姬菇液体菌种发酵技术优化
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１ ０ ｒ ｍｉ 。 ５ ／ ｎ
关键词 ： 姬菇 ； 体菌种 ； 液 发酵 ； 优化 中图分 类号 ：６ ６ １ ￥４ ． 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ １ ０ ０ １ ｏ １０ ３２ ２ １ ）６— ４ ３一 ２
姬菇 （ ｌ ｒｔ ｏｎｃｐａ ） 叫黄 白侧耳 、 味侧 耳、 Ｐｅ ｏｕ ｃｒｕｏｉ 又 ｕ ｓ ｅ 美 紫 孢侧耳 、 紫孢平菇、 小平 菇 、 平菇 、 姬 小侧耳 等。姬 菇 口感好 ， 质地脆嫩 ， 味道鲜美 ， 营养价值高 ， 白质含量 高于一般蔬菜 ， 蛋 含有人体所必需 的 ８种 氨基酸 ， 其子实 体入药有 滋补强壮 的
１ ２ 斜面及液体茵种培养基 ．
将生长 良好、 无污染的摇瓶培养发酵液用 ４层纱 布过 滤。 菌丝球生物量湿重为沥干后将 固体物在 电子天 平上称重 ， 菌 丝球生物量干重则是 直接过滤烘干称重 。
２ ３ 菌球 直径 测 定 ．
马铃 薯 完 全 培 养 基 配 方 ： 铃 薯 ２０ ｇ 蔗 糖 ２ ， 马 ０ ， Ｏ ｇ
２５ ｐ ． Ｈ值 测 定
Ｋ ２ Ｏ ｇ Ｍ Ｓ ・７ ２ ． ｇ 维 生 素 Ｂ Ｈ Ｐ ４３ ， ｇＯ ＨＯ １ ５ ， 微 量 ， 水
江苏农业科学
孟德 龙， 戴
２ １ 年第 ３ ０１ ９卷第 ６ 期
． １ － ． — ３． —４ — —
虹， 李冠喜．姬菇液体菌种发酵技术优化［ ］ 江 苏农业科学 ， １ ， （ ） ４ ３ ４ ５ Ｊ． ２ １３ ６ ： － １ ０ ９ １
姬 菇液体菌种发酵技术优 化
盂德龙 戴 ， 虹 李冠喜 ，
姬菇液体菌种碳 源试 验基 础培 养基 配方 ： 白胨 ２ ， 蛋 Ｏｇ Ｋ ２ Ｏ ｇ Ｍ Ｓ ・７ ２ ． ｇ 维 生 素 Ｂ Ｈ Ｐ ３ ， ｇＯ ＨＯ １ ５ ， 微 量 ， 水
养皿 中沿 固定 的直线排成一行 ， 用卡尺测 定其总长度 ， 重复 ３ 次， 求其平均值 。
２４ 菌球 密度 测 定 ．
１００ｍＬ ｐ ０ ，Ｈ值 自然条件 ，２ １ １℃下灭 菌 ３ ｉ。 ０ｒ ｎ ａ
姬菇液体菌种 氮源试 验基 础培 养基 配方 ： 露醇 ３ ， 甘 ０ｇ
取 １ｍ Ｌ均匀的发 酵液 ， 用水稀释 １ ， Ｏ倍 于培养皿下垫置 黑色方格纸计数 。
作用 ， 可辅助 治疗多 种疾 病… 。姬 菇不是 分类 学上 的 名称 ，
生素 Ｂ ０ ｍ 、 １０ ０ ｍ ， Ｈ值 自然条 件 ，２ １ ｇ 水 ０ Ｌ ｐ １ １℃下灭 菌
３ ｎ。 ０ ｍｉ
姬菇发酵罐液体培养 基配方（ ） 甘露醇 ３ ， １Ｌ ： ０ｇ 酵母膏
