植物提取液成分分析方法
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植物提取液成分分析
植物中含有丰富的营养成分和医药成分,尤其植物的提取液可以应用到很多行业,如医药、化妆品、食品、科研等,其关注度日益提高,特殊有益的成分也具有极高的商业和科研价值。植物提取液组成过于复杂,即便是相同的植物由于受地理、气候、环境等条件影响所含的化学成分差异很大,现在的研究体系也缺乏系统性。
科标分析实验室独创“光-色-热-质-元-化”联用分析手段,运用气相色谱-质谱联用技术(GCMS)、电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)、薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)、柱层析分离、氨基酸分析仪、傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、高效液相色谱-质谱联用等(HPLC-MS/MS)技术综合方法对植物提取液成分进行全方位解析。
本研究手段主要从氨基酸、微量元素、挥发油、非挥发物质进行解析,其样品处理方法、仪器参数均在实验室内部进行方法学验证,通过验证得到实验最佳参数。
一、样品制取
植物洗净剔除沙土后,再用蒸馏水反复清洗,于烘箱干燥后粉碎过筛,所制得的干粉存于广口瓶中备用。
二、氨基酸测定
称取一定量的植物干粉于试管中,加入盐酸于烘箱内在一定温度条件下水解,水解完成后却出冷却,将液体转移到烧杯并加热出去其中的盐酸,冷却后用稀盐酸稀释过滤并定容,所得溶液直接上氨基酸分析仪进行氨基酸含量的测定。
三、挥发油的GC-MS测定
将干粉按照《中国药典》的方法置于挥发油的提取装置中,通过水蒸气蒸馏得到油
状物,并用乙醚、正己烷、二氯甲烷等试剂进行萃取,干燥浓缩后即得挥发油,并对所得挥发油进行GC-MS分析。
四、ICP-AES法测定植物中的微量元素
将干粉置于恒重坩埚中,并于马弗炉中灼烧至灰分,所得灰分加混酸加热消化,消化完全后移至容量瓶定容,所得溶液直接上机测定,通过标准溶液对样品进行各种元素的定量。
五、非挥发性成分的柱层析分析
通过公司数据库以及实验确定展开剂,通过硅胶柱进行分离,收集不同阶段下的分离产物,通过核磁、红外、质谱以及公司内部的相关数据库匹配最终确定各个成分名称。
六、提取液中化学成分HPLC-MS/MS分析
通过对提取液的液相条件摸索,选择分离度最佳的液相方法,设定好质谱参数后将样品直接上机进行HPLC-MS/MS进行分析,对每一个峰的质谱及其二级质谱进行解析,通过内部数据库以及专业解谱人员的分析,确定出各个成分的组成。