不同月龄大鼠去卵巢骨质疏松模型的比较

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水。 1.3 指标检测 造模术后 20 周, 对所有大鼠的腰 椎和股骨进行骨密度(BMD)检测,BMD 检测后禁食 过夜, 次日用 2%戊巴比妥钠溶液 (按 40 mg / kg 体 重)进行腹腔麻醉,采用腹主动脉取血,分离血清,参 照试剂盒说明书进行 E2 和 T 含量测定。 1.4 统计学处理 计量资料以 x±s 表示,采用 SPSS 13.0 统计软件包进行检验。 2结果 2.1 4 组大鼠 BMD 比较 见表 1。
6 月 龄 模 型 组 8 0.120±0.0113)4) 0.108±0.0133)4)
注 :与 3 月 龄 假 手 术 组 比 较 ,1) P<0.05,2) P<0.01;与 6 月龄假手术组比较,3) P<0.05;与 3 月龄模型组比较, 4) P<0.01
从 表 1 结 果 分 析 ,3 月 龄 模 型 组 腰 椎 和 股 骨 BMD 分别与 假 手 术 组 腰 椎 和 股 骨 相 比 均 有 明 显 下 降,有统计学意义(P<0.05);6 月龄模型组腰椎和股 骨 BMD 分别与假手术组腰椎和 股骨相比均 有明显 下降,有统计学意义(P<0.05);3 月龄组造模后腰椎 和股骨 BMD 下降率分别为22.55%和 22.22%,6 月龄 组造模后腰椎和股骨 BMD 下降率分别为 25.47%及 25.52%;6 月龄模型组 与假手术 组腰椎和股 骨 BMD 均显著高于 3 月龄相应组别的 BMD(P<0.01)。 2.2 4 组大鼠血清 E2、T 含量及比值 的比较 见 表 2。
总之,不论从骨密度还是从性激素水平考虑,选 择骨骼与性接近成熟的 6 月龄大鼠进行切除卵巢模 拟绝经后骨质疏松症更适合。
参考文献: [1] 韦永中,陶松年 ,杨 国 平 ,等. 去 势 对 不 同 月 龄 雌 性 大 鼠 骨 丢
失 的 影 响 [J]. 南 京 医 科 大 学 学 报 ,1999,19(3):203-203. [2] 张军. 原发性骨质疏松症的病因和发病机制 [J]. 中国社区医
骨 BMD 下 降 率<25%,6 月 龄 组 造 模 后 腰 椎 和 股 骨 BMD 下 降 率>25%;6 月 龄 模 型 组 与 假 手 术 组 腰 椎 和 股 骨 BMD
均显著高于 3 月龄相应组别的 BMD(P<0.01);3 月龄、6 月龄模型组大鼠 E2 含量与同月龄假手术组相比均有明显下 降(P<0.01),T 含量均有上升,但 3 月龄组 T 含量上升没有统计学 意 义 (P>0.05),而 6 月 龄 组 T 含 量 上 升 有 显 著 统
收 稿 日 期 :2009-01-05 基 金 项 目 : 福 建 省 自 然 科 学 基 金 (C0410032 ), 陈 可 冀 中 西 医 结 合 发 展
基 金 (CKJ2007010 ) 作 者 简 介 :郑 良 朴 (1974 — ), 男 ,硕 士 研 究 生 ,实 验 师 。 通 讯 作 者 :苏 友 新 (1969— ),男 ,医 学 博 士 ,教 授 ,Tel:13705049622,
最常被采用月龄的大鼠,进行造模观察。 就骨密度而 言,从本研究的表 1 结果分析,虽然 3 月龄与 6 月龄 大鼠在造模后骨密度均有显著下降, 似乎均符合骨 质疏松模型造模的条件, 但以目前普遍采用的骨密 度低于正常 25%为骨质疏松的判断标准, 显然 6 月 龄鼠造模后更符合骨质疏松的表现。 再从表 2 显示 性激素 的 变 化 来 看 ,3 月 龄 大 鼠 造 模 后 睾 酮 的 变 化 及雌二醇与睾酮的比值均不及 6 月龄大鼠变化明 显, 而 6 月大鼠性激素的变化更符合绝经后女性的 变化规律,即出现性激素内环境的紊乱。 不同月龄大 鼠的性 成 熟 程 度 与 骨 骼 发 育 状 态 有 所 不 同 ,3 月 龄 大鼠骨骼还处于生长期。 如我们结果所示,6 月龄的 大鼠不论造模与否, 其骨密度均高于其相应的 3 月 龄大鼠, 显然利用骨骼发育未成熟的大鼠进行骨质 疏松症造模及骨代谢的研究是不适合的。 现在的研 究更进一步证实,随着雌激素水平降低,性激素内环 境发生紊乱, 雌二醇与睾酮的比例失调, 引起下丘 脑-垂体-卵巢轴或肾上腺轴等功能紊乱所致的神经 递质、激素、细胞因子产生失衡等,均参与绝经后骨 质疏松症的发生发展过程[7]。 从这点来看,模拟更接 近人类绝经后性激素内环境变化的模型应该是选择 性成熟度更高的动物, 这对于探讨绝经后骨质疏松 症的发病与防治都是至关重要的。
