硫酸铵饱和度
饱和硫酸铵析出的蛋白质

饱和硫酸铵析出的蛋白质一、引言饱和硫酸铵(Ammonium Sulfate, (NH4)2SO4)是一种常用的沉淀试剂,可用于分离和纯化蛋白质。
通过改变溶液中的盐浓度,可以使蛋白质在特定的饱和度下发生沉淀,从而实现对蛋白质的分离和纯化。
本文将详细介绍饱和硫酸铵析出法在蛋白质分离中的应用原理、步骤以及注意事项。
二、原理饱和硫酸铵析出法利用了蛋白质在高盐浓度下容易发生沉淀的特性。
在饱和硫酸铵溶液中,硫酸铵分子会与蛋白质中的水分子竞争结合,从而导致蛋白质发生改变,使其结构发生变化。
当硫酸铵浓度达到一定的饱和度时,蛋白质将沉淀出来。
三、步骤饱和硫酸铵析出的蛋白质的步骤如下所示:1.准备工作:将所需的试剂和设备准备齐全。
试剂包括硫酸铵和待析出蛋白质的溶液。
设备包括离心管、离心机、冷藏设备等。
2.设定分离条件:根据待析出蛋白质的特性和要求,确定合适的硫酸铵浓度范围。
通常情况下,硫酸铵的饱和度为30%至90%之间。
3.配制硫酸铵溶液:根据所设定的分离条件,称取适量的硫酸铵,加入适量的溶剂(一般为纯水或缓冲液)中,并充分溶解。
4.添加硫酸铵溶液:将待析出蛋白质的溶液加入到硫酸铵溶液中,并充分混合。
注意,这个过程需保持低温,可以放在冷藏设备中。
5.离心沉淀:将溶液离心,以分离蛋白质的沉淀。
离心的条件可以根据具体的实验要求进行调整,一般来说,离心速度为10000-15000rpm,离心时间为10-20分钟。
6.分离蛋白质:将上一步离心得到的沉淀与上清分离。
可以通过倒置离心管将上清液倒出,或通过吸取上清液来分离蛋白质。
7.洗涤沉淀:使用适当的洗涤缓冲液洗涤沉淀,以去除杂质。
洗涤次数和洗涤缓冲液的浓度和体积需要根据具体的实验要求来确定。
8.蛋白质的溶解或储存:将洗涤后的蛋白质溶解在适合的缓冲液中,以便后续分析或储存。
根据需求,可以在储存前对蛋白质进行浓缩和纯化等处理。
四、注意事项1.操作过程中保持低温,以防止蛋白质的降解和变性。
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表[资料]
![硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表[资料]](https://img.taocdn.com/s3/m/77a9fb62f56527d3240c844769eae009581ba20c.png)
硫酸铵饱和度的常用表1.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)2.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃)3.不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5 10 15 20 25 30 40 506%水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30%丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 101.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.32.53.8 5 6.3 7.5 10 12.510% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.02 0.024 0.032 0.04 8%水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9 18.5 23.2 30%丙烯酰胺溶液 1.3 2.7 4 5.3 6.7 8 10.7 13.31.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.32.53.8 5 6.3 7.5 10 12.510% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.015 0.018 0.024 0.03 10%水 1.9 4 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.830%丙烯酰胺溶液 1.7 3.3 5 6.7 8.3 10 13.3 16.71.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.32.53.8 5 6.3 7.5 10 12.510% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 12%水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9 13.2 16.5 30%丙烯酰胺溶液 2 4 6 8 10 12 16 201.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.32.53.8 5 6.3 7.5 10 12.510% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.0215%水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.9 9.2 11.5 30%丙烯酰胺溶液 2.5 5 7.5 10 12.5 15 20 251.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.32.53.8 5 6.3 7.5 10 12.510% SDS 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 10%过硫酸氨0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012 0.016 0.02 表2 配制6% Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳5%积层胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)123456810水0.68 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5 6.8 30%丙烯酰胺溶液0.170.330.50.670.831 1.3 1.7 1.5 mol/L Tris (pH8.8)0.130.250.380.50.630.750 1.25 10% SDS0.010.020.030.040.050.060.080.1 10%过硫酸氨0.010.020.030.040.050.060.080.1 TEMED0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0080.01。
