葛根素的非内皮依赖性血管舒张作用机制

Ｃ ：． ， １ １２ 葡萄糖 ： ． ｐ ．）无 钙 Ｋ Ｈ液 以 Ｅ ． ２ ５ １ ０（Ｈ ７４ ； ０ － Ｇ
［ 收稿 日期 ］ ２０ ４ — ０４） １ ２６ ［ 讯作者 ］ 董侃 ，ｅ：０７）７３５０ Ｆｘ （５１８２６８ 通 Ｔｌ（５１８２６Ｏ ，ａ：０７ ）７３８９
Ｅ— ｉ： ｏ ｇ ａ ７ ｍａｌ ｄ ｎ ｋ ｎ ６＠ ｓｈ Ｃ Ｉ ｏ ｕ． Ｏ Ｉ Ｔ
Ｏｃｏ ｅ ， Ｏ ４ ｔｂ ｒ ２ ０
诱发 的血管环 的最大 收缩 幅度之 间的比率 反映血管 张 力的变化 ， 血管舒张 曲线 。 制作
在去内皮血管 实验 中 ，向浴槽灌流 液内加入选择
性 Ｋ 通 道 阻 断 剂 ４Ａ （ ０ ３ ｏ・ ） Ｅ Ｐ １ １＿ ｌ Ｌ ，Ｔ Ａ Ｘ ｍ （ ０ ｏ・ ） Ｇｉ １ ０ ｔ ｌＬ ）孵 浴 １ １ ｔ ｌＬ 或 ｌ （ ×１ ｏ ・ ， Ｘ０ ｏ ｏ ３ ｉ 后 ， 入 Ｐ （ ０ ｔ ｌＬ ） 再逐 步增 加 ０ｍ ｎ 加 Ｅ １ １ ｏ ・ ， Ｘ ｏ Ｐｅ ｕ 的浓度 ， 观察血 管环 张力的变化 。 １４ 统计学处 理 ． 所有 数据 均 以 ±ｓ 表示 ， 用 采 Ａ Ｏ Ａ，ｔｄｎ Ｎ ｗ ａ— ｅｌ检 验 和 Ｓ ｄｎ ｔ 验 Ｎ Ｖ Ｓ ｅｔ ｅ ｍ ｎＫ ｕ ｕ — ｓ ｔ ｅｔ － ｕ 检
果并不 完全一致 ＿ 。本 实验观察 了葛根素对离体大 ４ Ｊ
鼠胸主动 脉的舒 张效应 及其 影 响 因素 ， 以求进 一步
了解其血 管作用 的可 能机 制 ， 为相关 疾 病的 治疗 并
提供理论依 据 。
１ 材料与方法
１ １ 药 品 与溶 液 乙酰 胆 碱 （ ｃ ） 苯 肾上 腺 素 ． Ａｈ ；
用。
［ 键 词 ］ 葛根 素 ； 动脉 环 ； 肾上 腺 素受体 ； 关 主 Ｃ ｔ 钾通 道 ［ 中图 分类 号 ］ ８ ． 【 Ｒ２５５ 文献 标识 码 ］ Ａ ［ 文章 编 号 ］１ １ ３２２ｏ）０ ９ １ ４ ０ ， ｏ（ｏ４ １－ ８— ０５ ０ ０
中药 葛 根 取 自野 葛 Ｐ ｅ ｒ ｂｔ （ ｌ． Ｏ ｕｒ ｉ ｌ ａ Ｗｉ ） — ａａ ｏ ａ ｄ
在部 分实验 中 ， 用小 镊 子轻轻 摩擦 血 管 内壁 以破坏 血管 内皮 。血 管条一端用不锈钢 钩垂直悬 吊于血管 平滑肌浴槽 中 ， 另一 端连 于张力传感器 ， 其静息张力 为 ２ｇ使用 Ｐｗ ｒａ 生物信 号采集 系统 （ Ｄ仪器公 ， ｏｅ ｂ Ｌ Ａ
司， 澳大利 亚 ） 录血 管环 张 力 变化 。浴 液 为 Ｋ Ｈ 记 ．
２ １ Ｐｅ Ｐ ． ｕ 对 Ｅ和 Ｋ １ 收缩 主动脉 环张 力 的影响 Ｃ预 当Ｐ Ｅ引起 大 鼠胸 主 动 脉 环 的收 缩 达 最 大 幅 度
