高中生物 第1章基因工程原理课件 新人教版选修3

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【公开课课件】人教版高中生物选修三课件:专题一基因工程(共77张PPT)

【公开课课件】人教版高中生物选修三课件:专题一基因工程(共77张PPT)

免疫-抗体
蛋白质是生命活动的 主要承担者 。
蛋白质工程实例
实例一:干扰素的保存 原因:干扰素易形成二聚体,变性使活性降低。 设计:如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨 酸,那么在-70℃的条件下,可以保存半年。
一、蛋白质工程的崛起的缘由
基因工程在原则上只能生产自然界已存 在的蛋白质。
蛋白质工程能产生自然界原本不存在的 新的蛋白质。
许多工业用酶是在改变天然酶的特性后,才 使之适应生产和使用需要的。
旁栏思考题
你知道人类蛋白质组计划吗?它与蛋白质工 程有什么关系?我国科学家承担了什么任务?
人类蛋白质组计划是继人类基因组计划 之后,生命科学乃至自然科学领域一项重大 的科学命题。2001年,国际人类蛋白质组组 织宣告成立。之后,该组织正式提出启动了 两项重大国际合作行动:一项是由中国科学 家牵头执行的“人类肝脏蛋白质组计划”; 另一项是以美国科学家牵头执行的“人类血 浆蛋白质组计划”,由此拉开了人类蛋白质 组计划的帷幕。
P27/“讨论”
3、蛋白质工程的概念
是指以蛋白质分子的结构规律及其生 物功能的关系作为基础,通过基因修饰或 基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制 造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和 生活的需求。
4、蛋白质工程与基因工程的关系
蛋白质工程是在基因工程的基础上, 延伸出来的第二代基因工程,是包含多学 科的综合科技工程领域。
导入微生物细胞 ——Ca2+处理成感受态细胞
1、将目的基因导入植物细胞:
卵细胞 极核
花粉粒
花粉粒萌发
花 粉 管
花 粉 管
精子
(2)
受 精 卵
受精卵 受精极核
2、将目的基因导入动物细胞:
含目的基因的表达载体提纯

生物:1.3《基因工程的应用》ppt(新人教版选修3)

生物:1.3《基因工程的应用》ppt(新人教版选修3)
例:1990年,美国正式开始首例重度免疫缺陷症的临床 基因治疗,患者是一个小女孩,因为她编码的腺苷酸脱氨 酶(简称ADA)基因发生了突变。研究人员首先克隆了人 体正常的腺苷酸脱氨酶基因(ada),然后将其转入患者 有缺陷的T淋巴细胞中,经过培养、转化后的T淋巴细胞 可以产生ADA,最后将成千上万的这种转基因的T淋巴细 胞注射到患者骨髓组织中。3年后,这个女孩体内50%的 T淋巴细胞出现了新的ada,并能合成ADA,患者的免疫 功能得到修复,症状明显缓解,治疗取得成功。
问题1:传统的育种方法有哪些? 杂交育种、诱变育种、单倍体育种、多倍体育种 问题2:传统的育种方法能否解决不同种生物之 间优良性状的重组问题?
问题3:基因工程技术如何解决不同种生物之间 优良性状的重组问题?
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1、转基因植物
转基因植物的产生过程
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1)抗虫转基因植物
转基因抗虫水稻(绿色)与对照(枯黄)
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6、下列属于利用基因工程技术培育的新品种的是 () A、耐寒的小黑麦 B、抗棉铃虫的转基因抗虫棉 C、太空椒 D、试管牛
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7、下列不属于利用基因工程技术制取的药物是 () A、从大肠杆菌体内制取白细胞介素 B、在酵母菌体内获得的干扰素 C、在青霉菌体内提取青霉素 D、在肠杆菌体内获得胰岛素
转鱼抗寒基 因的番茄
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4)利用转基因改良植物的品 质
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• 基因工程在畜牧养殖业上的应用主要是什么?
繁殖具有抗病能力、高产仔率、高产奶 率和高质量的皮毛等优良品质的转基因动物。
该过程的重要步骤是通过感染或显微注 射技术将重组DNA转移到动物受精卵中。
将人的生长激素 基因和牛的生长素基 因分别注射到小白鼠 受精卵中,得到的 “超级小鼠”。

