猪瘟病毒基因组蛋白结构及蛋白表达技术的研究进展
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一
种 功 能 蛋 白 ，对 病 毒 的免 疫 、识 别 、吸 附 和 进 入 宿 主 细 胞
十 分 重 要 。 它 可诱 导机 体 产 生 中 和 抗 体 ，用 其 免 疫 猪 可 诱 导
产 生 对 致 死 剂 量 的 保 护 性 免 疫 反 应 ．也 是 病 毒 粒 子 吸 附 进 入
ｐｌ Ａ ｏｙ（）尾 巴结 构 ，在 所 有 瘟 病 毒 中 高 度 保 守 ，其 参 与 病 毒 基 因组 的复 制 、 多 聚蛋 白 的 翻译 和 病 毒 粒 子 的装 配 。猪 瘟 病 毒 的 Ｏ Ｆ翻 译 一 个 ３ ９ Ｒ ８ ８个 氨 基 酸 的 多 聚 蛋 白 。 该 蛋 白在 细 胞 内 蛋 白 酶 和病 毒特 异 性 的 蛋 白酶 作 用 下 裂 解 成 各 种 成 熟 的
和 性 ．Ｎ ２ ３蛋 白为 双 功 能 蛋 白 ，具 有 丝 氨 酸 蛋 白酶 活 性 、 Ｓ—
核苷 ｉ磷酸酶活性及 解旋酶 活性 ，其解旋作用 依赖于 Ｃ Ｆ ＳＶ
特 异 的单 链 Ｒ Ａ，该 蛋 白在 病 毒 的 生 命 周期 中 至关 重 要 。还 Ｎ 有 其 他 一 些 非 结 构 蛋 白 ，比如 Ｎ ４ 和 Ｎ ４ 、Ｎ ５ ＳＡ ＳＢ Ｓ Ａ和 Ｎ ５ ＳＢ 这 些非 结 构蛋 白的研 究还 不 多 ，其 中 Ｎ ５ Ｓ Ｂ也 与病 毒 复制 有关 。 ２ 猪瘟 病 毒 蛋 白表 达 技 术 ２１ 原核 表 达 ． 在 各 种 表 达 系 统 中 ，最 早 被 采 用 进 行 研 究 的 是 原 核 表 达 系 统 ．这 也 是 目前 掌 握 最 为 成熟 的 表 达 系 统 。该 项 技 术 的 主 要 方 法 是 将 已 克 隆 人 目的 基 因 Ｄ Ａ 片 段 的 载 体 （ 般 为 质 Ｎ 一
复 杂 的二 级 结 构 ，无 甲基 化 帽 子 结 构 。５ ’端 Ｕ Ｒ 与 病 毒 的 Ｔ 复 制 和 翻译 都 密 切 相 关 。３ ’端 Ｕ Ｒ 长 度 为 ２ ５ ２ ９ ｔ Ｔ １ ～ ３ ｎ ．无
染细 胞培 养上 清 液 中的 糖 蛋 白 。Ｅ ｓ 是 一 个 结 构 蛋 白 又是 ｏ ｒ 既
Ｎ ４ 、ＮＳ Ｂ、 ＮＳ Ａ 和 ＮＳ Ｂ。 ｓＡ ４ ５ ５ １１ 结 构 蛋 白及 其 功 能 ．
和爆 发 做 好 准备 。 同 时 ．加 强 猪 瘟 病 毒 诊 断 中各 技 术 的研 究 对 预 防 和 控 制 本 病 具 有 非 常 重 要 的 现 实 意 义 。 本论 文 对 猪 瘟 病 毒 基 因组 结 构 和诊 断 技 术 中的 蛋 白表 达 技 术进 行 了 系统 的
阐述 。
１１１ Ｃ蛋 白 ． ．