摘 要: 目的 对不同月龄大鼠去卵巢骨质疏松模型进行比较, 优选合适骨质疏松模型的大鼠月龄。 方法
将 3、6 月龄大鼠分别随机分成模型组和假手术组 ,模型组切除双侧卵巢 ,假手术组大鼠只行腹部切口 ,不切除卵巢 。
造模后 20 周,对所有大鼠的腰椎和股骨进行骨密度(BMD)检测,并取血清进行 E2 和 T 含量测定。 结果 3 月龄、 6 月龄模型组腰椎和股骨 BMD 分别与假手术组腰椎和股骨相比均有明显下降 (P<0.05);3 月龄组造模后腰椎和股
计 学 意 义 (P<0.05);6 月 龄 模 型 组 大 鼠 E2 / T 比 值 与 3 月 龄 模 型 组 大 鼠 相 比 更 低 ,有 统 计 学 意 义 (P<0.05)。 结 论 从性激素水平与骨密度考虑,选择 6 月龄的雌性大鼠作为妇女绝经后骨质疏Leabharlann Baidu症的模型动物优于 3 月龄。
关键词:大鼠月龄;去卵巢骨质疏松;骨密度;性激素;动物模型
师 ,2008,24(22):9. [3] 刘石平,廖二元 ,伍 汉 文 ,等. 绝 经 后 骨 质 疏 松 大 鼠 模 型 的 综
合 评 价 [J]. 湖 南 医 科 大 学 学 报 ,2001,26(2):111-114. [4] 袁 勇 ,钟 卫 军. 骨 质 疏 松 症 的 动 物 实 验 研 究 进 展 [J]. 湖 南 中
选择合适月龄的雌性大鼠是复制绝经后骨质疏 松症的关键,目前研究者在制备去势模型时,常用的 有 2 月龄至 6 月龄不同月龄的大鼠[5]。 从大鼠的 生 命周期来看,大鼠寿命为 2.5~3.0 a,至少要 18 月龄 后才进入老年期, 这才与人类绝经后骨质疏松症发 病年龄段相符,但毕竟 1.5 a 的老龄鼠难获得,费用 高,考虑到切除卵巢后大鼠均需再饲养一定时间,故 更年轻的大鼠常被采用。 但究竟多大月份的大鼠较 为合适目前尚未形成统一认识。 有人分别选择 2 月 龄、3 月龄大鼠去势后观察骨矿含量和骨密度,结果 发现,处于骨生长期的 2 月龄大鼠,术后 4 个月内骨 矿含量、骨密度都处于增长趋势,不易成模;而 3 月 龄大鼠易成模[6]。 1994 年美国食品与药物管理局也 建议研究绝经后骨质疏松动物模型选择 6~10 月雌 鼠。 鉴于以上认识,我们选择了 3 月龄与 6 月龄 2 个
0.033±0.0081)
2.276±0.217
8
0.050±0.018
1.955±0.332
8
0.025±0.0062)
2.646±0.3093)
E2 / T 0.028±0.009 0.014±0.005 0.026±0.008 0.009±0.0034)
注:与 3 月龄假手术组比较,1) P<0.01;与 6 月龄假手术组比较,2) P<0.01,3) P<0.05;与 3 月龄模型组比较,4) P<0.05
表 1 4 组腰椎和股骨 BMD 检测结果(x±s)
g / cm2
组别
n 腰椎 BMD
股骨 BMD
3 月龄假手术组 8 0.102±0.021 0.108±0.017
3 月 龄 模 型 组 8 0.079±0.0131) 0.084±0.0161)
6 月龄假手术组 8 0.161±0.0132) 0.145±0.0222)
福建中医药 2009 年 4 月 第 40 卷 第 2 期
50
Fujian Journal of TCM April 2009 ,40 (2)
不同月龄大鼠去卵巢骨质疏松模型的比较
