临床输血安全
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免疫球蛋白分5类： IgM IgG IgA IgD IgE
IgM（五聚体）
IgG（单体）
结构 半衰期 是否能通过胎盘 是否可激活补体 抗原结合部位 最大作用距离
IgG 单体 20~23天
是 是 2个
14nm
IgM 五聚体 10天
否 是 10个
30nm
注:红细胞在生理盐水介质中的间距约为25nm。
IgM 与 IgG
抗人球蛋白法示意图
1红细胞彼此之间有一定的间距 2不完全抗体可以结合在红细胞
表面,但是不能和两个红细胞 同时结合。 3加入抗人球蛋白
4抗人球蛋白可以同时和两 个不完全抗体的FC段结合， 从而把红细胞连接在一起。
临床输血相容性检测
注意事项:
每次试验要设有阴性和阳性对照。 实验器材清洁。 注意抗原抗体比例、孵育时间、温度等条件 严格按照实验方法操作。 排除自身抗体干扰。
微柱凝胶免疫技术的特点： 使用安全 操作简单 结果稳定 灵敏度高 重复性好 费用昂贵 特殊仪器
临床输血相容性检测
微柱凝胶试验注意事项
严格按照试剂说明书操作。 献血者DAT阳性，干扰结果判读。 患者自身抗体干扰。 注意加样顺序。 配制细胞浓度准确。
临床输血相容性检测
聚凝胺试验原理：
聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多 个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并 籍助正负电荷的作用，引起红细胞的非特异性凝 集。当红细胞与血清在低离子介质中孵育后，IgG 抗体与红细胞上相应的抗原结合，在聚凝胺的作 用下发生凝聚。凝集和凝聚在表面上不能区分， 再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与聚 凝胺上的正电荷中和，非特异性凝集现象消失， 而真正的凝集不会消失。
3受检血清问题（抗体减弱或未知抗体）：年龄、 白血病、不规则抗体、异常球蛋白浓度、冷凝 聚、静脉输用大分子药物等。
获得性异常
1获得性B：细菌酶作用，只见于A型，肠道疾病， 酸化血清可消除，疾病缓解会消除。
2获得性多凝聚：感染会暴露T/Tn等隐蔽抗原，而 抗-T等天然存在，感染减轻凝聚会消失。
3急性白血病：尤其A抗原减弱，可呈混合凝聚。 4老年人：尤其A抗原减弱常见。
聚凝胺法示意图1
聚凝胺
枸橼酸钠
1 红细胞间有一定间距
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异性凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺
4 红细胞的非特异性 凝集消失
聚凝胺法示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
常见血型鉴定正反不一致分析处理
1 增强技术：4℃孵育对IgM抗体增强；反定型加 大血清量可提高弱抗体检出率；增强剂：凝聚胺、 蛋白水解酶等。
2 针对冷凝集素：在37 ℃可解除凝聚。 3 直抗阳性红细胞处理：放散技术，56 ℃热放散、
乙醚放散、2-Me。 4 亚型检测：抗原强度，家系调查。 5 混合视野：
介质为0.9NaCl IgG
ຫໍສະໝຸດ Baidu
临床输血相容性检测
抗人球蛋白试验原理
IgG类血型抗体（主要是免疫抗体，如Rh血型抗体 ）分子量小，与红细胞相应抗原结合后，在盐水 介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称之为不完 全抗体，但在加入抗人球蛋白后，以其搭桥作用 则可出现凝集反应。
补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活以 后，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆 抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致 敏的红细胞反应，使之凝集也称为抗球蛋白试验 。
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
不完全抗体
血型鉴定
广义的血型:血型即血液中各种血细胞和 血浆蛋白等成分所具有的表面抗原物质 的多态性。 狭义的血型:红细胞表面抗原物质的多态 性。
