标准曲线的绘制-电子教案

《仪器分析》教案

技能点2 标准曲线的绘制(作图法)点2：学时1学时

教学

内容

标准曲线的绘制(作图法)点

教学重点标准曲线的绘制(作图法)点

教学难点

标准曲线的绘制(作图法)点

参考资料仪器分析(第二版) 中国环境出版社

仪器分析技术华中科技大学出版社

现代仪器分析技术及应用中国石化出版社

标准曲线的绘制（水中微量铁的测定）

1、方法选择

水中微量铁的含量，通常采用还原剂（如盐酸羟胺）将三价铁离子还原为亚铁离子，进行邻二氮菲分光光度法测定。

2、水样预处理（略）

3、概述

(1) 方法原理

亚铁在pH3～9之间的溶液中与邻二氮菲（邻菲啰啉）生成稳定的橙红色络合物〔(C12H8N2)3Fe3+〕，然后于510nm波长处进行分光光度法测定。

(2) 方法的适用范围

本方法最低检出浓度为0.03mg／L，测定上限为5.00mg／L。适用于一般环境水和废水中铁的测定。

4、仪器

分光光度计、10mm比色皿

5、试剂

(1) 铁标准贮备液：准确称取0.7020g硫酸亚铁铵〔（NH4）2Fe(SO4)2·6H2O〕置于烧杯中，加20mL（1+1）盐酸溶解后移入1000mL容量瓶中。用水稀释至标线，摇匀。此溶液每毫升含100.0μg铁（以Fe计）。

(2)铁标准使用液：吸取10.00mL铁标准贮备液于100mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含10.00μg铁。临用时现配。

(3)10%（m/V）盐酸羟胺溶液

(4)0.15%（m/V）邻二氮菲溶液，加数滴盐酸帮助溶解。

(5)乙酸-乙酸钠缓冲溶液（pH=5.5）：称取150g无水乙酸钠[或250g三水乙酸钠

(NaC

2H

3

O

2

﹒3H

2

O)]溶于适量水中，加入36 %醋酸50mL(或冰乙酸18 mL) ，用水稀至

1000mL，混匀。

6、测定步骤

(1)校准曲线的绘制

取六支50mL具塞比色管，分别加入铁标准使用液0.00、1.00、3.00、5.00、10.00、15.00mL，再分别加入1mL盐酸羟胺溶液，2mL邻二氮菲溶液及5mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液，加水稀至标线，充分混匀。显色放置15min后，用10mm比色皿，于510nm波长处，以零浓度空白管为参比，测量吸光度。

(2)样品测定

分取25mL水样于三支比色管中，以下按绘制标准曲线的步骤进行显色、测量。减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出铁含量。

7、计算

m

铁(Fe，mg／L)= ——————

V

式中：m ——由校准曲线查得的铁量(μg)； V ——水样体积(mL)。

注意事项

(1) 各批试剂的铁含量如不相同，每新配一次试液，都需要重新绘制校准曲线。

(2) 操作所用的玻璃器皿及比色皿用后的清洗，可用1+5的盐酸浸泡2h。

(3) 若水样含铁量较高时，可适当稀释；浓度低时可换用20mm 或30mm的比色皿。

8、水中微量铁的测定数据记录表

1、铁标准曲线的绘制

铁标液浓度（ug∕mL）10

吸取量（mL）0 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00

实测浓度（ug∕mL∕）0 0.400 0.800 1.20 1.60 2.00

吸光度A 0 0.086 0.166 0.249 0.332 0.409