人教版高中生物选修3课件:专题1 基因工程 (共36张PPT)

人教版高中生物选修3课件:专题1 基因工程 (共36张PPT)
该方法是根据碱基互补配对原则, 把互补的双链DNA解开,把单链的DNA 小片段用同位素、荧光分子或化学发 光剂等进行标记,之后同被检测的DNA 中的同源互补序列杂交,从而检出所 要查明的DNA或基因。
目的基因的检测示意图
检测目的基因是否转录出了mRNA
过程:用上述探针和转基因生物的 mRNA杂交,若出现杂交带,表明目 的基因转录出了mRNA.
为具有新性状的动物
Ca2+
微生 物细

处理 增大 细胞 壁通
原核 细胞 或酵 母菌
透性
用Ca2+处理细胞→感受 态细胞→重组表达载体 DNA分子与感受态细胞 混合→感受态细胞吸收
4.目的 基因的 检测与 鉴定
1.3 应用
一、基因工程的应用、安全性和生物武器 1.基因工程的应用 (1)动物:提高生长速度从而提高产品产量; 改善畜产品品质;生产药物;器官移植供体等 (2)植物:抗虫植物、抗病植物和抗逆植物; 利用转基因改良植物的品质. (3)基因诊断:采用基因检测的方法来判断患 者是否出现了基因异常或携带病原体。 (4)基因治疗:指利用正常基因置换或弥补缺 陷基因的治疗方法.
中心法则
复 制
DNA 转录 RNA 翻译 蛋白质
逆转录
蛋白质工程与基因工程的比较
项目 蛋白质工程
基因工程
预期蛋白质功
能→设计蛋白 目的基因的获取
质结构→推测 →基因表达载体
区 过 氨基酸序列→ 的构建→将目的


推测脱氧核苷 基因导入受体细 酸序列→合成 胞→目的基因的
DNA→表达 检测与鉴定
出蛋白质
D.多次重复.
PCR技术扩增与DNA复制的比较
PCR技术
DNA复制

高中生物人教版选修3课件:专题1 基因工程

高中生物人教版选修3课件:专题1 基因工程
如何利用规律实现更好记忆呢?
-26-
专题整合
超级记忆法-记忆规律
第四个记忆周期是 1天 第五个记忆周期是 2天 第六个记忆周期是 4天 第七个记忆周期是 7天 第八个记忆周期是15天 这五个记忆周期属于长期记忆的范畴。 所以我们可以选择这样的时间进行记忆的巩固,可以记得更扎实。
如何利用规律实现更好记忆呢?
-11-
专题整合
什么是学习力-常见错误学习方式
案例式 学习
顺序式 学习
冲刺式 学习
-12-
专题整合
什么是学习力-高效学习必备习惯
积极 主动
以终 为始
分清 主次
不断 更新
-13-
高效学习模型
专题整合
高效学习模型-学习的完整过程
方向
资料
筛选
认知
-15-
专题整合
高效学习模型-学习的完整过程
消化
固化
-32-
专题整合
超级记忆法-记忆方法
TIP1:NPC代入,把自己想成其中的人物,会让自己的记忆过程更加有趣 (比如你穿越回去,成为了岳飞的母亲,你会在什么背景下怀着怎样的心情在 背上刺下“精忠报国”四个字); TIP2:越夸张越搞笑,越有助于刺激我们的大脑,帮助我们记忆,所以不妨在 编故事时,让自己脑洞大开,尝试夸张怪诞些~
优秀同龄人的陪伴 让你的青春少走弯路 -6-
专题整合
小案例—哪个是你
忙忙叨叨,起早贪黑, 上课认真,笔记认真, 小A 就是成绩不咋地……
好像天天在玩, 上课没事儿还调皮气老师, 笔记有时让人看不懂, 但一考试就挺好…… 小ents
1. 什么是学习力 2. 高效学习模型 3. 超级记忆法 4. 费曼学习法
-20-

