小鼠胚胎培养方法的探究

小鼠胚胎培养方法的研究

摘要

目的：探讨小鼠早期胚胎在不同的体外培养液中生长发育的状况，从而寻找胚胎培养的最佳培养体系，为人类胚胎培养方法的改善提供理论依据，以提高临床体外受精一胚胎移植（ＩＶＦ．ＥＴ）的成功率。

方法：配制不同的培养液，对１００例小鼠超排卵共取卵子１６７８枚，分别在不同的培养液中进行体外授精，并将２一细胞鼠胚放入各组培养液中进行培养，其中，血清组的培养液为Ｅａｒｌｅ培养液加１０％人血清：卵泡液组的培养液为Ｅａｒｌｅ培养液加ｌＯ％人卵泡液；蜕膜细胞条件培养液组的培养液为Ｅａｒｌｅ培养液加ｌＯ％条件培养液：血清加卵泡液组的培养液为Ｅａｒｌｅ培养液加１０％人血清和５％人卵泡液：血清加条件培养液组为Ｅａｒｌｅ培养液加１０％人血清和５％条件培养液。每日在显微镜下观察小鼠胚胎的发育情况，分析受精率、卵

山西医科大掌

裂率、卵裂速度及桑椹胚与囊胚形成率，采用ｘ２分割检验进行统计分析。

结果：

一、１、小鼠胚胎在蜕膜细胞条件培养液中有７２．９％发育到８．细胞期，６６．０％发育到桑椹胚，６１．６％形成囊胚，３２．１％胚胎孵化。而对照组有４３．６％发育到８．细胞期，３０．９％发育到桑椹胚，１９．１％到初级囊胚，５５％孵化的胚胎。两组比较有显著性差异。２、卵泡液的胚胎有７１．３％到８．细胞期，５８８％发育到桑椹胚，５０．Ｏ％形成囊胚，２５７％孵化。与对照组比较有差显著性异。３、血清组有５３，４％发育到８．细胞期，４０．５％到桑椹胚，２９．３％形成囊胚，仅有７．８％孵化。与对照组无显著性差异。

二、鼠卵在不同培养液中受精率无显著性差别，而对于卵裂率和优质胚胎的形成率，鼠卯在蜕膜细胞条件培养液组和卵泡液组中均与对照组有显著性差异，而血清组与对照组比较无差异。鼠胚在蜕膜细胞条件培养液和卵泡液中培养发育速度快，碎片率明显低于对照者。

三、小鼠早期胚胎在卵泡液组、蜕膜细胞条件培养液组

中的调亡速度明显低于对照组，有显著性差异，而血清组中鼠胚的调亡速度低于对照组，但无显著性差异。

四、小鼠胚胎在血清加卵泡液组中发育到８－ｆｌＩｊ胞划，桑椹胚，囊胚及孵化胚胎的比率分别是７２．７％，６２．３％，５１２％和２８．５％，在血清加条件培养液组中则分别有７４．１％，６８．５％，６２０％和３５．２％发育至８．细胞期，桑椹胚，囊胚和孵化胚胎。各组与血清组比较均有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０１）。

结论：早孕蜕膜细胞能释放某些刺激胚胎发育的物质，可以促进胚胎体外发育，并提高胚胎发育质量。卵泡液对早期胚胎发育有促进作用，早期胚胎培养中，在培养液中添加人卵泡液对提高早期胚胎培养质量有显著的效果。

关键词：胚胎发育条件培养液卵泡液血清

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Ｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｔｅｃｈｎｉｑｕｅｏｆ

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Ａｂｓｔｒａｃｔ

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山西医科大掌硕士掌位论文Ｒｅｓｕｌｔｓ：

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