白血病淋巴瘤免疫分型

CD19+
B-Lineage
Common
Pre-B CD10+ cig+ TdT+ sig-
B
Biblioteka Baidu
TdT+ CD10+ clgsig-
sCD3CD4CD8-
sig+ CD10+/clg+/TdT-
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B-ALL
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Pre-BALL
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白血病免疫分型的价值
确定ALL的细胞类型（B细胞或T细胞）和
ALL的分化阶段。
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非肿瘤B淋巴 细胞表型
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非肿瘤粒细胞、 单核细胞表型
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非肿瘤粒细胞、 单核细胞表型
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白血病免疫分型
• 根据白血病细胞表达的系列相关抗原， 确定其系列来源。如：淋系T/B、粒单系、 红系、巨核系等。 • 根据白血病细胞表达的系列分化其相关 抗原进一步分型。如：早前B，前B，普 通 B…
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AML-M3
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AML-M4
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AML-M4
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初治急淋分型
Acute Leukemia – Blasts Present >20%
CD7+ and/or CD2+
T-Lineage
Early Thymocyte CD2-/+ CD5-/+ Common Thymocyte CD2+ CD5+ Dual CD4+/CD8+ sCD3Mature Thymocyte CD2+ CD5+ CD4+ or CD8+ sCD3+ Early BPrecursor TdT+ CD10clgsig-
CD34+/CD117+/HLADR+ CD56+ CD15-/+ CD11b-, CD14-
Promyeloid
CD15+/CD117+/CD34-
Myelomonocytic & Monocytic
CD14+ CD4+/-
HLADRCD11b-, CD14-
HLADR+ CD15+
CD11b+
红系和巨核系的鉴定需要另外增 加二线抗体。 如:CD71、GPA、CD41、CD61
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谢谢!
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3
CD45/SS示意图
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抗原分布
• 表面,胞浆,核内 • 是共同检测还是分别检测?
表面 胞浆 核内
CD3, CD4, CD8, tetramer
cytokines
DNA
CD3,4,8, tetramer Cytokines
+
CD3,4,8, tetramer DNA
Cytokines DNA
+
+
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MM
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流式免疫表型诊断血液肿瘤的劣势
1、纤维化、硬化的骨髓可能没有足够的细胞分析。 2、细胞太多聚集或成团也可能没有足够的分析细胞。 3、硬化的组织也很难得到足够的分析细胞。 4、组织结构关系、形态关系丢失。 5、比例太低的单克隆B细胞很难检测到。
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流式免疫表型诊断血液肿瘤的劣势
6、没有异常免疫表型的T细胞淋巴瘤也可能很难检测。 7、异常的T细胞免疫表型不一定提示T细胞肿瘤，也可能 是感染引起的单核细胞增多症、反应性皮肤病、炎症性 疾病。 8、取材不好或样品保存不当，可能导致假阴性的结果。 9、HL的肿瘤细胞水平低，所以免疫表型检测或诊断HL不 可靠。 10、治疗或复发可能引起肿瘤细胞表面抗原改变。
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细胞类型鉴定
Borowitz et al (1993) AJCP 100:534-40. Steltzer et al (1993) Ann NY Acad Sci 667:265-280
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CD45/SS示意图
正常骨髓细胞
老化粒细胞 、噬酸细胞 早幼—成熟粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 正常前体细胞 M3、CML M4、M5 LGL CLL、ALL、CLD M0、M1、M2、
鉴定AML的特征。 对形态学上未分化的急性白血病有助于
鉴定细胞类型。
诊断一些少见类型的白血病。如：M6、
M7、M0等。
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多发性骨髓瘤（MM）
多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生性疾病。 正常浆细胞为CD38+/CD45dim/-，使用 CD38/CD45双标记检测外周血和骨髓标本，可以 准确划定浆细胞群。通常使用 CD38和CD45，结 合轻链检查，对多发性骨髓瘤细胞进行分析。 另外，正常浆细胞的表面标记为CD19+/CD56-， 而多发性骨髓瘤细胞通常为 CD19-/CD56+ 。 CD138目前认为是浆细胞最特异的指标。这样， 使用流式细胞仪对外周血或骨髓标本进行多参 数分析，并计算异常浆细胞含量，对于多发性 骨髓瘤的诊断和治疗评估具有重要意义。
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粒细胞分化与抗原表达关系图
Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine
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单核细胞分化与抗原表达关系图
Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine
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非肿瘤T淋巴 细胞表型
白血病的免疫分型
北京爱普益医学检验中心市场部 孙晓琳
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流式细胞术的基本概念
流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种 可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒 （通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对 特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人 工合成微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并 加以定量
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初治急白分型
Acute Leukemia – Blasts Present >20%
CD13+ and/orCD117+ and/orCD33+
CD7+ and/orCD2+
CD19+
Myeloid Lineage
T-Lineage
B-Lineage
Myeloid, no or minimal maturation
CD3,4,8, tetramer Cytokines DNA
+ +
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设门
6
08-03307
设门
全部 细胞
门内细胞
7
08-03307
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血液肿瘤分类进程
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白血病免疫分型的理论基础
白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原标 志是表达于正常造血细胞不同分化发育阶 段的分化抗原。虽然是恶性肿瘤细胞，但 仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而 仍可依据其抗原的表达谱对白血病/淋巴瘤 进行免疫分型。为了正确分析白血病/淋巴 瘤细胞，必须对正常造血细胞分化抗原的 表达模式有充分的了解。只有熟悉正常细 胞的抗原表达模式，才能辨认白血病/淋巴 瘤细胞的存在。
血液肿瘤细胞
嗜碱性粒细胞
成熟红细胞、血小板 细胞碎片
M4、M5、ALL
M6、M7、MM Pre-B-ALL 非血液来源细胞
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B淋巴细胞分化与抗原表达关系图
Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine
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T淋巴细胞分化与抗原表达关系图
Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine
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散射光信号和荧光信号
前向角散射光（FSC, Forward Scatter） 入射激光的前向散射光信号 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光（SSC, Side Scatter） 入射激光90角的散射光信号 细胞粒度及细胞内相对复杂性 荧光素与特异抗体结合，荧光抗体与细胞 抗原结合越多，产生的荧光信号越强。