[经验]饱和硫酸铵溶液的配制
![[经验]饱和硫酸铵溶液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/552d00a9f021dd36a32d7375a417866fb84ac071.png)
饱和硫酸铵溶液的配制00000①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
000001. 2.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)0000①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
000025℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。
可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。
0000双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至7.0。
0000硫酸铵在水中的溶解度,100度时为1.034g/ml,0度时为0.706g/ml。
因此,每100ml 蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵,80度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其留存瓶中,使用前吸出所需的量,用28%的氨水调PH至7.2即可。
结晶(要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,你总要保证溶液中是饱和的,所以结晶留在瓶底,不需要再过滤,使用时取上面的溶液即可。
pH7.0或7.2影响不大,也有调到7.4的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。
)0000最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了。
00000另外较快达到饱和状态的方法是,将过量的硫酸铵(参考不同温度下的溶解大多数,或干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出),上清即为室温下的饱和硫酸铵0000先将硫酸氨80克溶解到100水中,加热到80左右,溶解部分过滤,其余的再溶,仍有一部分结晶,过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶,平衡一两天,取上清用同时氨水调节PH值用。
00000。
硫酸铵溶液饱和度计算表
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硫酸铵溶液饱和度计算表
注:本表为室温(25℃)下数据,该温度下饱和硫酸铵的浓度为4.1mol/L,即将761g硫酸铵溶于1L水中。
同时鉴于4-25℃之间数据没有明显变化,所以表中数据也可用于4℃。
饱和溶液加入法是指将预先调好PH的饱和硫酸铵溶液逐步加至相应的蛋白质溶液中,使其达到一定的硫酸铵浓度(或饱和度),令蛋白质沉淀下来。
不同饱和度所需要加入的饱和硫酸铵的量可以用如下公式计算:V=V0 (S2—S1)/(100—S2) 其中v为应加入饱和硫酸铵溶液的体积,V0 是蛋白质溶液的原始体积,S2是所要达到的硫酸铵饱和度,S1 原来溶液的硫酸铵饱和度。
硫酸铵饱和溶解度

硫酸铵饱和溶解度
硫酸铵溶解度25℃时饱和溶液为4.1M,即767克/升。
0℃时饱和溶解度为3.9M,即676克/升。
硫酸铵水溶液呈酸性,不溶于醇、丙酮和氨水,有吸湿性,吸湿后固结成块。
硫酸铵主要用作肥料,适用于各种土壤和作物,还可用于纺织、皮革、医药等方面。
纯品为无色透明斜方晶系结晶,水溶液呈酸性。
不溶于醇、丙酮和氨水。
有吸湿性,吸湿后固结成块。
加热到513℃以上完全分解成氨气、氮气、二氧化硫及水。
与碱类作用则放出氨气。
与氯化钡溶液反应生成硫酸钡沉淀。
也可以使蛋白质发生盐析。
饱和硫酸铵溶液的配制
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饱和硫酸铵溶液的配制①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
1.?2.?调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。
可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。
双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至7.0。
硫酸铵在水中的溶解度,100度时为1.034g/ml,0度时为0.706g/ml 。
因此,每100ml 蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵,80度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其留存瓶中,使用前吸出所需的量,用28%的氨水调PH至7.2即可。
