苯甲酸、山梨酸及山梨酸钾的测定—气相色谱法
高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中山梨酸和苯甲酸
卫生化学实验七高效液相色谱法（HPLC）测定饮料中山梨酸和苯甲酸一、实验目的与要求1、掌握高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的原理和方法2、了解高效液相色谱仪的基本结构和使用方法3、熟悉饮料样品的处理方法2、实验方法与原理苯甲酸和山梨酸广泛用于食品防腐剂，能够引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏等。
因此国家严格限制其使用量。
在本实验中，样品首先经过超声和加热除去二氧化碳和乙醇，然后过滤注入高效液相色谱仪，经反相C18液相色谱柱分离后，紫外检测器230 nm波长处检测。
以色谱峰的保留时间定性，色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量分析。
3、实验仪器与试剂1、仪器：高效液相色谱仪（Waters，美国）：2487紫外检测器、1525高压输液系统、717进样系统、Waters Breeze色谱工作站；超声震荡仪；100 ml烧杯（1个）； 1 ml和100 μl移液枪；离心管若干个；离心管架；微孔滤膜（0.22 μm）。
2、试剂：（1）甲醇（色谱纯）；醋酸铵溶液（0.02 mol/L，色谱纯）；流动相分别超声脱气（10 min）（2）山梨酸储备溶液(1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g山梨酸，加超纯水定容至250 ml。
（3）苯甲酸储备液（1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g苯甲酸，加超纯水定容至250 ml。
4、实验步骤1、样品处理碳酸饮料（雪碧）：吸取10 ml碳酸溶液超声5 min，然后用微孔滤膜（0.22 μm）过滤，滤液备用。
吸取100 μl滤液于离心管中，并加入900 μl超纯水，混合均匀标记为样品。
2、配制标准溶液（1）取一定量的苯甲酸储备液，经滤膜过滤于离心管中。
吸取滤液50 μl 于另一离心管并加入950 μl超纯水，得到50 μg/ml的苯甲酸标准品，做好标记。
（2）同理得到50 μg/ml的山梨酸标准品，做好标记。
（3）混合标准品配制：分别吸取500 μl过滤后的苯甲酸和山梨酸储备液于离心管中混合均匀，得到500 μg/ml的混合标准品。
气相色谱法测定食品中山梨酸、苯甲酸含量的测量不确定度评定
图 １ 测试 流程 图
方法采用 山梨酸、 甲酸标准储备液（． ｍ ／ Ｌ 稀释配制成 ５ 苯 １０ ｇ ） ０ ｍ 种浓度 的标准溶液 ， 每种溶液 均进样 ３ ， 次 得到相应的峰面积 ， 用最小二乘法拟合浓度一峰面积曲线进行校准 。
２ 数 学 模 型
Ｃ×１ ０ ０ ０×１ ０ ００ Ｃ
拉准 ｍ 控 准 回啦 事Ｊ
０ ． ２
ｌ０ｇ 一 ｘ １
５１ 电子分析天平分辨率产生的不确定度 ｕｍ ） ．． ２ （２ 电子分析天平的分辨率为 ± ． ｇ按均匀分布 ０１ ， ｍ
图 ２ 不 确 定 度来 源 因果 图
考虑， 则标准不确定度为： ， ） ‘
≈．１ ｓ ５ｘ ８０
因 此称样所引入的标准不确度为： （ ＝ “ ）
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收 稿 日期 ：０ ８ ０ － ９ ２ ０ — ４ ２
作者简介 ： 国春（９ ７ ）男 ， 黄 １７ － ， 福建莆 田人 ， 工程 师 ， 主要从事食品及石化产 品分析 ， 色谱 和质谱等仪器分析 。
维普资讯
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福 建 轻 纺
式 中：——试样 中山梨酸或苯 甲酸的含量 ，／ ｘ ｇ【 ｌ ｇ Ｃ —— 由工作 曲线上查得试样分解液中山梨酸或苯 甲酸的浓度 ， ｇ ｍ ——试 样的质量， ｇ ｖ —斌样乙醚提取液的总体积 ， Ｌ 方法 中 Ｖ＝ ５ ０ Ｌ ， ｍ （ 。 ．ｍ ） ２０ Ｖ 厂 测定时吸取 乙醚提取液的体积， Ｌ 方法中 、＝ ． ｍ ） ｍ （ ， ５ ０ Ｌ ２ ０ ｖ 厂—－Ⅱ 力 入石油醚 一乙醚（ ＋ ） ３ １混合溶剂的体积 ， Ｌ 方法中 Ｖ＝ ． ｍ ） ｍ （ ３２ ０ Ｌ ＝０ ｖ 广一 测定时进样的体积 ， Ｌ 方法中 ２ ） （ Ｌ ｆｃ ｒ —— 回收率校正因子。 ｅ
糕点中山梨酸和苯甲酸含量测定中气相色谱法的应用分析
糕点中山梨酸和苯甲酸含量测定中气相色谱法的应用分析作者：余晓丽来源：《现代食品》 2018年第5期余晓丽（尤溪县产品质量检验检测中心检验科，福建尤溪365100）摘要：完善糕点的处理方式，通过气相色谱法对山梨酸、苯甲酸含量进行检测。
