糖类测定
糖类的测定实验报告

一、实验目的1. 掌握糖类物质的基本性质和鉴定方法。
2. 学习使用化学试剂和方法检测溶液中的糖类物质。
3. 了解不同糖类物质的鉴定原理及其在实际应用中的意义。
二、实验原理糖类物质是一类多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,它们在化学性质上具有一些共同的特性。
例如,糖类物质可以与某些特定的试剂发生颜色反应,从而实现对糖类的鉴定。
常见的糖类鉴定方法包括:1. 还原糖的鉴定:还原糖在碱性条件下可以与斐林试剂发生反应,生成砖红色沉淀。
2. 非还原糖的鉴定:非还原糖可以通过与苏丹溶液反应,观察颜色变化来鉴定。
3. 蛋白质的鉴定:蛋白质可以与双缩脲试剂发生紫色反应。
三、实验器材1. 试管2. 烧杯3. 滴管4. 移液器5. 恒温水浴锅6. 显微镜7. 斐林试剂8. 苏丹溶液9. 双缩脲试剂10. 糖类溶液(葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉等)11. 蛋白质溶液12. 碱性溶液13. 酸性溶液四、实验步骤1. 还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。
- 向试管中加入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后加入)。
- 将试管放入盛有50-65度温水的大烧杯中加热约2分钟。
- 观察溶液颜色变化,若出现砖红色沉淀,则说明溶液中含有还原糖。
2. 非还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。
- 向试管中滴加3滴苏丹溶液。
- 观察溶液颜色变化,若出现颜色变化,则说明溶液中含有非还原糖。
3. 蛋白质的鉴定- 向试管中加入2mL待测蛋白质溶液。
- 向试管中加入1mL双缩脲试剂A液(摇匀)。
- 向试管中加入双缩脲试剂B液4滴(摇匀)。
- 观察溶液颜色变化,若出现紫色反应,则说明溶液中含有蛋白质。
五、实验结果1. 还原糖的鉴定:实验结果显示,葡萄糖溶液在斐林试剂作用下出现砖红色沉淀,果糖溶液也出现砖红色沉淀,而蔗糖溶液没有出现沉淀。
2. 非还原糖的鉴定:实验结果显示,蔗糖溶液在苏丹溶液作用下出现颜色变化,而葡萄糖溶液和果糖溶液没有出现颜色变化。
糖类的化学实验报告(3篇)
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第1篇一、实验目的1. 了解糖类的基本化学性质。
2. 掌握糖类物质的鉴定方法。
3. 区分还原糖和非还原糖。
4. 学习利用化学反应验证糖类的存在。
二、实验原理糖类是一类重要的有机化合物,包括单糖、双糖和多糖。
它们在自然界中广泛存在,具有重要的生物学功能。
本实验通过一系列化学反应,观察糖类的性质,包括溶解性、反应性和鉴定方法。
三、实验器材与药品1. 实验器材:试管、试管架、烧杯、滴管、酒精灯、镊子、玻璃棒、蒸馏水、加热器等。
2. 实验药品:葡萄糖、蔗糖、果糖、氢氧化钠、硫酸铜、氢氧化钠溶液、碘液、淀粉溶液等。
四、实验步骤1. 溶解性实验- 将一定量的葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入适量蒸馏水,观察溶解情况。
2. 还原性实验- 将少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入少量氢氧化钠溶液,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。
3. 鉴定实验- 斐林试剂法:取少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入斐林试剂,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。
- 本尼迪克特试剂法:取少量葡萄糖、蔗糖、果糖分别加入试管中,加入本尼迪克特试剂,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。
4. 淀粉水解实验- 取少量淀粉溶液加入试管中,加入少量稀硫酸,加热至沸腾,观察溶液颜色变化。
5. 苏丹Ⅲ染色实验- 取少量蔗糖溶液加入试管中,加入苏丹Ⅲ染液,观察溶液颜色变化。
五、实验现象1. 溶解性实验:葡萄糖、蔗糖、果糖均能溶解于水中。
2. 还原性实验:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。
3. 鉴定实验:- 斐林试剂法:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。
- 本尼迪克特试剂法:葡萄糖溶液呈红色,蔗糖溶液无明显变化,果糖溶液呈红色。
4. 淀粉水解实验:淀粉溶液呈蓝色,加热后颜色消失。
5. 苏丹Ⅲ染色实验:蔗糖溶液被染成红色。
六、实验结论1. 葡萄糖、蔗糖、果糖均为糖类物质,具有不同的化学性质。
2. 葡萄糖、果糖具有还原性,而蔗糖不具有还原性。
实验检测糖类含量的方法
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实验检测糖类含量的方法
实验检测糖类含量的方法有以下几种:
1. 红糖法:将待测样品与红糖溶液混合加热,利用糖类的还原性使红糖被还原变色,颜色的深浅与糖类含量成正比。
2. 蒸馏法:将待测样品加入蒸馏水中,用蒸馏器蒸馏,收集第一滴液滴入菲林试剂,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
3. 酚高法:将待测样品与酚及硫酸混合,用比色计测定吸光度,从而测定糖类含量。
4. 酶释法:在待测样品中加入糖类酶,使其分解为糖类,然后利用酚-硫酸法或蒸馏法测定糖类含量。
5. 还原终点滴定法:将碘液与待测样品反应,然后用硫代硫酸钠滴定溶液中的剩余碘,从而测定糖类含量。
以上就是实验检测糖类含量的几种方法,根据具体情况可以选择不同的方法进行实验。
四种糖的测定方法
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4种糖的测定方法总结:1、直接滴定法。
原理为糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。
缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。
缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响,过程较为复杂,误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下,脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点:如果水样呈橙红色(大部分水样为黄色),会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的测定。
缺点:,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。
综合比较;采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。
(一)直接滴定法(本法是国家标准分析方法)中华人民共和国行业标准(果汁-总糖的测定-直接滴定法)SB/T 10203-199 4Ⅰ、原理一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与酒石酸钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂,用标液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应,生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全部被还原后,稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为无色,即为滴定终点。
根据样液消耗量可计算出还原糖含量。
样品经除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝做指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。
食品中总糖的测定
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食品中总糖的测定在食品中测定总糖含量是非常重要的,因为糖是食品中常见的能量来源之一。
在食品中准确测定总糖含量能帮助人们更好地控制摄入的糖量,从而维持健康的饮食习惯。
下面将介绍几种常见的测定总糖含量的方法。
1. 高效液相色谱法(HPLC):这是一种常用的食品分析方法,可以准确地测定食品中的糖含量。
该方法通过将食品中的糖分离,并利用色谱柱进行分析。
HPLC方法能够同时检测多种糖类物质,包括单糖、双糖和多糖。
2. 光学旋光法:这是一种基于糖类物质旋光性质的测定方法。
糖类物质对光的旋光性质与其化学结构密切相关,因此通过测量旋光角度可以推测出糖类物质的含量。
这种方法通常适用于单糖的测定。
3. 酶法:酶法是一种常用的测定食品中总糖含量的方法,它基于特定酶与糖类物质发生反应的原理。
常用的酶法包括葡萄糖氧化酶法和酶解法。
葡萄糖氧化酶法通过测定检测的光密度,从而确定食品中葡萄糖的含量。
酶解法则通过将糖类物质与特定酶进行反应,产生可检测的产物来测定总糖含量。
4. 色层分析法:这是一种常见的半定量测定糖类物质含量的方法。
色层分析法通过将食品样品与试剂反应,然后在色层板上通过比较颜色的强度和形状来推测出糖类物质的含量。
这种方法操作简单、成本较低,但精确度相对较低。
以上只是几种常见的测定总糖含量的方法,实际上还有许多其他的方法可以用于测定糖类物质的含量。
在具体进行测定时,一般需要根据样品的特点和分析要求选择适合的方法。
此外,在测定过程中还需要注意一些影响测定结果的因素,例如样品的制备、仪器的校准和样品的存储等。
通过合理选择测定方法和注意测定过程中的细节,可以准确地测定出食品中的总糖含量。
糖类测定方法大全
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糖类测定方法大全(一)测定方法概述(二)可溶性糖类的提取和澄清1、提取液制备(1)常用提取剂——水、乙醇(2)提取液中含糖量控制0.5~3.5mg/mL(3)含脂肪食品先脱脂,然后用水提取(4)含淀粉及糊精食品(乙醇沉淀淀粉等)用70~75%乙醇溶液提取(5)含乙醇及CO2液态食品,蒸发至1/3~1/4原体积,以除去C2H5OH及CO2 (6)酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解(7)提取固体样品有时需要加热,以提高提取效果。
一般在40~50℃,防止多糖溶出(8)乙醇作提取剂加热时应安装回流装置2、提取液的澄清(1)影响测定的杂质色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁,可影响颜色、浑浊、过滤困难。
(2)澄清剂①醋酸铅(中性)Pb(CH3COO)2·3H2O,形成沉淀,吸附杂质,可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。
②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白质等干扰物。
③硫酸铜和氢氧化钠Cu离子使蛋白质沉淀。
(3)澄清剂用量用量适宜,以无新沉淀为准,如2ml饱和醋酸铅(30%)、(4)除铅剂由于铅影响还原糖的测定,生成铅糖化合物。
常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。
(三)蓝—爱农(Lane-Eynon)法测定还原糖(国际上常用的定量糖的方法)1、原理斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+ Cu2O↓(红棕)终点的确定:葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)过量兰色无色(兰色消失)终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色2、测定①预测准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。
(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)②测定甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml样液在2min 内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
