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卵母细胞体外成熟的影响因素

卵母细胞体外成熟的影响因素

卵母细胞体外成熟的影响因素乔利敏1,2 黄成定2 李向臣1 姚雅馨2 关伟军13 马月辉1(1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100094 2甘肃农业大学动物科技学院兰州730070) 【摘要】随着哺乳动物体外受精、细胞核移植技术的不断深入,人们对成熟卵母细胞以及哺乳动物胚胎需求量日益增加,卵巢内丰富的卵泡资源是胚胎工程迅速发展的基础。

本文从卵巢因素、供体、体外培养条件和成熟培养液中添加成分等对卵母细胞IVM的影响进行了分析,为胚胎的体外生产提供理论基础和科研依据。

关键词:卵母细胞;体外成熟;影响因素 胚胎移植技术成熟与否是胚胎工程技术成败的基础,而卵母细胞体外成熟质量又是决定胚胎移植技术成功的关键。

IVM可以为体细胞核移植提供大量的受体细胞,也为体外受精提供大量的MⅡ期卵母细胞,因此IVM已经成为胚胎体外生产和体外受精的重要环节之一。

虽然近几年来在卵母细胞的体外成熟方面已经取得了飞速发展,但是卵母细胞的体外成熟还存在很多问题。

现就卵母细胞体外成熟的影响因素进行概述。

1 卵巢因素和供体对卵母细胞体外成熟的影响1.1 卵巢所处性周期的影响有学者研究表明,卵巢所处性周期阶段影响卵母细胞的成熟培养,在无黄体期卵巢上的卵母细胞比黄体期和黄体前期卵巢上卵母细胞成熟效果要好。

崔亚利等〔1〕根据卵巢上是否有明显突出卵巢表面的黄体,将卵巢分为黄体期和卵泡期,分别在两期卵巢上卵泡中抽取卵母细胞进行体外成熟培养发现,二者无统计学差异,但是卵泡期卵母细胞成熟培养效果(63.9%)较好,说明卵巢性周期阶段对卵母细胞体外成熟存在一定影响,但影响不大。

2000年郭继彤〔2〕对繁殖季节和非繁殖季节山羊卵母细胞进行研究发现,非繁殖季节可采集到比繁殖季节更多的可用卵母细胞,并且非繁殖季节的屠宰山羊卵巢卵母细胞成熟培养效果(74.1%)优于繁殖季节的屠宰山羊卵巢卵母细胞(67.7%)。

在非繁殖季节屠宰的山羊,几乎没有大卵泡的发生。

猪卵母细胞体外成熟的影响因素

猪卵母细胞体外成熟的影响因素
第 3 O卷 第 3 期 21 0 1年 6 月








Vo . O No 3 13 .
J u n l fHu z o gAg iut rl nv ri o r a ah n r l a iest o c u U y
Jn qt 20 24 u e2 l ,8  ̄ 8
如何 优 化猪 卵母 细 胞体 外 成熟 体 系 , 得 卵母 lmmo IL 谷 氨 酰 胺 、 0 n / 使 l . / 1 g mL表 皮 生 长 因 子
肼 细胞 核 、 同步成 熟 , 得较 强 的发 育 能 力 , 为 当 ( 质 获 成
今亟需 解决 的 问题 L 。然 而 , 卵母 细 胞 的成 熟 是 t / 庸 霉素 、 0t / 4 ] 猪  ̄ mI g 5 g mL 硫 酸 链 霉 素 、 0 p F  ̄ 1 F ;

个复 杂 的生 理 过 程L , 5 主要 包 括 细胞 核 和 细胞 质 NC U-3 D B ; 卵 液 ( .1 透 明 质 酸 酶 的 ] S 2E P S 脱 ; 0 %
1 . 方 2 法
BS 。 的变化 , 同时又是一 个受 多因素调 节 的过 程 , 严格 依 DP )
赖其生 长的卵泡 环境 _ 。 6 ]
1 材 料 与方 法

及生 物学基 础研究诸 多方 面 的探 索提供 了强 大的技 11 材 .
洗 卵液 ( B ) 自 Gic 司 , 马血 清促 性 DP S 购 b o公 孕
精技术 (VF 、 浆 单精 子 注 射 (C I 和 S NT 技 腺 激素 ( MS 、 绒 毛 膜 促性 腺 激 素 ( C 是 宁 I )胞 IS) C P G) 人 h G) 术等成 功与否 的关键 L 。相对 猪体 内成熟 的卵母 细 波 激素制 品厂生 产 , 他试剂 如未特 别注 明 , 1 ] 其 均购 自