Ｃ蛋 白也 称 ｐ ４ １ ，是 病 毒 的 核 衣 壳 蛋 白 ， 由 多 聚 蛋 白 上 Ｓｒ６ 一 ｌ２７之 间 的氨 基 酸 组 成 ．分 子量 为 １ｋ ａ 在瘟 病 ｅ１９ Ａ ａ６ ４Ｄ 。
毒 ，Ｃ蛋 白 是 主要 区域 中极 为保 守 的 蛋 白 ，同源 性 大 于 ９ ％。 １ Ｃ蛋 白 Ｎ端 由 Ｎ ｒ ｐ ｏ的水 解 作 用 而 产 生 ，Ｃ端 可 能 是 由宿 主 细 胞 的 信 号 肽 酶 作 用 所 致 。Ｃ蛋 白在 合 成 后 几 分 钟 便 与 基 因组
的研 究 表 明 ．Ｅ ２蛋 白 的 抗 原 区 主 要 集 中在 蛋 白分 子 的 Ｎ 端 区 域 ６ ０ａ ８６ ａ ９ ａ ～ ６ ａ ，包 含 ４个 抗 原 结 构 域 ，即 Ａ、Ｂ、Ｃ 、Ｄ。 Ｅ ２的 Ｃ端 有 一 段 核 心 序 列 为 Ｙ Ｅ （ ９ ～ ９ ａ ） Ｙ Ｐ ９ ５ ９ ８ ａ ，存 在 于 一 个 线 性 表 位 中 ，该 表 位 被 认 为 是瘟 病 毒 共 有 的抗 原 表 位 。序
病 毒 颗 粒 构 型 的 主要 结 构 蛋 白 。 同 时 ，动 物 实 验 说 明 Ｅ １蛋 白对 猪瘟 病 毒 的繁 殖 有 重 要 作 用 ，但 作 用 机制 不 明 了 。
１１ Ｅ ．． ２蛋 白 ４
Ｎ ２ ３蛋 白也 是 Ｃ Ｆ 中一 个 非 结 构 蛋 白 ，所 有 感 染 猪 Ｓ— ＳＶ 瘟 的 动 物 体 中 均产 生 Ｎ ２ ３的抗 体 ，但 Ｎ ２ ３ 具 有 病 毒 中 Ｓ— Ｓ— 不
列 Ｔ Ｖ Ｐ Ｌ （ ２ ～ ３ ａ ） 表 位 在 猪 瘟 病 毒 中高 度 保 守 ， Ａ Ｓ 丌 Ｒ ８ ９ ８ ７ａ 可 以作 为 鉴 别 牛 病 毒 性 腹 泻 病 毒 和 羊 边界 病 病 毒 的依 据 。
１２ 非 结 构 蛋 白 ．
物 纯 化 困难 ： 而 且 原 核 表 达 系 统 翻 译 后 加 工 修 饰 体 系 不 完
Ｉ
资源育繁 ｌ
猪瘟病毒 基 因组蛋 白结构及 蛋 白表达 技术 的研 究进展
张 月 兰邹然 王贵 升 孙 圣福 （ 东省动 物疫病预 防与控 制 中心 ２ ０ ２ ） 山 ５ ０ ２
摘 要 ：猪 瘟是 威 胁 许 多 国 家 包括 我 国 在 内的 养 猪 业 的 重 要 疾 病 之 一 ，随 着 猪 瘟病 毒 （ Ｓ Ｖ） 的 突 变性 发展 ，从 分 子 水 平 ＣＦ
粒 ）转 化 细 菌 （ 常 选 用 的是 大 肠 杆 菌 ） 通 ，通 过 ＩＴ Ｐ Ｇ诱 导 并
最 终 纯 化 获 得 所 需 的 目的蛋 白 。 其 优 点 在 于 能 够 在 较 短 时 间 内获 得 基 因表 达 产 物 。 而且 所 需 的成 本 相 对 比较 低 廉 。但 与
此 同 时 原 核 表 达 系 统 还 存 在 许 多难 以 克 服 的 缺 点 ：如 通 常 使