在糕点酸化后，利用乙醚取样检测糕点中山梨酸与苯甲酸的含量。
关键词：山梨酸；苯甲酸；气相色谱法中图分类号：TS207.3食品防腐剂可以减少糕点中酵母菌与霉菌的数量，能够延长糕点的保质期，因此多数国家允许在食品中添加食品防腐剂。
山梨酸与苯甲酸是我国常用的食品防腐剂，虽然适量的食品添加剂能够抑制糕点细菌的增长，但过量添加会危害人的身体健康，世界各国相继对食品添加剂的添加量做出了限制。
以我国食品添加的相关标准为例，对于山梨酸与苯甲酸的含量，我国规定使用气相色谱法检测。
由于糕点中的脂肪含量较少、含水量较高，样品检测过程较为简单。
当前我国对糕点中的山梨酸、苯甲酸含量检测的资料较少。
另外，因为液相色谱法检测成本较高，且普及度较低，在检测环境满足气相色谱法条件时，实验人员检测时应优先选择气相色谱法[1] 。
1 材料与仪器1.1 实验试剂与材料月饼、石油醚、盐酸、乙醚、苯甲酸、山梨酸、无水硫酸钠以及邻苯二甲酸二乙酯。
试剂配制过程：①在 40 g/mL 质量浓度的氯化钠酸性溶液中加入一定比例的盐酸溶液，并进行酸化处理。
②取 100 mL 的盐酸，加水稀释，使盐酸溶液的质量增加至 200 mL。
③称取0.2 g 苯甲酸与 0.2 g 山梨酸，并将两者放入 100 mL 的容量瓶内，将石油醚 - 乙醚的混合溶剂倒入瓶中，溶解后稀释，使混合溶液中1 mL 中含有 2.0 mg 的苯甲酸、山梨酸。
④石油醚 - 乙醚试剂配成邻苯二甲酸二乙酯内标溶液，混合试剂中每1 mL 含有 0.25 mg 的邻苯二甲酸二乙酯。
②提取一定比例的苯甲酸与山梨酸试剂，将石油醚 - 乙醚溶液倒入瓶内对山梨酸以及苯甲酸溶液进行稀释，使混合溶液中每1 mL 中含有 150、50、250 μg 的苯甲酸与山梨酸[2] 。
食品中苯甲酸、山梨酸及其钠盐的液相色谱法测定
食品中苯甲酸、山梨酸及其盐的测定
2020/11/12
6
我国食品苯甲酸（钠）、山梨酸（钾）使用量标准
名称 苯甲酸、 苯甲酸钠
山梨酸、 山梨酸钾
2020/11/12
使用范围
最 大 使 用 量 备注 （g/kg)
酱油、醋、果汁（味）型饮料、果酱（不包含 1.0 罐头）
葡萄酒、果子酒、琼脂软糖
0.8
碳酸饮料
0.2
低盐酱菜、酱类、蜜饯
0.5
苯甲酸和苯甲酸钠同时 使用时，以苯甲酸计， 不得超过最大允许使用 量；以苯甲酸计，塑料 桶装浓缩果蔬汁不得超 过2g/kg
食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁
2.0
酱油、食醋、果酱、氢化植物油、软糖、鱼干 1.0 制品、即食豆制食品、糕点、馅、面包、蛋糕、 月饼、即食海蜇、乳酸菌饮料 低盐酱菜、酱类、蜜饯、果汁（味）型饮料、 0.5 果冻、胶原蛋白肠衣
提取、纯化后，也可利用其化学结构特性采用紫外吸收光谱法进行测定。
2020/11/12
8
食品中苯甲酸、山梨酸及其盐的测定
❖ GB/T5009·29—2003 ❖ 第一法 气相色谱法 ❖ 第二法 高效液相色谱法 ❖ 第三法 薄层色谱法
❖ 本标准规定了酱油、水果汁、果酱等食品中苯甲酸、山梨酸 含量的测定方法。
葡萄酒、果酒
0.6
以山梨酸计，食品工业 用塑料桶装浓缩果蔬汁 不得超过2g/kg；山梨酸 和山梨酸钾同时使用时， 以山梨酸计，不得超过 最大允许使用量
果、蔬保鲜、碳酸饮料
பைடு நூலகம்
0.2
肉、鱼、蛋、禽制品
0.075
食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁
2.0
7
食品中苯甲酸、山梨酸及其盐的测定
高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中山梨酸和苯甲酸
卫生化学实验七高效液相色谱法（HPLC）测定饮料中山梨酸和苯甲酸一、实验目的与要求1、掌握高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的原理和方法2、了解高效液相色谱仪的基本结构和使用方法3、熟悉饮料样品的处理方法2、实验方法与原理苯甲酸和山梨酸广泛用于食品防腐剂，能够引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏等。
因此国家严格限制其使用量。
在本实验中，样品首先经过超声和加热除去二氧化碳和乙醇，然后过滤注入高效液相色谱仪，经反相C18液相色谱柱分离后，紫外检测器230 nm波长处检测。
以色谱峰的保留时间定性，色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量分析。