新人教版高中生物选修3全册新课课件共640张PPT

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新人教版高中生物选修3 全册新课课件
专题1 基因工程
1.1
DNA 重组技术的基本工具
1.基因工程的基本原理是基因重组,外源 DNA 能在受 体细胞表达的理论基础是密码子的通用性。
2.DNA 重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、 DNA 连接酶和使目的基因进入受体细胞的载体。
3.限制性核酸内切酶可识别双链 DNA 分子的某种特 定核苷酸序列,并在特定位点上切割。
有特殊的 标记基因 ②其他载体:λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
(2)作用 ①作为 运载工具 ,将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (3)载体须具备的条件及其作用(连线)
三、重组 DNA 分子的模拟操作 1.所用材料用具中,剪刀代表 EcoRⅠ ,透明胶 条代表 DNA 连接酶 。 2.用剪刀进行 DNA“切割”时,应找出
G—A—A—T—T—C 序列并在 G—A 之间 作切口进行“切割”。
3.若操作正确,不同颜色的黏性末端能 互补配对 。
1.基因工程是一种新兴的生物技术,实施该工程的最终目的
是 A.定向提取生物体的 DNA 分子
( D)
B.定向对 DNA 分子进行人工“剪切”
C.在生物体外对 DNA 分子进行改造
D.定向改造生物的遗传性状 解析:基因工程也称 DNA 重组技术,它是按照人类的意愿,施
基因工程的最终目的是定向改造生物的遗传性状。
2.下列关于限制酶的说法,正确的是
(B)
A.限制酶广泛存在于各种生物中,其化学本质是蛋白质
B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C.不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端
D.限制酶均特异性地识别由 6 个核苷酸组成的序列

生物:专题1《基因工程》课件(1)(新人教版选修3)

生物:专题1《基因工程》课件(1)(新人教版选修3)

核 生R 物 转录


RNA聚合酶
lacZ
结构基 因
lacY
lacA
转录

因 信使 R糖 半乳糖苷酶


调 阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变,因而不能与
控 操纵基因结合,使得结构基因进行转录。
第二步: 基因表达载体的构建
核心
目的基因与载体结合成为重组基因
需要 哪两种
工具
总结:表达载体需由哪几部分组成
③分类:E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶
二者在性质 上的区别
• 基因的针线——DNA连接酶
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝 隙“缝合”起来,即把梯子两边扶手的 断口连接起来(形成磷酸二酯键),这样一 个重组的DNA分子就形成了。
(3)运载体
①作用:将外源基因送入受体细胞。
为什么 要具备 这些条件
第一步:获取式图
通过对 受体菌的 培养而 储存基因
第一步:获取术合成DNA
PCR:聚合酶链式反应.是以DNA变性、复制的
某些特性为原理设计的. 前提条件是必须对目的基因有一定的了解,
②具备的条件: 能在宿主细胞内复制,并稳定地保存 有多个限制酶切点,与外源基因连接。 具有某些标记基因, 便于进行筛选 对受体细胞无害
③举例:质粒(常用)、噬菌体 和动植物病毒。
质粒特点: 1、细菌染色体外双链环状DNA分子 2、能自我复制并在受体细胞中稳定存在 3、有一个或多个限制酶切点 4、有特殊的遗传标记基因
蛋白质的结构,特别是对功能基因的修饰,也可以制造
新型的蛋白质。
一、蛋白质的改造
• 干扰素在体外保存困难 将分子中的一个半胱氨酸转变成丝氨酸

人教版高中生物选修3课件:专题一基因工程(选修三)