后， 累积性增 加 Ｐ ｅ的浓度 （ ． ～ 一１０Ｘ１ ｕ １０ １ Ｘ０ ． ０ ｍ ｌＬ ） 发现 Ｐ ｅ 内皮完 整 和去 内皮 的血管 环 ｏ・ ， ｕ对
或者 Ｋ ｌ６×１ Ｉ ｏ・ ）待 血 管环 收缩 达 到稳 ｃ（ ０ ２ ｌＬ ， ｍ
定后 ， 加人 累加剂量 的 Ｐｅ １ ０ ～１ ０ ４ ｏ・ ｕ （ ×１ 一 ×１ Ｉ ｌ ｍ
Ｌ ） 。以加人 Ｐ ｅ 的血 管 张 力 幅度 与 Ｐ ｕ后 Ｅ或 Ｋ Ｉ Ｃ
・
９ １ ・ ８
理组 中 ， 在加 Ｃ Ｃ， １ ｉ， 入 １ ｔ ｌ ａ １前 ０ｍ ｎ 加 ．Ｘ１ ｏ ・ ０ ０ ｏ
Ｌ～ 的 Ｐ ｅ ｕ。
进行 差异显著性检验 。
２ 结 果
１３３ 在 无 Ｃ２ 中对 Ｐ ．． ａ 液 Ｅ及咖啡 因 的收 缩 幅度
影 响组 在去 内皮血 管实 验 中 ， Ｋ Ｈ液 孵浴 血管 用 ４ ｉ ， 上 无 Ｃ２ ０ｍｎ后 换 ａ 的 ＫＨ 液孵 浴 １ ｍ ｎ 加 入 — ５ ｉ， １ Ｉ ｏ Ｉ Ｐ ０ ５ 卜Ｌ １ Ｅ使血 管收缩 ， 收缩稳 定后 用 Ｋ Ｈ ｍ 待 ． 液换 洗至基线 ， 定 ４ ｉ 稳 ０ｍｎ后再换上 无 Ｃ 的 Ｋ Ｈ ． 液稳定 ５ｍｎ 接着 加入 １０ ０ ５ ｏ・ 的 Ｐ ｅ ｉ， ． １ Ｉ ｔ ｌＬ Ｘ ｏ ｕ 共 浴 １ ｉ， ０ｍｎ 再加入 １ Ｉ ｏ・ Ｐ ０ ５ ｌＬ ｍ Ｅ使 血管收缩 。比
（Ｅ 、 啡 因 （ ａ） 四 乙胺 （ Ｅ 、． 基 吡 啶 （ Ｐ ）咖 Ｃｒ、 Ｔ Ａ）４氨 ４
液 ，Ｈ ７４ 浴 槽 中通 以 ９ ％０ ．％ｃ ２混 合 气 ，７ ｐ ．， ５ ２ ５ ０ ３ ℃平 衡 １ｈ 每 １ ｍ ｎ 液 １ 。 以 Ｋ １ ０ ｎ ｌ ， ５ ｉ换 次 Ｃ １ ・ ６ 瑚 Ｌ 一收缩动脉环 ３ ， 次 直到收缩稳定 。用苯肾上腺素
绞痛、 急性 心肌梗死 、 多种 心律 失 常 、 岛素抵抗 及 胰 高血脂 等均有一定疗效 ｌ３ １ｊ －。然而 ， 葛根素 的这些 对 药理作用机 制的研 究还 不够 十 分全 面 和深人 ， 且结
重（４ ２Ｏ±２ ）ｇ 由浙 江 大学 实 验 动物 中 心提 供 ） ０ （ 。
大 鼠用钝器 击 昏， 颈椎 脱位 处死 后 ， 速打 开胸 腔 ， 迅 取其 主动 脉 ， 人盛有 ４℃ ９％ ｏ—％ｃ 混合 氧 移 ５ ２ ５ ｏ ２ 饱 和 ＫＨ液 的培 养皿 中。仔 细 剥 除血 管周 围结 缔 － 组织 ， 冲洗 血管 内血 液 ， 剪成 长 ３ ４ｍｌ的血管环 ， ～ ｉ ｌ
１３２ ＣＣ２ 效 曲线 组 去 内皮 的血 管 环 稳 定 ．． ａ１量
后 ，换 成 无钙 ＫＨ溶 液并 加 人 Ｋ ｌ６Ｘ１ ｍ ｌ ． Ｃ （ ０ ｏ・ Ｌ ）孵 浴 ２ ｉ， ， ０ｍｎ 然后逐步加入 Ｃ Ｃ ２ ５ ０ ～５ Ａ １ ． ×１ 一 ２ Ｘ１ － ｍ ｌＬ ） 观察 血 管环 张力 的变 化 。Ｐ ｅ ３ ｏ・ ， ０ ｕ 处
