蝴蝶兰组培课件
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授粉时先将母本的花粉块除去,再将父本 的花粉块用小镊子镊起,轻轻地放在母本的柱头 上,因柱头和花粉块上都有粘液,花粉在柱头上 粘得牢, 不必担心花粉块脱落。
一般授粉后不需要套袋，用铅笔写好标 牌,挂在授粉母株上。晴天气温较高时,授粉后 结实率可达 95% 以上。
2）蝴蝶兰果实无菌处理
当蝴蝶兰果实呈黄绿色时,要及时采收 ,否 则易裂果。蝴蝶兰果实为萌果,果实大小长约 6.5~12.5 cm,直径 0.7~1.6cm,每个果实中含种 胚上万至几十万粒,兰花种子具有未分化的特点, 只是一团未分化的胚细胞,胚小,种皮宽大,呈纺 锤型，没有贮藏营养物质的组织,
(3)培养基和培养条件 诱芽培养基：MS+BA3 诱导原球茎：MS+BA5+NAA0、5 增殖：MS+BA3+NAA0、2+活性炭1.5克/L 生根：1/2MS+BA1+NAA0.5 PH：5.4 培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒 温25℃。 生根之前可以进行过渡培养，不加激素。
兰花培养成功的关键，首先是形成无性繁殖系原球茎。
国 兰 原 球 茎 的 增 殖
2、花梗侧芽的培养
当兰花开花约一个月后，大 多选取已开有少数花的健壮 花序，切取带有花梗和芽的
节段
(1)采芽 将带腋芽的花梗进行冲洗，用10％的漂白粉 溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5％的漂白 粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净。 (2) 带腋芽花梗组织，接种到培养基上。
４）蝴蝶兰生根苗的移栽
生根苗移栽前,连同培养瓶一起从培养室转移 到炼苗棚 ,放置1周。
打开瓶口,炼苗2~3d 后移栽。
移栽时小心取出生根苗,洗去根部培养基,移栽到 基质是水苔的苗盘中。
空气温度保持在80%~90%，遮光率50%,光照强 度 10000Lx左右,环境温度控制在22 ~26℃。
因兰花有性杂交很容易，所以通过无菌发芽培养，简化了 发芽育种技术，也就促进了兰花的杂交育种工作。
原生种蝴蝶兰
杂种蝴蝶兰
親本 ♀： P.Princcess Kaiulani 親本 ♂： P.Ambotrana
1）蝴蝶兰授粉
人工授粉时,首先要选好亲本 ,雌花最好的授 粉时间是开花后 3~4d 。
.接种 茎尖接种以固体培养基为好，但因属而
异，如蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则 用固体培养基进行继代培养，而卡德兰属和石斛 属这一类易变褐枯死的属，以在液体培养基为好。
.继代培养 接种后1~2个月培养的茎尖即可形成原球茎球
状体，以后即发芽生根长叶。应在其发芽前把它切 成小块进行转移，让它继续不断地形成原球茎球状 体。这样连续的进行继代培养，短时间可以得到大 量的原球茎球状体。
所以 在自然条件下很难萌发,需要在无菌条 件下播种育苗。
蝴蝶兰无菌播种配方（简称A培养基 PH:5.5）
药品
花宝一号（Hyponex7-6-19)
用量（g/L）
3.0
蛋白胨 肌醇 磷酸三钙 香蕉 蔗糖 琼脂
2.0 0.1 0.2 100.0 20.0 7.0
果实采收后灭菌。将果实取出放在无菌纸上, 用手术刀剖开果实取出粉状种胚,将种胚均匀的 接种到灭过菌的培养基上。
试管苗的移栽用苔藓作基质
培养意义
兰花的种子极小，一个朔果中有1300~400000粒种子。薄薄 的种皮包着分化不完全的胚，没有胚乳，所以与其他植物种子 不同，很不容易发芽。 通过无菌播种，能在短期内获得大量无菌苗，并已成为工厂化 育苗的重要途径，同时也是杂交育种培育新品种的重要途径。 在实践上有很大的价值。
（左图为及时采收果实，右图为采收不及时的裂果）
药品
花宝一号 花宝二号 蛋白胨
肌醇 磷酸三钙
萌芽培养基配方（g/L）
用量
药品
用量
1.5
香蕉
100.0
1.5
糖