人教版高中生物选修3课件:专题一基因工程(选修三)
质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒
的工具
运载 工具
专题1-2
目的基因的获取
基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定
(一)、目的基因概念: 主要指的是编码蛋白质的结构基因。 也可以是一些具有调控作用的因因 化学方法直接人工合成
1、基因表达载体的组成
目的基因 启动子: 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的 首端。是RNA聚合酶识别和结合的部位, 有了它才能驱动基因转录mRNA,最终 获得蛋白质。 终止子: 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的尾端。使 转录在所需要的地方停止。 标记基因等 是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因 的细胞筛选出来,如青霉素基因。
③目的基因是否翻译出蛋白质
检测方法: 抗原—抗体杂交
2、个体生物学水平的鉴定
例2、回答有关基因工程的问题因工程的问题: (1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后, 可能产生粘性末端,也可能产生___ 平 末端。若要在限制酶切割目 的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生 _____ 相同(相同,不同)粘性末端的限制酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛 素基因及其启动子等,其中启动子的作用是 提供RNA聚合酶 特异性识别结合位点,驱动基因转录 。在用表达载体转化大肠杆菌时, 2+ Ca 常用 处理大肠杆菌,以利于表达载体进入:为了检测胰岛 素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与 DNA—RNA分子杂交 mRNA杂交,该杂交技术称为 。为了检测胰岛 素基因转录的mRNA是否翻译成 _,常用抗原胰岛素原(蛋白质) 抗体杂交技术。 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的 基因插入农杆菌Ti质粒的 T—DNA 中,然后用该农杆菌感染植物 细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 染色体 上。

人教版选修三专题一《基因工程》课件 (共74张PPT)

人教版选修三专题一《基因工程》课件 (共74张PPT)


1970年工具酶的发现
1965年氨基酸测序和1977年DNA测序技术的发明 1972年DNA体外重组的实现 1973年重组DNA表达实验的成功 1980年第一例转基因动物和1983年第一例转基因 植物问世 1988年PCR技术的发明
技 术 发 明


【应城一中生物】
17
专题一 基因工程
操作水平
基本过程 结果
【应城一中生物】
剪切 → 拼接 → 导入→ 表达
人类需要的新生物类型和产品
7
【应城一中生物】
8
早 期 基 础 理 论
1859年达尔文提出生物进化论
【应城一中生物】
9
早 期 基 础 理 论
1900年孟德尔基因分离定律和自由组合定律的再度提出
【应城一中生物】
10
早 期 基 础 理 论
要切两个切口,产生四个黏性(平)末端。
• 如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割,会怎样?
会产生相同的黏性(平)末端
• 如果把具有相同黏性(平)末端的DNA连接起来,又会怎样呢?
得到重组DNA
【应城一中生物】
31
【应城一中生物】
黏性末端
【应城一中生物】
27
SmaI限制酶的作用
SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。
在G与C之 间切割
中轴线
【应城一中生物】
28
SmaI限制酶的切割
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA 两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。
平末端
【应城一中生物】
平末端
29
1958年梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制

人教版教学课件基因工程课件(人教版高中生物选修3)

人教版教学课件基因工程课件(人教版高中生物选修3)

