第五章 人工授精

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1、精液量:指公畜一次射出的精液总体积。因动物种类、品种、
个体及年龄不同而有差别。
2、色泽: 正常:乳白 、浅灰或浅乳黄色
异常:红色、绿色、黄色
3、气味:一般无味或略带腥味。其它气味为异味。 4、云雾状:云雾状的明显程度代表着高浓度的精液中精子活力的
高低,是一个综合指标。
5、pH:各种动物精液的pH都有一定的范围,一般新采出的牛、羊
精液抹片示意图
1.A片后退,使其边缘接触精液小滴(C) ; 2.精液均匀分散在A片的边 缘;3.A片向前推进,使精液均匀涂抹在B片上
2、精子顶体异常率
• 一般认为只有呈前进运动、且顶体完整的精子才具有正常
受精能力。
• 正常情况下,牛为 5.9%,猪为 2.3%。如果精子顶体异常 率显著增加,牛超过14%,猪超过4.3%,则会导致受精力
比色计测定样品的透光度与标准管比较或查对精子
密度查数表,确定样品的精子密度。
• 这种方法的测定结果与使用血细胞计数器计数法的 测定结果近似,其相关系数在0.93以上。 • 本法用于猪、马精液时,应过滤除去精液中的胶状 物,以免干扰透光性而造成误差。
(三)精子形态
1、精子畸形率 凡形态和结构不正常的精子通称为畸形精子。精液 中畸形精子数占精子总数的百分率称为精子畸形率。 在正常精液中也有一定比例的畸形精子,但一般不 会超 20%。优质精液,精子畸形率不能超过如下数 值 , 即 牛 18% 、 水 牛 15% 、 羊 14% 、 猪 18% , 马 12%、狗20%。
手握法(猪)
• 射精过程中可停止弹性刺激,但由于公猪副性腺 发达,射精量大,完成射精往往需要经历2-4个 阶段,而在各个射精阶段的间隔期间要恢复弹性 刺激,直至采完全部精液为止。 • 特点:简单、方便,能采集富含精子部分精液。 • 分段采精:弃掉含副性腺分泌物多、精子较少、 精液清亮白色的第一段和精液较稀、清亮、精子 少的第三段,只收集精液浓、精子多、呈乳白色 的第二段。
第五章 人工授精
授课教师:刘宏
主要内容
第一节 概述 第二节 精液的采集
第三节 精液品质检查
第四节 精液的稀释 第五节 精性动物受孕的繁殖技术,包括自然交配 与人工授精两种类型。
• 受精是指雌性动物的卵子与雄性动物的精子结合形
成胚胎的生理过程或现象,是配种的目的,即配种


30~50
30~50
20~40
5~12
700~1000
200~400
二、人工授精发展简史
1.试验阶段:1780年,意大利生理学家
Spallanzani,对犬进行人工授精。
2.实用阶段:上世纪40-60年代,成为繁殖
改良家畜的重要手段。
3.冷冻精液阶段:50年代英国的Smith和
Polge改进牛精液的冷冻保存方法,人工授精
(二)精子代谢能力测定
• 活精子具有分解代谢能力,即使在低温和冷冻状态下, 虽然精子停止了运动,但其代谢活动理论上并未绝对 停止。 • 可通过精液果糖分解测定实验、美蓝褪色实验、精子 耗氧量测定等检测精子代谢能力。
四、精液的细菌学检查
• 检验方法按常规微生物学检查操作规程进行。主 要检测精液细菌的菌落数及其病原微生物。 • 我国评定牛精液中细菌数通常采用平板培养法。 • 根据2008年我国发布的《牛冷冻精液》 (GB4143-2008)规定,解冻后精液应无病原微 生物,每毫升精液中细菌菌落(上限)为800个。 • 目前可使用精液品质自动分析仪、流式细胞计数 仪等先进仪器高效率检测多项指标。
• 放大 200-400 倍,对精液样品进行主观估测。放在 37℃-38℃显微镜恒温载物台上观察。 • 活力评定通常采用十级评分法,即按呈前进运动的 精子所占百分率分别评为1.0、0.9、0.8……0.1等十 个等级,若无前进运的精子,则以“0”表示。如 “0.8”就表示呈直线前进运动的精子占总精子数的 80%,有些国家对某些畜种也有采用百分制和五级 评分法。
精液偏酸性,猪、马精液偏碱性。
二、精液的显微镜检查
精液质量自动检测系统
(一)精子活力
