盐酸克伦特罗快速检测

盐酸克伦特罗快速检测

摘要

本实验采用了百睿TM盐酸克伦特罗快速检测卡对样品进行定性检测。盐酸克伦特罗快速检测卡适用于尿样、瘦肉、肝脏、肺脏、肾脏和饲料等样本中盐酸克伦特罗的测定。检出限为3ng/mL（3ppb）。

关键词盐酸克伦特罗快速检测卡定性检出限

前言

盐酸克伦特罗(Clenbuterol,CLB),又名瘦肉精,分子式为C12H18Cl2N2O•HCl,药品名为克喘素、氨哮素等,为白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚和苯,化学性质稳定;它是一种人工合成的B-肾上腺素受体激动剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病(Mersmann,1998)。当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此将其俗称为瘦肉精,在养猪业中一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到饲料中(Kuip-er,1998),用以改善胴体的品质,但同时也造成了猪肉中盐酸克伦特罗的残留。当人们食用含有盐酸克伦特罗残留的肉品后,常常造成心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠甚至于瘫痪等中毒症状,对心脏病患者更有生命危险。国家农业部农牧发[2002]1号文5关于发布食品动物禁用的兽药及其他化合物清单的通知6中,盐酸克伦特罗被列为所有食品动物禁止使用。

1实验步骤

（1）使用前将待测样本溶液恢复至室温

（2）取出检测卡平放，用移液枪吸取待测样品溶液100ul，垂直加于加样孔，开始计时

（3）结果应在3~5min读取，其他时间判读无效，根据示意图判定结果。

【结果判断】

2 实验结果

实验结果如下图 1

由图可知，左边表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于 3 ng/mL ，或不含有盐酸克伦特罗；右边样品中盐酸克伦特罗浓度高于3 ng/mL 。

3结果与讨论

3.1实验原理

若待测样品溶液中不含盐酸克伦特罗,当样品溶液进入测试端,盐酸克伦特罗金标单抗在硝酸纤维素膜上层析泳动,被硝酸纤维素膜上检测印迹处的盐酸克伦特罗-BSA 偶联物拦截形成盐酸克伦特罗-BSA 偶联物)金标盐酸克伦特罗单抗 复合物,并在该印迹处形成红色的条带(检测线);

测试端多余的金标盐酸克伦特阴性（-）：两条紫红色条带出现。表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3 ng/mL ，或不含有。

阳性（+）：检测T 线无显色，则表示样品中盐

酸克伦特罗浓度高于3 ng/mL 。

无效：未出现质控C 线，表明操作过程不正确

或检测卡已失效。

罗单抗在硝酸纤维素膜上继续层析可被对照印迹羊抗鼠IgG单克隆抗体捕获形成红色的对照条带(对照线)。当待测尿样中含有一定量的盐酸克伦特罗时,盐酸克伦特罗与盐酸克伦特罗金标单抗形成复合物,从而与硝酸纤维素膜上的盐酸克伦特罗-BSA偶联物形成竞争,抑制了检测印迹处包被的盐酸克伦特罗-BSA偶联物捕获盐酸克伦特罗金标单抗的量,而不能在检测线形成红色印迹或形成颜色较浅的红色印迹,多余的盒标盐酸克伦特罗单抗继续层析在对照印迹处形成对照线。根据该反应模式,检测线颜色深浅与样品中盐酸克伦特罗含量呈负相关,即检测线颜色越浅表示样品中盐酸克伦特罗含量越高。

3.2 试纸条组成

1.样品垫的作用是尽快地将加样孔中的样品吸附到试纸中去，以利于继续加样；

2.结合垫中则是含有胶体金标记的盐酸克伦特罗单抗；

3.硝酸纤维素膜上则预先标记了两种物质，在检测线处标记的是盐酸克伦特罗

-BSA偶联物。

4.吸收垫一般由吸水纸构成，主要作用是保持从加样垫到吸收垫之间的毛细管

作用力[1]。

参考文献

[1] 姜艳彬，孙冠如，王海，等. 盐酸克伦特罗胶体金快速检测试纸条的研制[J]. 中国畜牧兽医. 2010(10): 109-113.