▲“黏性末端”和“平末端”
当限制酶在它识别序列的中心轴线的两侧将 DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端. 而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开 时,产生的则是平末端。
思考:
1. 要想获得某一个特定性状的基因(即” 目的基因”)必须要用限制酶切几个切口?可 产生几个黏性末端? 要切两个切口,产生四个黏性末端.
▲基因工程的基本操作流程
▲基因工程的基本操作程序主要包括
四个基本步骤:
1)目的基因的获取 2)“基因表达载体”的构建 3)将目的基因导入受体细胞(即“转化”) 4)目的基因的检测与鉴定
步骤一:目的基因的获取
▲什么叫目的基因? 主要是指编码蛋白质的结构基因.
▲获取目的基因的途径有哪些?
3.直接人工合成(适合于基因较小且已知 其核苷酸顺序)
▲如何将目的基因(如上例中的“抗虫 基因”)导入受体细胞(即接受目的基因 的生物的细胞,如上例中的棉花细胞)?
----导入过程需要运输“目 的基因”的工具——载体。
▲注意: 一般地,不能将目的基因直接导入受体细胞.
▲载体是什么(生物化学 成分)?它从哪里获得?它 是如何承载目的基因的?
3.基因进入受体细胞的载体---“分子运输车”.
▲利用PCR技术扩增“目的基因”.
1.概念:PCR即“聚合酶链式反应”,是一种在生 物体外复制特定DNA片断的技术. 2.原理:DNA的半保留复制. 3.过程:(见图). 4.优点:大量获取目的基因.(指数式扩增, 近2n)
▲提示与思考:
1.图中的“模板DNA” 就是已知核苷酸序列 的目的基因. 2.引物是人工合成 的,与模板DNA(即目 的基因)互补,作用是 使___. 3.加热的作用是使 _________. DNA解链 4.聚合酶(Tap酶)是 指____(选:DNA聚合 酶;RNA聚合酶),其特 点是_________. 5.原料是_________. 6.每扩增一次,目的 基因的数目增加___. 7.“退火”

高中生物 第一单元第一节 基因工程的原理课件 中图版选修3

高中生物 第一单元第一节 基因工程的原理课件 中图版选修3

提取质粒并用 限制酶切割
用连接酶将目的 基因和质粒连接
精选ppt
14
目的基因与质粒的连接
精选ppt
返回15
重组载体的转化和筛选
• 转化方法: 基因枪法、显微注射法和花 粉管通道法。 受体是动物细胞时最常用 的是显微注射法,是植物细 胞时常用基因枪法。
• 筛选: 利用载体上的标记基因, 借助选择培养基进行筛选。
精选ppt
返11回
㈠运载工具——载体
• 条件:
①能在受体细胞中复制
②具适宜的限制酶切割位点,供外源DNA片段 插入
③具有标记基因,便于选择含有载体的细胞
④对受体细胞无害
• 类型
质粒、噬菌体或其它一些病毒,最常用的 是质粒
精选ppt
12
精选ppt
返回13
重组载体的构建
• 用与提取目的基因相 同的限制酶切割质粒 使之出现一个切口, 将目的基因插入切口 处,让目的基因的黏 性末端与切口上的黏 性末端互补配对后, 在DNA连接酶的作用下 连接形成重组DNA分子。
第一节 基因工程的原理
普通玫瑰 思考:蓝色妖姬如何培育的?
精选ppt
蓝色妖姬
1
• “蓝色妖姬”最早来自荷兰是一种加工花卉。它是用一种 对人体无害的染色剂和助染剂调合成着色剂,等白玫瑰 (或白月季)快到花期时,开始用染料浇灌花卉,让花像 吸水一样,将色剂吸入进行染色。
• 据花卉专家介绍,目前世界上极少有自然生长的蓝色玫瑰 花,现在市场上出售的“蓝色妖姬”都是人工染色后的产 物。比较正规的“蓝色妖姬”是在花卉的成长期开始染色, 颜色能均匀地附着在花瓣上,看上去比较自然;部分商贩 直接将普通的白玫瑰花采摘后染成蓝色,颜色不自然,也 容易掉色。