3、实验仪器与试剂1、仪器：高效液相色谱仪（Waters，美国）：2487紫外检测器、1525高压输液系统、717进样系统、Waters Breeze色谱工作站；超声震荡仪；100 ml烧杯（1个）； 1 ml和100 μl移液枪；离心管若干个；离心管架；微孔滤膜（0.22 μm）。
2、试剂：（1）甲醇（色谱纯）；醋酸铵溶液（0.02 mol/L，色谱纯）；流动相分别超声脱气（10 min）（2）山梨酸储备溶液(1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g山梨酸，加超纯水定容至250 ml。
（3）苯甲酸储备液（1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g苯甲酸，加超纯水定容至250 ml。
4、实验步骤1、样品处理碳酸饮料（雪碧）：吸取10 ml碳酸溶液超声5 min，然后用微孔滤膜（0.22 μm）过滤，滤液备用。
吸取100 μl滤液于离心管中，并加入900 μl超纯水，混合均匀标记为样品。
2、配制标准溶液（1）取一定量的苯甲酸储备液，经滤膜过滤于离心管中。
吸取滤液50 μl 于另一离心管并加入950 μl超纯水，得到50 μg/ml的苯甲酸标准品，做好标记。
（2）同理得到50 μg/ml的山梨酸标准品，做好标记。
（3）混合标准品配制：分别吸取500 μl过滤后的苯甲酸和山梨酸储备液于离心管中混合均匀，得到500 μg/ml的混合标准品。
酸牛乳中山梨酸、苯甲酸的测定
6、山梨酸酸、苯甲酸混合标准贮备液 （2.000mg/ml）：准确秤取山梨酸、苯甲 酸各0.2000g，置于100ml容量瓶中，用石 油醚+乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释 至刻度。 7、山梨酸、苯甲酸混合标准使用液：分别吸 取0.25ml、0.50ml、0.75ml、1.00ml、 1.25ml山梨酸、苯甲酸混合标准贮备液， 用石油醚+乙醚（3+1）混合溶剂稀释定容 至10ml，此溶液每毫升含有50ug，100ug， 200ug，250ug山梨酸或苯甲酸。
酸牛乳中山梨酸、苯甲酸的测 定（气相色谱法）
物质介绍
• 山梨酸和山梨酸钾是限量添加的食品添加 剂，苯甲酸和苯甲酸钠是目前国家已不允 许添加的食品防腐剂。苯甲酸和苯甲酸钠 对细菌、霉菌等有较强的抑制作用，特别 是在酸性食品中效果更好，当ph>4时效果 明显下降；山梨酸和山梨酸钾适用于ph<5 的食品防腐，对于霉菌、酵母菌、需氧菌 的抑制均有效，但对厌氧菌与噬酸乳杆菌 几乎无效。山梨酸是不饱和脂肪酸，进入 人体后，直接参与脂肪代谢，被氧化成二 氧化碳和水，比苯甲酸更为安全。
计算
• 山梨酸（或苯甲酸的含量，g/kg） =(A*1000*1000)/ （m*0.2*V2\V1*1000*1000)
由测得苯甲酸的量乘以1.18，即为样品中苯 甲酸钠的含量。 结果的表达：报告算术平均值的2位有效数字。 允①该方法山梨酸回收率81%~98%，相对标准 偏差2.4%~8.5%；苯甲酸回收率为 92%~102%，相对标准偏差0.7%~9.9%。 ②该方法也适用于酱油中山梨酸、苯甲酸含 量的测定。
原理
样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸， 用带氢火焰离子化检测器的气相测谱仪进 行分离测定，与标准系列比较定量。
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解-不能不看的精华
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/，糖精钠的检测参照GB/T ，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/和GB/ 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L) ml，加入%亚铁氰化钾溶液， 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比气相色谱仪要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。
高效液相色谱法(HPLC)测定饮料中山梨酸和苯甲酸
卫生化学实验七高效液相色谱法（HPLC）测定饮料中山梨酸和苯甲酸一、实验目的与要求1、掌握高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的原理和方法2、了解高效液相色谱仪的基本结构和使用方法3、熟悉饮料样品的处理方法二、实验方法与原理苯甲酸和山梨酸广泛用于食品防腐剂，能够引起人的再生障碍性贫血，粒状白细胞缺乏等。
因此国家严格限制其使用量。
在本实验中，样品首先经过超声和加热除去二氧化碳和乙醇，然后过滤注入高效液相色谱仪，经反相C18液相色谱柱分离后，紫外检测器230 nm波长处检测。