糖类的测定的实验报告心得
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糖类的测定的实验报告心得引言糖类是生命中不可或缺的能量来源,也是许多食物的主要成分之一。
因此,糖类的测定对于食品科学、营养学等领域的研究具有重要意义。
本次实验通过测定糖类样品中还原糖的含量,掌握了一种常用方法——差色法的原理和操作技巧。
实验目的1. 了解差色法测定糖类含量的原理及方法;2. 掌握差色法在糖类测定实验中的操作技巧;3. 分析实验结果,总结经验教训。
实验步骤1. 根据所要测定的糖类样品的特性和浓度范围,选择合适的稀释倍数;2. 将样品经过稀释后,通过加入试剂并加热反应得到含还原糖的溶液;3. 测定溶液的光密度值,并制定标准曲线;4. 根据标准曲线,计算出待测样品中还原糖的含量;5. 重复以上步骤,进行数据的重复性验证;6. 分析实验结果并撰写实验报告。
实验结果通过实验我们得到了一组标准曲线,该曲线具有良好的线性关系。
利用该标准曲线,我们可以准确地测定糖类样品中还原糖的含量。
同时,在进行数据的重复性验证时,我们得到了一致的结果,说明本实验操作规范准确。
实验分析通过本次实验,我们了解了差色法测定糖类含量的原理与方法。
差色法是一种常用的测定糖类含量的方法,其优点是操作简便、准确度高。
通过加热反应和试剂的作用,还原糖被氧化成醛酮酸,这个过程使得我们可以通过测定溶液的光密度值来推算出糖类的含量。
实验过程中的关键是选择合适的稀释倍数以及准确测量光密度值。
在稀释倍数的选择上,应根据样品的特性和浓度范围选择,避免过高或过低的稀释倍数。
另外,在测量光密度值时,要注意操作的准确性,避免操作不慎导致数据的偏离。
在实验操作中,我们也遇到了一些问题。
比如,在加热反应时,温度的控制非常重要,过高的温度可能导致糖类的热解,从而影响结果的准确性;而过低的温度则可能导致反应速度过慢、不完全,影响测定的灵敏度。
因此,在操作过程中,我们需要严格控制加热温度,确保反应的进行。
实验结论本次实验通过差色法测定糖类含量的方法,成功得到了一组标准曲线,并能够准确测定糖类样品中还原糖的含量。
糖类物质的测定
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01
易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入,避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。
02
⑤滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定,以防止空气进入反应溶液中。 样品溶液预测的目的;一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求(0.1%左右),测定时样品溶液的消耗体积应与标定时葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近,通过预测可了解样品溶液浓度是否合适,浓度过大或过小应加以调整,使预测时消耗样液量在 10 ml 左右;
1
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直接滴定法(是GB法)
Cu2+ + 还原糖 Cu+ 用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的方 法。 利用通过实验编制出的还原糖检索表来计算。 在测定过程中要严格遵守标定或制表时所规定的操作条件,如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。 计算还原糖的量有两种方法:
适用范围
比直接法的试剂中少亚铁氰化钾,终点为红色。
蓝—爱农(Lane—on)法
GB/T 5009.7—2003《食品中还原糖的测定》
高锰酸钾法
直接滴定法(先标定再测定)
三、蔗糖的测定
蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖,没有还原性,不能用碱性铜盐试剂直接测定,但在一定条件下,蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖和果糖(转化糖)。因此,可以用测定还原糖的方法测定蔗糖含量。对于纯度较高的蔗糖溶液,其相对密度、折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系,故也可用物理检验法测定。这里介绍还原糖法。
01
还原糖法
03
化学法
02
纸色谱 薄层色谱 GC HPLC β—半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖 葡萄糖氧化酶测葡萄糖 发酵法 ——测不可发酵糖 重量法——测果胶、纤维素、膳食纤维素
糖分的测定实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 理解并掌握糖分测定的原理和方法。
2. 通过实验操作,学习使用本尼迪克特试剂(Benedict's reagent)检测还原糖的含量。
3. 了解糖类物质在食品和生物体内的作用及其检测的重要性。
二、实验原理还原糖是指具有游离醛基或酮基的糖,它们在加热条件下能与斐林试剂或本尼迪克特试剂发生反应,生成砖红色沉淀。
本实验采用本尼迪克特试剂进行还原糖的定量测定。
三、实验材料与仪器材料:- 食品样品(如水果汁、饮料、蜂蜜等)- 本尼迪克特试剂- 水浴加热装置- 移液管- 试管- 酒精灯- 精密天平仪器:- 烧杯- 滴定管- 移液器- 比色计四、实验步骤1. 样品准备:取适量食品样品,用蒸馏水稀释至适当浓度。
2. 试剂准备:按照本尼迪克特试剂的配制方法,准确称取试剂,溶解后备用。
3. 样品处理:取5支试管,分别加入1mL样品溶液。
4. 试剂添加:向每支试管中加入2mL本尼迪克特试剂。
5. 混合:充分混合试管中的溶液。
6. 加热:将混合后的溶液放入水浴中加热至沸腾,保持5分钟。
7. 冷却:将试管从水浴中取出,静置至室温。
8. 比色:使用比色计测定溶液的吸光度。
9. 计算:根据吸光度值,参照标准曲线计算样品中的还原糖含量。
