茶游离氨基酸的测定

3.2 2%茚三酮溶液：
称取水合茚三酮（纯度不低于 95%） 2g，加 50ml 水和 80mg 氯化亚锡（GB 638-78， 分析纯），搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至 100ml。
3.3 茶氨酸或谷氨酸标准液：
称取 100mg 茶氨酸或谷氨酸（纯度不低于 99%）溶于 100ml 水中，作为母液。准确 吸取 5ml 母液，加水定容至 50ml 作为工作液（1ml 含茶氨酸或谷氨酸 0.1mg）。
A
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4 操作方法
4.1 取样方法
按“茶叶原料验收规范”（文件编号………… ）要求进行取样。
4.2 试液制备
按《茶 茶多酚测定》中 4.2.1 试液制备之规定，制备试液。
4.3 测定
准确吸取试液（4.2）0.5ml，注入 25ml 容量瓶中，加 0.5ml 水，0.5mlpH 8.0 缓 冲液（3.1）和 0.5ml 2%茚三酮溶液（3.2），在沸水浴中加热 15min。待冷却后加水定 容至 25ml。放置 10min 后，用 10mm 比色杯，在 570nm 处，以试剂空白溶液作参比，测 定吸光度（A）。
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茶 游离氨基酸总量测定
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4.4 氨基酸定量标准曲线的制作 分别吸取 0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml 氨基酸工作液（3.3）于一组 25ml 容量瓶
中，各加水至 4ml、茚三酮溶液（3.2）0.5ml 和缓冲液（3.1）2ml，在沸水浴中加热 15min， 冷却后加水定容至 25ml，按 4.3 的操作测定吸光度（A）。将测得的吸光度与对应的茶氨 酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
参考标准曲线：C=0.1686*A+0.0381
5 结果计算 5.1 计算方法和公式
茶叶中游离氨基酸含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：
C B 游离氨基酸总量（%） 1000 L 1.002 100
M m
式中： B —— 试样液总质量，g； L —— 测定用试样量，ml； M —— 试样量，g； C —— 根据 4.3 测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的 mg 数；
2 仪器和用具
分析天平：感量 0.0001g。分光光度仪。
3 试剂和溶液
3.1 pH8.0 磷酸盐缓冲液：
按《茶 茶多酚测定》中 3.2 的规定，配制 1/15M 磷酸氢二钠（3.2.1）和 1/15M 磷 酸二氢钾（3.2.2）溶液。然后取 1/15M 的磷酸氢二钠溶液 95ml 和 1/15M 磷酸二氢钾溶 液 5ml，混匀。
茶 游离氨基酸总量测定
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茶 游离氨基酸总量测定
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1 原理 氨基酸在 pH8.0 的条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的
波长下测定其含量。
1.002 —— 试样液比重（经验值）； m —— 试样干物质含量百分率，%。
5.2 重复性
同一样品进行两次测定，取两次测定的算术平均值作为结果。测定值之差，不得超 过平均值的 5%。
备注：本方法参考 GB 8314《茶 游离氨基酸总量的测定》。
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