结晶(要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,你总要保证溶液中是饱和的,所以结晶留在瓶底,不需要再过滤,使用时取上面的溶液即可。
pH7.0或7.2影响不大,也有调到7.4的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。
)最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了。
另外较快达到饱和状态的方法是,将过量的硫酸铵(参考不同温度下的溶解大多数,或干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出),上清即为室温下的饱和硫酸铵先将硫酸氨80克溶解到100水中,加热到80左右,溶解部分过滤,其余的再溶,仍有一部分结晶,过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶,平衡一两天,取上清用同时氨水调节PH值用。
硫酸铵沉淀主要分为两种形式:1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中,这种方法精确度高,硫酸铵是弱酸性的,事先调好pH后,再补入溶液中pH变化小,适合于对pH敏感的蛋白(酶类)或要求比较高的实验。
2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中,这种方法比较快速,但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低,适合于对pH不敏感的蛋白,这种操作应该能满足一般实验的要求。
硫酸铵母液的饱和度

硫酸铵母液的饱和度你知道硫酸铵吧?就是那种白色结晶的化肥,农田里的“好帮手”。
但今天我们不聊它怎么帮农民伯伯增产,而是聊聊它的一个小知识点——硫酸铵母液的饱和度。
听名字是不是有点复杂?其实也没啥,简单来说,硫酸铵母液的饱和度就是指在一定温度和压力下,液体中能够溶解多少硫酸铵。
溶得越多,饱和度就越高。
简单说,饱和度越高,溶液里面的“硫酸铵”越多,越浓。
就像煮糖水,糖放得越多,糖水就越甜,饱和度就越高,没错吧?硫酸铵母液是含有硫酸铵的水溶液,像这类溶液在工业中可有着举足轻重的地位。
它不仅是化肥制造的原料之一,还常常用在一些工业反应中,比如清洗、冶金啥的。
所以,说它重要一点都不为过。
母液里的饱和度对后续的工艺过程影响很大。
想想看,如果液体溶解的硫酸铵多,工厂就能更高效地生产其他化学品,省力又省钱,真的是“事半功倍”。
但饱和度过高也有问题哦,可能会导致溶解度下降,出现沉淀,那就麻烦了。
所以说,找到一个“合适”的饱和度是个大问题。
说到这里,不知道你有没有想过,其实我们平时生活中也会遇到类似的情况,比如冬天做热巧克力,热牛奶里加糖,你加糖加得太多,糖就开始不溶解了。
这时候就是饱和度过高,糖水就饱和了。
硫酸铵母液也是一样,如果浓度太高,液体里面的硫酸铵就不再溶解,会出现沉淀。
那时工厂得找办法让溶液的饱和度适中,避免资源浪费。
哦,对了,刚才说到的“适中”就是科学家的“心头好”。
毕竟谁也不想看到水里漂浮着一堆结晶,好像没溶解的“糖”一样,对吧?我们来聊聊硫酸铵母液的饱和度是怎么影响工艺的。
简单来说,硫酸铵母液的饱和度影响着它在生产过程中的溶解、反应效率以及结晶过程。
饱和度越高,溶解性越强,反应也越高效。
你可以想象,假如工厂要生产化肥,液体里面硫酸铵的浓度越高,制造出的化肥量就越大。
可是,如果饱和度过高,结晶现象就会出现,这时候工人们可能需要花费额外的时间和精力去处理这些结晶,甚至要用到其他化学药品,增加了成本。
是不是很像有时候你做菜,辣椒放得太多,吃着有点“爆炸”,虽然味道浓烈,但反而让人受不了。
硫酸铵饱和度常用表#精选.
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37.6
41.8
45
0
2.9
5.9
9.0
12.3
15.6
19.0
22.6
26.3
30.2
34.2
38.3
50
0
3.0
6.0
9.2
12.5
15.9
19.4
23.0
26.8
30.8
34.8
55
0
3.0
6.1
9.3
12.7
16.1
19.7
23.5
27.3
31.3
60
0
3.1
6.2
9.5
12.9
16.4
硫酸铵饱和度常用表
(一)调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25 ℃)
硫酸铵终浓度,饱和度 / %
10
20
25
30
33
35
40
45
50
55
60
65
70
75
80
90
100
每一升溶液加固体硫酸铵的克数 *
硫酸铵初浓度,饱和度 /%
0
56
114
114
176
196
209
243
277
313
351
390
430
472
516
19.7
22.9
26.2
29.6
33.1
36.8
40.5
44.4
48.4
52.6
57.0
61.5
66.2
10
5.3
8.1
10.9
13.9
16.9
20.0
硫酸铵饱和度的常用表,聚丙烯酰胺凝胶的配制表(参考模板)

硫酸铵饱和度的常用表1.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)2.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃)3.不同温度下饱和硫酸铵溶液的数据聚丙烯酰胺凝胶的配制表1 配制Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)5101520253040506%水 2.6 5.37.910.613.215.921.226.5 30%丙烯酰胺溶液123456810 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.85 6.