五、实验结果与分析结果:- 样品A:吸光度值为0.6- 样品B:吸光度值为0.8- 样品C:吸光度值为1.2- 样品D:吸光度值为1.5- 样品E:吸光度值为0.3分析:根据比色结果,可以得出以下结论:- 样品A中的还原糖含量为0.6mg/mL- 样品B中的还原糖含量为0.8mg/mL- 样品C中的还原糖含量为1.2mg/mL- 样品D中的还原糖含量为1.5mg/mL- 样品E中的还原糖含量为0.3mg/mL通过实验,可以观察到不同食品样品中的还原糖含量存在差异,这与食品的种类和加工方法有关。
六、实验讨论1. 本实验采用本尼迪克特试剂进行还原糖的测定,该试剂具有操作简便、灵敏度高等优点。
糖类测定

1.糖蜜成分分析1.1糖蜜中总糖、蔗糖及还原糖含量分析1.1.1总糖含量的测定——苯酚-硫酸法苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖反应产物在490nm处(戊糖及糖醛酸反应产物在480nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。
1.1.1.1 试剂:浓硫酸(分析纯,95.5%)6%苯酚(临用前配制) 标准葡萄糖1.1.1.2 实验方法与实验结果①标准曲线的制定准确称取标准葡萄糖20mg于500mL容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8mL,并以水补充总体积至2.0mL,然后加入6%苯酚1.0mL及浓硫酸5.0mL,静置10min,摇匀,室温放置20min后于490nm 测光密度,以2.0mL水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标1为光密度值,得标准曲线,如图②样品含量测定吸取样品液1.0mL,按上述步骤操作,测光密度,以标准曲线计算多糖含量。
③实验结果表1 糖蜜中的总糖含量甘蔗糖蜜524甜菜糖蜜4431.1.2 蔗糖含量的测定——Roe比色法六碳糖与浓盐酸作用产生羟甲基糠醛,但酮糖比醛糖产生的羟甲基糠醛的量要多得多(1-1.5%酮糖与20%醛糖所产生的轻甲基糠醛量相等)。
此羟甲基糠醛在一定条件下和酚类化合物一间苯二酚形成鲜红色。
此反应在一定条件下为酮糖所特有,所以可作为酮糖测定的依据。
样液中若同时存在果糖、葡萄糖或麦芽糖等不影响蔗糖的测定。
其测定范围在40-360μg。
1.1.2.1试剂A:间苯二酚溶液,0.1g间苯二酚用6mol/L盐酸溶液溶解后定容至100mL;B:10mol/L盐酸,量取83.5mL浓盐酸(比重1.19)注入蒸馏水中,并稀释到100mL,冷却;C: 2mol/L氢氧化钠,准确称取8.0g氢氧化钠,用蒸馏水溶解后定容至100mL;D:蔗糖标准溶液(1mg/mL),精确称取0.1g恒重蔗糖(90℃烘至恒重),以蒸馏水溶解并定容至100mL。
糖类定量测定极谱法原理
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糖类定量测定极谱法原理
极谱法是一种常用的糖类定量测定方法,其原理基于糖分子在电极表面吸附和氧化的特性。
极谱法的测定步骤如下:
1. 准备工作:首先需要准备一个工作电极和一个参比电极。
常用的工作电极有玻碳电极和金电极,参比电极可以选择银-银氯化银电极。
2. 电化学清洗:将工作电极和参比电极进行电化学清洗,以去除表面的杂质和氧化物。
3. 电化学活化:将工作电极浸泡在包含电解质的溶液中,施加一定的电势进行电化学活化,使电极表面形成一层稳定的氧化物膜。
4. 校准曲线:制备一系列浓度已知的糖溶液。
利用工作电极进行极谱扫描,记录不同浓度下的峰电流。
5. 测定样品:将待测糖溶液进行适当稀释,然后利用工作电极进行极谱扫描,记录峰电流。
6. 数据处理:根据校准曲线,将峰电流转化为对应糖类浓度。
可以使用线性回归等方法进行数据处理。
需要注意的是,极谱法在测定糖类时对溶液的pH值和温度有一定的要求,应严格控制实验条件来保证测定结果的准确性。
四种糖的测定方法
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四种糖的测定方法糖是一类普遍存在于食品和生物体内的有机化合物,在生物体内扮演着能量供应和结构支持的重要角色。
因此,准确测定糖的含量对于食品工业、医学研究以及农业等领域至关重要。
本文将介绍四种常见的糖类测定方法:离子色谱法、高效液相色谱法、酶法和光学旋光法。
离子色谱法(Ion Chromatography,IC)是一种基于糖与离子交换柱相互作用的分析方法。
该方法的原理是,通过将样品中的糖溶解成离子形式,并通过离子色谱柱对其进行分离和定量测定。
该方法具有高灵敏度、分离效果好和操作简便等特点。
离子色谱法广泛应用于果汁、乳制品、饮料等食品中糖的含量测定,同时也可用于生物体内糖的测定,如血糖测定。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种利用高压将流动相通过色谱柱以及对样品中的目标物进行分离和检测的方法。
在糖的测定中,通常采用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行检测。
首先,将样品中的糖通过酶反应转化为过氧化氢和酮糖,然后过氧化氢再和荧光素酶反应生成荧光素,最后通过荧光检测器进行定量测定。
该方法具有高灵敏度、准确度高和分离效果好的特点,广泛应用于食品和生物体中糖类的测定。
酶法是一种常见的测定糖的方法。
在糖类测定中,常使用葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)进行测定。
该酶与葡萄糖结合形成过氧化氢和酮糖,然后通过反应转换为酸与染料反应产生有色产物,最后根据产生的色度与糖的浓度成正比进行定量测定。
酶法具有操作简便、准确性高和灵敏度高等特点,广泛应用于血糖检测和食品中糖类的测定等领域。
光学旋光法是一种通过测量糖溶液在光的干涉下发生的旋光现象来测定糖含量的方法。
根据糖分子中的手性碳原子的存在,使得糖分子能够旋光,通过测量光经过旋光液体时的偏离程度,并与标准旋光度进行对比,可以确定糖的含量。
光学旋光法具有准确性高、非破坏性测量以及对复杂样品的适用性等特点,广泛应用于食品、医药等领域的糖类测定。
第八章 糖类的测定
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的理化性质
3、过剩的澄清剂应不干扰后面分析操作或应易
于除掉。
高锰酸钾滴定法
1.原理
过量的碱性酒 石酸甲铜溶液
① ②
一定量的样液
+
△ Cu O↓ 2
2FeSO4
还原糖
Cu2O↓
2
Cu2+
4 3
+过量酸性Fe (SO )
+CuSO4
③
滴定终点如 何确定???
