第一章色谱法基本原理
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3．峰面积A A＝1.065hY1/2
4．半峰宽Y1/2 Y1/2=2.354σ
5．峰底宽 Y=4σ， 拐点作切线与基线相交，相交两点，两点间距
离为峰底宽，如图中AB。σ、Y1/2、Y统称为区域宽度
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
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1.3.2 保留值
保留值是用来描述待测试样中各组分在色谱柱中滞留情
由于固定相可分为固体吸附剂和涂在固体担体上或毛细 管内壁上的液体固定相，故可将色谱法分为下述四类：
气-固色谱
气体
固体
流动相
气-液
固定相
液-固
液体
液体
液-液色谱
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
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3
2、按固定相形状分类
①柱色谱
固定相装在柱管内。它又可分为填充柱色谱和空心毛细
管色谱。
GC 填充柱: 长1－10 m， 2－4 mm
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第一章色谱法基本原理
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1.3 色谱流出曲线
1.3.1、色谱峰
流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线
色谱峰：流出曲线上突起部分
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
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1.峰高
色谱峰顶点与基线之间的距离，以h表示，如图中AB
2．标准偏差σ
0.607h处，拐点处，峰宽正好为2σ
第一章 色谱法的基本原理
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
1
1.1 色谱法概述
1.1.1 色谱法发展史
流动相 固定相
色谱分析法是用来进行混合物中各组分的分离
和分析的一种物理化学分析方法。
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
2
1
1903年，俄国植物学家Tswett 利用吸附原理分离植物色素而 发明色谱法(chromatography) 。
空心毛细管: 长10－100 m， 0.1－0.5 mm
LC : 长0.1－0.5 m， 4－6 mm
②纸色谱
用滤纸作固定相，试样溶液在纸上进行展开、分离。
③薄层色谱
将固定相研磨成粉末，再压成薄膜或涂成薄膜。样品的
分离形式类似纸色谱。(纸色谱和薄层色谱又统称作平板色谱
)2021/3/1
第一章色谱法基本原理
况的物理量，通常用距离或将各组分带出色谱柱所需的载气 体积（或时间）表示。在一定的固定相和操作条件下，任何 一种物质都有一个固定的保留值，故组分的保留值可用于该 组分的定性鉴定。 1．死时间tM
不被固定相吸附或溶解的组分从进样开始到柱后出现响应 信号极大值时所需时间。对于气相色谱，常把空气（热导检 测器）和甲烷（氢火焰离子化检测器）从进样到出峰的时间 称为死时间。
7
6
km snscsV sKV sK m m nm cm V m V m β
k: 随K和流动相、固定相体积的变化而变化，而K是由组 分及固定液的热力学性质决定的。
β Vm Vs
β：相比 Vm：色谱柱中流动相体积，Vs：色谱柱中固定相体积
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第一章色谱法基本原理
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1.2.2 分离原理
VR′=VR－VM
8．相对保留值r2,1 指组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，
是一个无因次量，只和柱温与固定相性质有关，故其可
以作为一个定性指标。
r2,1=tt''R R1 2
=V'R2 V'R1
tR2 tR1
VR2 VR1
r2,1也可用α表示，即，α也叫做选择因子。
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第一章色谱法基本原理
80年代Jorgenson J W等的研究工作推动了高效毛细管电泳(Highperformance capillary electrophoresis, HPCE)高速发展
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第一章色谱法基本原理
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1.1.2 色谱法分类
1、按两相所处的状态分类 气相色谱 -------- 用气体作流动相 液相色谱 -------- 用液体作流动相
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9．保留值与保留因子 间的关系
2021/3/1
ux L , 来自百度文库 L
tR
tM
u x u nm ns nm
因为色谱柱长是一定的，所以
u xtR u tM
u
nm ns nm
u tM
nm
tM n m
nm
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ns nm
ns ns
k 1
nm nm
tR tM (k 1)
k tR tM t 第一章色谱法基本原理M
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3、按分离过程的物理化学原理分类 ① 吸附色谱 (L－S，G－S) 利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差异进行分离。 ② 分配色谱 (L－L，G－L) 利用不同组分在两相中分配系数的不同进行分离。 ③ 离子交换色谱 (L－S) 利用组分离子与离子交换剂的交换能力不同进行分离。 ④ 空间排阻色谱 (L－S) 用多孔物质对不同大小分子的阻碍作用进行分离。
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1.2 色谱分离原理
1.2.1 分配系数和分配比
1. 分配系数
K cs cm
2. 分配比(保留因子)
s：固定相 m：流动相
定义：在一定的温度、压力下，组分在气液两相间达平衡 时，分配在液相中的质量与分配在气相中的质量之比。即
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t
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t'
R2
t' R1
t' R2
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k2
K2
Vs Vm
k1
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5．死体积VM 不被保留的组分，即分配色谱中K=0的组分，可由死时
间来确定。
VM=tM qV,c 6．保留体积VR
从进样开始到柱后出现待测组分响应信号极大值时 所通过的载气体积。
VR=tRqV,c
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7．调整保留体积VR′ 指扣除死体积后的保留体积。
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第一章色谱法基本原理
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2．保留时间tR 试样从进样开始到柱后出现峰极大点时所经历的时间，
称为保留时间，如图 O‘B′。它相应于样品到达柱末端的 检测器所需的时间。 3. 调整保留时间