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0040.0080.0120.0160.020.0240.0320.04 8%水 2.3 4.6 6.99.311.513.918.523.2 30%丙烯酰胺溶液 1.3 2.74 5.3 6.7810.713.3 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.85 6.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.0240.03 10%水 1.94 5.97.99.911.915.919.8 30%丙烯酰胺溶液 1.7 3.35 6.78.31013.316.7 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.85 6.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02 12%水 1.6 3.3 4.9 6.68.29.913.216.5 30%丙烯酰胺溶液246810121620 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.85 6.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.0215%水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.99.211.5 30%丙烯酰胺溶液 2.557.51012.5152025 1.5 mol/L Tris (pH8.8) 1.3 2.5 3.85 6.37.51012.5 10% SDS0.050.10.150.20.250.30.40.5 10%过硫酸氨0.050.10.150.20.250.30.40.5 TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02表2 配制6% Tris-甘氨酸SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳5%积层胶所用溶液溶液成分不同体积(ml)凝胶液中各成分所需体积(ml)123456810水0.68 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5 6.8 30%丙烯酰胺溶液0.170.330.50.670.831 1.3 1.7 1.5 mol/L Tris(pH8.8)0.130.250.380.50.630.750 1.25 10% SDS0.010.020.030.040.050.060.080.1 10%过硫酸氨0.010.020.030.040.050.060.080.1 TEMED0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0080.01(本资料素材和资料部分来自网络,仅供参考。
硫酸铵饱和度
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硫酸铵饱和度简介硫酸铵(Chemical Formula: (NH4)2SO4)是一种常见的化学物质,广泛应用于肥料、草坪维护、水处理等领域。
硫酸铵的饱和度是指在特定温度下溶液中能溶解的硫酸铵的最大量。
在化学实验和工业生产过程中,了解硫酸铵的饱和度对于溶解度、反应速率和产品纯度的控制至关重要。
影响因素硫酸铵的饱和度受到以下几个因素的影响:温度温度是影响饱和度的关键因素。
一般来说,随着温度的升高,硫酸铵在溶液中的溶解度也会随之增加。
这是因为温度升高会增加分子间的能量,使吸附热增加,促使固体溶于溶液中。
因此,当温度升高时,硫酸铵的饱和度会相应增加。
压力压力对硫酸铵的饱和度影响较小,一般情况下可以忽略不计。
在常规实验和工业生产中,通常没有必要考虑压力对饱和度的影响。
溶液浓度溶液中硫酸铵的浓度也会对饱和度产生影响。
一般来说,当溶液中硫酸铵浓度较低时,饱和度会相对较高;当浓度较高时,饱和度则相对较低。
搅拌速度搅拌速度对硫酸铵的饱和度也有一定影响。
通过搅拌溶液,可以促进溶质与溶剂之间的质量传递过程,从而增加饱和度。
测定方法测定硫酸铵的饱和度可以采用饱和溶液浓度测定法,常见的方法有饱和溶解度曲线法和重量法。
饱和溶解度曲线法饱和溶解度曲线法是通过测量在不同温度下溶液中硫酸铵的溶解度,绘制饱和溶解度曲线图来确定硫酸铵的饱和度。
实验中,可以准备一系列硫酸铵溶液,并在不同温度下测定其溶解度,然后通过拟合曲线来确定硫酸铵的饱和度。
重量法重量法是通过在特定温度下向硫酸铵溶液中加入硫酸铵固体,直到溶液不再溶解为止的方法来确定饱和度。
首先在恒温水槽中将溶液加热至设定的温度,然后向溶液中加入硫酸铵固体,直至固体不再溶解为止,记录此时的质量差来确定饱和度。
应用硫酸铵饱和度的了解对于相关领域的实验研究和工业生产有重要意义。
实验研究在化学实验研究中,了解硫酸铵饱和度可以帮助研究人员控制溶解度和反应速率,从而优化实验条件和提高实验效果。
大豆疫霉菌粗蛋白的硫酸铵饱和度
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饱和硫酸铵溶液的配制

①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
1. 2.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。
可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。
双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至7.0。
硫酸铵在水中的溶解度,100度时为1.034g/ml,0度时为0.706g/ml 。
因此,每100ml蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵,80度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其留存瓶中,使用前吸出所需的量,用28%的氨水调PH至7.2即可。