KMnO4
萨 氏 法
过量的KIO3 + 5 KI + 3H2SO4 = 3I2
2Cu+ +过量的I2 = 2Cu2+ +2 II2 + 2 Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2 NaI 淀粉作为指示剂
酶法
三、蔗糖的测定
蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再按还原糖 测定。水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。
四、总糖的测定
食品中的总糖通常是指具有还原性的糖和在测定条件下能水
解为还原性单糖的蔗糖的总量。
五、可溶性糖类的分离与定量
主要方法:
1. 纸色谱法——分离效果差,操作时间长。 2. GC法——糖不易挥发。 3. 薄层色谱法(TLC)——问题同纸色谱法。 4. HPL量,再折算为淀粉含量。
注:
1、乙醇除去可溶性糖,但不得除去淀粉,要求乙醇浓度85% 2、水解要求严格,须保证淀粉水解完全 3、酸水解法,HCl水解淀粉的专一性不如淀粉酶,同时水解 半纤维,不宜用于含半纤维高或含壳皮较高的食品。
二、酶水解法
样品经乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖类后,在
硫酸铜和氢氧化钠溶液 中性醋酸铅 【Pb(CH3COO)2· 3H2O】
测定糖含量实验报告
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一、实验目的1. 了解糖类在食品、药品、生物体中的重要性。
2. 掌握测定糖含量的方法,学会使用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖含量。
3. 提高实验操作技能,培养严谨的科学态度。
二、实验原理还原糖是指在碱性条件下,能与3,5-二硝基水杨酸发生还原反应的糖类。
在实验中,还原糖与3,5-二硝基水杨酸在碱性条件下共热,生成棕红色物质。
在一定浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,通过比色法测定还原糖含量,进而推算出样品中的糖含量。
三、实验材料1. 试剂:3,5-二硝基水杨酸、氢氧化钠、苯酚、亚硫酸钠、酒石酸钾钠、葡萄糖、蒸馏水。
2. 仪器:可见分光光度计、电子天平、真空干燥箱、数显恒温水浴锅、离心机、移液器、枪头、500mL容量瓶、试管、500ml烧杯、1000ml烧杯。
四、实验步骤1. 准备工作(1)配制标准葡萄糖溶液:准确称取葡萄糖10.0g,溶解于1000mL蒸馏水中,配制成10.0mg/mL的标准葡萄糖溶液。
(2)配制3,5-二硝基水杨酸溶液:准确称取3,5-二硝基水杨酸50.0mg,溶解于100mL蒸馏水中,配制成0.5%的3,5-二硝基水杨酸溶液。
(3)配制氢氧化钠溶液:准确称取氢氧化钠20.0g,溶解于100mL蒸馏水中,配制成20%的氢氧化钠溶液。
2. 实验操作(1)取一定量的样品,加入适量蒸馏水,充分振荡,使样品溶解。
(2)准确吸取样品溶液1.0mL,置于50mL容量瓶中。
(3)向容量瓶中加入5.0mL 3,5-二硝基水杨酸溶液和5.0mL氢氧化钠溶液,用蒸馏水定容至刻度线。
(4)将溶液置于水浴锅中加热煮沸5分钟,取出冷却至室温。
(5)用可见分光光度计在540nm波长处测定溶液的吸光度。
(6)根据标准曲线计算样品中的还原糖含量。
3. 数据处理(1)绘制标准曲线:以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)根据样品溶液的吸光度,从标准曲线上查得对应的葡萄糖浓度。
(3)根据样品溶液的浓度和体积,计算样品中的还原糖含量。
糖类检测的实验报告(3篇)
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第1篇一、实验目的1. 了解并掌握检测糖类的基本原理和方法。
2. 通过实验,学习如何运用化学试剂对糖类进行定性检测。
3. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理糖类是一类有机化合物,广泛存在于自然界中。
在生物体内,糖类具有重要的生理功能。
检测糖类的方法主要有:还原糖检测、非还原糖检测和糖类含量测定等。
本实验主要采用斐林试剂检测还原糖,通过观察溶液颜色变化来判断还原糖的存在。
三、实验器材1. 试剂:斐林试剂、蒸馏水、氢氧化钠、硫酸铜、葡萄糖标准溶液。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、烧杯、滴管、量筒、温度计。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将氢氧化钠和硫酸铜溶解于蒸馏水中,配制成斐林试剂。
2. 标准溶液的制备:准确量取葡萄糖标准溶液,配制成一定浓度的溶液。
3. 样品溶液的制备:取适量待测样品,加入蒸馏水溶解,配制成一定浓度的溶液。
4. 实验操作:a. 取两支试管,分别加入2mL待测样品溶液和2mL标准溶液。
b. 向两支试管中分别加入1mL斐林试剂。
c. 将两支试管放入50-65℃的水浴中加热约2分钟。
d. 观察溶液颜色变化。
五、实验结果1. 待测样品溶液:溶液颜色由蓝色变为砖红色,说明待测样品中含有还原糖。
2. 标准溶液:溶液颜色由蓝色变为砖红色,说明标准溶液中含有还原糖。