Ｏｃｏ ｅ ， １ ４ ｔｂ ｒ ２３ Ｏ
葛根素 的非 内皮依 赖性血管舒 张作用 机制
董 侃 ，陶谦 民 夏 强２ ， ，单绮娴２ 国标 ，潘
（ ． 江大 学 医学院 附属第一 医院 心 内科 ， 江 杭 州 ３００ ； １浙 浙 １０ ３ ２ 浙江 大学 医学院 生理教研 室， ． 浙江 杭 州 ３０ ０ ） １０ ３
舒张幅度大于 ７％认 为 内皮完 整 ， ０ 以舒 张幅 度小于
２ ％认为 内皮去除 ， ｏ 进行下 一步实验 。 １３ 实验分组 及处理 ． １３ １ Ｐ ．． Ｅ和 Ｋ Ｉ Ｃ 预收缩 的主动脉 环 张力组 内皮 完整或 去 内皮 的血 管环 ， 加入 Ｐ （ ×１ ｍ ｌＬ ） Ｅ１ ０ ｏ・
・
１３４ Ｋ 通 道阻断剂 对 Ｐ ｅ 血管 作用 的影 响组 ．． ｕ舒
Ｌ ） 预处理 １ ｉ， ０ｍｎ不改变 ＣＣ， ａ１量效 曲线 （ ２ 。 表 ）
表 １ 葛根素对 Ｐ 和 Ｋ ！ Ｅ Ｃ 预收缩的主动脉环张力的影响
（ Ｅ １ ｍ ｌＬ 预 收缩 动 脉环 ， 收缩 稳 定加 入 Ｐ ）０ ｏ・ 待 乙酰 胆碱 （ ｃ ）０ ５ｍ ｌＬ 检验血 管 内皮 功能 ， Ａ ｈ １ Ｉ ｏ・ 以
Ａ ） 格 列 苯 脲 （ ｌ 、 Ｇ Ａ（ ｔ ｌ ｅ ｇ ｃ１ ｉ［ Ｐ、 Ｇｉ Ｅ Ｔ ｅ ｙ ｎ ｌ ｏ ｂｓ Ｂ ） ｈｅ ｙ ． ａ ｉ ｅ ｙ ｅ ｅ］Ｎ， ｍ ｎ ｔ ｌ ｔ ｒ． Ｎ，Ｎ Ｎ 一 ｔａｅｃａｉ） 购 自 ｏｈ ｈ ｅ ａｃｔ ｃ 均 ｔｒ ｉ ｄ Ｓ ｍ 公司； ｉａ ｇ 葛根素 （ｕｒ ｉ ，ｕ） 浙江康恩 贝制药 ｐｅ ｒ ｎ Ｐ ｅ ， ａｎ
股份有 限公司产 品 ； 其余试剂 为市售分析纯 。Ｋｅｓ ｒ ． ｂ
Ｈ ｎｅ ｉ （ ． 液 内 含 （ ｕｏ ・ ） Ｎ Ｃ ： １ ．， ｅｓｌｔ Ｋ Ｈ） ｅ ｎｎｌ Ｌ ： ａ ｌ １８０
ＫＣ ： ７， １４． ＫＨ２ Ｏ ： ． Ｍ ｏ ： ． Ｎａ Ｏ３ ２ ０， ａ Ｐ ４ １ ２， ｇ ４ １ ２， ＨＣ ： ５． Ｃ — Ｓ
ｈ ｉ， ｗ ．具有辛凉 解 表作 用 。葛 根素 （ ｕ ） 化学 名 ４ Ｐｅ ， ，
ｒ （０ｔａ ・ ） Ａ ５ ｏ Ｌ 代替 Ｃ Ｃ ， ｍ ｌ ａ１ 其余成分 同 Ｋ Ｈ液 。 ２ —
１２ 离体 主动脉环标本 的制备 ．
ｓ 鼠， Ｄ大 雄性 ， 体
７二羟基一一 一 一 ８ Ｄ 葡萄 糖 基 异 黄酮 ， 中药 葛 根 的有 是 效成分 。临床研究表 明 ， 葛根 素对高血压 、 冠心病心
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第 ２ 卷第 ｌ ９ Ｏ期
２Ｏ ０ ４年 １ Ｏ月
中 国 中 药 杂 志
