第三章 红细胞检验

第三章红细胞检验

第一节红细胞生理

第二节红细胞计数

第三节血红蛋白测定

第四节红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义

第五节网织红细胞概述

第三章红细胞检验

第六节红细胞比容测定

第七节红细胞直径测定

第八节计算红细胞平均数

第九节红细胞形态检验

第十节点彩红细胞检验

学习目标

1.概述红细胞的生成、形态与功能以及血红蛋白的结构和吸收光谱。

2.叙述红细胞显微镜计数原理、试剂、操作、计算、注意事项。

3.比较红细胞计数和白细胞计数的异同。

4.概述红细胞计数的计数误差及质量控制。

第一节红细胞生理

一、红细胞的发育过程

二、红细胞形态与功能

三、血红蛋白结构与吸收光谱

一、红细胞的发育过程

造血干细胞

→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞

→网织红细胞→成熟红细胞

一、红细胞的发育过程

成熟红细胞

120天

二、红细胞的形态与功能

形态：双凹圆盘状；

直径：6～９μm，平均7.2μｍ；

厚度：边缘部分约2μｍ，中央约１μｍ

侧面观呈哑铃形。

在高渗溶液中：

红细胞皱缩，边缘呈锯齿状；

在低渗溶液中：

红细胞肿涨甚至破裂，血红蛋白逸出后形成影细胞。

血涂片经瑞特染色后，细胞呈粉红色，中央着色较淡，有明显的中央淡染区，淡染区的直径约占红细胞直径的1/3～2/5。

红细胞主要成分

血红蛋白和水（64％～70％），其余成分为蛋白质、磷脂、无机盐和酶。

功能：

1.运输O2和CO2

2.调节酸碱平衡

3.免疫粘附

三、血红蛋白结构与吸收光谱

Hb的结构：

Hb的分子量：64458。

1分子Hb：4个亚铁血红素，4个Fe，

可结合4个O2。

1molHb：4mol Fe，可结合4mol O2。

1克Hb：含3.47mg Fe , 结合1.39ml O2。

在正常情况下，外周血中的血红蛋白主要有：

氧合血红蛋白（HbO2）

还原血红蛋白（Hbred）

碳氧血红蛋白（HbCO）

高铁血红蛋白（Hi或MHb）。

吸收光谱特征：

氧合血红蛋白(HbO2）：呈鲜红色，在578nm（黄色光）和540nm（绿色光）处有两条吸收光带。

还原血红蛋白（Hbred）：呈暗红色，在556nm（黄、绿色光之间）处有一条吸收光带。

碳氧血红蛋白（HbCO）：呈樱红色，在572nm（黄色光）和535nm（绿色光）处有两条吸收光带。

高铁血红蛋白（Hi）：呈红褐色，在634nm、578nm、540nm和500nm处有４条吸收光带。

第二节红细胞计数

原理

第二节红细胞计数

器材

稀释液

甲醛枸橼酸盐稀释液

Hayem稀释液

稀释液

1.甲醛枸橼酸盐稀释液

成分功能

枸橼酸钠抗凝、维持渗透压

36%甲醛液防腐并固定红细胞

氯化钠维持渗透压

蒸馏水

稀释液

2.Hayem稀释液

成分功能

氯化钠调节渗透压

硫酸钠提高相对密度，防止细胞粘连

氯化高汞防腐剂

蒸馏水

操作

加稀释液：2.0ml

↓

采血：10μl

↓

混匀

↓

充液

↓

静置：2～3min

操作

↓

计数：高倍镜下中央大方格

五个中方格的RBC

↓

计算：

RBC/L =五个中方格的RBC

×5×10×200×106

↓

报告：RBC：△. △△×1012/L

请您练习

取稀释液1.99ml,加血10µl，计数中央大格内五个中方格红细胞为500个，请报告结果?

答案：

RBC=500×5×10×200×106

=5.00×1012/L

请您练习

取稀释液2.0ml,加血20µl，计数中央大格内10个中方格红细胞为800个，请报告结果?

答案：

RBC=800/10×25×10×(2000+20)/20×106

=2.02×1012/L

压线红细胞的计数方法：

注意事项

1. 血量要准确。

2. 稀释液要过滤。

3. 红细胞计数池内要分布均匀。

注意事项

4. 实验器材应清洁干燥。

5. 自身凝集素增高者，宜用不含甲醛的枸橼酸盐稀释液。

6.同时做白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白测定，应先取红细胞计数用血。

7. 如实记录实验结果，每次签发报告前应仔细核对。

计数误差

1.技术误差

同白细胞计数

白细胞数过高时应进行校正。

2.固有误差

严重贫血的标本，应缩小稀释倍数或扩大计数

范围。

质量控制

1.两差比值评价法

D R= —————

质量控制

2.变异系数评价法

|Xm-X |

V = —————×100

Xm

质量得分=100-（2 ×V）

目标形成性检测与校正

请您思考

红细胞计数与白细胞计数方法上有哪些不同？

答案

（1）红细胞稀释液是等渗溶液而白细胞稀释液是低渗溶液。pH也不相同。

（2）红细胞稀释液不破坏细胞。

（3）稀释倍数不同。

（4）选用计数池区域不同。

（5）计数域误差大小不同。

思考题：

1.试着比较显微镜红细胞计数、白细胞计数、嗜酸性粒细胞计数的异同。

2.常用红细胞稀释液由哪些成分配成，各有何作用？为什么有的患者可致浑浊？该怎样处理？

作业

1.测知一Hb含铁量是416mg/L，氧结合量是16.68%，问含血红蛋白多少？

2.取红细胞稀释液1.98ml，加外周血20μl，混匀后充入计数池，计数中央大方格中5个中方格，平均每个中方格的红细胞为80个，试报告该标本的RBC计数结果。

第三节血红蛋白测定

一、氰化高铁血红蛋白测定

二、其他测定方法