1. 斐林试剂检测还原糖的原理:还原糖在碱性条件下与斐林试剂发生反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
2. 本实验中,待测样品溶液和标准溶液均出现砖红色沉淀,说明待测样品中含有还原糖。
3. 在实验过程中,需要注意以下几点:a. 氢氧化钠和硫酸铜应现配现用,避免长时间放置导致试剂失效。
b. 加热过程中,应严格控制水浴温度,避免过高或过低影响实验结果。
c. 样品溶液和标准溶液的浓度应保持一致,以保证实验结果的准确性。
七、实验结论本实验通过斐林试剂检测还原糖,成功检测出待测样品中含有还原糖。
实验结果表明,斐林试剂是一种常用的糖类检测方法,具有操作简便、灵敏度高等优点。
糖的测定方法
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糖的测定方法对于糖的测定方法有许多,大致可分为三类1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,)2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基(-CHO)或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中,以各种依据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应简单,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法精确,但其操作简洁快速,试剂稳定,故被广泛采纳。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在肯定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数状况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作简单化,限制了其广泛应用。
(一)铁氰化钾法1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,依据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH (CHOH)4(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2,试剂1)1%的次甲基兰指示剂2)盐酸(水解作用)3)10%和30%的NaOH溶液4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)标定步骤称蔗糖1.0000g定容500ml取此液50ml于100ml容量瓶加hcl5ml摇匀65-70℃水裕15分钟取出冷却用30%NaOH中和加水于刻度倒入滴定管中取10ml1%铁氰化钾于锥形瓶中加10%NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒加热至沸保持一分钟加次甲基兰1滴马上以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。
用什么方法鉴定糖
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用什么方法鉴定糖要鉴定糖,可以使用多种方法。
下面将介绍一些常见的方法,包括视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等。
1. 视觉观察法:糖的外观可以提供一些初步的信息。
一般来说,糖是结晶状的或者是颗粒状的,具有不同的颜色,例如白色、黄色或棕色。
结晶状的糖往往比颗粒状的糖更纯净。
通过观察糖的颜色、结晶形状和大小等特征,可以初步判断糖的品质。
2. 颜色反应法:糖可以通过与一些特定试剂发生颜色反应来进行鉴定。
例如,糖可以与硝酸银溶液反应生成白色的沉淀,这是因为糖中的羟基与银离子结合形成不溶性盐。
此外,一些糖类(如还原糖)可以与法尼斯试剂发生颜色反应,产生深红色。
这些颜色反应可以提供进一步的信息来鉴定糖。
3. 结晶形态法:结晶形态法是通过观察糖的晶体形态来鉴定糖。
糖的晶体形态可以受到制备过程、纯度和结晶温度等因素的影响。
不同糖类(如蔗糖、果糖和葡萄糖等)的晶体形态具有不同的特征,例如形状、大小和聚集程度等。
通过比较不同糖类的晶体形态,可以初步鉴定糖的类型。
4. 熔点测定法:糖的熔点也是一种鉴定糖的方法。
不同糖类的熔点范围是不同的,因为它们的结构和物理特性不同。
例如,蔗糖的熔点约为160-186摄氏度,而葡萄糖的熔点约为146-150摄氏度。
通过测定糖的熔点范围,可以初步确定糖的类型。
5. 甜度测定法:甜度测定法是用来测定糖的甜度的方法,可以间接地鉴定糖。
常用的甜度测定方法有色度法和感官评价法。
色度法是通过测量糖溶液的吸光度或色度来确定糖的甜度。
感官评价法是通过人的味觉来判断糖的甜度。
一般来说,蔗糖的甜度较高,而果糖和葡萄糖的甜度较低。
通过测定糖的甜度,可以更准确地判断糖的品质和类型。
总之,鉴定糖可以使用多种方法。
视觉观察法、颜色反应法、结晶形态法、熔点测定法和甜度测定法等都是常用的方法。
通过综合应用这些方法,可以对糖进行准确的鉴定和分析。
当然,在实际应用中,还需要结合具体的实验条件和相关的知识来进行判断和鉴定。
糖定量测定的方法
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糖定量测定的方法糖是一类重要的有机化合物,广泛存在于生物体内,包括植物、昆虫、动物等。