以色谱峰的保留时间定性，色谱峰面积在一定范围内与浓度呈线性关系进行定量分析。
三、实验仪器与试剂1、仪器：高效液相色谱仪（Waters，美国）：2487紫外检测器、1525高压输液系统、717进样系统、Waters Breeze色谱工作站；超声震荡仪；100 ml烧杯（1个）；1 ml和100 μl移液枪；离心管若干个；离心管架；微孔滤膜（0.22 μm）。
2、试剂：（1）甲醇（色谱纯）；醋酸铵溶液（0.02 mol/L，色谱纯）；流动相分别超声脱气（10 min）（2）山梨酸储备溶液(1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g山梨酸，加超纯水定容至250 ml。
（3）苯甲酸储备液（1.0 mg/ml）：准确称取0.2500 g苯甲酸，加超纯水定容至250 ml。
四、实验步骤1、样品处理碳酸饮料（雪碧）：吸取10 ml碳酸溶液超声5 min，然后用微孔滤膜（0.22 μm）过滤，滤液备用。
吸取100 μl滤液于离心管中，并加入900 μl超纯水，混合均匀标记为样品。
2、配制标准溶液（1）取一定量的苯甲酸储备液，经滤膜过滤于离心管中。
吸取滤液50 μl于另一离心管并加入950 μl超纯水，得到50 μg/ml的苯甲酸标准品，做好标记。
（2）同理得到50 μg/ml的山梨酸标准品，做好标记。
（3）混合标准品配制：分别吸取500 μl过滤后的苯甲酸和山梨酸储备液于离心管中混合均匀，得到500 μg/ml的混合标准品。
气相色谱法测定酱油中山梨酸和苯甲酸的含量
苯 甲酸 、山梨酸及 其钠盐 和钾盐 可用作 防腐剂 ， 甲酸 和 山梨 酸 苯 具有 一定的毒 性 ， 引起 人、动 物肝和 肾的病 理变 化。以苯 甲酸 和 山 能 梨酸计 ， 酱油 中最大使 用量不得 超过 １ Ｏ ／ ｇ ．ｇ ｋ 。 Ｇ ／ ５ ０ ．９ ２ ０ 有关酱油 中苯 甲酸 和山梨酸含 量的测定方法 Ｂ Ｔ ０ ９２— ０ ３ 中的气相 色谱法萃取时 醚层与酱油 层界面分离不 明显 ， 净化不彻 底 ， 醚 层酱色深 ， 回收率低 。 笔者 采用特殊方法 对酱油进 行前处理 、 取 、 提 净 化， 进行 气相色谱分析 ， 减少 了有色物质对 色谱柱的污染 和分析过程 样 品处 理的 系统误 差 ， 收得 率高 ， 相对标 准偏 差小 ， 得到 了满意 的结 果 。
沈 阳化学试 剂厂 。 盐酸０＋ ， Ｖ）取 ５ ｍｌ 酸（ １Ｖ／ ： ０ 盐 分析纯 ） ５ ｍＬ 与 Ｏ 蒸馏 水混合 ｝ 石油 醚 一乙醚（＋ ， Ｖ）量取 ３ ３ １Ｖ／ ： 体积石 油醚与 １ 积乙醚混 合 ；％氯化 体 ５ 钠溶 液 ： 称取 ５ ｇ氯化钠 溶于 １０ 蒸馏 水中 ，％碳酸 氢钠的 ５ ０ ｍｌ １ ％氯化 钠水 溶液 ： 称取 ｌ ｇ碳酸氢 钠溶干 １０ ５ ０ｍ１％氯 化钠溶液 中 ； 山梨 酸 、苯 甲酸标 准贮备液 ： 准确称取 山梨 酸 、苯 甲酸各 ０ ２ ０ ｇ 置 于 １ ０ ｌ ．０ ０ ， ０ ｍ 容 量瓶 中 ， 用石油醚 一乙醚（＋ ） 合溶剂 溶解后 并稀释至 刻度 ， ３ １混 此溶液 每 毫升相 当于 ２ ０ ｇ山梨酸 或苯 甲酸 ， ．ｍ 山梨酸 、 甲酸标准使 用液 ： 苯 吸 取上 述山梨酸 、苯 甲酸标 准储备液 １ ．ｈ 于 １ ０ ｌ ０ ０ａ ｌ ０ ｍ 容量瓶 中 ， 以石油 醚 一乙醚 （＋１混合溶 剂稀 释并定 容 ， ３ ） 此溶液浓 度为 ２ ０ ｇ ｍ１ ０ ７／ 。
苯甲酸和山梨酸的测定
食品中苯甲酸和山梨酸的检测摘要：近年来食品安全卫生已成为社会、政府关注的焦点之一。
食品安全已越来越引起广大消费者的密切关注和担忧。
目前我国每年食物中毒报告例数约2万人，但据专家估计实际数量要比这个数字大10倍左右。
食品安全问题不仅涉及广大消费者的健康，还涉及相关企业的经济效益和市场空间，关系到整个食品行业的发展。
苯甲酸可与人体内的氨基乙酸结合生成马尿酸而随尿液排出体外。
如过量摄入苯甲酸和苯甲酸钠，将会影响肝脏酶对脂肪酸的作用，其次苯甲酸钠中过量的钠对人体血压、心脏、肾功能也会产生影响。
特别是对心脏、肝、肾功能弱的人群而言，苯甲酸和苯甲酸钠的摄食是不适合的嘲。
另外还会出现代谢性酸中毒、惊厥和气喘等病症。
在体外测定中还可以测到一些弱断裂剂的放射性。
苯甲酸及其钠盐因为有叠加中毒现象的报道，在使用上有争议，虽仍为各国允许使用，但应用范围愈来愈窄。
日本的进口食品中就限制使用，甚至部分禁止使用，日本已停止生产。
但因价值低廉，在中国仍作为主要防腐剂使用。
山梨酸具有较低的毒性，是迄今为止国际公认的最好的防腐剂，已经成为了西方发达国家的主流防腐剂。
但事实上，现在已经报道了许多案例(荨麻疹和假过敏)说明人体中对过多的山梨酸所带来的危害。