猪卵母细胞体外培养质量评价指标

猪卵母细胞体外培养质量评价指标
生长因子
生长因子是一类促进细胞生长和分化的蛋白质,在猪卵母细胞体外培养过程中, 如胰岛素、表皮生长因子等对卵母细胞的发育和成熟也有重要作用。
能量物质和代谢物质含量
能量物质
猪卵母细胞在体外培养过程中需要消耗大量的能量物质,如葡萄糖、氨基酸、维生素等。这些物质含量的变化会 影响卵母细胞的发育和成熟。
代谢物质
通过检测培养液中生长因子的含量,如 IGF-1、EGF等,评估卵母细胞的生长和 发育潜力。
能量物质和代谢物质检测
检测糖分
通过检测培养液中的糖分 含量,评估卵母细胞的能 量代谢状况。
检测乳酸
通过检测培养液中的乳酸 含量,评估卵母细胞的代 谢状况和细胞活性。
检测氨氮
通过检测培养液中的氨氮 含量,评估卵母细胞的蛋 白质代谢状况。
用。
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感谢您的观看
培养液中各种营养物质的含量 和比例对卵母细胞的发育和质
量有重要影响。
激素的作用
一些激素如促性腺激素等对卵 母细胞的发育和成熟具有重要
作用。
环境因素
温度、湿度、氧气浓度等环境 因素对卵母细胞的体外培养也
有重要影响。
CHAPTER 03
猪卵母细胞体外培养质量评 价指标
卵母细胞形态与成熟度
卵母细胞形态
CHAPTER 02
猪卵母细胞体外培养概述
猪卵母细胞的生物学特性
猪卵母细胞的形态
呈圆形或卵圆形,具有一个大的卵黄和透明带。
猪卵母细胞的发育阶段
猪卵母细胞在不同的发育阶段,其形态和大小也会有所不同。
猪卵母细胞体外培养技术
01
02
03
卵母细胞的采集
通常从猪卵巢中采集未成 熟的卵母细胞,然后进行 体外培养。

不同因素对牛卵母细胞体外成熟培养效果的影响

不同因素对牛卵母细胞体外成熟培养效果的影响

用屠 宰场卵巢采集卵母细胞 , 卵母细 胞采集方 法、 从 卵巢
性周期 阶段 以及培养液中血清浓度 3 方面研究 了影响 个 牛卵母细胞体外 成熟 的因素 , 旨在 完 善和优 化 牛卵母 细 胞体外成熟技术 环节 , 为进一步研究工作奠定基础 。
1 材 料 与 方 法
11 材料 .
1 2 方 法 .
c tsfo dfee tetos y l a h a e e p na cp bl y ③ temau aina dc a a ert ye rm i rn sru c sh dtesmed v l me tl a a it ; h t rt n l v g ae n f c e o i o e i
5. 和 3. 、66 没有显著差异 ( >O0 )③培养液中添加 2 F S组的卵母细胞 成熟率和奄 _ 66 95 3 . %, P .5; 0 B A o
卵裂 率显 著 高于 1 F S和 3 F S组 ( < O 0 ) 0 B 0 B P .5 。 关键 词 : ; 牛 卵母 细胞 ; 外成 熟 体
Ab t a t Th fe t fc l c i n m e h d,e t o s c ce a d c n e ta i n o CS o h a u a i n c lu e o sr c : e e f c s o o l t t o e o s r u y l n o c n r to f F n t e m t r t u t r f o
响进行 了分析 。结果表 明 : 不 同采 卵方 法的采 卵效果存在 差 异 , 成 熟培 养 和体 外受精 情 况差异 不显 ① 但 著( P>0 0 ) ② 从 卵 泡 期 和 黄 体 期 卵 巢采 集 到 的 卵母 细 胞 的 体 外 成 熟 率 和 卵裂 率 分 别 5 . , .5; 为 9 7