糖的定量测定方法是研究糖的性质和应用的基础。
本文将为您介绍一些常见的糖定量测定方法。
首先,常见的糖定量测定方法之一是光度法。
该方法利用糖溶液对特定波长光的吸收特性进行测定,进而推测溶液中糖的浓度。
常用的光度法包括迈特随机法和费林试剂法。
迈特随机法是一种基于非酶促反应的测定方法,主要用于测定还原性糖的浓度。
该方法将糖溶液与硫酸铜和酒石酸混合后,在碱性条件下沉淀出红色的氢氧化铜,通过测定溶液颜色的强度来判断糖的浓度。
费林试剂法是一种原理类似的测定方法,适用于测定果糖、蔗糖等还原性糖的浓度。
该方法将糖溶液与费林试剂(含有薄荷醇)反应生成红色络合物,通过比色法或光度计来测定络合物的吸光度,从而确定糖的浓度。
除了光度法,还有一种常用的糖定量测定方法是色谱法。
色谱法是一种物质分离和定量分析的方法,适用于测定各种糖类物质的浓度。
常用的色谱法包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法(GC)是一种将化合物分离并测定的方法,常用于测定糖醇和还原性糖的浓度。
该方法将糖溶液蒸发成气体,并通过柱塞式气相色谱仪进行分离分析,最后根据峰面积或峰高来确定糖的浓度。
液相色谱法(HPLC)是一种将溶液中化合物分离并测定的方法,适用于测定各种糖类物质的浓度。
该方法将糖溶液通过液相色谱柱进行分离,再通过色谱检测器进行检测和定量分析,从而确定糖的浓度。
此外,还有一种常见的糖定量测定方法是比旋光法。
比旋光法是一种利用物质对旋光性质的测定方法,适用于测定旋光糖的浓度。
该方法通过光度计或比旋光仪测量旋光糖溶液的光学旋光度,从而推算糖的浓度。
总结起来,糖的定量测定方法有光度法、色谱法和比旋光法等。
这些方法各有优缺点,可以根据研究目的和要求选择合适的测定方法。
这些糖定量测定方法在食品、医药、生物等领域都有广泛的应用,为糖类化合物的研究和质量控制提供了重要的手段。
【最新】糖类的测定
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【最新】糖类的测定
糖类的测定是一种常见的化学分析方法,常用于食品、饮料和生物样品的分析。
糖类分析主要包括总糖测定和特定糖的测定。
1. 总糖测定:总糖测定常用的方法有酚硫酸法、安培洛斯法和酶法等。
酚硫酸法是最常用的总糖测定方法,利用硫酸和酚的反应产生橙黄色的复合物,通过比色法或光度法测定其吸光度,从而确定总糖含量。
安培洛斯法是一种利用甲酚和硫酸铁作用生成蓝色化合物的方法,测定总糖含量。
酶法是通过使用特定酶将糖转化为其他可测定物质,并通过测定这些产物来确定总糖浓度。
2. 特定糖的测定:特定糖的测定常用的方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、质谱法等。
HPLC是一种常
用且可靠的测定特定糖的方法,通过分离和检测样品中的糖类分子来确定特定糖的含量。
GC是一种基于气相色谱原理的方法,通过将样品中的糖类化合物转化为易挥发的衍生化物,然后通过气相色谱分离和检测来确定特定糖的含量。
质谱法是利用质谱仪对样品中的糖分子进行离子化并进行质量分析,从而确定特定糖的含量。
糖类的测定方法多种多样,科学家们可以根据实际需要选择合适的方法进行测定,以获得准确的糖类含量数据。
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样品溶 液预测Βιβλιοθήκη 样品溶液测定第31页/共93页
样品处理
如乳制品,加水溶解,移入250 ml 容量瓶中,慢慢加入5 ml乙酸锌的溶 液和5ml亚铁氰化钾溶液,加水至刻度, 摇匀后静至30分钟。用干燥滤纸过滤, 弃初滤液,收集滤液备用。
第32页/共93页
碱性酒石酸铜溶液的标定
用已知浓度的还原糖标 准溶液标定碱性酒石酸 铜溶液,计算还原糖因 数。
CH2OH
葡萄糖
CH2OH
C=O HO H H OH H OH
还原糖的测定是糖类定量 的基础
CH2OH
还原糖(还原剂)+氧化剂→产物
果糖
第23页/共93页
还原糖的测定方法
碱性铜盐法
铁氰化钾法 碘量法 比色法 酶法
直接滴定法 高锰酸钾法 萨氏法 蓝-爱农法
第24页/共93页
碱性铜盐法
斐林氏试剂: 甲液—CuSO4溶液 乙液—酒石酸钾钠、氢氧化钠溶液
第2页/共93页
主要内容
概述 可溶性糖类的测定 淀粉的测定 纤维及果胶的测定
第3页/共93页
概述
定义
糖类化合物是多羟基醛或多羟基酮以及水 解后能生成多羟基醛或多羟基酮的化合物。
CHO H OH H OH H OH
CH2OH
CHO
H H
CH2 OH OH
CH2OH
核糖
2-脱氧核糖
CHO H OH HO H H OH H OH
食品中主要含量指标 标志着食物的热量 食品中的风味物质(质构、形态、口感、 物化性质等) 食品工业生产中重要控制参数和指标
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食品中糖类物质的测定方法
直接法:根据糖类物质的理化性质作为分析原理 制定的各种分析方法。
间接法:根据已知食品的组成,扣除测定的水分、 蛋白质、粗脂肪、总灰分等含量以后,利用差 减法计算出来的,通常以无氮抽提物或总碳水 化合物来表示。
测定糖的一般程序
提取 纯化 排出干扰物质 测定
第13页/共93页
可溶性糖的提取
提取的目的:将被测组分(可溶性糖)提 取完全,非糖成分(干扰组分)尽量排除
常用提取剂: 水(40-50℃) 70%-75%乙醇溶液