Ｅ ２糖 蛋 白 由 Ｏ Ｆ ９ ～ ０ ０位 编 码 的 ３ ０个 氨 基 酸 残 疾 Ｒ ６ ０ １６ ７ 组 成 ，根 据糖 基 化 程 度 的 不 同 ，分 子 量 在 ５ ￣ ５ ｕ之 间 内变 １５ｋ 动 。 它位 于 病 毒 囊 膜 表 面 ，参 与病 毒 的 感 染 过 程 ，是 猪 瘟 病 毒 的 编码 蛋 白中 最 不 保 守 的一 种 蛋 白 ，但 是 猪 瘟 病 毒 的 最 主
存 在 于病 毒 粒 子 表 面 或 被 分 泌 到 胞 外 ，是 唯 一 可 以 分 泌 到 感
的 囊 膜 包 裹 ，内 部 为 二 十 面 体 的对 称 核 衣 壳 。核 心 直 径 大 约 ３ｈ Ｏ ｍ。 核 衣 壳 内包 裹 单 股 正 链 线 性 Ｒ Ａ分 子 ，基 因组 大 约 Ｎ １． ｂ ５ ２５ 。 ’端 Ｕ Ｒ 长 度 为 ３ ３ ｔ ３ ４ ｔ ｋ Ｔ ７ｎ 或 ７ ｎ，有 茎 环 、 发 卡 等
探 索 Ｃ Ｆ 基 因组 及 蛋 白 结 构及 功 能 ．可 以 为 预 防 猪 瘟 流行 ＳＷ 结 构 蛋 白 （ ）和 非 结构 蛋 白 （ Ｓ 。从 Ｎ端 开始 至 Ｃ端 各 蛋 Ｓ Ｎ ） 白 质 分 别 是 Ｎ ｒ 、 Ｃ Ｅ ｓ Ｅ 、 Ｅ 、 ｐ 、 Ｎ ２ Ｎ ３ ｐｏ 、 ｒ 、 １ ｏ ２ ７ Ｓ、 Ｓ、
Ｒ Ａ 相结 合 ，包 装 形 成 核 衣 壳 ，除 此 之 外 ，还 在 病 毒 繁殖 和 Ｎ 基 因表 达 调 控 中 有 着 重要 作 用 。但 是 以 Ｃ基 因为 基 础 构 建 的 重 组 痘 苗 病 毒 活 载 体 疫 苗 免 疫 猪 ，不 能 诱 导 机 体 产 生 中 和 性 抗 体 ，无 法 保护 猪 免 受 强 毒 的攻 击 。
１１２ ｏｓ蛋 白 ．． Ｅｒ
率较 高 ，给养 猪业 造 成 巨 大 的 经 济 损 失 ， 国际 动 物 卫 生 组 织
将 此 病 被 列 为 Ａ类 传 染 病 之 一 。世 界 上 ．包 括 亚 洲 、欧 洲 、 中 南 美 洲 、部 分 非 洲 等 许 多 国家 采 取 了大 规 模 的疫 苗 防 控 净 化 措 施 ，但 是 猪 瘟 仍 然 普 遍 存 在 。 ２ ０世 纪 ２ ０年 代 我 国 首 次
易 感 细胞 的 必 须 蛋 白 。 Ｅｎ 还 具 有 Ｒ Ａ 酶 活 性 ，对 病 毒 宿 ｒｓ Ｎ 主和 细 胞 嗜性 、致 病 性 、细 胞 凋亡 等 方 面 起 重要 作用 。
１１３ ．． Ｅ１蛋 白
Ｅ １糖 蛋 白 由病 毒 Ｏ Ｆ上 Ｌ ｕ９ ～ ｌ６ ９之 间 １５个 氨 Ｒ ｅ ４ ５ Ｇｙ８ ９
对 该 病 进 行 了报 道 ，此 后 的 几 十 年 里 ， 疫 情 接 连 不 断 的 发 生 。 １５ ９ ４年 。Ｚ ｏ ｈ ｕ等 ０ 研 发 的 猪瘟 兔 化 弱 毒 疫 苗 虽 然 较 好 １
