浅谈鸭坦布苏病毒病及其防控

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本 的采集有 困难 。
鸭 坦布苏病 毒属于 黄病 毒科 、黄病 毒属 、恩塔 亚病 毒 群 。该病 主要 以体 重 、食欲 、产蛋 率下 降与高热 ,甚
至停 产 以及 部分死亡 为特 征 。该病原 传播迅 速且发 病范
围极广 ,全国大部分省市蛋鸭 曾受到严重影响 。
l 病毒的流行病学
床快速诊断的方法。 4 . 3 分子生物学诊 断方法
2 病毒的培养特性
经 研究表 明鸭 坦布苏 病毒 可 以在鸡胚 、鸭胚 、 鸭胚 成纤维细胞 、鸡胚 成纤维细 胞及部 分传 代细胞系( 如D F 1 ) 中增殖 并增殖 到较高 的滴度 ,经尿 囊腔 接种鸡 胚或者 鸭 胚后2 6 d 可 以致死胚 体。经 细胞培 养 。病毒 可 以对 成纤
或 者使其侵 入或 者脱壳 的能 力受 到抑制 ,继而丧 失对敏 感细 胞和 易感动物 的感 染力 。这种 方法 多被用 于动物免 疫 水平和疫 苗效价 的评 价 。进行 中和实 验需要 采集急性 期 和恢复 期血清进 行检 测 ,检测 诊断 费时 费力,不能达 到 早期快速 诊 断的 目的 ,特 异性和 敏感 性不 高,双份标
维细胞引起 明显的病变 。
3 临床诊断
临床上 该病主 要 以产蛋骤 降和 一系 列 明显的病 理变 化 为诊断依据 ,鸭 发病后采 食量 下 降甚 至废 绝 、体 温升 高 、精神委顿 ,喜 卧、排 绿色稀 便 ,可见 有神经症 状 ,
部 分可见有 软脚现象 。剖 解病 鸭后可 见病 鸭脾脏 明显肿
山东畜牧兽医
2 0 1 3年第 3 4卷
浅谈 鸭坦布苏病毒病及其防控
张兆成 刘恩 昌 史 辉 ( 山东 省昌乐 县畜牧兽医 局 2 6 2 4 0 0 )
中图分类号 :¥ 8 5 8 . 3 3 文献标识码 :B 文章编号 :1 0 0 7 - 1 7 3 3 ( 2 0 1 3 ) 0 6 - 0 0 3 8 . 0 2

种灵敏 、简 单 、快 速并 且适合 于大规 模检 测的诊 断方
法 。E L I S A可 以检测抗体 ,也可 以检测抗原 。该方法具有
鸭、 肉用 种鸭 ,现 有报道 在种 鹅和野 鸭 体 内也 分离到该
病毒。
很 大 的优 点 ,使用 的抗原 全部 为灭活过 的病 毒 ,所 以没 有病毒 的扩散 等 问题 ,同时该 法不 需要实验 动物也 不需 要大量 的细胞 ,减 少了人 力物 力 ,这 就使 鸭坦布苏病毒 的诊断从特 定的实验 室走 向了普通的实验室。 4 . 2 _ 3 间接 免疫 荧光 ̄ ( I F A ) 免疫荧光 技术是将 免疫学 方法与 荧光标 记技 术结 合起 来 研究特 异 蛋 白抗原在 细胞 内分布 的方法 。在 荧光 显微镜 下可 检测 出荧光素所 发 出 的荧光 ,从而 可从 细胞 上定位 出抗 原 。鸭坦布苏病 毒抗 体 的检 测 可通 过 该 方 法 来 实 现 。虽 然 这种 方 法 特异 性 强 、灵敏性 高 ,但 是在 操作上 较 为复杂 ,不适 宜作为临
鸭坦 布苏 病毒 全基 因序 列测定 取得 的进展 、分子生 物 学及生物 信息 学 的发展 ,为鸭坦 布苏 病毒 的快 速基 因
大 ,呈花斑样 病变 ,严重 可 出现坏死 点 .肾脏肿 大 ,蛋 鸭可见卵泡破裂,卵巢出血 ,卵泡膜明显增厚、浑浊。
检测提供 了依据 。
4 . 3 . 1 R T . P C R 是经过反转录将R N A模 板 转 化 为 e D NA,再 以其 为模板进行扩 增 ,从而获得 所要 的基 因片 段。现多 以该 病毒 的NS 5 和E 基因 为 目的基因 。该方法可 从临床病 鸭上 快速敏 感 的检测 出该病 ,且结 果快速 、简 单 ,特 异性高 ,这 为鸭坦 布苏 病毒病 的诊 断提 供 了科学
株在鸡胚 、鸭成 纤维细胞及D F 1 细胞上均可 正常生长,一
4 . 3 . 2 套 式R T - P C R 是应用两 对 引物对 目的基 因片段进 行两 次扩 增 ,即先 应用一 对外 部 引物对 目的基 因进 行第

般2 d 左右 即可 导致细胞 病变 ,产生C P E 检 测鸭坦布苏病
毒最 为经 典 的方法就 是病原 的分 离鉴定 ,但这 种诊 断方
次扩 增 ,再 将第 一对扩 增产 物作 为模板 ,用第二对 内
法影 响因素 多、工作 量较 大且耗 时较 长 ,所 以在 临床应
用上该方法 具有一 定的局 限性 。 4 . 2 血清学检测
部 引物对其进 行扩 增 ,这种 方法具 有较 高的特异性 和敏
感性 。套式P c R比一 般的P C R 敏感性高 1 0 倍 。并且还具有 快速 、特异等优点 。
4 . 3 - 3 实时荧光定 量R T - P C R 实时 清学 方法 这 种方法 最经 典的就 是中和
实验 ,它 的主要原理 可 以归纳 为 :血 清 中的中和抗 体可
的检测 手段 。
4 实验室诊断
4 . 1 病毒 分离鉴定

般将 发病鸭 的脾脏研 磨 离心 后墩上 清经尿 囊腔接
种8 日龄S P F 鸡胚 ,接种后2 — 6 d 鸡胚死亡 ,死 亡时间在第4
天相 对 比较 集 中 。死 亡 鸡 胚 主 要表 现 为 尿 囊膜 明显 增 厚 ,胚体 水肿 出血 。胚体 肝脏 肿大 ,有坏 死灶 。分离 毒
鸭 感 染后 主 要 表 现 站 立 不稳 , 卧地 不 起 等 神经 症 状 ,但与其 他黄病 毒属病 毒不 同的 是该病 毒可 导致蛋鸭
产 蛋下 降。根据报 道 ,该类病 毒 的传 播主 要媒 介是节肢 动物 。该病 感 染 主要 以产 蛋 鸭群 为 主 ,还包 括 商 品 肉
4 . 2 . 2 酶联 免疫吸附试验 ( E L I S A) 酶联 免疫吸 附试验 是
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