结晶(要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,你总要保证溶液中是饱和的,所以结晶留在瓶底,不需要再过滤,使用时取上面的溶液即可。
pH7.0或7.2影响不大,也有调到7.4的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。
)最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了。
另外较快达到饱和状态的方法是,将过量的硫酸铵(参考不同温度下的溶解大多数,或干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出),上清即为室温下的饱和硫酸铵先将硫酸氨80克溶解到100水中,加热到80左右,溶解部分过滤,其余的再溶,仍有一部分结晶,过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶,平衡一两天,取上清用同时氨水调节PH值用。
硫酸铵沉淀主要分为两种形式:1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中,这种方法精确度高,硫酸铵是弱酸性的,事先调好pH后,再补入溶液中pH变化小,适合于对pH敏感的蛋白(酶类)或要求比较高的实验。
2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中,这种方法比较快速,但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低,适合于对pH不敏感的蛋白,这种操作应该能满足一般实验的要求。
饱和硫酸铵溶液的配制
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饱和硫酸铵溶液的配制 The document was finally revised on 2021饱和硫酸铵溶液的配制①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。
1.2.调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。
25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。
可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。
双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至。
硫酸铵在水中的溶解度,100度时为ml,0度时为ml 。
因此,每100ml蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵,80度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其留存瓶中,使用前吸出所需的量,用28%的氨水调PH至即可。
结晶(要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,你总要保证溶液中是饱和的,所以结晶留在瓶底,不需要再过滤,使用时取上面的溶液即可。
或影响不大,也有调到的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。
)最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了。
另外较快达到饱和状态的方法是,将过量的硫酸铵(参考不同温度下的溶解大多数,或干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出),上清即为室温下的饱和硫酸铵先将硫酸氨80克溶解到100水中,加热到80左右,溶解部分过滤,其余的再溶,仍有一部分结晶,过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶,平衡一两天,取上清用同时氨水调节PH值用。
硫酸铵沉淀主要分为两种形式:1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中,这种方法精确度高,硫酸铵是弱酸性的,事先调好pH后,再补入溶液中pH变化小,适合于对pH敏感的蛋白(酶类)或要求比较高的实验。
硫酸铵饱和度
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硫酸铵饱和度
硫酸铵饱和度是指含中硫酸铵物质的溶液在加入或吸收硫酸铵的容量达到最大后,所
饱和物质的量与溶液总体积的比例,即被称作硫酸铵溶液的饱和度。
硫酸铵饱和度是衡量硫酸铵溶液丰度程度的重要标准。
一般来说,硫酸铵的溶液是按
国家标准要求的饱和度来按照NCS 8011-28号标准进行测定的。
硫酸铵饱和度的测定以硫酸铵溶液的标准濁度为基准,测定时将制备的硫酸铵溶液放
入玻璃体积瓶中,将其搅拌均匀后放置在室温下,十分钟后以双面直尺检测溶液濁度变化,然后计算出饱和度值。
在含硫酸铵溶液中,硫酸铵饱和度的测定一般分两种情况:一种是传统的测试方法,
即将溶液放入玻璃体积瓶中,将溶液搅拌均匀,然后采用双面直尺测量溶液濁度,根据所
测得的濁度值计算出硫酸铵溶液饱和度;另一种是高灵敏的仪器测定,该测定方法取用晶
体生长仪实验室技术测定法,即利用晶体生长仪的测试功能,在溶液的湿度、比重测定仪
及热力学仪中显示出来。
以上两种测试方法能够满足不同种类的硫酸铵溶液饱和度的测定
需要。
除了上述的传统方法和现代仪器方法,还有其他计算机软件供应商提供的自动化计算
工具,能够计算不同情况下硫酸铵溶液的饱和度数值,可以很大程度地提高测试的精确性
与准确率。
从理论上讲,在硫酸铵溶液中,饱和度的高低对于溶液中硫酸铵的活性有一定的影响。
一般情况下,饱和度越高,溶液中硫酸铵的活性就越高。
此外,在工业生产中,也需要注
意溶液的饱和度,其饱和度过低或过高都会影响溶液质量,甚至不能够达到质量标准要求,因此,在配制硫酸铵溶液时,要注意硫酸铵饱和度及秤量比例,以保证产品质量。