级摇瓶液体菌种转接到各处理的二级液体菌种摇瓶 中。若无 特殊说 明 ， 摇瓶培养条件均为 ：５ Ｌ三角瓶装液量 １０ｍＬ ２ ０ｍ ０ ， 接种量 ５ （ ） 置旋转式摇 床上 ， ％ Ｖ： ， 在转速 １０ｒｒｉ，５℃ ５ ａ ｎ２ ／ 条件下振荡培养 ５～ ， ７ｄ 同样 ， 其余各级液体菌种也是相 同的
Ｋ ２ Ｏ ， ｇ Ｏ ７ ２ ． ， Ｈ Ｐ ４ ｇ Ｍ Ｓ ４・ Ｈ Ｏ０ １ｇ琼脂 ２ ， １００ ｍ ，Ｈ ２ ０ｇ水 ０ Ｌ ｐ
取 １ｍ Ｌ发酵液 ， 用水稀释 １ ０倍 ， 随机 取 ２ ０个菌球 在培
值 自然条件 ，２ １ １℃下灭菌 ３ ｉ， ０ｍｎ 用作食用菌斜面培养 。
培养方式 。
２ ２ 菌 丝体 生物 量 测 定 ．
生产成本低 、 种简 便等 优点 ， 用前景 非 常广 阔 。本研 接 应 究通过对 实验室规模 的姬菇液体菌种培养基和培养条件 进行 优化 ， 为液体菌种的工厂化应用 奠定基础 。
１ 试 验 材 料
１ １ 供 试菌株 ．
姬菇 ３号为笔者所在课题组引进 并优选的菌株 。
１ ， 米 粉 １ ， Ｈ２ｏ ， Ｓ ４・７ ２ ． ， ５ｇ 玉 ０ ｇ Ｋ ｖ ，２ ｇ Ｍｇｏ Ｈ Ｏ ０ ５ ｇ 水
１ ０ Ｌ ｐ ０ｍ ，Ｈ值 ＝ ． ， ０ ６ ０ 发酵罐 中利用 自身蒸汽灭菌 ３ ｉ。 ０ｒ ｎ ａ
２ 试 验 方 法
也不 是菌 种名 ， 而是一种商品名 ， 指采收子实体菌盖直径小于 ３ｅ ｍ的一类平菇 。姬菇最先是在 日本开 发栽培 ， 很受 日本 消 费者 的喜 爱 ， 因而其 名称 也来源 于其 日文 名 。在 ２ Ｏ世 纪 ８ ０年代后期 ， 姬菇生产引入中 国， 其后 生产规模逐 年扩大 ， 在 全 国各地都有生产 。 目前在姬菇生产方式上多采用固体 菌种 逐级扩大 的方式 ， 菌种的纯度低 、 活力小 、 抗杂 能力弱 ， 且发 并 菌时 间较 长 ， 造成生产成本较高。而液体发酵法培养菌种 ， 则
（． １江苏徐淮地 区连云港农业科学研究所 ， 江苏连云港 ２ ２０ ； ． ２ ０ ６ ２ 江苏省东海县农业技术推广 中心 ， 江苏东海 ２２ ０ ） ２ ０ ０
摘要： 对实验室规模 的姬菇液体菌 种培养基和培养条件进行优化 。结果表 明： 姬菇 液体 菌种 的最佳碳 、 氮源分别 为甘露醇 、 酵母膏 ； 佳的培养条件 为添 加 １ 的玉 米粉 、 始 ｐ 最 ％ 初 Ｈ值 ＝ 、 养温 度 ２ ６培 ６℃ 、 装液 量 ９ Ｌ 摇 床转 速 ０ｍ 、
可全 面解决 以上 问题 ， 体菌种具有生产周 期短 、 液 菌龄一致 、
２ １ 液体茵种培 养方法 ． 将保存 的菌种用斜面扩大培养 ，５℃恒 温培养 ７ｄ可得 ２ 斜 面 母 种 ， 后 将 活 化 的斜 面 母 种 分 割 成 黄 豆 大 小 、 然 约
０５ ． 的小块 ， １ ｍ 取 小块接 种到液体 培养基 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ， ２ 于 ５℃先静 置 ２ ， ４ｈ 然后 恒温振荡培养得一级摇瓶菌种 ， 再将 培养好 的一