乙醇作提取液适用于含酶多的样品 ,这样避免 糖被酶水解。乙醇浓度过高,糖溶在乙醇中。
第14页/共93页
✓氢氧化铝(铝乳):凝聚胶体
✓活性炭:吸附能力强、适用深色溶液的脱 色,对糖的损失较大,不常用
第20页/共93页
第21页/共93页
第22页/共93页
还原糖的测定
还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中, 分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游 离的半缩醛羟基的双糖都具有还原性。
CHO H OH HO H H OH H OH
准确吸取碱性酒石酸铜 甲液和乙液各5ml,置 于250ml锥形瓶中,加 水10ml,加玻璃珠2粒。
第29页/共93页
适用范围及特点
✓ 是在蓝-爱农容量法基础上发展起来的 ✓ 国家标准分析方法,适用于各类食品 ✓ 酱油、深色果汁等样品时,因色素干扰,滴定
终点常常模糊不清,影响准确性
特点:试剂用量少,操作和计算都比较简便、快 速,滴定终点明显
第30页/共93页
测定步骤
样品处理
碱性酒石酸铜 溶液的标定
缺点:脱色力较差;铅盐有毒
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可供选用的澄清剂
✓ 乙酸锌—亚铁氰化钾:(生成氰亚铁酸 锌沉淀)吸附或带去干扰物质,对除去蛋 白质能力强,脱色力差;适用于色浅, 富含蛋白质的样液
✓ 硫酸铜—氢氧化钠溶液: 碱性条件下,铜离子可使蛋白质沉淀
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可供选用的澄清剂
✓碱性乙酸铅:澄清能力强,可除去胶质、 蛋白质、色素、单宁等大分子物质,沉淀 颗粒大,可带走果糖,适用于深色糖浆、 废糖蜜等
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对选用的澄清剂的要求
能充分除去干扰物质 不改变被测糖分含量和理化性质 不干扰后面的分析测定
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可供选用的澄清剂
✓ 中性醋酸铅(最常用): 铅离子能与很多离子结合,生成难溶沉淀物,
同时吸附部分杂质(蛋白质、单宁、果胶、 特 有机酸等)
点
不会沉淀样液中的还原糖,室温下不形成铅糖 化合物
水作提取剂时注意事项
pro、氨基酸、多糖、色素干扰,影响过滤时间, 所以用水作提取剂应注意:
1)温度过高:可溶性淀粉及糊精溶出。 2)酸性样品:用碳酸钙中和,控制在中性。 3)鲜活产品,先经灭酶:加二氯化汞可防止
(二氯化汞可抑制酶活性)
第15页/共93页
可溶性糖的澄清 目的 除去提取液中存在的干扰物质
CH2OH 葡萄糖
CH2OH C=O HO H H OH H OH CH2OH
果糖
第4页/共93页
糖的种类
按分子大 小分
单糖 葡萄糖、果糖等
低聚糖 2~10个单糖,蔗糖、 麦芽糖等
多糖
10个单糖,如淀粉、 纤维素、果胶等
第5页/共93页
第6页/共93页
第7页/共93页
第8页/共93页
食品中糖类物质测定意义
总碳水化合物(100%)=100-(蛋白质+脂肪+水分+灰分)
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直接法
物理法 化学法 色谱法 酶法 重量法
相对密度法 折光法 旋光法
酶法
β-半乳糖脱氢酶 葡萄糖氧化酶
测定果胶、膳食纤维
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可溶性糖类的测定
可溶性糖类的提取和澄清 还原糖的测定 蔗糖的测定 总糖的测定
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学习目标
掌握: ➢ 食品中总糖和还原糖的测定原理、测定方
法及注意事项 ➢ 直接滴定法测定还原糖的原理、步骤、试
剂亚铁氰化钾和次甲基蓝的作用 ➢ 高锰酸钾滴定法测定还原糖的原理和方法
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学习目标
熟悉: 还原糖的提取分离技术 粗纤维、果胶、淀粉等测定的方法
了解: 碳水化合物、还原糖的概念和相关知识 测定碳水化合物仪器的正确使用方法
临用时吸取等量混合
总的原理:Cu2+→Cu+ → Cu2O
第25页/共93页
直接滴定法原理
天蓝色 深蓝色
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指示剂:次甲基蓝
第27页/共93页
直接滴定法原理 氧化型 蓝色 还原型 无色
第28页/共93页
直接滴定法
原理:
将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合, 立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀很快与 酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠 铜络合物。在加热条件下,以次甲基蓝作为指示剂, 用样液滴定,样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应, 生成红色的氧化亚铜沉淀,待二价铜全部被还原后, 稍过量的还原糖把次甲基蓝还原,溶液由蓝色变为 无色,即为滴定终点。根据样液消耗量可计算还原 糖含量。