Ｅ ｎ 蛋 白 由病 毒 Ｏ Ｆ Ｇ ｕ ６ 一 １４ ４之 间 的 ２ ７个 氨 基 ｒｓ Ｒ ｌ２ ８ Ａ ａ ９ ２ 酸 残基 组成 ，是 一 种 高 度 糖 基 化 的 蛋 白 。 分 子 量 大 小 依 据 糖 基 化 程 度 的 不 同 而 不 同 ． 为 ４ ～ ８ Ｄ， 糖 蛋 白 分 子 量 约 占 ４ ４ｋ Ｅ ｓ总蛋 白分 子 量 的二 分 之 一 ，去 糖 基 的 蛋 白骨 架 分 子 量 约 ｏ ｒ
关 键 词 ： 猪 瘟 病 毒 ； 基 因组 结 构 ；蛋 白表 达 技 术 ；技 术 应
用：研 究 进展
猪 瘟 （ ｌ ｓ ａ ｓ ｉ ｖｒ Ｓ ）为 黄 病 毒 科 瘟 病 毒 属 Ｃａ ｉ ｌ ｗｎ ｆ ｅ，Ｃ Ｆ ｓｃ ｅ ｅ 成员 ，是 严 重 危 害养 猪 业 的 传 染 病 之 一 ，传 染 性 很 强 ，致 死
１２３ ．＿ ＮＳ蛋 自
Ｅ １与 Ｅ ２以异 源 二 聚 体 的形 式 存 在 ， 目前 还 未 发 现 病 毒 免 疫 血 清 中有 抗 Ｅ １的抗 体 。关 于 其 蛋 白 的研 究 很 少 ，Ｅ １不 能 诱 导机 体产 生 中 和 抗 体 ，在 病 毒 中 ，Ｅ 一 ２复 合 物 可 能 是 稳 固 １Ｅ
作 者 简介 ： 张 月 （ ９ ２６ ，女 ， 汉 ， 山 东省 济 南 市人 ，硕 士 ．研 究方 向 ：动 物 疫 病 的预 防与 控 制 。 １ ８ ．一）
５ 日匾蜀匦蜀国 ２１． ４ ０ １ ２０
基 酸 组 成 ．分 子 量 约 ３ Ｋ 。 在 Ｃ Ｆ ３ Ｄ Ｓ Ｖ感 染 细 胞 的抽 提 物 中 ，
地 控 制 了猪 瘟 在 我 国 的广 泛 流 行 ，但 ７ ０年 代 末 。 我 国 部 分
省市 仍 受 到 威 害 。 １ 猪 瘟 病 毒 基 因 组结 构 猪 瘟 病 毒 粒 子 呈 圆 形 ，直 径 为 ３ ～ ０ ｍ，外 部 被 脂 蛋 白 ４５ｎ
为 ２ ．ｋ ａ ｒｓ 膜 糖 蛋 白 位 于 病 毒 粒 子 表 面 ， 以分 子 量 ５ Ｄ 。Ｅ 囊 ７ ｏ 为 １０ Ｄ 的 同源 二 聚 体 的 形 式存 在 ，没有 跨 膜 区 ，只存 在 于 ０ｋ 黄病 毒 科 的 瘟 病 毒 属 。 在 感 染 细 胞 中 ，Ｅ ｓ 累 于 内 质 网 ， ｏ ｒ 积
用 的 表 达 系 统 无 法 对 表 达 时 间及 表 达 水 平 进 行 调 控 ，有 些 基 因的 持 续 表 达 可 能 会 对 宿 主 细胞 产 生 毒 害 作 用 ，过 量 表 达 可 能 导 致 非 生 理 反 应 ， 目的蛋 白 常 以 包 涵 体 形 式 表 达 ，导 致 产
要 保 护 性 抗 原 ，能 诱 导 机 体 产 生 中和 抗 体 。 在 靠 近 Ｅ ２蛋 白 Ｎ 端 上游 有一 段 信 号 肽 序 列 ，在 其 Ｃ端 一 侧 含 有 １ 约 由 １ 个 ８ 个 氨基 酸 组 成 的疏 水 侧 链 ，可 形 成 跨 膜结 构蛋 白 Ｔ 。Ｅ ＭＰ ２蛋 白 是 病 毒 宿 主 细 胞 识 别 、吸 附 的 主 要 蛋 白 。Ｗｅｓｏｒ等 嘲 ｎｖｏｔ