由于山梨酸和苯甲酸在食品中的广泛使用,所以在此讨论苯甲酸和山梨酸的检测以技术及以及各种检测技术的利弊。
1防腐剂的检测在食品工业中，作为防腐剂，不能影响人体正常的生理功能，一般说来，在正常规定的使用范围内使用食品防腐剂对人体没有毒害或毒性极小。
因此，食品防腐剂的定性与定量的检测在食品安全性方面是非常重要的。
目前，测定防腐剂的方法主要有：薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相气谱法等1.1苯甲酸和山梨酸各种检测方法1.1.1高效薄层色谱法和高效液相色谱法M．Thomassin等人曾经采用高效薄层色谱法和高效液相色谱法对尼泊金酯类作过检测，实验发现高效薄层色谱法的相对标准偏差要大于高效液相色谱法，但是高效薄层色谱法对于尼泊金酯类的定量就更为快速。
气相色谱内标法测定食品中的防腐剂苯甲酸和山梨酸_黎清金
农产品加工·学刊
第 6 期(总第 175 期) 2009 年 6 月
农产品加工·学刊 Academic Periodical of Farm Products Processing
文章编号：1671- 9646 ( 2009 ) 06- 0102- 03
2009 年第 6 期
No.6 Jun.
Key Laboratory of Food Science of Ministry of Education，Nanchang University，Nanchang，Jiangxi 330047，China） Abstract：Preservatives including benzoic acid and sorbic acid were quantified by gas chromatography using diethyl phthalate as internal standard. The results from the internal standard method were similar to those obtained from external standard method under the same conditions. 3 minutes were taken to complete the determination. Key words：preservative；diethyl phthalate；gas chromatography；internal standard method
件下，内标法测定的结果与外标法所测的结果比较接近。采用内标法仅需 3 min 即可完成测定。
关键词：防腐剂；邻苯二甲酸二乙酯；气相色谱；内标法
结合实验分析气相色谱法测定糕点中防腐剂的含量
结合实验分析气相色谱法测定糕点中防腐剂的含量摘要随着人们生活水平的不断提高,对食品的需求也越高,糕点是属于保质期较短的即时食品,为了保证其质量和风味,延长它的货架期,在加工过程中经常加入防腐剂,而过量食用这些防腐剂对人体健康有不同程度的危害。
本文根据实验分析如何运用了气相色谱法检测糕点中防腐剂的含量,以供大家参考。
关键词实验;糕点;检测Abstract As the standard of living, the demand for higher food, cake belongs to pasteurizd a shorter instant food , in order to ensure its quality and flavor , extended its shelf-life of , during the process often preservatives , and overdoing the preservatives on human health have varying degrees of harm. This article is based on how to use the experimentalanalysis gas chromatograph pastry in content for members ‘ reference.Keywords Experimental;pastry; Detection0引言当今我国对苯甲酸、山梨酸的国家标准分析方法有气相色谱法和液相色谱法,而检测脱氢乙酸的国家标准分析方法为气相色谱法,处理复杂,使用大量有机试剂萃取,易污染环境。
本文采用了气相色谱法测定糕点中的苯甲酸、山梨酸,该方法简单、快速,分析结果准确令人满意。
我国国家标准中规定用气相色谱法检测酱油和果汁中山梨酸和苯甲酸的含量,这一类食品基本不含脂肪,可以提取后直接进样检测。
气相色谱法测定食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾及注意事项
气相色谱法测定食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾
及注意事项
吴惠丽
【期刊名称】《食品安全导刊》
【年(卷),期】2016(000)021
【摘要】食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾的测定原理食品试样酸化后,利用苯甲酸、山梨酸易溶于乙醚的性质,用乙醚将食品中的苯甲酸、山梨酸提取出来,在气相色谱仪上进行分离测定,根据标准曲线求出食品中苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾的含量。
试剂乙醚:不含过氧化物;石油醚:沸程30~60℃;盐酸;无水硫酸钠;盐酸(1∶1):量取100 m L水。
【总页数】1页(P79-79)
【作者】吴惠丽
【作者单位】焉耆回族自治县质量与计量检测所
【正文语种】中文
【相关文献】
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3.纸色谱法快速分离液相色谱法测定食品中苯甲酸钠和山梨酸钾
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5.食醋和酱油中苯甲酸钠和山梨酸钾含量的高效液相色谱法测定
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液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠疑难详解不能不看精华
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解-不能不看的精华_.txt16生活，就是面对现实微笑，就是越过障碍注视未来；生活，就是用心灵之剪，在人生之路上裁出叶绿的枝头；生活，就是面对困惑或黑暗时，灵魂深处燃起豆大却明亮且微笑的灯展。
17过去与未来，都离自己很遥远，关键是抓住现在，抓住当前。
液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解－不能不看的精华液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-2003，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-2003使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
HPLC法测饮料中苯甲酸、山梨酸
苯甲酸结构
山梨酸的结构
二：实验部分
（一）
仪器和设备 试剂和原料 溶液的配制 样品前处理
（二）
（三） （四）
（一）仪器和设备
高效液相色谱仪（Agilent Technologies 1200Series）配有二极管阵 列检测器恒温水浴锅、微量进样器、1次性注射器(10uL)、0.45µm滤膜、电 子天平
（二）试剂和原料
氨水、乙酸铵、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、碳酸氢 钠等试剂均为分析纯，甲醇为色谱纯。实验用碳酸饮料，橙 汁饮料样品均从当地超市购买。
（ 三）溶液的配制
甲醇：经滤膜（0.45µm）过滤。 稀氨水（1+1）:氨水加水等体积混合。 乙酸铵溶液(0.02mol/L):经0.45µm滤膜过滤。 (0.02mol/L): 0.45µm 苯甲酸标准储备液、山梨酸标准储备液。 标准使用溶液：分别各吸取5、10、15、20、25mL苯甲酸 、山梨酸标准储备液转移至编号为1、2、3、4、5的100mL 容量瓶中，加水稀释，定容至刻度后摇匀，此时溶液浓度分别 为50、100、150、200、250µg/mL。
900 800 700 600 y = 3740.4x + 36.195 2 R = 0.999
2500 2000 y = 7911x + 509.98 R2 = 0.9897
1500
500 400 300 200 100 0 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
系列1 线性 (系列1)
DAD1 B, Sig=230,16 Ref=360,100 (A001151.D) 5 .8 1 1 mAU 600 500 400 300 200
-35 mAU -10 -15 -20 -25 -30 DAD1 C, Sig=260,16 Ref=360,100 (A001149.D) 8 .5 2 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min
气相色谱法测定食品中的山梨酸和苯甲酸
气相色谱法测定食品中的山梨酸、苯甲酸邓燕雅安职业技术学院【摘要】本文介绍了采用氢火焰离子检测器及毛细管柱气相色谱测定食品中山梨酸、苯甲酸的快速检测方法。