郑良朴 1,李远志 2,胡海霞 1,林 薇 1,吴银生 1,苏友新 1 (1. 福建中医学院中西医结合研究院,福建 福州 350108;2. 福建中医学院骨伤系,福建 福州 350108)
第2期
郑良朴等:不同月龄大鼠去卵巢骨质疏松模型的比较
51
组别 3 月龄假手术组 3 月龄模型组 6 月龄假手术组 6 月龄模型组
表 2 4 组血清 E2、T 含量及 E2 / T 的比较(x±s)
n
E2 / nmol·L-1
8
0.057±0.023
T / nmol·L-1 2.032±0.346
8
动物模型的选择在病因、发病机理、病理变化及 症状方面应尽量与临床接近, 绝经是卵巢功能衰退 的一个重要标志,以卵巢功能减退、雌激素水平降低 为其生理基础。 研究已表明,雌激素水平降低成为绝 经 后 骨 质 疏 松 的 主 要 原 因 [2],由 于 体 内 雌 激 素 水 平 降低,使骨代谢呈负平衡,骨吸收相对增强,导致全 身性骨量的减少及骨组织微结构的改变, 引起的高 转换型骨质疏松症。 绝经后骨质疏松的动物模型于 1969 年首先由 Saville 用大鼠切除卵巢建立,后被反 复证实并广泛采用, 目前切除卵巢的雌鼠骨质疏松 模型已成为标准化的公认的绝经后骨质疏松症经典 病 理 模 型 [3],最 主 要 的 原 因 就 是 该 模 型 基 本 能 模 拟 绝经后妇女生殖内分泌变化趋势, 能很好地体现雌 激素水平下降这一重要病因, 能很好地模拟绝经后 骨质疏松症骨代谢的特点,同时造模因素单一,模型 确 定 ,重 复 性 好 ,实 验 结 果 可 信 度 大 [4]。
从表 2 结果分析,这 2 个月龄的模型组 E2 含量 与同月龄假手术组相比均有明显下降 (P<0.01);模 型组 T 含量与同月龄假手术组相比均有上升, 但 3 月龄组没有统计学意义(P>0.05),而 6 月龄组有统 计学意义(P<0.05);6 月龄模型组大鼠 E2 / T 比值与 3 月龄 模型组大鼠 相 比 更 低 , 有 统 计 学 意 义 (P< 0.05)。 3讨论
中 图 分 类 号 :R-332
文 献 标 识 码 :A
文 章 编 号 :1000-338X(2009)02-0050-02
骨质疏松动物模型是骨质疏松症实验研究中不 可缺少的研究材料, 去卵巢大鼠模型是目前最常用 的绝经后骨质疏松动物模型。 对于骨质疏松症模型 大鼠的鼠龄目前尚未统一, 多数研究选择 3 月龄的 大鼠, 但已有学者提出应选择性成熟的 6 月龄大鼠 进行造模较适合[1]。 本研究从骨密度及性激素水 平 对 3、6 月龄大鼠去卵巢骨质疏松的 模型进行比 较, 现报道如下。 1 材料与方法 1.1 仪 器 与 试 剂 快 速 扫 描 骨 密 度 测 量 仪 (EXCELL plus,美国 NORLAND 公司),γ 放 射免疫计数 仪 (FJ2008PS, 西 安 二 六 二 厂 ); 雌 二 醇 (E2)、 睾 酮 (T) 放免试剂盒 (北京原子高科核技术应用股份有限公 司,批号均为 200803)。 1.2 实验动物处理 清洁级 Wistar 雌性大鼠 16 只 (3 月龄), 由福建中医学院实验动物中心负责饲养 至 6 月龄; 到第 1 批大鼠 6 月龄时, 另购买清洁级 Wistar 雌性大鼠 16 只(3 月龄),大 鼠均购自上 海斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 公 司 , 合 格 证 号 为 SCXK (沪 ) 2003-0003,动 物 实 验 均 在 福 建 中 医 学 院 实 验 动 物 中 心进行。 2 批大鼠(3、6 月龄)各随机分成模型组 8 只 和假手术组 8 只, 模型组大 鼠 以 40 mg / kg 体 重 的 2%戊巴比妥腹 腔注射麻醉 后,腹部常 规消 毒 ,取 腹 侧入路正中手术切口打开腹腔, 切除双侧卵巢后分 两层缝合切口;假手术组大鼠只行腹部切口,不切除 卵巢。 术后给予青霉素抗感染,所有大鼠自由摄食进
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