种 功 能 蛋 白 ，对 病 毒 的免 疫 、识 别 、吸 附 和 进 入 宿 主 细 胞
十 分 重 要 。 它 可诱 导机 体 产 生 中 和 抗 体 ，用 其 免 疫 猪 可 诱 导
产 生 对 致 死 剂 量 的 保 护 性 免 疫 反 应 ．也 是 病 毒 粒 子 吸 附 进 入
ｐｌ Ａ ｏｙ（）尾 巴结 构 ，在 所 有 瘟 病 毒 中 高 度 保 守 ，其 参 与 病 毒 基 因组 的复 制 、 多 聚蛋 白 的 翻译 和 病 毒 粒 子 的装 配 。猪 瘟 病 毒 的 Ｏ Ｆ翻 译 一 个 ３ ９ Ｒ ８ ８个 氨 基 酸 的 多 聚 蛋 白 。 该 蛋 白在 细 胞 内 蛋 白 酶 和病 毒特 异 性 的 蛋 白酶 作 用 下 裂 解 成 各 种 成 熟 的
和 性 ．Ｎ ２ ３蛋 白为 双 功 能 蛋 白 ，具 有 丝 氨 酸 蛋 白酶 活 性 、 Ｓ—
核苷 ｉ磷酸酶活性及 解旋酶 活性 ，其解旋作用 依赖于 Ｃ Ｆ ＳＶ
特 异 的单 链 Ｒ Ａ，该 蛋 白在 病 毒 的 生 命 周期 中 至关 重 要 。还 Ｎ 有 其 他 一 些 非 结 构 蛋 白 ，比如 Ｎ ４ 和 Ｎ ４ 、Ｎ ５ ＳＡ ＳＢ Ｓ Ａ和 Ｎ ５ ＳＢ 这 些非 结 构蛋 白的研 究还 不 多 ，其 中 Ｎ ５ Ｓ Ｂ也 与病 毒 复制 有关 。 ２ 猪瘟 病 毒 蛋 白表 达 技 术 ２１ 原核 表 达 ． 在 各 种 表 达 系 统 中 ，最 早 被 采 用 进 行 研 究 的 是 原 核 表 达 系 统 ．这 也 是 目前 掌 握 最 为 成熟 的 表 达 系 统 。该 项 技 术 的 主 要 方 法 是 将 已 克 隆 人 目的 基 因 Ｄ Ａ 片 段 的 载 体 （ 般 为 质 Ｎ 一
复 杂 的二 级 结 构 ，无 甲基 化 帽 子 结 构 。５ ’端 Ｕ Ｒ 与 病 毒 的 Ｔ 复 制 和 翻译 都 密 切 相 关 。３ ’端 Ｕ Ｒ 长 度 为 ２ ５ ２ ９ ｔ Ｔ １ ～ ３ ｎ ．无
染细 胞培 养上 清 液 中的 糖 蛋 白 。Ｅ ｓ 是 一 个 结 构 蛋 白 又是 ｏ ｒ 既
Ｎ ４ 、ＮＳ Ｂ、 ＮＳ Ａ 和 ＮＳ Ｂ。 ｓＡ ４ ５ ５ １１ 结 构 蛋 白及 其 功 能 ．
和爆 发 做 好 准备 。 同 时 ．加 强 猪 瘟 病 毒 诊 断 中各 技 术 的研 究 对 预 防 和 控 制 本 病 具 有 非 常 重 要 的 现 实 意 义 。 本论 文 对 猪 瘟 病 毒 基 因组 结 构 和诊 断 技 术 中的 蛋 白表 达 技 术进 行 了 系统 的
阐述 。
１１１ Ｃ蛋 白 ． ．
Ｃ蛋 白也 称 ｐ ４ １ ，是 病 毒 的 核 衣 壳 蛋 白 ， 由 多 聚 蛋 白 上 Ｓｒ６ 一 ｌ２７之 间 的氨 基 酸 组 成 ．分 子量 为 １ｋ ａ 在瘟 病 ｅ１９ Ａ ａ６ ４Ｄ 。
