教案肝素钠效价测定步骤.doc

肝素钠效价测定步骤

准确称取0.035-0.05g样品，放入小烧杯中，加入35-50ml0.9%Nacl 盐，配成0.1%的样品溶液；

吸取0.5ml上述样品溶液至小瓶中；

根据估计效价，加入适量0.9%Nacl,其量为估计效价除以标准品效价（即8），减去1，除以2，即：

[（估计效价/8）-1]/2 摇匀；

取5个试管，分别吸取上述3的溶液140ul、150ul、160ul、170ul、180ul；

分别加入1ml血浆，再加入0.8ml0.25%Cacl2,盖上塞子，摇匀；

放入37℃±1水浴箱中1小时，1小时后观察结果

结果判定，实际效价=估计效价*标准品凝固点/样品凝固

(1L(升)=1000ML（毫升）\1ML=1000UL（微升）)

废液残留测定

试验目的

为了加强生产监控力度，在过程中进行检测吸附废液残留，从而根据废液残留量，在后道工序进行调整，最大程度的提高肝素钠效价和出率。

试验原理

肝素钠是具有抗凝血活性的一类物质，在溶液中肝素钠含量越高，抗凝血作用越强，吸附废液中肝素残留量的高低，直接跟血浆的凝固程度有关，含量越高，凝固程度越大。

三、试验器材及试剂

1、试验器材：-18度冰箱1个，吸耳球2个，10ml吸量管3个，1ml吸量管1个，试管架1个，恒温水浴箱1个，锥形漏斗1个，脱脂棉；

2、试验所需试剂：血浆，标准品，0.9%的Nacl,0.25%的Cacl2；

四、试验方法

1、吸附结束后，关闭搅拌电机，静置2分钟，用瓶子取半瓶吸附废液，盖上瓶盖，放冷水中冷却备用；

2、取1个试管架，装试管4排，第一排装5支，后面3排各装3支；

3、在第1排试管中分别按顺序加入吸附废液1400ul、1600ul、1800ul、2000ul、2200ul,后3排分别按顺序加入标准品150ul、160ul、170ul；

4、分别在上述4排试管里加入1ml血浆，然后再加入0.8ml0.25%的Cacl2，盖上试管塞，摇匀；

5、放入37℃±1 的恒温水浴箱中1小时，1小时后观察每1管的凝固程度；

五、试验结果

1、观察每一排试管中血浆的凝固程度，以第1排血浆的凝固程度作为吸附废液的血浆凝固点，后3排中凝固程度相同的两排的凝固程度作为标准品的凝固点；

凝固程度判断：

1）、完全凝固：溶液完全凝固，倒转管子，凝块不从管壁脱落；

2）、3/4凝固：溶液完全凝固，倒转管子，凝块有气泡产生，能从管壁脱落；

3）、1/2凝固：倒转管子，大约有一班体积的溶液凝固；

4）、1/4凝固：倒转管子，只有很少溶液凝固；

5）、0凝固：倒转管子，溶液无凝固现象，并完全流动；

2、废液残留量的计算方式：

废液残留量=8*标准品凝固点/样品凝固点

新树脂处理方案

1、用60度的热水浸泡4小时，沥干。

2、用40°酒精浸泡12小时，酒精和树脂的体积比为2：1，结束后用清水冲净，然后滤干。

3、用4°盐酸（按盐酸和水1：9稀释）搅拌2小时，盐酸与树脂比为

2：1，然后用清水冲洗至中性。

4、用4°氢氧化钠溶液搅拌2小时，氢氧化钠溶液与树脂的体积比为2：1，然后用清水冲洗至中性。

5、用1:1的18°盐水浸泡12小时，然后用清水冲洗至中性即可。