20.0
2.0
琼脂
8.0
0.1
PH值
5.2
0.2
药品
KH 2PO4 Ca(NO3)2.4H2O
(NH4)2SO4 FeSO4.7H2O MgSO4.7H2O
KC 培养基（mg/L）
用量 药品
用量
250 1000 500
MnSO4.4H2O 蛋白胨 糖
100.0 2000 20000
25
琼脂
7000~8000
250
PH值
5.2
3）蝴蝶兰种胚培养
中间转接
蝴蝶兰由播种到移栽过程
无菌播种 10d± 变成黄绿色 20d± 变为 绿色 10d± 米粒大小 50d± 萌芽90d± 长出2片叶30d± 苗高2cm 50d± 苗高 3~7cm、3~5条根，可移栽。
蝴蝶兰全部为附生植物,原生种约70多个,但经近百 年来的杂交育种,品种已上万种,成为花卉世界的一个大 家族。
蝴蝶兰
1、茎尖 兰花组织培养大多用茎尖和花序上的芽，因为叶片培养
的植株变异较大，难以控制。 以茎尖培养，要选择生长旺盛的植株，切下茎顶端2～3
厘米长的一段，若茎长而巨大，亦可切下5～8厘米或更长。先 用无菌水清洗干净，除去残留的鞘、叶基等，再在70% ～75% 酒精中浸泡10 ～30秒，取出后在5% ～10%漂白粉溶液中浸 10～ 15分钟，再用无菌水冲洗干净。然后在无菌解剖镜下剥 掉幼叶，用小刀切取小芽块。
蝴蝶兰的组织培养
主讲人：郑宇华
兰科花卉组织培养
兰科植物，在自然条件下主要靠分株繁殖， 繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖生产， 只有用组织培养方法进行大量繁殖。
ห้องสมุดไป่ตู้
蕙兰
春兰西神梅
蝴蝶兰产业发展的基本概况
蝴蝶兰原产我国台湾,以及东南亚的菲律宾、泰国、 马来西亚、印度等地的南亚热带雨林区,我国的台湾、 云南和西藏的南部是其自然分布的北限。
经 1~2 个月的管理,待小苗长出1~2对新叶时移 栽到营养钵中。随着苗子的成长,逐渐更换大的营 养钵。
在小苗管理期间要经常喷水,但水苔不能积水 或过湿 ,防止烂根。每隔 2~3 周追1次稀薄液体肥 料 ,定期喷洒杀菌剂 ,预防病害发生。当开花时根 据育种目标选择优良植株，然后进行无性繁殖。
蝴蝶兰生长情况
一般授粉后不需要套袋，用铅笔写好标 牌,挂在授粉母株上。晴天气温较高时,授粉后 结实率可达 95% 以上。
2）蝴蝶兰果实无菌处理
当蝴蝶兰果实呈黄绿色时,要及时采收 ,否 则易裂果。蝴蝶兰果实为萌果,果实大小长约 6.5~12.5 cm,直径 0.7~1.6cm,每个果实中含种 胚上万至几十万粒,兰花种子具有未分化的特点, 只是一团未分化的胚细胞,胚小,种皮宽大,呈纺 锤型，没有贮藏营养物质的组织,
(3)培养基和培养条件 诱芽培养基：MS+BA3 诱导原球茎：MS+BA5+NAA0、5 增殖：MS+BA3+NAA0、2+活性炭1.5克/L 生根：1/2MS+BA1+NAA0.5 PH：5.4 培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒 温25℃。 生根之前可以进行过渡培养，不加激素。
兰花培养成功的关键，首先是形成无性繁殖系原球茎。
国 兰 原 球 茎 的 增 殖
2、花梗侧芽的培养
当兰花开花约一个月后，大 多选取已开有少数花的健壮 花序，切取带有花梗和芽的
节段
(1)采芽 将带腋芽的花梗进行冲洗，用10％的漂白粉 溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5％的漂白 粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净。 (2) 带腋芽花梗组织，接种到培养基上。
４）蝴蝶兰生根苗的移栽
生根苗移栽前,连同培养瓶一起从培养室转移 到炼苗棚 ,放置1周。
打开瓶口,炼苗2~3d 后移栽。
移栽时小心取出生根苗,洗去根部培养基,移栽到 基质是水苔的苗盘中。
空气温度保持在80%~90%，遮光率50%,光照强 度 10000Lx左右,环境温度控制在22 ~26℃。