Ｃｈｎ ｏ ｒ ａ ｆＣｈ ｌ ｉ ａ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｉ￣ Ｍ ａ ｅ ｉ ｅ ｉａ ｏ ｌ ｔｒａ Ｍ ｄ ｃ
Ｖｏ． ９．ｑｕ ｌ ห้องสมุดไป่ตู้ １２ Ｌｓｅ ０
均有 舒张作用 ， 且呈浓度依赖性 （ １ 。 表 ）
同样 ， 无论 是有 内皮 的还 是去 内皮 的主动脉环 ，
较前后两次血管 收缩 的程 度 ， 算后 一 次 的收缩 幅 计 度与前一 次的 比值 。对照组 在第 ２次加 Ｐ Ｅ前 不加 Ｐｅ ｕ 。无 ｃ２ 中对 咖啡 因 的收缩 幅度 ， ２ ｍ ｌ ａ 液 以 ０ｍ ｏ
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第 ２ 卷第 ｌ ９ Ｏ期
２０ Ｏ４年 ｌ Ｏ月
中 国 中 药 杂 志
Ｃｈｎ ｏ ｒ ａ ｆＣｈ．ｅ ｅ ｎａ ｅ ｉ ｃ ｉａ ｉ ａ Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｍ ｓ ｔｒａ Ｍ ｄ ｃ
Ｖ０ ．９．ｓｕ ｌ １２ Ｉｓｅ ０
诱 导 的短 暂 收缩 。钾 通道 阻 断剂 ４氨基 吡 啶和 四乙胺 孵 育后 能 够 明显抑 制 葛根 素 的舒 张 血管 作 用 ， 格 列 苯脲 不 ． 但
能抑制其舒张血管作用。结论： 葛根素的血管舒张作用是非内皮依赖性的 ， 其机制可能是通过抑制 ａ 肾上腺素受 体介导的血管平滑肌细胞外 ｃ２ ａ 内流而起作用的。同时 ， ｖ Ｋ 通道和 Ａ Ｐ Ｔ 敏感性 Ｋ 通道参与了葛根素的舒血管作
【 摘要］ 目的 ： 研究葛根素对血管的舒张作用并探讨 其机制 。方法： 记录离体大 鼠胸 主动脉环张力反应。结
果： 葛根 素能 明 显舒 张 由苯 肾上腺 素诱 导 收 缩的 大 鼠主 动脉 环 ， 血管 舒 张 作用 为非 血 管 内皮依 赖 性 ； Ｃ 预 收 缩 其 Ｋ１
下， 葛根素对主动脉环无舒张作用。对去内皮的血管环 ， 在无 ｃ２ ａ 溶液 中， 葛根素不能够抑制咖啡 因或苯肾上腺素
・
Ｋ１ Ｃ 预收 缩 下 ， ｕ Ｐ ｅ对 主 动 脉 环 均 无 舒 张 作 用 （ 表 １ 。因此 ， ） 以下 的实验都在去 内皮 的血管环上进行 。 ２２ Ｐ ｅ ＣＣ２ ． ｕ 对 ａ ｌ量效 曲线 的影 响 在无 钙 ＫＨ溶 －
液中， 随着 Ｃ Ｃ 的浓 度 （ ． ×１ ～ ～ ０ ３ｍ ｌ ａ１ ２ ２５ ０ ５Ｘ１ Ｉ ｏ・
Ｌ 咖啡因代替 １ Ｉ ｔ ｌＬ Ｐ ０ ５ ｏ・ Ｅ使血管 收缩 ， ｏ 比较
前后 两次血管收 缩 的程度 ， 计算后 一 次 的收 缩 幅度
与前一 次的比值 。
Ｌ ） 加， 增 预先 用 Ｋ ￣６Ｘ１ ｆ １Ｌ ） Ｃ （ ０ ｌ ． 去极 化 的 １ ｏ 血管环呈 浓度依赖性收缩 。而用 Ｐｅ １０ — ｍ ｌ ｕ （ ． １ ５ ｏ Ｘ０