采用无水乙醚提取样品中的山梨酸、苯甲酸，反复振荡提取两次，经氯化钠酸性溶液盐析，无水硫酸钠脱水，旋转蒸发仪蒸干，丙酮定容后待测。
用外标法定量，取1ul待测样，HP-FFAP石英毛细管柱内分离后进入FID检测器验证。
结果表明100ug/ml浓度与峰面积有着良好的线性关系，相关系数大于0.999，山梨酸、苯甲酸的检出限为 1.0mg/kg，回收率为82.4%~92.0%，相对偏差为6.1%。
此方法具有检出限低，检测快速，定量准确，操作性强，适用于山梨酸、苯甲酸的检测工作。
【关键词】气相色谱；山梨酸；苯甲酸；食品；测定食品的保鲜和保存通常主要依赖于防腐剂，山梨酸又是被国际粮农组织和世界卫生组织重点推荐的，低毒、高效的防腐剂，主要用于儿童食品等新兴食品领域，而传统领域还在大量使用苯甲酸及其钠盐[1]。
并且，每年山梨酸的需求量可达6500t,苯甲酸的需求也很可观[2]。
并且，大量的毒理学试验表明：防腐剂成分用量过多会对人体肝脏产生危害，甚至致癌。
因此，对山梨酸、苯甲酸的检测技术的研究已成为一种必然。
目前，对其进行检测主要方法有气相色谱法、高效液相色谱法及毛细管电泳法等。
[3]]本文选用气相色谱法测定食品中的山梨酸、苯甲酸，探求有效提取食品中的山梨酸、苯甲酸的有效方法，确定检测的最佳线性关系及最低检测限值。
1实验方法1.1主要仪器和试剂美国Agilent7890A气相色谱仪，配置有自动进样器，附有FID检测器，选配Agilent的HP-FFAP(30m×0.32mm×0.25um)毛细柱。
瑞士旋转蒸发仪、50ml 的比色管。
丙酮（色谱纯）、无水乙醚（分析纯）、氯化钠（分析纯）、无水硫酸钠（分析纯）、浓盐酸、山梨酸、苯甲酸的标准品均购自德国Dr.Ehrenstorfer公司。
食品中山梨酸、苯甲酸的测定
3 分析步骤
• 结果计算： • 试样中山梨酸或苯甲酸(X)以毫克每千克表示，按式(3-1)计算：
• • • • • • • • •
式中： X——试样中山梨酸或苯甲酸的含量，mg/kg； A——测定用试样液中山梨酸或苯甲酸的质量，μg； V1——加入石油醚-乙醚（3+1)混合溶剂的体积，mL； V2——测定时进样的体积，μL； m——试样的质量，g； 5——测定时吸取乙醚提取液的体积，mL； 25——试样乙醚提取液的总体积，mL。
1
2015-3-23
（1）苯甲酸
• 近年来由于它的毒性，有用山梨酸代替的倾向。 我国《食品添加剂使用卫生标准》（GB27602011）规定：最大使用量根据不同食品要求不 同，其范围是0.2～2.0g/kg。其中碳酸饮料和 配制酒为0.2g/kg；腌制的蔬菜、酱及酱制品、 蜜饯（凉果）类为0.5g/kg；复合调味料为 0.6g/kg；葡萄酒、果酒、乳脂糖果、凝胶糖果 为0.8g/kg；酱油、醋、果酱（不包括罐头）、 果汁（味）冰、果蔬汁（肉）饮料、风味饮料 为1.0g/kg；食品工业用浓缩果蔬汁为2.0g/kg。
（2）山梨酸
• 山梨酸结构式为 • 别名花楸酸，分子量为112.13，是具有特殊 气味的白色单斜结晶。熔点132～135℃， 室温时，在100g水中能溶解0.16g山梨酸 （20℃），在100g无水乙醇或100g冰乙酸 中能溶解13g山梨酸，在100g油中能溶解 0.5～1.0g山梨酸
（2）山梨酸
• 山梨酸的急性毒性，大鼠经口LD50为 10.5±1.96g/kg体重，山梨酸和其他防腐剂同时使 用时不改变其急性毒性。用含10％山梨酸的饲料喂 养大鼠42天，没有发现有害影响。用此剂量的山梨 酸喂养大鼠120天，引起体重增加及肝增重，但动 物的繁殖能力仍正常。用5%山梨酸的饲料喂养大鼠 和狗90天，未发现有害影响。重量增加可能是由于 山梨酸的热能的利用。其ADI为0～ 25mg/kg(bw)(FAO/WHO,1994)。 • FAO/WHO联合食品添加剂委员会将其列为A类，可 以安全使用的食品添加剂。FDA评定为GRAS，是 目前较为安全的防腐剂。
气相色谱法测定饮料中苯甲酸和山梨酸的含量
25 mL容量瓶中，加乙醚到刻度，摇匀。准确吸取上述 苯 气
甲相
乙醚提取液5.00 mL于5 mL带塞试管中，置于40～50 ℃
酸色 和谱
山法
的水浴上蒸干，加入2.00 mL 3︰1的石油醚-乙醇混合
梨测 酸定
的饮
溶剂，使残渣溶解，盖好备用。
含料 量中
在线答疑：yanjie0001@ liaolw@
技
准曲线和测试试样时，每次进样的量都要相等，操作条 术
件要完全一致，这样才能通过比较峰面积或者峰高来准 13/15
确确定各次进样中被测元素的相对含量。实际工作中， 苯 气
甲相
要做到每次进样都相等，操作条件完全一致，都是相当
酸色 和谱
山法
困难的，所以这两点就成为制约外标标准曲线法测量准
梨测 酸定
的饮
确度的主要因素。
在线答疑：yanjie0001@ liaolw@
大