临床输血相容性检测
红细胞悬液浓度
①2％ ②5％ Test ③10％ ④0.8%
临床输血相容性检测
方法：玻片法--便于显微镜观察结果 试管法--适用于不同温度、便于洗涤
反应温度：4～22℃ 临床意义：盐水凝集试验阳性，并在37℃也有活性的抗体
是有意义的。这些抗体通常也能用其他方法证明。室温有 活性，37℃无活性者临床意义不大。
临床输血相容性检测
试验结果判定与记录
4+（++++）：一个大凝集块，背景透明，无游离细胞 3+（+++）：数个大凝集块，背景透明，无游离细胞 2+（++）：许多小凝集块，背景稍混浊，有游离细胞 1+（+）：细小的凝集块，背景浑浊 W+（±）：极细小凝集块，要用显微镜观察结果 0（-）：无凝集，无溶血，细胞呈游离散在状 PH：部分溶血; H：完全溶血
非O型输入O型红细胞：会消失 ABO不相容的骨髓移植：会消失 嵌合体细胞：A+O,B+O
临床输血安全
临床输血相容性检测 血液选择 临床输血
临床输血相容性检测
项目： ABO血型正反定型 RHD血型鉴定 不规则抗体筛查与鉴定 交叉配血试验
临床输血相容性检测
方法： 1、盐水玻片法 2、盐水试管法 3、聚凝胺法 4、抗人球蛋白法 5、酶法 6、微柱凝集法（手工加样） 7、微柱凝集法（自动加样） 8、微板法
临床输血相容性检测
临床输血相容性检测
临床输血相容性检测
结果分析：阳性-凝集或溶血 阴性-无凝集无溶血
先观察有无溶血、再观察有无凝集 注意事项：细胞浓度2～5%（严格按说 明书操作）、血清与细胞比例、反应温度、弱 凝集分析 优点：简便、快捷、直观。 缺点：不能发现不完全抗体。
输血免疫学基础回顾
临床输血相容性检测
微柱凝胶试验原理： 微柱凝胶技术是用特定的化学物质做成 微型凝胶柱，柱的上端有一个加样反应 室。抗原抗体反应后离心，凝胶柱起过 筛作用，红细胞凝集块不能通过凝胶的 间隙而留在凝胶的上部，未凝集的红细 胞通过凝胶的间隙，沉积到底部。
临床输血相容性检测
结果显示
临床输血相容性检测
滴定抗体效价 血 型 鉴 定 或 间 接 Coom,s
则用于测定抗体的亲合力 微柱凝胶抗体鉴定
血型鉴定正反不一致的原因
1试验技术原因：采样不规范、试剂质量问题 （细菌污染）、离心速度和时间、抗原抗体比 例不适当等。
2受检红细胞问题（抗原减弱或未知抗原）： ABO亚型、白血病、直抗阳性、获得性异常、 移植术后等。
IgM（五聚体）
IgG（单体）
结构 半衰期 是否能通过胎盘 是否可激活补体 抗原结合部位 最大作用距离
IgG 单体 20~23天
是 是 2个
14nm
IgM 五聚体 10天
否 是 10个
30nm
注:红细胞在生理盐水介质中的间距约为25nm。
IgM 与 IgG
抗人球蛋白法示意图
1红细胞彼此之间有一定的间距 2不完全抗体可以结合在红细胞
表面,但是不能和两个红细胞 同时结合。 3加入抗人球蛋白
4抗人球蛋白可以同时和两 个不完全抗体的FC段结合， 从而把红细胞连接在一起。
临床输血相容性检测
注意事项:
每次试验要设有阴性和阳性对照。 实验器材清洁。 注意抗原抗体比例、孵育时间、温度等条件 严格按照实验方法操作。 排除自身抗体干扰。
微柱凝胶免疫技术的特点： 使用安全 操作简单 结果稳定 灵敏度高 重复性好 费用昂贵 特殊仪器
临床输血相容性检测
微柱凝胶试验注意事项
严格按照试剂说明书操作。 献血者DAT阳性，干扰结果判读。 患者自身抗体干扰。 注意加样顺序。 配制细胞浓度准确。
临床输血相容性检测
聚凝胺试验原理：
聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶液中有多 个阳离子基团，能中和红细胞表面的负电荷，并 籍助正负电荷的作用，引起红细胞的非特异性凝 集。当红细胞与血清在低离子介质中孵育后，IgG 抗体与红细胞上相应的抗原结合，在聚凝胺的作 用下发生凝聚。凝集和凝聚在表面上不能区分， 再加入枸橼酸钠重悬液，枸橼酸根的负电荷与聚 凝胺上的正电荷中和，非特异性凝集现象消失， 而真正的凝集不会消失。
3受检血清问题（抗体减弱或未知抗体）：年龄、 白血病、不规则抗体、异常球蛋白浓度、冷凝 聚、静脉输用大分子药物等。
获得性异常
1获得性B：细菌酶作用，只见于A型，肠道疾病， 酸化血清可消除，疾病缓解会消除。
2获得性多凝聚：感染会暴露T/Tn等隐蔽抗原，而 抗-T等天然存在，感染减轻凝聚会消失。
