专题一兽药毒理学试验和安全性评价

专题一 兽药的毒理学试验和安全性评价
一般毒性试验: 急性毒性试验 亚慢性毒性试验 长期毒性试验
特殊毒性试验: “三致”试验 致畸、致突变、致癌
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第一节 一般毒性试验
一、急性毒性试验 (1)经口或注射给药的急性毒性试验 (2)经皮给药的急性毒性试验
目的： （1）求出受试物的半数致死量（LD50）。 （2）阐明受试物急性毒性的剂量-反应关系与中毒特征，为急
5.观察指标
观察动物的全身中毒表现和死亡情况，观察 时间为一周。若给药4天后仍有动物死亡时，仍 需继续观察一周，对死亡动物应做大体剖检，必 要时进行病理组织学检查。
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6 . 结果判定
兔涂皮LD50在5 mg/kg以下为极毒，5～44 mg/kg为剧毒，44 ～ 350 mg/kg为中等毒， 350 ～ 2180 mg/kg为低毒，2180mg/kg以上者为 实际无毒。
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3.给药方式
试验周期 14天
28天以上
给药途径
大鼠、小鼠 灌胃
鸡
药丸
混饲 自由采食
饮水不限
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4.剂量与分组
大鼠 20只/组，雌雄各半 对照组 低剂量组 高于有效量，不出现毒性反应 中剂量组 高剂量组 部分动物出现毒性反应或死亡
但死亡数不超过20%
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二、亚慢性毒性试验
确定外来化学物质在动物1/10左右的生命时间 内，反复多次接触后有无引起损害的观测过程。 又称短期试验、亚急性毒性试验（Subchronic toxicity test）。
目的：1.毒性确定 2.靶器官 3.慢性毒性试验依据
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5.观察指标
分六大项，具体指标为：
（1）健康状况
每天
（2）体重，饲料消耗 2-3次/周
（3）血液学检查
定期
（4）血液生化学检查 定期
（5）肝、肾绝对重量和脏器指数 试验结束时
（6）剖检、组织病理学检查
试验结束时
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4百度文库
5.观察指标
动物一般健康状况，中毒表现和死亡过程。 时间：7天。 死亡动物：大体剖检、病理组织学检查（必要时）
6.LD50计算 寇氏法 计算供试药的LD50值及其95%可信限范围。
7.结果判定
大鼠一次经口LD50在1 mg/kg以下为极毒，1～50 mg/kg为剧毒，50 ～ 500 mg/kg为中等毒，500 ～ 5000 mg/kg为低毒，5000 mg/kg以上者为实际无毒。
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4.剂量与分组
正式试验前，用少量动物做预备试验，根据24 小时内动物死亡情况，估计LD50的可能范围，以 确定正式试验的剂量。一般分为4个剂量组，组间 剂量呈等比级数。其比值为：1:1.5-3.0。若用赋 形剂，需设赋形剂对照组。
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10
7
0.7
0.3
5 622 2.7938
10
10
1.0
0
合计 -
-
-
∑ ri24 ∑ Pi2.4 ∑ q2.6
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计算LD50，代入下列公式： lgLD50=Xk - d（∑ Pi – 0.5) LD50 =Lg –1 [Xk - d（∑ Pi – 0.5)] 式中Xk 为最大对数剂量, ∑ Pi为死亡率的总和; d为相邻两组剂量比值的对数, d=lg1.2=0.0792 则: LD50 = Lg –1 [2.7938-0.0792(2.4-0.5)]= Lg –1 2.6433
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试验方法
1.动物 一般选用大鼠(100～200g)或小鼠(15～20g)。 有条件时，采用供试药物的靶动物鸡等。外购 动物需饲养一周后才能供试验用。
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2.试验周期
临床用药期（天） 毒性试验给药期（天）
1～3
14
7
28
30
90
30天以上
6个月
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小鼠腹腔注射敌百虫LD50计算表
组别 1
剂量 (mg/ kg)
300
对数剂量 (Xi)
2.4771
实验动 物数(ni)
10
死亡动物 数(ri)
0
死亡率 存活率(q) (pi)
0
1
2 360 2.5563
10
2
0.2
0.8
3 432 2.6355
10
5
0.5
0.5
4 518 2.7143
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3.给药方式
脱去动物背部脊柱两侧毛发（不得损伤皮肤），脱毛 后24小时检查皮肤，如无损伤才能进行试验。将供试药 物均匀地涂敷于脱毛区，不应少于动物体表面积的10%， 用塑料纸和两层纱布覆盖，再用胶布或绷带固定，以防 脱落和动物舔食。敷药24小时。试验结束后，用温水或 适当溶剂清除残留供试药。大鼠可采用浸尾方法给药。
=439.87(mg/kg)
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经皮给药的急性毒性试验
1.动物
选用健康家兔（2.0～3.0 kg）、豚鼠(350～450 g)或 大鼠(200～300 g)，每组动物不少于6只，雌雄各半。
2.供试药物的配制
供试药物如是固体，应磨成细粉状，过120目筛，并用 适量水或无毒无刺激性赋型剂（橄榄油、羊毛脂、凡士 林等）混匀。如为液体，一般不要稀释。
救治疗措施提供依据。 （3）为受试物的毒性作出初步判断，为其它毒性试验设计提
供依据。
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经口或注射给药的急性毒性试验
1.动物 小鼠（体重18～22g）、大鼠（体重180～200g）
或其他敏感动物。应注明动物的品系。每组小鼠不 少于10只、大鼠不少于6只，雌雄各半，雌性应未 产无孕。 2.供试药物的配制
一般用水为溶剂,将药物配成一定浓度的溶液.
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3.给药方式与最大体积 灌胃法: 一次最大灌胃量 1.0ml/只(小鼠) 4.0ml/只(大鼠)
腹腔注射: 一次最大注射量 1.0ml/只(小鼠) 3.0ml/只(大鼠)
4.剂量与分组 预试验 全部致死的最小剂量LD100和全部存 活的最大剂量LD0 正式试验 5-7个剂量组,组间剂量呈等比级数, 其比值为1.2-1.4.