• 精子活力是指精液中呈直线前进运动的精子所占百分率,
也称活率。由于它与精子的受精能力直接相关,所以是
评价精液品质的一个重要指标,通常在采精后,精液处 理前、后,冷冻精液解冻后和输精前进行检查。
精子活力检测方法
人工授精的优点
4、避免在自然配种时公母畜必须直接接触的时空特点,
防止疾病的传播。
5、克服公、母畜体型悬殊而出现的交配困难。 6、在国际和地区间的交流和贸易中,代替种公畜的引进。
人工授精与自然交配的配种效率比较
自然交配每年每头 畜种 公畜可配母畜头数 猪 牛 20~3 0 20~40 100~200(冻精) 600~1200(冻精) 人 工 受 精 每次采精可配母 畜头数 5~15 20~25 每年每头公畜可配母 畜头数 200~400 50~200
定的公畜交配。
–优缺点:可提高种公畜利用率,增加利用年限,
且能有计划的选配,提高后代质量。
(二)人工授精
人工授精(AI)是在人工条件下利用器械采集种
公畜的精液,经过品质检查,稀释保存等适当 的处理后,再用器械将精液输送到发情母畜生 殖道内,使母畜受孕的配种方法。
人工授精的优点
1、最大限度地提高优秀种公畜的繁殖效能和种用价值。
一头种公畜一次射精可配种的母畜数是自然交配的几十
倍,甚至几百倍。 2、加速品种改良速度,促进育种进程。
AI特别是冷冻精液的运用,极大限度地提高了公畜的配
种能力,使优秀种公畜的遗传基因迅速扩大,使其后代 生产性能迅速提高,从而加速了品种改良。
–公猪好好一坡,母猪好好一窝。
3、大幅度减少种公畜的头数,降低繁殖成本 。
三、采精频率
1、定义:
–公畜每周的采精次数。 –为了既能最大限度地采集精液,又能维 持其健康体况和正常生殖机能,必须合 理安排采精频率。
2、各种动物的采精频率:
–成年公牛每周采精2d,每天可连续采精两次,
两次间隔时间可在30min左右;也可隔日采精,
每周采3d。
–成年公猪适于隔日采精1次。
–羊在配种季节内集中连续每日采精2-4次均
(三)电刺激法
• 通过电流刺激腰椎有关神经和输卵管壶腹部 而引起公畜射精的方法。 • 适用于各种动物,尤其是种用价值高、但失 去爬跨能力的优良公畜及难以调教爬跨的野 生动物等。
(四)按摩法(禽类)
• 手指对生殖器官及副性腺进行按摩刺激,以引起性 欲而出现射精。 • 家禽的按摩采精法:助手保定,以防采精过程中扑 打。然后采精者右手指间夹着集精容器,并有节奏 地前后按摩禽体后躯及耻骨下部,引起射精反射。 与此同时,左手将尾羽弯向头部,轻轻压迫尾脂区 域。当出现射精时,两手拇指和食指同时做 “挤乳” 状挤压,接取精液,直至反射消失。
技术进入了一个新的发展阶段。
第二节 精液的采集
一、采精前的准备
(一)采精场地 • 固定的场地和环境,以便建立起巩固的条件反射。 • 同时也是保证人畜安全和防止精液污染的基本条件。 • 场地应宽敞、平坦、清洁、安静。 • 有供母畜保定用的采精架或供公畜爬跨的假台畜。 • 应配备喷洒消毒和紫外线照射装置。
精子波状运动与精子活力评定 等级 0 1 2 3 4 5 波状运动状态 全部不动 个别运动 运动非常缓慢 一般波状运动,波幅小 快速波状运动,无漩涡 快速波状运动,有漩涡
(二)精子密度
也称精子浓度,指每毫升精液中所含的精子数
量。目前常用的测定方法有估测法、计数法
(血细胞计法)、光电比色计测定法和电子颗粒
计数仪测定法。
1、估测法
• 将原精液放在低倍(10×10)显微镜下观察,根据视野中精子的
稠密程度将精子密度粗略地分为密、中、稀三级。由于各种动物 正常精液的精子密度相差很大,很难使用统一的等级标准,检验
者应根据经验,对不同的动物采用不同的标准。
• 估测法评定精子密度,具有较大主观性,误差也较大。但方法简 便,在基层人工授精站常用。
成功后,可使卵子受精。
一、动物的配种方法
(一)自然交配 1、自由交配:在群体自然状态下雄性和雌性 动物的随意交配的方式。
优缺点:方便;后代血缘不清,易引起近亲交配或早配,
使种群生产性能和遗传性能发生退化。
2、人工辅助交配
–定义:在公、母畜隔离饲养条件下,只在母畜发
情时,才按既定选种选配计划,令其与特