扣除死时间后的保留时间。 tR′=tR－tM
4. 流动相的流速
Vc=qct
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第一章色谱法基本原理
1941年Martin A J P和Synge R L M发明液液分配色谱、获1952年 诺贝尔化学奖。
1952年Martin A J P和James A T发明气相色谱(gas chromatography, GC)
70年代发展了高效液相色谱(High-performance liquid chromaotgraphy, HPLC)成为重要分离分析技术
4．半峰宽Y1/2 Y1/2=2.354σ
5．峰底宽 Y=4σ， 拐点作切线与基线相交，相交两点，两点间距
离为峰底宽，如图中AB。σ、Y1/2、Y统称为区域宽度
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1.3.2 保留值
保留值是用来描述待测试样中各组分在色谱柱中滞留情
由于固定相可分为固体吸附剂和涂在固体担体上或毛细 管内壁上的液体固定相，故可将色谱法分为下述四类：
气-固色谱
气体
固体
流动相
气-液
固定相
液-固
液体
液体
液-液色谱
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2、按固定相形状分类
①柱色谱
固定相装在柱管内。它又可分为填充柱色谱和空心毛细
管色谱。
GC 填充柱: 长1－10 m， 2－4 mm
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1.3 色谱流出曲线
1.3.1、色谱峰
流出曲线（色谱图）：电信号强度随时间变化曲线
色谱峰：流出曲线上突起部分
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1.峰高
色谱峰顶点与基线之间的距离，以h表示，如图中AB
2．标准偏差σ
0.607h处，拐点处，峰宽正好为2σ
第一章 色谱法的基本原理
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1.1 色谱法概述
1.1.1 色谱法发展史
流动相 固定相
色谱分析法是用来进行混合物中各组分的分离
和分析的一种物理化学分析方法。
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1903年，俄国植物学家Tswett 利用吸附原理分离植物色素而 发明色谱法(chromatography) 。
空心毛细管: 长10－100 m， 0.1－0.5 mm
LC : 长0.1－0.5 m， 4－6 mm
②纸色谱
用滤纸作固定相，试样溶液在纸上进行展开、分离。
③薄层色谱
将固定相研磨成粉末，再压成薄膜或涂成薄膜。样品的
分离形式类似纸色谱。(纸色谱和薄层色谱又统称作平板色谱
)2021/3/1
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况的物理量，通常用距离或将各组分带出色谱柱所需的载气 体积（或时间）表示。在一定的固定相和操作条件下，任何 一种物质都有一个固定的保留值，故组分的保留值可用于该 组分的定性鉴定。 1．死时间tM
不被固定相吸附或溶解的组分从进样开始到柱后出现响应 信号极大值时所需时间。对于气相色谱，常把空气（热导检 测器）和甲烷（氢火焰离子化检测器）从进样到出峰的时间 称为死时间。
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km snscsV sKV sK m m nm cm V m V m β
k: 随K和流动相、固定相体积的变化而变化，而K是由组 分及固定液的热力学性质决定的。
β Vm Vs
β：相比 Vm：色谱柱中流动相体积，Vs：色谱柱中固定相体积
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1.2.2 分离原理
VR′=VR－VM
8．相对保留值r2,1 指组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，
是一个无因次量，只和柱温与固定相性质有关，故其可
以作为一个定性指标。
r2,1=tt''R R1 2
=V'R2 V'R1
tR2 tR1
VR2 VR1
r2,1也可用α表示，即，α也叫做选择因子。
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第一章色谱法基本原理
80年代Jorgenson J W等的研究工作推动了高效毛细管电泳(Highperformance capillary electrophoresis, HPCE)高速发展
2021/3/1
第一章色谱法基本原理
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2
1.1.2 色谱法分类
1、按两相所处的状态分类 气相色谱 -------- 用气体作流动相 液相色谱 -------- 用液体作流动相
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9．保留值与保留因子 间的关系
2021/3/1
ux L , 来自百度文库 L
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因为色谱柱长是一定的，所以
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3、按分离过程的物理化学原理分类 ① 吸附色谱 (L－S，G－S) 利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差异进行分离。 ② 分配色谱 (L－L，G－L) 利用不同组分在两相中分配系数的不同进行分离。 ③ 离子交换色谱 (L－S) 利用组分离子与离子交换剂的交换能力不同进行分离。 ④ 空间排阻色谱 (L－S) 用多孔物质对不同大小分子的阻碍作用进行分离。
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1.2 色谱分离原理
1.2.1 分配系数和分配比
1. 分配系数
K cs cm
2. 分配比(保留因子)
s：固定相 m：流动相
定义：在一定的温度、压力下，组分在气液两相间达平衡 时，分配在液相中的质量与分配在气相中的质量之比。即
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5．死体积VM 不被保留的组分，即分配色谱中K=0的组分，可由死时
间来确定。
VM=tM qV,c 6．保留体积VR
从进样开始到柱后出现待测组分响应信号极大值时 所通过的载气体积。
VR=tRqV,c
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第一章色谱法基本原理
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7．调整保留体积VR′ 指扣除死体积后的保留体积。
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第一章色谱法基本原理
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2．保留时间tR 试样从进样开始到柱后出现峰极大点时所经历的时间，
称为保留时间，如图 O‘B′。它相应于样品到达柱末端的 检测器所需的时间。 3. 调整保留时间
扣除死时间后的保留时间。 tR′=tR－tM
4. 流动相的流速
Vc=qct
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第一章色谱法基本原理
1941年Martin A J P和Synge R L M发明液液分配色谱、获1952年 诺贝尔化学奖。
1952年Martin A J P和James A T发明气相色谱(gas chromatography, GC)
70年代发展了高效液相色谱(High-performance liquid chromaotgraphy, HPLC)成为重要分离分析技术