选修三 第一章 基因工程-本章小结(共16张PPT)优秀课件

选修三 第一章 基因工程-本章小结(共16张PPT)优秀课件
• 第四步:筛选含有目的基因的受体细胞
• 第五步:目的基因的表达
第三步:将重组DNA分子导入受体细胞
生物种 类
常用方 法
受体细 胞
转化过 程
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
农杆菌转化法
显微注射技术 感受态细胞法
体细胞
受精卵
细菌细胞
将目的基因插入到 将含有目的基因的 Ca2+处理细胞
Ti质粒的T-DNA 表达载体提纯→取 →感受态细胞→
苷酸序列。 b.切割相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 ③结果:产生粘性末端或平末端。
GA A T T C C T T A AG
2.DNA连接酶
作用: 将具有末端碱基互补的DNA片段连接在一 起,形成磷酸二酯键。
G C T TAA
AATTC G
练习: 如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变
化,图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、
基因工程 小结
思考:
如何用基因工程的甲手醛段获得真正能够除
甲醛的矮牵牛?
一、基因工程
1.广义概念: 把一种生物的遗传物质移到另外一种生物的 细胞中去,并使这种遗传物质所带的遗传信 息在受体细胞中表达。
2.核心:
构建重组DNA是生物遗传物质的发现,DNA双螺旋 结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。
目的基因的表达 • 第四步将:目筛的选基含因有导目入的受基体因的细受胞体细胞
• 第五步:目的基因的表达
思考: 如何用基因工程的手段获得真正能够除甲醛的矮牵 牛? 材料:矮牵牛细胞、兔肝细胞、的甲醛酶基因 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体
• 第一步:获取目的基因
• 第二步:形成重组DNA分子
• 第三步:将重组DNA分子导入受体细胞

高中生物 第一章 基因工程 1_2 基因工程的基本操作程序课件 新人教版选修31

高中生物 第一章 基因工程 1_2 基因工程的基本操作程序课件 新人教版选修31

三、基因工程操作程序:
• 4.第四步:目的基因的检测与鉴定 • (1)内容:
• ①检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的 基因(关键) • ②检测目的基因是否转录出了mRNA
• ③检测目的基因是否翻译成蛋白质 • (2)常用的技术: • ①DNA分子杂交技术--DNA与DNA杂交 • ②分子杂交技术--DNA与RNA杂交
• ②用同种限制酶切断目的基因,产生相同的黏性 末端; • ③将切下的目的基因片段,插入到质粒的切口处, 再加入适量DNA连接酶,使两者结合成重组质粒。
三、基因工程操作程序:
• (3)基因表达载体的组成:
外源DNA分子的有效片段。 • ①目的基因:
一段有特殊结构的DNA片段,位于基因首 • ②启动子:技术扩增目的基因 • C.反转录法 • D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
三、基因工程操作程序:
• 2.第二步:基因表达载体的构建(核心) • (1)目的:P11 • (2)以质粒为载体,将目的基因与质粒结合的 步骤:
• ①用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个有黏 性末端的切口;
三、基因工程操作程序:
• 1.第一步扩增目的基因 ③人工合成目的基因 (见《优化》P7) • (3)目的基因的扩增呈指数形式扩增目的基因的方法中需要模板链 是( )
端,它是RNA聚合酶识别和结合的部位, 是负责驱动基因转录出mRNA的。
位于基因尾端,起终止转录的作用。
• ③终止子:
鉴别受体细胞中是否含有目的基因, 从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 • ④标记基因:
三、基因工程操作程序:
• 3.第三步:将目的基因导入受体细胞 • (1)概念:目的基因进入受体细胞内,并且在受 体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。 • (2)常用的转化方法(见《优化》P6)

选修三-专题一-基因工程1PPT课件

选修三-专题一-基因工程1PPT课件
2021
技术发明使基因工程的实施成为可能 1.基因转移载体的发现 2.工具酶的发现 3.DNA合成和测序技术的发明 4.DNA体外重组的实现 5.重组DNA表达实验的成功 6.第一例转基因动物问世 7.PCR技术的发明
2021
基因工程的概念
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重 组技术。通俗地说,就是按照人们的意 愿,把一种生物的某种基因提取出来, 加以修饰改造,然后放到另一种生物的 细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之
间进行连接
T4 DNA 连接酶
既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性
末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末
端,但连接平末端之间的效率比较低
2021
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
相同点: 两者都是形成磷酸二酯键。
不同点: DNA连接酶:是将DNA双链上的两个缺口同
胞染色体外能够自我复制。
2021
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
2021
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
2021
(4)必需是安全的,不会对受体细 胞有害,也就是能够安全地“借居” 在受体细胞中。
(5)分子大小应适合,以便提取和 在体外进行操作。
实际上自然存在的质粒DNA分子并不 完全具备上述条件,都要进行人工改 造后才能用于基因工程操作。
2、种类:4000种。
3、作用:识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸
序列,并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4、结果:形成两种末端 粘性末端
平末端
2021
什么叫磷酸二酯键?
2021
5
A