毒 ，Ｃ蛋 白 是 主要 区域 中极 为保 守 的 蛋 白 ，同源 性 大 于 ９ ％。 １ Ｃ蛋 白 Ｎ端 由 Ｎ ｒ ｐ ｏ的水 解 作 用 而 产 生 ，Ｃ端 可 能 是 由宿 主 细 胞 的 信 号 肽 酶 作 用 所 致 。Ｃ蛋 白在 合 成 后 几 分 钟 便 与 基 因组
的研 究 表 明 ．Ｅ ２蛋 白 的 抗 原 区 主 要 集 中在 蛋 白分 子 的 Ｎ 端 区 域 ６ ０ａ ８６ ａ ９ ａ ～ ６ ａ ，包 含 ４个 抗 原 结 构 域 ，即 Ａ、Ｂ、Ｃ 、Ｄ。 Ｅ ２的 Ｃ端 有 一 段 核 心 序 列 为 Ｙ Ｅ （ ９ ～ ９ ａ ） Ｙ Ｐ ９ ５ ９ ８ ａ ，存 在 于 一 个 线 性 表 位 中 ，该 表 位 被 认 为 是瘟 病 毒 共 有 的抗 原 表 位 。序
病 毒 颗 粒 构 型 的 主要 结 构 蛋 白 。 同 时 ，动 物 实 验 说 明 Ｅ １蛋 白对 猪瘟 病 毒 的繁 殖 有 重 要 作 用 ，但 作 用 机制 不 明 了 。
１１ Ｅ ．． ２蛋 白 ４
Ｎ ２ ３蛋 白也 是 Ｃ Ｆ 中一 个 非 结 构 蛋 白 ，所 有 感 染 猪 Ｓ— ＳＶ 瘟 的 动 物 体 中 均产 生 Ｎ ２ ３的抗 体 ，但 Ｎ ２ ３ 具 有 病 毒 中 Ｓ— Ｓ— 不
列 Ｔ Ｖ Ｐ Ｌ （ ２ ～ ３ ａ ） 表 位 在 猪 瘟 病 毒 中高 度 保 守 ， Ａ Ｓ 丌 Ｒ ８ ９ ８ ７ａ 可 以作 为 鉴 别 牛 病 毒 性 腹 泻 病 毒 和 羊 边界 病 病 毒 的依 据 。
１２ 非 结 构 蛋 白 ．
物 纯 化 困难 ： 而 且 原 核 表 达 系 统 翻 译 后 加 工 修 饰 体 系 不 完
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猪瘟病毒 基 因组蛋 白结构及 蛋 白表达 技术 的研 究进展
张 月 兰邹然 王贵 升 孙 圣福 （ 东省动 物疫病预 防与控 制 中心 ２ ０ ２ ） 山 ５ ０ ２
摘 要 ：猪 瘟是 威 胁 许 多 国 家 包括 我 国 在 内的 养 猪 业 的 重 要 疾 病 之 一 ，随 着 猪 瘟病 毒 （ Ｓ Ｖ） 的 突 变性 发展 ，从 分 子 水 平 ＣＦ
粒 ）转 化 细 菌 （ 常 选 用 的是 大 肠 杆 菌 ） 通 ，通 过 ＩＴ Ｐ Ｇ诱 导 并
最 终 纯 化 获 得 所 需 的 目的蛋 白 。 其 优 点 在 于 能 够 在 较 短 时 间 内获 得 基 因表 达 产 物 。 而且 所 需 的成 本 相 对 比较 低 廉 。但 与
此 同 时 原 核 表 达 系 统 还 存 在 许 多难 以 克 服 的 缺 点 ：如 通 常 使