关键词 ： 姬菇 ； 体菌种 ； 液 发酵 ； 优化 中图分 类号 ：６ ６ １ ￥４ ． 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ １ ０ ０ １ ｏ １０ ３２ ２ １ ）６— ４ ３一 ２
姬菇 （ ｌ ｒｔ ｏｎｃｐａ ） 叫黄 白侧耳 、 味侧 耳、 Ｐｅ ｏｕ ｃｒｕｏｉ 又 ｕ ｓ ｅ 美 紫 孢侧耳 、 紫孢平菇、 小平 菇 、 平菇 、 姬 小侧耳 等。姬 菇 口感好 ， 质地脆嫩 ， 味道鲜美 ， 营养价值高 ， 白质含量 高于一般蔬菜 ， 蛋 含有人体所必需 的 ８种 氨基酸 ， 其子实 体入药有 滋补强壮 的
１ ２ 斜面及液体茵种培养基 ．
将生长 良好、 无污染的摇瓶培养发酵液用 ４层纱 布过 滤。 菌丝球生物量湿重为沥干后将 固体物在 电子天 平上称重 ， 菌 丝球生物量干重则是 直接过滤烘干称重 。
２ ３ 菌球 直径 测 定 ．
马铃 薯 完 全 培 养 基 配 方 ： 铃 薯 ２０ ｇ 蔗 糖 ２ ， 马 ０ ， Ｏ ｇ
２５ ｐ ． Ｈ值 测 定
Ｋ ２ Ｏ ｇ Ｍ Ｓ ・７ ２ ． ｇ 维 生 素 Ｂ Ｈ Ｐ ４３ ， ｇＯ ＨＯ １ ５ ， 微 量 ， 水
江苏农业科学
孟德 龙， 戴
２ １ 年第 ３ ０１ ９卷第 ６ 期
． １ － ． — ３． —４ — —
虹， 李冠喜．姬菇液体菌种发酵技术优化［ ］ 江 苏农业科学 ， １ ， （ ） ４ ３ ４ ５ Ｊ． ２ １３ ６ ： － １ ０ ９ １
姬 菇液体菌种发酵技术优 化
盂德龙 戴 ， 虹 李冠喜 ，
姬菇液体菌种碳 源试 验基 础培 养基 配方 ： 白胨 ２ ， 蛋 Ｏｇ Ｋ ２ Ｏ ｇ Ｍ Ｓ ・７ ２ ． ｇ 维 生 素 Ｂ Ｈ Ｐ ３ ， ｇＯ ＨＯ １ ５ ， 微 量 ， 水
养皿 中沿 固定 的直线排成一行 ， 用卡尺测 定其总长度 ， 重复 ３ 次， 求其平均值 。
２４ 菌球 密度 测 定 ．
１００ｍＬ ｐ ０ ，Ｈ值 自然条件 ，２ １ １℃下灭 菌 ３ ｉ。 ０ｒ ｎ ａ
姬菇液体菌种 氮源试 验基 础培 养基 配方 ： 露醇 ３ ， 甘 ０ｇ
取 １ｍ Ｌ均匀的发 酵液 ， 用水稀释 １ ， Ｏ倍 于培养皿下垫置 黑色方格纸计数 。
作用 ， 可辅助 治疗多 种疾 病… 。姬 菇不是 分类 学上 的 名称 ，
生素 Ｂ ０ ｍ 、 １０ ０ ｍ ， Ｈ值 自然条 件 ，２ １ ｇ 水 ０ Ｌ ｐ １ １℃下灭 菌
３ ｎ。 ０ ｍｉ
姬菇发酵罐液体培养 基配方（ ） 甘露醇 ３ ， １Ｌ ： ０ｇ 酵母膏
级摇瓶液体菌种转接到各处理的二级液体菌种摇瓶 中。若无 特殊说 明 ， 摇瓶培养条件均为 ：５ Ｌ三角瓶装液量 １０ｍＬ ２ ０ｍ ０ ， 接种量 ５ （ ） 置旋转式摇 床上 ， ％ Ｖ： ， 在转速 １０ｒｒｉ，５℃ ５ ａ ｎ２ ／ 条件下振荡培养 ５～ ， ７ｄ 同样 ， 其余各级液体菌种也是相 同的