4
1
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Cohen在重组DNA技术中杰出贡献
◆Cohen与Boyer合作创建重组DNA分子 ● To some historians, the discipline of DNA technology came into being over pastrami sandwiches at a local delicatessen in Waikiki Beach. The year was 1972. ●It happened that Herbert Boyer was at a scientific conference in Hawaii speaking about the EcoRl restriction enzyme. Stanley Cohen was in the audience. ●After the presentation, Cohen invited Boyer to lunch to explore their possible collaboration on a series of experiments. ●The two researchers sat and considered the experiments that would send DNA technology into a new era.
性内切酶EcoRⅠ的切点。
SV40 病毒
◆ 当获得二聚体 SV40DNA 后, Berg 等就
证明了环状DNA被内切酶切成线性DNA 后能够重新环化,并且能够同另外的分 子重组。
◆于是他们进行第二步的实验就是从
λdvgal DNA 中制备含有 E.coli 的半乳糖
操纵子DNA,用上述同样的方法进行重
Cohen在重组DNA技术中杰出贡献
◆Cohen与Boyer合作创建重组DNA分子 ●Cohen had been conducting fruitful experiments with plasmids, but he was experiencing difficulty cutting open the plasmids. ●Boyer's EcoRI enzyme seemed to be the ideal solution, so Cohen suggested they join forces. ●They would use his plasmids and Boyer's enzyme to recombine the plasmid DNA. ■ First they would try to recombine two plasmids to form a single plasmid. ■ If successful, they would attempt to bring DNA from a foreign species into the plasmid to produce a recombinant DNA molecule. Boyer agreed, and the bargain was struck.
3.2.2 基因工程技术的诞生
第一个重组体的构建
1972年,美国斯坦福大学P.Berg等在PNAS
上发表了题为∶“Biochemical methode for
inserting new genetic information into DNA of Simian Virus 40:circular SV40 DNA molecules cotaining lamda phage genes and the galactose operon of Escherichia coli. Proc.
中去进行表现。
3.1.1 基因工程与遗传工程
遗传工程(genetic engineering)一词产生于19世
纪20年代,是遗传学和工程学相结合的一门技 术科学。借用工程技术上的设计思想 , 在离体 条件下 ,对生物细胞、细胞器、染色体或 DNA 分子进行按图施工的遗传操作 , 以求定向地改 造生物的遗传性。遗传工程的概念有广义和狭 义之分。
组连接,并获得成功。
第一个有功能重组体的构建
◆虽然Berg的工作具有划时代的意义,但是他们并
没有证明体外重组的DNA分子具有生物学功能。
◆1973年,S.N.Cohen等在美国PNAS上发表了题为 “Construction of Biologically Functional Bacterial Plasmid In Vitro” (S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, H. W. Borer, and R. B. Helling, Proc.
植物细胞工程
细胞分泌工程
根据细胞内蛋白质合成和运输理论 而发展起来的一项新的细胞工程技术, 主要是通过对基因改造,如基因缺失、 多效分泌突变、周质泄漏突变或加接 信号肽等措施,促进基因产物分泌的 技术。
酶工程(enzyme engineering)
◆又称酶技术。它是围绕着酶所特有的生化