Ｅ ２糖 蛋 白 由 Ｏ Ｆ ９ ～ ０ ０位 编 码 的 ３ ０个 氨 基 酸 残 疾 Ｒ ６ ０ １６ ７ 组 成 ，根 据糖 基 化 程 度 的 不 同 ，分 子 量 在 ５ ￣ ５ ｕ之 间 内变 １５ｋ 动 。 它位 于 病 毒 囊 膜 表 面 ，参 与病 毒 的 感 染 过 程 ，是 猪 瘟 病 毒 的 编码 蛋 白中 最 不 保 守 的一 种 蛋 白 ，但 是 猪 瘟 病 毒 的 最 主
存 在 于病 毒 粒 子 表 面 或 被 分 泌 到 胞 外 ，是 唯 一 可 以 分 泌 到 感
的 囊 膜 包 裹 ，内 部 为 二 十 面 体 的对 称 核 衣 壳 。核 心 直 径 大 约 ３ｈ Ｏ ｍ。 核 衣 壳 内包 裹 单 股 正 链 线 性 Ｒ Ａ分 子 ，基 因组 大 约 Ｎ １． ｂ ５ ２５ 。 ’端 Ｕ Ｒ 长 度 为 ３ ３ ｔ ３ ４ ｔ ｋ Ｔ ７ｎ 或 ７ ｎ，有 茎 环 、 发 卡 等
探 索 Ｃ Ｆ 基 因组 及 蛋 白 结 构及 功 能 ．可 以 为 预 防 猪 瘟 流行 ＳＷ 结 构 蛋 白 （ ）和 非 结构 蛋 白 （ Ｓ 。从 Ｎ端 开始 至 Ｃ端 各 蛋 Ｓ Ｎ ） 白 质 分 别 是 Ｎ ｒ 、 Ｃ Ｅ ｓ Ｅ 、 Ｅ 、 ｐ 、 Ｎ ２ Ｎ ３ ｐｏ 、 ｒ 、 １ ｏ ２ ７ Ｓ、 Ｓ、
Ｒ Ａ 相结 合 ，包 装 形 成 核 衣 壳 ，除 此 之 外 ，还 在 病 毒 繁殖 和 Ｎ 基 因表 达 调 控 中 有 着 重要 作 用 。但 是 以 Ｃ基 因为 基 础 构 建 的 重 组 痘 苗 病 毒 活 载 体 疫 苗 免 疫 猪 ，不 能 诱 导 机 体 产 生 中 和 性 抗 体 ，无 法 保护 猪 免 受 强 毒 的攻 击 。
１１２ ｏｓ蛋 白 ．． Ｅｒ
率较 高 ，给养 猪业 造 成 巨 大 的 经 济 损 失 ， 国际 动 物 卫 生 组 织
将 此 病 被 列 为 Ａ类 传 染 病 之 一 。世 界 上 ．包 括 亚 洲 、欧 洲 、 中 南 美 洲 、部 分 非 洲 等 许 多 国家 采 取 了大 规 模 的疫 苗 防 控 净 化 措 施 ，但 是 猪 瘟 仍 然 普 遍 存 在 。 ２ ０世 纪 ２ ０年 代 我 国 首 次
易 感 细胞 的 必 须 蛋 白 。 Ｅｎ 还 具 有 Ｒ Ａ 酶 活 性 ，对 病 毒 宿 ｒｓ Ｎ 主和 细 胞 嗜性 、致 病 性 、细 胞 凋亡 等 方 面 起 重要 作用 。
１１３ ．． Ｅ１蛋 白
Ｅ １糖 蛋 白 由病 毒 Ｏ Ｆ上 Ｌ ｕ９ ～ ｌ６ ９之 间 １５个 氨 Ｒ ｅ ４ ５ Ｇｙ８ ９
对 该 病 进 行 了报 道 ，此 后 的 几 十 年 里 ， 疫 情 接 连 不 断 的 发 生 。 １５ ９ ４年 。Ｚ ｏ ｈ ｕ等 ０ 研 发 的 猪瘟 兔 化 弱 毒 疫 苗 虽 然 较 好 １
