100例早孕胚胎停育绒毛染色体核型分析

100例早孕胚胎停育绒毛染色体核型分析①

马玲利

丛

林②

袁静安徽医科大学第一附属医院产前诊断中心（安徽

合肥）230022

中国图书分类号R714.21文献标识码

B

文章编号1001-

4411（2011）26-4104-02①中华医学会分子生物学临床应用研究专项基金〔CAMB012010〕安徽省科技攻关计划〔08010302181〕②通讯作者

【摘

要】

目的：分析早孕胚胎停育与绒毛染色体异常的关系。方法：选择2010年 2011年3月安徽医科大学100例胚

胎停育患者，对其进行绒毛染色体核型分析。结果：100例胚胎停育患者，孕周最长15周，最短6周。绒毛培养失败5例，培养成功率95.0%；检出异常核型34例，检出率35.8%，其中单纯染色体数目异常占55.9%，异常类型有：染色体数目异常23例，三倍体4例，四倍体1例，结构异常2例，嵌合体4例。95例早孕胚胎停育中，女性胚胎51例，占53.7%；男性胚胎44例，占46.3%。结论：胚胎染色体异常是胚胎停育的重要原因。

【关键词】

早孕胚停

绒毛

染色体异常

Analysis on chorionic villus karyotype for 100cases of early embryo development arrest

MA Ling －Li ，CONG Lin ，YUAN Jing .The Center of Prenatal Diagnosis ，the First Hospital of Anhui Medical University ，Hefei 230022，Anhui ，China

〔Abstract 〕

Objective ：To investigate the relationship between early embryo development arrest and chorionic villus.Methods ：

100chorionic villus specimens in our hospital from November ，2010to March ，2011were cultured for karyotype analysis.Results ：Of the 100cases ，

95chorionic villus was successfully cultured （95%），and abnormal embryo karyotypes were identified in 34cases （35.8%）.The abnormal karyotypes include trisomy or monosomy ，sex chromosome monosomy （23cases ），triploid （4cases ），tetraploid （1case ），chromosomal abnormalstructures （2cases ），mosaicism （4cases ）.Female embryos were 53.7%（51/95），male embryos were 46．3%（44/95）.Conclusion ：Embryo chromosomal abnormality is the most important reason of early embryo development arrest.

〔Key words 〕

Early embryo development arrest ；Chromosome ；Chorionic villus

胚胎停育是指由于孕卵缺陷或母体存在不利于妊娠的因素，导致妊娠早期胚胎死亡。造成胚胎停育的具体原因主要包括遗传因素、免疫因素、激素水平、生殖道感染、甲状腺功能问题等，其中遗传因素，尤其是染色体异常被认为是最常见的诱发因素。绒毛细胞是胚胎外胚层细胞，具有与胚胎组织相同的遗传性状，利用绒毛细胞染色体检查技术可以了解胚胎细胞的遗传性状，探讨胚胎停育的病因。研究者对100例胚胎停育患者进行了绒毛组织的细胞遗传学核型分析。

1对象与方法

1.1

对象2010年11月 2011年3月安徽医科大学第一附

属医院妇产科门诊的早孕胚胎停育患者，孕6 15周，其中13 15周仅5例。B 超提示胚胎停止发育，即无心管搏动，不能见到胚芽等。1.2方法

1.2.1

标本采集和绒毛细胞培养

清宫手术过程中，将绒毛

组织无菌取出，生理盐水冲洗凝血块。将位于超净台中的培养皿加入生理盐水后滴入双抗，将取得的绒毛组织约20mg 置于培养皿中。选择呈“手指状”分枝较长的绒毛枝，约10 15mg 。生理盐水漂洗2次后，用眼科剪剪碎，加入1ml 胶原酶和1ml 1.5%EDTA －胰酶，将其混匀后移入试管里，将试管置入37ħ、5%的CO 2温箱内消化15min 取出，加入2

ml 小牛血清终止消化，离心后弃上清液，接种于培养瓶中。置入37ħ、5%CO 2温箱内培养5 7天，取出在倒置显微镜下观察细胞是否贴壁，见到梭形细胞克隆后换液。继续培养2 3天，待大量的细胞呈圆形或卵圆形时收获。1.2.2

细胞收获和染色体制备

用5ml 注射器加入浓度为

50μg /ml 的秋水仙素2滴，2.5h 后行细胞学处理。加入0.4%EDTA －胰酶1.5ml 消化1min ，将离心管内培养基加入终止消化后，再移入离心管内。2000r /min ，7min ，弃上清。低渗：加入已预温至37ħ的0.075mol /L 的KCl 7ml ，用吸

管微吹打，放入37ħ水浴箱内5min 后取出，加入2ml 固定液，用吸管混匀后，静置5min ，预固定。离心7min ，2000r /min 。固定：弃上清，加入7ml 固定液，轻混匀后静置固定30min 。离心7min ，2000r /min ，弃上清，加入7ml 固定液。滴片：将最后一次固定的混合液离心后弃上清，用固定液将沉淀细胞调成细胞悬液，滴在冰片上，酒精灯火焰上烤片后，

置于80ħ烤箱2h 。G 显带：将玻片置于预温至37ħ的0.5%胰酶溶液中消化2min 后，立即在生理盐水里漂洗2次，在预温至37ħ的Giemsa 溶液中染色3min ，自来水冲洗，吹干后阅片。核型分析：每例计数30个分裂相，分析4个核型，如有嵌合体，加倍计数。1.3统计学方法采用SPSS 13.0统计软件进行χ2

检验。

2结果

2.1

染色体异常核型分类

100例患者胚胎停止发育在6

15周的分别为4例、3例、8例、20例、19例、19例、22例、3例、1例、1例。孕周最短的6周，妊娠囊大小为

·4014·中国妇幼保健2011年第26卷