(2) 在氢火焰未点燃时，扳动放大器灵敏度开关，基线 学
不应变动或仅有微小变动。若这时基线发生很大变动，则说
通 用
明同轴电缆或离子室的绝缘下降，或放大器有故障，应检查 化
修理
学 实
(3) 必须罩好离子室外罩，旋上端盖，以保证良好的屏 验
针尖在进样器中的位置、插入速度、停留时问和拔出速度等
都会影响进样的重现性，操作中应予以注意。用医用注射器
苯气 甲相
酸色
进气体试样时，应防止注射器芯子位移。可用拿注射器的右
和谱 山法
梨测
手食指卡在芯子与外管的交界处，以固定它们的相对位置，
酸定 的饮
含料
从而保证进样量的准确。
量中
在线答疑：yanjie0001@ liaolw@
苯甲酸、山梨酸及山梨酸钾的测定—气相色谱法
苯甲酸钠、山梨酸及山梨酸钾的测定—气相色谱法一、实训内容适用于测定酱油、果子汁等食品的苯甲酸钠、山梨酸及山梨酸钾的含量。
通过酸化处理从样品中提取苯甲酸钠、山梨酸及山梨酸钾，气相色谱法测定，绘制标准曲线，计算样品含量。
二、实训目的、要求①理解气相色谱法的原理，能熟练操作气相色谱仪。
②能熟练处理样品。
三、实训原理样品酸化后，用乙醚提取山梨酸，用氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。
四、仪器和用具气相色谱仪：Agilent 7890气象色谱仪，配有氢火焰离子化检测器。
五、试剂①乙醚：不含过氧化物。
②石油醚：沸程30~600 ℃③盐酸。
④无水硫酸钠。
⑤盐酸（1+1）：取100 mL盐酸，加水稀释至200 mL。
⑥氯化钠酸性溶液(40 g/L)：向氯化钠溶液(40 g/L)中加少量盐酸（1+1）酸化。
⑦山梨酸标准溶液：准确称取山梨酸（0.1g左右）g，置于100 mL容量瓶中，用石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释至刻度。
此溶液相当于（1m g/mL左右）山梨酸。
⑧山梨酸标准使用液：吸取适量的山梨酸标准溶液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂稀释至每毫升相当于0.5150 mg、0.2575mg、0.1288 mg、0.06438 mg、0.03219 mg山梨酸。
⑨苯甲酸钠标准溶液：准确称取苯甲酸钠（0.1g左右）g，置于100 mL容量瓶中，用石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释至刻度。
此溶液相当于（1m g/mL左右）苯甲酸钠。
⑩苯甲酸钠标准使用液：吸取适量的苯甲酸钠标准溶液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂稀释至每毫升相当于0.5245 mg、0.2623mg、0.1311 mg、0.06556mg、0.0375 0mg苯甲酸钠。
六、操作步骤1. 样品提取（可口可乐、“6个柠檬”）称取（10g左右）g可口可乐和（10g左右）g6个柠檬事先混合均匀的样品，分别置于50mL带塞锥形瓶中，加0.5mL盐酸（1+1）酸化，用15mL、10mL乙醚提取2次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25mL带塞锥形瓶中。
(气相色谱法)防腐剂山梨酸、苯甲酸的测定(测定原理与试剂配制)
技能点：测定原理与试剂配制
主讲：李冰心
目录
食品营养与检测专业教学资源库
测定原理 适用范围 试剂配制
—2—
测定原理
一
食品营养与检测专业教学资源库
• 试样经盐酸酸化后，用乙醚提 取苯甲酸、山梨酸，采用气相 色谱-氢火焰离子化检测器进行 分离测定，外标法定量。
—3—
— 11 —
谢谢
• 1.试剂（除另有说明，本法所用试剂均为分析纯）
防
腐 剂
（1）乙醚（C2H5OC2H5）。
苯
（2）乙醇（C2H5OH）。
甲 酸
（3）正己烷（C6H14）。
的 测 定
（4）乙酸乙酯:（CH3CO2C2H5）色谱纯。 （5）盐酸（HCl）。
（6）氯化钠（NaCl）。
（7）无水硫酸钠（Na2SO4）：500℃烘8h，于干燥器中冷却至室 温后备用。
钠 含
中 ，混匀。
量
的
测
定
50mL盐酸
盐酸溶液 （1＋1）
50mL水
食品营养与检测专业教学资源库
• 3.试剂配制：氯化钠溶液
糖
精
（2）氯化钠溶液（40g/L）：称取40g氯化钠，用适量水溶解，加
钠 含
盐酸溶液2mL，加水定容至1000mL。
量
的 测
一级水
定
盐酸
氯化钠溶 液（40g/L）
2mL
一级水
（8）甲醇（CH3OH）：色谱纯。—6—Biblioteka 食品营养与检测专业教学资源库
• 2.仪器准备
糖
精
钠
仪器
规格
仪器
规格
含
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。