Ｋ ２ Ｏ ， ｇ Ｏ ７ ２ ． ， Ｈ Ｐ ４ ｇ Ｍ Ｓ ４・ Ｈ Ｏ０ １ｇ琼脂 ２ ， １００ ｍ ，Ｈ ２ ０ｇ水 ０ Ｌ ｐ
取 １ｍ Ｌ发酵液 ， 用水稀释 １ ０倍 ， 随机 取 ２ ０个菌球 在培
值 自然条件 ，２ １ １℃下灭菌 ３ ｉ， ０ｍｎ 用作食用菌斜面培养 。
培养方式 。
２ ２ 菌 丝体 生物 量 测 定 ．
生产成本低 、 种简 便等 优点 ， 用前景 非 常广 阔 。本研 接 应 究通过对 实验室规模 的姬菇液体菌种培养基和培养条件 进行 优化 ， 为液体菌种的工厂化应用 奠定基础 。
１ 试 验 材 料
１ １ 供 试菌株 ．
姬菇 ３号为笔者所在课题组引进 并优选的菌株 。
１ ， 米 粉 １ ， Ｈ２ｏ ， Ｓ ４・７ ２ ． ， ５ｇ 玉 ０ ｇ Ｋ ｖ ，２ ｇ Ｍｇｏ Ｈ Ｏ ０ ５ ｇ 水
１ ０ Ｌ ｐ ０ｍ ，Ｈ值 ＝ ． ， ０ ６ ０ 发酵罐 中利用 自身蒸汽灭菌 ３ ｉ。 ０ｒ ｎ ａ
２ 试 验 方 法
也不 是菌 种名 ， 而是一种商品名 ， 指采收子实体菌盖直径小于 ３ｅ ｍ的一类平菇 。姬菇最先是在 日本开 发栽培 ， 很受 日本 消 费者 的喜 爱 ， 因而其 名称 也来源 于其 日文 名 。在 ２ Ｏ世 纪 ８ ０年代后期 ， 姬菇生产引入中 国， 其后 生产规模逐 年扩大 ， 在 全 国各地都有生产 。 目前在姬菇生产方式上多采用固体 菌种 逐级扩大 的方式 ， 菌种的纯度低 、 活力小 、 抗杂 能力弱 ， 且发 并 菌时 间较 长 ， 造成生产成本较高。而液体发酵法培养菌种 ， 则
（． １江苏徐淮地 区连云港农业科学研究所 ， 江苏连云港 ２ ２０ ； ． ２ ０ ６ ２ 江苏省东海县农业技术推广 中心 ， 江苏东海 ２２ ０ ） ２ ０ ０
摘要： 对实验室规模 的姬菇液体菌 种培养基和培养条件进行优化 。结果表 明： 姬菇 液体 菌种 的最佳碳 、 氮源分别 为甘露醇 、 酵母膏 ； 佳的培养条件 为添 加 １ 的玉 米粉 、 始 ｐ 最 ％ 初 Ｈ值 ＝ 、 养温 度 ２ ６培 ６℃ 、 装液 量 ９ Ｌ 摇 床转 速 ０ｍ 、
可全 面解决 以上 问题 ， 体菌种具有生产周 期短 、 液 菌龄一致 、
２ １ 液体茵种培 养方法 ． 将保存 的菌种用斜面扩大培养 ，５℃恒 温培养 ７ｄ可得 ２ 斜 面 母 种 ， 后 将 活 化 的斜 面 母 种 分 割 成 黄 豆 大 小 、 然 约
０５ ． 的小块 ， １ ｍ 取 小块接 种到液体 培养基 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ， ２ 于 ５℃先静 置 ２ ， ４ｈ 然后 恒温振荡培养得一级摇瓶菌种 ， 再将 培养好 的一