因兰花有性杂交很容易，所以通过无菌发芽培养，简化了 发芽育种技术，也就促进了兰花的杂交育种工作。
原生种蝴蝶兰
杂种蝴蝶兰
親本 ♀： P.Princcess Kaiulani 親本 ♂： P.Ambotrana
1）蝴蝶兰授粉
人工授粉时,首先要选好亲本 ,雌花最好的授 粉时间是开花后 3~4d 。
.接种 茎尖接种以固体培养基为好，但因属而
异，如蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则 用固体培养基进行继代培养，而卡德兰属和石斛 属这一类易变褐枯死的属，以在液体培养基为好。
.继代培养 接种后1~2个月培养的茎尖即可形成原球茎球
状体，以后即发芽生根长叶。应在其发芽前把它切 成小块进行转移，让它继续不断地形成原球茎球状 体。这样连续的进行继代培养，短时间可以得到大 量的原球茎球状体。
所以 在自然条件下很难萌发,需要在无菌条 件下播种育苗。
蝴蝶兰无菌播种配方（简称A培养基 PH:5.5）
药品
花宝一号（Hyponex7-6-19)
用量（g/L）
3.0
蛋白胨 肌醇 磷酸三钙 香蕉 蔗糖 琼脂
2.0 0.1 0.2 100.0 20.0 7.0
果实采收后灭菌。将果实取出放在无菌纸上, 用手术刀剖开果实取出粉状种胚,将种胚均匀的 接种到灭过菌的培养基上。
试管苗的移栽用苔藓作基质
培养意义
兰花的种子极小，一个朔果中有1300~400000粒种子。薄薄 的种皮包着分化不完全的胚，没有胚乳，所以与其他植物种子 不同，很不容易发芽。 通过无菌播种，能在短期内获得大量无菌苗，并已成为工厂化 育苗的重要途径，同时也是杂交育种培育新品种的重要途径。 在实践上有很大的价值。
（左图为及时采收果实，右图为采收不及时的裂果）
药品
花宝一号 花宝二号 蛋白胨
肌醇 磷酸三钙
萌芽培养基配方（g/L）
用量
药品
用量
1.5
香蕉
100.0
1.5
糖
20.0
2.0
琼脂
8.0
0.1
PH值
5.2
0.2
药品
KH 2PO4 Ca(NO3)2.4H2O
(NH4)2SO4 FeSO4.7H2O MgSO4.7H2O
KC 培养基（mg/L）
用量 药品
用量
250 1000 500
MnSO4.4H2O 蛋白胨 糖
100.0 2000 20000
25
琼脂
7000~8000
250
PH值
5.2
3）蝴蝶兰种胚培养
中间转接
蝴蝶兰由播种到移栽过程
无菌播种 10d± 变成黄绿色 20d± 变为 绿色 10d± 米粒大小 50d± 萌芽90d± 长出2片叶30d± 苗高2cm 50d± 苗高 3~7cm、3~5条根，可移栽。
蝴蝶兰全部为附生植物,原生种约70多个,但经近百 年来的杂交育种,品种已上万种,成为花卉世界的一个大 家族。
蝴蝶兰
1、茎尖 兰花组织培养大多用茎尖和花序上的芽，因为叶片培养
的植株变异较大，难以控制。 以茎尖培养，要选择生长旺盛的植株，切下茎顶端2～3
厘米长的一段，若茎长而巨大，亦可切下5～8厘米或更长。先 用无菌水清洗干净，除去残留的鞘、叶基等，再在70% ～75% 酒精中浸泡10 ～30秒，取出后在5% ～10%漂白粉溶液中浸 10～ 15分钟，再用无菌水冲洗干净。然后在无菌解剖镜下剥 掉幼叶，用小刀切取小芽块。
蝴蝶兰的组织培养
主讲人：郑宇华
兰科花卉组织培养
兰科植物，在自然条件下主要靠分株繁殖， 繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖生产， 只有用组织培养方法进行大量繁殖。
ห้องสมุดไป่ตู้
蕙兰
春兰西神梅
蝴蝶兰产业发展的基本概况
蝴蝶兰原产我国台湾,以及东南亚的菲律宾、泰国、 马来西亚、印度等地的南亚热带雨林区,我国的台湾、 云南和西藏的南部是其自然分布的北限。
经 1~2 个月的管理,待小苗长出1~2对新叶时移 栽到营养钵中。随着苗子的成长,逐渐更换大的营 养钵。
在小苗管理期间要经常喷水,但水苔不能积水 或过湿 ,防止烂根。每隔 2~3 周追1次稀薄液体肥 料 ,定期喷洒杀菌剂 ,预防病害发生。当开花时根 据育种目标选择优良植株，然后进行无性繁殖。
蝴蝶兰生长情况