催化特性 , 结合现代的技术手段 , 在体外模
分子,然后导入活细胞, 以改变生物原有的遗传
特性 ,获得新品种 , 生产新产品 , 或是研究基因 的结构和功能。
体外 操作 与细 胞内 表达
细胞工程(cell engineering)
◆应用细胞生物学的原理和方法,结合工程学 的技术手段 , 按照人们预先的设计 , 有计划 地改变或创造细胞遗传性的技术,以及在体 外大量培养和繁殖细胞 , 或获得细胞产品 , 或利用细胞体本身的技术领域。 ◆主要内容包括细胞融合、细胞拆合、染色 体转移、基因转移、细胞或组织培养等。 由于所用细胞的来源不同,细胞工程又分 为微生物细胞工程、植物细胞工程、动物 细胞工程等。
Natl. Acad. Sci. USA 70:3240-3244, 1973)
的论文,宣布体外构建的细菌质粒能够在细胞中
进行表达,从而完善了Berg开创的基因重组技术。
Boyer and Cohen
Cohen在重组DNA技术中杰出贡献
◆质粒 pSC101的获得
●In 1972, Cohen constructed a new plasmid beginning with DNA isolated from E. coli. Cohen named the plasmid pSC101 (“SC" for Stanley Cohen).The new plasmid had three important features: (1) it had only a single recognition site where EcoRI would cut the molecule, thus identifying the spot where the plasmid would open; (2) it had a sequence of nucleotides called an origin of replication, which is needed to initiate DNA replication; such a sequence stimulates plasmids to multiply in a host organism; (3) it contained a gene for resistance to the antibiotic tetracycline; thus, bacteria having the plasmid could resist the effects of tetracycline, whereas bacteria lacking the plasmid would be killed by the tetracycline.
基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程 等是生物技术的主要内容。
基因工程(gene engineering)
又 称 基 因 操 作 (gene manipulation), 重 组
DNA(recombinant DNA) 。基因工程是以分子 遗传学为理论基础 , 以分子生物学和微生物学 的现代方法为手段 ,将不同来源的基因 (DNA分 子), 按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA
发酵工程(fermentation engineering)
◆又称微生物工程,微生物发酵工程。 ◆利用生物,主要是微生物的某种特定功能,通过现 代化工程技术手段 ,生产有用物质 , 或把微生物 直接用于某种工业化生产的一种技术体系。 ◆主要内容包括菌种选育 , 发酵生产微生物 ,或植
物细胞的代谢产物 , 生产微生物菌体 ,最佳培养
广义的遗传工程包括传统遗传操作中的杂交技
术和现代遗传操作中的基因工程和细胞工程 , 狭义的遗传工程仅指基因工程。
3.1.2 生物技术
生物技术 (biotechnology) 又称生物工艺学 , 生物工程学。是根据生物学、化学和工程 学的原理进行工业规模的经营和开发微生 物、动植物细胞及其亚细胞组分, 进而利用 生物体所具有的功能元件(如基因、蛋白质) 等来提供商品或社会服务的一门综合性科 学技术。
Natl. Acad. Sci. USA 69:2904-2909, 1972”,
标志着基因工程技术的诞生。
第 一 个 重 组 体 构 建
SV40 病毒是猿猴病毒,是一种直径为 450Å的球形病毒,分子对。 SV40DNA上有一个限制
第 3章 基因工程原理
基因工程是20世 纪70年代发展起 来的遗传学的一 个分支学科
基 因 克 隆 操 作
基 因 工 程 的 应 用
3.1 基因工程的特点
◆基因工程的对象是基因,所以如果是获得商 品的话,就是基因的产品,或是改变了遗传 性的细胞和个体。如果要获得效益的话,除 了经济效益之外,还有巨大的社会效益。 ◆基因工程的对象是基因,而基因要安居才能 乐业,也就是说基因需要在宿主细胞中工作, 这样,基因工程同一般的土建工程的根本差 别在于,它需要在体外操作,然后送到细胞
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