祛湿颗粒质量标准的研究

祛湿颗粒质量标准的研究

【摘要】目的建立祛湿颗粒的质量标准。方法采用薄层鉴别法，对祛湿颗粒进行了定性鉴别；采用高效液相色谱法测定其有效成分的含量。结果薄层鉴别法可鉴别出苍术、山楂、茵陈的对应斑点；高效液相色谱法可测定出厚朴酚、和厚朴酚的含量。结论方法简单、灵敏、准确、重复性好，可有效地控制祛湿颗粒的质量。

【Abstract】Objective To establish the standard for quality control of Qushi Granule.Methods Qushi Granule was identified by TLC and the effective components of Qushi Granule were determined by HPLC.Results The relevant sports in Rhizoma Atractylodis，Fructus Crataegi and Herba Artemisiae Scopariae were identified by TLC.The contents of magnolol and honokinl could be determined by HPLC.Conclusion The method was simple,sensitive，accurate and reproducible and it could control the quality of Qushi Granule effectively.

【Key words】Qushi Granule；Quality standard；TLC；HPLC

祛湿颗粒是由厚朴、苍术、广藿香、山楂、茵陈、火炭母、木棉花、甘草等药物组成，具有清热祛湿、健脾消积等功效，临床上主要用于湿热积滞，口干尿赤等症。为了更好地控制祛湿颗粒的质量，本研究采用薄层色谱法对制剂中山楂、茵陈、苍术进行了定性鉴别；并采用高效液相色谱法对制剂中厚朴所含厚朴酚、和厚朴酚进行了含量测定，方法简便，重复性好，可作为该制剂的质量控制标准。

1 仪器与试药

1．1 仪器瑞士CAMAG Automatic TLC Sampler4(薄层自动点样仪)；瑞士CAMAG Reprostar(薄层成像系统)；硅胶G薄层板(浙江省路桥四甲生化塑料厂)；Agilent 1100(美国)高效液相色谱仪；Kromasil C18(4．6×250 mm,5 μm)色谱柱,DAD检测器,四元剃度泵,G2170AA数据处理软件系统。

试剂：甲醇为进口色谱纯，水为双蒸水，其它试剂均为分析纯。

1．2 试药厚朴酚、和厚朴酚对照品、山楂对照药材、茵陈对照药材及苍术对照药材均购于中国药品生物制品检定所。

2 定性鉴别

2．1 山楂的薄层色谱鉴别取本品3 g，加乙酸乙酯10 ml，超声处理15 min，滤过，滤液浓缩至2 ml，作为供试品溶液。另取山楂对照药材1 g，加乙酸乙酯5 ml，同法制成对照药材溶液。再按处方比例，取缺山楂的其他各味药，按制备工艺加工制成阴性样品，按供试品制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄

层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶4∶0．5)为展开剂，预饱和15 min，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液(3→10)，在80℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365 nm)下检视，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。(见图1、图2)。

2．2 苍术的薄层色谱鉴别取本品3 g，加正己烷10 ml，超声处理15 min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术对照药材0．5 g，同法制成对照药材溶液。再按处方比例，取缺苍术的其他各味药，按制备工艺加工制成阴性样品，按供试品制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录ⅥB)试验，吸取上述新制备的三种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，先以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(10:1)为展开剂，预饱和15 min，展开，展至约4 cm，取出，晾干，再以环已烷为展开剂，展开，展距7 cm，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。(见图3)。

2．3 茵陈的薄层色谱鉴别取2．1项下供试品溶液作为供试品溶液，另取茵陈对照药材1 g，加乙酸乙酯10 ml，超声处理10 min，滤过，滤液浓缩至2 ml，作为对照药材溶液。再按处方比例，取缺茵陈的其他各味药，按制备工艺加工制成阴性样品，按供试品制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶3．5∶0．5)为展开剂，预饱和15 min，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。(见图4)。

3 含量测定

3．1 色谱条件色谱柱：Kromasil C18(4．6×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(78∶22)；流速：1．0 ml/min；柱温：35℃；检测波长：294 nm。

3．2 对照品溶液的制备精密称取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量，加甲醇分别制成每1 ml含厚朴酚40 μg、和厚朴酚24 μg的溶液，即得。

3．3 供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0．5 g，精密称定，置具

塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，摇匀，密塞，浸渍24 h，滤过，精密量取续滤液5 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

3．4 供试品阴性对照溶液的制备处方中除去厚朴按制剂工艺制备，制得供试品阴性对照品，按3．3项下供试品溶液制备的方法制得供试品阴性对照溶液。

3．5 线性范围的考察精密吸取对照品溶液(厚朴酚40 μg/ml、和厚朴酚24 μg/ml)2、4、6、8、10 μl 进行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，并以峰面积(Y)对进样量(X)进行回归，得标准曲线：

厚朴酚：Y=1．86X+38．43,r=0．999 98，

和厚朴酚：Y=1．59X+37．95,r=0．999 97，

表明厚朴酚在0．080~0．800μg范围内良好的呈线性关系，和厚朴酚在0．048~0．480μg范围内良好的呈线性关系。

3．6 精密度试验精密吸取上述对照品溶液5 μl重复进样5次，测得峰面积积分值，结果RSD分别为1．08%，1．13%。

3．7 稳定性试验取同一厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液5 μl，按上述色谱条件测定5次，每次间隔2 h，测得峰面积积分值，RSD分别为1．10%，1．16%，结果表明8 h内稳定。

3．8 重现性试验按拟定的含量测定方法，对同一批样品(批号：20071101)5份，分别制备供试液，测得峰面积并计算含量，结果RSD为0．92%，1．11%。

3．9 回收率试验取已知含量的样品(批号：20071101)，分别精密加入一定量的厚朴酚、和厚朴酚对照品，按供试品制备与测定方法，按上述色谱条件，平行做6 组。结果见表1、表2。

3．10 样品测定分别精密吸取对照品溶液与样品供试液各5 μl，按上述色谱条件测定。结果见表3。

4 小结与讨论

本品为一多种中药配制而成的中药复方制剂，成分较为复杂，采用薄层色谱法对方中山楂、苍术、茵陈进行鉴别；方中厚朴为君药，采用高效液相色谱法测定方中厚朴所含厚朴酚、和厚朴酚的含量，结果表明方法简单、灵敏度高，重现性好，可用于本制剂的质量控制。

参考文献