Ｅ ｎ 蛋 白 由病 毒 Ｏ Ｆ Ｇ ｕ ６ 一 １４ ４之 间 的 ２ ７个 氨 基 ｒｓ Ｒ ｌ２ ８ Ａ ａ ９ ２ 酸 残基 组成 ，是 一 种 高 度 糖 基 化 的 蛋 白 。 分 子 量 大 小 依 据 糖 基 化 程 度 的 不 同 而 不 同 ． 为 ４ ～ ８ Ｄ， 糖 蛋 白 分 子 量 约 占 ４ ４ｋ Ｅ ｓ总蛋 白分 子 量 的二 分 之 一 ，去 糖 基 的 蛋 白骨 架 分 子 量 约 ｏ ｒ
关 键 词 ： 猪 瘟 病 毒 ； 基 因组 结 构 ；蛋 白表 达 技 术 ；技 术 应
用：研 究 进展
猪 瘟 （ ｌ ｓ ａ ｓ ｉ ｖｒ Ｓ ）为 黄 病 毒 科 瘟 病 毒 属 Ｃａ ｉ ｌ ｗｎ ｆ ｅ，Ｃ Ｆ ｓｃ ｅ ｅ 成员 ，是 严 重 危 害养 猪 业 的 传 染 病 之 一 ，传 染 性 很 强 ，致 死
１２３ ．＿ ＮＳ蛋 自
Ｅ １与 Ｅ ２以异 源 二 聚 体 的形 式 存 在 ， 目前 还 未 发 现 病 毒 免 疫 血 清 中有 抗 Ｅ １的抗 体 。关 于 其 蛋 白 的研 究 很 少 ，Ｅ １不 能 诱 导机 体产 生 中 和 抗 体 ，在 病 毒 中 ，Ｅ 一 ２复 合 物 可 能 是 稳 固 １Ｅ
作 者 简介 ： 张 月 （ ９ ２６ ，女 ， 汉 ， 山 东省 济 南 市人 ，硕 士 ．研 究方 向 ：动 物 疫 病 的预 防与 控 制 。 １ ８ ．一）
５ 日匾蜀匦蜀国 ２１． ４ ０ １ ２０
基 酸 组 成 ．分 子 量 约 ３ Ｋ 。 在 Ｃ Ｆ ３ Ｄ Ｓ Ｖ感 染 细 胞 的抽 提 物 中 ，
地 控 制 了猪 瘟 在 我 国 的广 泛 流 行 ，但 ７ ０年 代 末 。 我 国 部 分
省市 仍 受 到 威 害 。 １ 猪 瘟 病 毒 基 因 组结 构 猪 瘟 病 毒 粒 子 呈 圆 形 ，直 径 为 ３ ～ ０ ｍ，外 部 被 脂 蛋 白 ４５ｎ
为 ２ ．ｋ ａ ｒｓ 膜 糖 蛋 白 位 于 病 毒 粒 子 表 面 ， 以分 子 量 ５ Ｄ 。Ｅ 囊 ７ ｏ 为 １０ Ｄ 的 同源 二 聚 体 的 形 式存 在 ，没有 跨 膜 区 ，只存 在 于 ０ｋ 黄病 毒 科 的 瘟 病 毒 属 。 在 感 染 细 胞 中 ，Ｅ ｓ 累 于 内 质 网 ， ｏ ｒ 积
用 的 表 达 系 统 无 法 对 表 达 时 间及 表 达 水 平 进 行 调 控 ，有 些 基 因的 持 续 表 达 可 能 会 对 宿 主 细胞 产 生 毒 害 作 用 ，过 量 表 达 可 能 导 致 非 生 理 反 应 ， 目的蛋 白 常 以 包 涵 体 形 式 表 达 ，导 致 产
要 保 护 性 抗 原 ，能 诱 导 机 体 产 生 中和 抗 体 。 在 靠 近 Ｅ ２蛋 白 Ｎ 端 上游 有一 段 信 号 肽 序 列 ，在 其 Ｃ端 一 侧 含 有 １ 约 由 １ 个 ８ 个 氨基 酸 组 成 的疏 水 侧 链 ，可 形 成 跨 膜结 构蛋 白 Ｔ 。Ｅ ＭＰ ２蛋 白 是 病 毒 宿 主 细 胞 识 别 、吸 附 的 主 要 蛋 白 。Ｗｅｓｏｒ等 嘲 ｎｖｏｔ