EMS诱变步骤
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
EMS诱变步骤:
原生质体诱变时,buffer里要加15%的蔗糖、平板为R6;
孢子诱变时,需要在TSB预萌发
原生质体原液:109个/ml OK
稀释缓冲液:pH7.2 0.1M 磷酸缓冲液+15%蔗糖(过滤灭菌) OK
终止液:5%硫代硫酸钠+15%蔗糖溶液(过滤灭菌) OK
平板:R6 OK
消毒液:20%硫代硫酸钠溶液 OK
EMS 原液: OK
致死率:不同诱变条件下的致死率,从平板计数可直接得出
突变率:(1)表型多样性:再生后直接观察计数
(2)产量分布:需将各致死率下的克隆发酵,统计产量分布
甲基磺酸乙酯 Ethyl methylsulfonate
分子式: C3H8O3S; 分子量: 124.16, 沸点: 85-86℃
性质描述: 无色透明油状液体
相对密度1.1452 (10M/L)
溶于乙醚、乙醇、氯仿,微溶于水
终止液: 1M NaOH, 20% w/v Na2S2O3