• 在特定染料中(如伊红-苯胺黑),活精子不着色, 死精子着色,从而将死活精子加以区别。 • 精液抹片染色后,在显微镜下计数活精子所占百 分比。
三、精液的生物化学检查
(一)精子存活时间和存活指数
• 精子存活时间:精子在体外一定保存条件下的总 生存时间。 • 存活指数:精子的平均存活时间,表示精子活力 下降的速度。 • 精子存活时间和存活指数与受精率密切相关,两 项指标的测定也是鉴定精液稀释液处理效果的方 法之一。
(二)台畜的准备
• 真台畜即活畜,是指用与公畜同种的母畜或阉畜作 为台畜。 • 假台畜是根据母畜体型大小,选用钢管或木材做成 的有支撑力的架子,然后在其表面包裹一层畜皮或 麻袋、人造革等弹性柔软物品。
假台畜
真台畜
(三)种公畜的准备和调教
• 利用假台畜采精,要事先对种公畜进行调教,使其建 立条件反射。
成。
2、假阴道的准备
• 1)适宜温度:一般控制在38-42℃。 • 2)适当压力:借助注水和空气调节。 • 3)适当润滑度:用消毒的润滑剂加以润滑。
• 假阴道使用前必须进行严格消毒,并保证无破损漏洞。
充气后的假阴道
3、采精操作
牛羊假阴道安装充气后理想的状态
(二)手握法(猪)
• 将手握成空拳使公猪阴茎插入其中,让其来回 抽动片刻,当螺旋状阴茎龟头己伸露于掌外时, 应由松到紧握住阴茎,并不再让其转动和滑脱 ; • 待阴茎充分勃起向前伸展时,应顺势向前将其 带出(千万不要拉出),并在不让其转动和滑脱 的情况下,手掌做有节律的一紧一松弹性刺激, 直至射精。
2、计数法(血细胞计法) • 本法可以准确测定单位容积精液中的精子数, 设备简单,但操作步骤多,较费时,常用于对 精液作定期全面检查。对牛、羊等精子密度大 的精液使用红细胞吸管稀释;对猪、马等精子 密度较低的精液使用白细胞吸管稀释。
采用血细胞计数器计算精子密度方法示意图
3、光电比色计测定法
• 根据精子密度越大,透光性越低的原理,使用光电
二、采精方法
(一)假阴道法(牛、羊、马、驴、兔) (二)手握法:猪及犬 (三)电剌激法:各种动物 (四)按摩法:禽类
(一)假阴道法
– 假阴道是模拟雌性阴道条件而仿制的人工阴道。能收集到动物全部射出的精
液,既不降低精液的品质,又不影响雄性动物的生殖器官和性机能,所以应
用最广泛。 – 1、假阴道结构:为圆筒状,主要由外壳、内胎、集精杯(瓶、管)及附件构
可,但每周应休息1d。
第三节 精液品质检查
• 精液品质检查的目的在于确定精液品质的优劣,以此作 为精液稀释、保存的依据。 • 同时,也反映种公畜饲养管理水平和生殖器官的机能状 态,以及精液在稀释、保存、冷冻和运输过程中的品质 变化及处理效果。 • 精液品质检查项目分为常规检查项目和定期检查项目。
一、精液的物理特性检查
畸形精子类型图
1.正常精子 2.游离原生质滴 3.各种畸形精子 4.头部脱落 5.附有原生质滴 6.附有远侧原生 质滴 7.尾部扭曲 8.顶体脱落


水牛
绵羊

畸形精子检查方法
可在计算死活精子比例的染色玻片上同时进行,也
可用少许精液小心做成抹片,勿人为损伤精子,用 普通染色液(如美蓝)或红、蓝墨水染色3min,水 洗干燥后,在400倍显微镜下观察,检查精子总数 不少于200个,计算畸形精子百分率。
下降。
• 精液在体外保存时间过长,遭受低温打击,特别是冷冻方 法不当等是精子出现顶体异常的重要原因,也可能与雄性 生精机能和副性腺分泌物性状异常有关。精子的顶体异常 有膨胀、缺损、部分或全部脱落等数种。
精子顶体异常图
1.正常顶体 2.顶体膨胀 3.顶体部分脱落 4.顶体全部脱落
(四)活精子百分率
– 1.在假台畜旁边牵一发情母畜,诱使公畜进行爬跨,但不让 其交配,当公畜性兴奋达到高峰时,迅速牵走母畜,令其爬 跨假台畜采精。
– 2.在假台畜的后躯涂抹发情母畜的阴道粘液或尿液,刺激公
畜的性欲并引诱其爬跨,经过多次采精后即可调教成功; – 3.将待调教的公畜拴系在假台畜附近,让其观看另一头已调
教好的公畜爬跨假台畜,然后再诱其爬跨。
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