3急性白血病：尤其A抗原减弱，可呈混合凝聚。 4老年人：尤其A抗原减弱常见。
聚凝胺法示意图1
聚凝胺
枸橼酸钠
1 红细胞间有一定间距
2 加入聚凝胺后，可以 缩短红细胞之间的距离， 使其非特异性凝集
3 加入枸橼酸钠，可以 中和聚凝胺
4 红细胞的非特异性 凝集消失
聚凝胺法示意图2
1 红细胞上已有不完全 抗体致敏
2 加入聚凝胺后，缩短红 细胞之间的距离，让不完 全抗体可以同时与两个红 细胞结合使其特异性凝集
常见血型鉴定正反不一致分析处理
1 增强技术：4℃孵育对IgM抗体增强；反定型加 大血清量可提高弱抗体检出率；增强剂：凝聚胺、 蛋白水解酶等。
2 针对冷凝集素：在37 ℃可解除凝聚。 3 直抗阳性红细胞处理：放散技术，56 ℃热放散、
乙醚放散、2-Me。 4 亚型检测：抗原强度，家系调查。 5 混合视野：
介质为0.9NaCl IgG
ຫໍສະໝຸດ Baidu
临床输血相容性检测
抗人球蛋白试验原理
IgG类血型抗体（主要是免疫抗体，如Rh血型抗体 ）分子量小，与红细胞相应抗原结合后，在盐水 介质中不出现肉眼可见的凝集反应，称之为不完 全抗体，但在加入抗人球蛋白后，以其搭桥作用 则可出现凝集反应。
补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活以 后，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆 抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致 敏的红细胞反应，使之凝集也称为抗球蛋白试验 。
聚凝胺
枸橼酸钠
3 加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4 由于不完全抗体的 结合，红细胞的特异 性凝集不消失
不完全抗体
血型鉴定
广义的血型:血型即血液中各种血细胞和 血浆蛋白等成分所具有的表面抗原物质 的多态性。 狭义的血型:红细胞表面抗原物质的多态 性。
临床输血相容性检测
红细胞悬液浓度
①2％ ②5％ Test ③10％ ④0.8%
临床输血相容性检测
方法：玻片法--便于显微镜观察结果 试管法--适用于不同温度、便于洗涤
反应温度：4～22℃ 临床意义：盐水凝集试验阳性，并在37℃也有活性的抗体
是有意义的。这些抗体通常也能用其他方法证明。室温有 活性，37℃无活性者临床意义不大。
临床输血相容性检测
试验结果判定与记录
4+（++++）：一个大凝集块，背景透明，无游离细胞 3+（+++）：数个大凝集块，背景透明，无游离细胞 2+（++）：许多小凝集块，背景稍混浊，有游离细胞 1+（+）：细小的凝集块，背景浑浊 W+（±）：极细小凝集块，要用显微镜观察结果 0（-）：无凝集，无溶血，细胞呈游离散在状 PH：部分溶血; H：完全溶血
非O型输入O型红细胞：会消失 ABO不相容的骨髓移植：会消失 嵌合体细胞：A+O,B+O
临床输血安全
临床输血相容性检测 血液选择 临床输血
临床输血相容性检测
项目： ABO血型正反定型 RHD血型鉴定 不规则抗体筛查与鉴定 交叉配血试验
临床输血相容性检测
方法： 1、盐水玻片法 2、盐水试管法 3、聚凝胺法 4、抗人球蛋白法 5、酶法 6、微柱凝集法（手工加样） 7、微柱凝集法（自动加样） 8、微板法
临床输血相容性检测
临床输血相容性检测
临床输血相容性检测
结果分析：阳性-凝集或溶血 阴性-无凝集无溶血
先观察有无溶血、再观察有无凝集 注意事项：细胞浓度2～5%（严格按说 明书操作）、血清与细胞比例、反应温度、弱 凝集分析 优点：简便、快捷、直观。 缺点：不能发现不完全抗体。
输血免疫学基础回顾
临床输血相容性检测
微柱凝胶试验原理： 微柱凝胶技术是用特定的化学物质做成 微型凝胶柱，柱的上端有一个加样反应 室。抗原抗体反应后离心，凝胶柱起过 筛作用，红细胞凝集块不能通过凝胶的 间隙而留在凝胶的上部，未凝集的红细 胞通过凝胶的间隙，沉积到底部。
临床输血相容性检测
结果显示
临床输血相容性检测
滴定抗体效价 血 型 鉴 定 或 间 接 Coom,s
则用于测定抗体的亲合力 微柱凝胶抗体鉴定
血型鉴定正反不一致的原因
1试验技术原因：采样不规范、试剂质量问题 （细菌污染）、离心速度和时间、抗原抗体比 例不适当等。
2受检红细胞问题（抗原减弱或未知抗原）： ABO亚型、白血病、直抗阳性、获得性异常、 移植术后等。