植物组培技术的应用
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植物组培技术在花卉领域中的应用
摘要:植物组织培养在过去的40多年中得到了迅速的发展,已渗透到生物学科的各个领域,成为生物工程技术中的一个重要组成部分和基本研究手段之一。现如今,植物组织培养技术具有保持花卉优良性状、培育脱毒苗木、保存种质资源等优势,因而在花卉种苗繁殖生产中得到广泛应用。
关键词:植物组织培养;组织栽培;花卉
植物栽培技术虽然发展比较晚,但是在经过20世纪后的几十年,经过众多科学家的努力与奋斗,这项技术越来越完善,越来越成熟。尤其近40年以来,植物组培技术已渗透到植物生理学、病理学、遗传学、药学、育种以及生物化学等各个研究领域,为快速繁育优良品种,培育无毒苗木,进行突变筛选培育,药用植物工厂化生产,种质保存和基因库建立等方面开辟了新途径,成为生物学科中的重要研究技术和手段之一。现如今,植物组织培养技术具有保持花卉优良性状、培育脱毒苗木、保存种质资源等优势,根据这些优势,植物栽培技术也被广泛应用于花卉的种苗繁殖与生产之中。
1 花卉领域中组织栽培优势
1.1 快速、大量繁殖优良品种
由于组织培养法繁殖作物的突出特点是快速,因此,对一些繁殖系数低、不能用种子繁殖的“名、优、特、新、奇”等品种的繁殖,意义更大。因为材料的单一个体性,所以遗传现状也是一致的,那
么在试验与生产整个过程中就能够达到微型化与精密化,既节约了人力与物力,又能够更好的对培养基的成分、温度与湿度、光强度与光质以及光周期进行有效控制,整年都可进行试验与生产,所以在花卉培养方面的应用能够迅猛发展。通过离体的快速繁殖,加上不受区域气候条件的影响,可以进行脱毒苗、新育成以及新引进,还有稀缺语种与基因工程等等,较常规快数万乃至数十万数百万倍的速度扩展增大繁殖,以提供更多的优质种苗。
在花卉的育种过程中,通过杂交与选种,增加了花卉品种种类与花卉的颜色种类,以满足更多人们的需求。与此同时,却带来了一些问题,由于子代很难有均一的变现造成基因类型的异质化太高。可以根据需要选择优良性较高的植株加以分生,这样就可以得到与母株一模一样的植株,其原因是组织栽培育苗是由母株的组织或者器官等发展的,能够保持母株的全部特征,包括花的形状、颜色,植株的形状,抗逆性等等。
1.2 脱毒苗木的培育
植物脱毒是目前植物组织培养应用最多最有效的一个方面。由于观赏性的植物一般采用营养繁殖,比如在利用嫁接、分株等方法繁殖时,病菌很容易由营养体、刀具或者土壤等传给下一代,这样就加快了病毒的传播与积累,以至于病毒病对植物的危害也就随之变严重。据相关统计表明,观赏性的植物的病毒已高达百种,并呈逐年递增的趋势。观赏植物应得了病毒病,而对观赏价值造成了严重
的影响,像百合、康乃馨等植物的鳞茎、球茎严重退化,兰科植物的花变得小且少,而且造成花朵的畸形等,这些问题对其观赏价值造成了影响,甚者可以导致其品种的灭绝,在一定程度上制约了其发展,这也是我国花卉不能走出国门、迈向世界的重要原因之一。从长时间生产中可以得出,植物组织栽培技术可有效地去除植物体内的病毒。病毒在感病植物体内的分布不均匀,其数量也随部位与年龄的不同而不同,在靠近茎尖顶端的区域,越靠近病毒的浓度就越低。因为分生区域内无维管束的原因,病毒的传递只能靠细胞间的联系进行,比不上细胞分裂的速度与生长速度,所以在植株生长点附近的病毒数量是非常稀少的。鉴于以上原因,在进行茎尖培养时,在保证茎尖成活的前提下,茎尖越小越好,太大的话对于脱毒有很大的影响,种类不同的植物与病毒,在切取茎尖的时候,大小也不相同,一般来说是带一两个叶原基的0.2-0.5mm大小的茎尖。
1.3 保存种质资源
花卉生产是在现有种质资源的基础上进行的,由于自然灾害和生物之间的竞争以及人类活动对大自然的影响,已有相当数量的植物物种在地球上消失或正在消失。具有独特遗传性状的生物物种的绝迹是一种不可挽回的损失,而通过组织培养,可保持母本的一切遗传特性,并大大节省人力、物力的同时,又能延长保存期,以作为种质资源未能突变与流失的保证。
2 花卉组培的途径
2.1 胚状体
在组织培养中,再生植株可通过与合子胚相似的胚胎发生过程,即形成胚状体,再由胚状体发育成大量植株。一品红、玉兰等通常采用此途径进行繁育。
2.2 生长点
茎尖或者是侧芽经过诱导而形成大量腋芽,进而获得幼小植株。通过这个途径进行花卉组培发生变异的概率很小,品质比较均匀,一般都采用这种途径。
2.3 愈伤组织
愈伤组织途径是外植体在经过生长调节剂的处理,先形成愈伤组织,之后经器官分化成芽体,以大量繁殖,这种途径比其他两种途径都更易变异。
3 花卉组织培养的阶段
3.1 外植体材料的选取
无论是离体培养繁殖种苗,还是进行生物技术研究,培养材料的选择都要从主要的植物入手。选取性状优良的种质或特殊的基因型。对材料的选择要有明确的目的,具有一定的代表性,以提高成功的几率,增加其实用的价值。对于许多种子植物,茎尖是最好的选择部位,但是由于被才材料来源所限制,所以选择茎段,并且叶片的材料来源很丰富,所以其利用也是非常普遍的。对于较难培养的植物来说,子叶与下胚轴是很好的选择。进行选材的时候,应该
选取携带菌少、生长时间较短、生长较旺盛的材料,同时还要注意选材的时期,一般在植物开始生长的时候进行采样,其他时候不利于组织的培养。花药培养应在花粉发育到单核期时取材,这时比较容易形成愈伤组织。对于器官的状态也有影响,花卉主轴越往上的部位,经过组织培养而形成的器官,生长时间越短,且比较容易形成器官。
3.2 材料的灭菌消毒处理
一般采取的预处理方法是,先对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,将准备使用的植物材料在流水中冲洗干净。经过预处理的植物材料,其表面仍有很多细菌和真菌,因此还需进一步灭菌处理。花卉植物组织的培养进行的是无菌的培养,这也就要求材料是不能带菌的。从田间或者是温室切取材料的时候,要选健壮、没有病虫的柱体作为母株,选择分生能力强的部位,这样有利于培养时的生长。用浓度为70%的酒精,将其浸泡10-15″进行消毒,之后用无菌水冲洗两次,再进行3-15分钟的氯化汞浸泡,再用无菌水进行3-4次的冲洗。以上这些操作均要求在无菌环境下进行。这些材料表面经过灭菌,在用无菌的滤纸吸掉水分,最后取几毫米所需的部位,然后用解剖针或枪式镊子将材料接种到培养瓶内。
3.3 愈伤组织的诱导
将健壮、五病虫的花卉植株作为母株,并种植在室内或温室的经过消毒的培养基上,在2-4星期之后,采取母株上刚生长的茎顶或