氧分压_培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响

氧分压_培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响
关键词:猪;体细胞核移植;氧分压;生长因子;培养基
Effect of Oxygen Tension, Culture Media and Growth Factors on in vitro Development of Porcine Somatic Cloned Embryos
PAN Deng-ke, LIU Ji, FENG Shu-tang, MU Yu-lian, ZHANG Li
Key words: Pig; Somatic cell nuclear transfer; Oxygen tension; Growth factor; Culture medium
收稿日期:2006-11-22;接受日期:2007-02-14 基金项目:国家“十五”科技攻关项目(2004BA717B) 作者简介:潘登科(1972-),男,吉林九台人,博士,研究方向为猪转基因克隆和干细胞。Tel:010-62815893;Fax:010-62899982;E-mail:pand@
。通讯作者冯书堂(1945-),男,河北大名人,研究员,研究方向为小型猪培育和生物技术。E-mail:fst508@
4期
பைடு நூலகம்
潘登科等:氧分压、培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响
1187
0 引言
【研究意义】目前,体细胞克隆猪效率较低,克 隆胚胎的囊胚发育率在 10%左右,囊胚细胞数约 25~ 35,而体内囊胚的细胞数约为 200。Machaty 等[1]研究 发现体外培养的囊胚总细胞数低于体内胚,Koo 等[2] 发现猪的体细胞克隆胚胎(NTEs)以及体外受精胚胎 (IVFEs)的细胞数,均明显低于体内胚胎,这反映 了猪的体外培养体系还不理想。因此,胚胎体外培养 体系的改进将推动猪胚胎体外生产技术的发展,提高 体细胞克隆猪的效率。【前人研究进展】近年来猪孤 雌激活以及体细胞核移植胚胎的培养方面已经取得了 较大进展,但与体内生产的胚胎相比,体外培养胚胎 的早期发育率还很低,发育环境不理想[3]。胚胎培养 基是影响胚胎发育的一个重要因素。目前,用于猪早 期胚胎体外培养比较成功的培养基有 NCSU-23、 PZM-3 和 G2[4]等,其中 NCSU-23 是最常用的[5]。然 而该培养基尚有不足,如胚胎发育延迟,细胞数较少。 用 Yoshioka 研究出的 PZM-3 培养猪的体内受精胚, 囊胚率和细胞数都得到了提高[6]。氧浓度影响胚胎体 外培养是近期研究的一个热点[7~11]。胚胎体外培养通 常采用 5% CO2,95%空气(20% O2)的气相环境;另 一种培养气相是 5% CO2﹕5%~7% O2﹕88%~90% N2,接近生殖道的氧浓度[12]。理论上,低氧可减少培 养中自由基和活性氧(ROS)的形成,而活性氧对细 胞有毒害作用,易造成 DNA 损伤和脂质过氧化反应[13]。 由于猪的卵黄富含脂滴,猪胚胎对脂质过氧化反应特 别敏感,因此低氧可能有利于胚胎的发育。目前,两 种气相究竟哪种更好还有争议,研究表明有的培养基 在低氧环境下更有利于胚胎发育,而有些培养基在普 通气相较好。胚胎在体内发育过程中,母畜生殖道分 泌的生长因子对附植前的胚胎发育起着重要的作用[14], 如胰岛素、胰岛素样生长因子、表皮生长因子(EGF) 以及碱性成纤维因子(bFGF)等。在体外培养胚胎过 程中,向培养液内添加生长因子是否对胚胎的发育具 有促进作用,研究表明各种类型胚胎在不同阶段的添 加效果并不统一[15~17],对胚胎囊胚发育率和总细胞数 的影响也不一致。【本研究切入点】目前,猪的胚胎 体外培养的系统仍还不够理想,胚胎体外发育能力较 差。【拟解决的关键问题】研究对不同氧分压、几种 培养基及添加生长因子(EGF 和 bFGF)对体细胞核 移植克隆胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响,优 化猪体细胞克隆胚胎体外培养条件,提高克隆胚胎的

《生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响》范文

《生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响》范文

《生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响》篇一摘要:本研究旨在探讨生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响。

通过实验操作,分析不同处理条件下卵母细胞的成熟率和胚胎发育情况,为山羊繁殖技术提供理论依据和实践指导。

一、引言山羊作为重要的家畜之一,其繁殖效率和后代质量对于养殖业的发展具有重要意义。

近年来,生长因子和C型钠肽在动物生殖领域的研究逐渐受到关注。

它们通过调节生殖系统的生理过程,对卵母细胞的成熟及胚胎发育产生重要影响。

因此,研究生长因子和C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响,对于提高山羊繁殖效率和后代质量具有重要意义。

二、材料与方法1. 实验材料选用健康成年山羊作为实验动物,收集其卵母细胞;生长因子和C型钠肽购自生物试剂公司,其他试剂为分析纯。

2. 实验方法(1)卵母细胞的收集与处理从健康成年山羊的卵巢中收集卵母细胞,将其分为两组,一组作为对照组,另一组分别添加不同浓度的生长因子和C型钠肽进行处理。

(2)卵母细胞的成熟培养将处理后的卵母细胞置于培养液中,在特定条件下进行成熟培养。

(3)胚胎的体外培养与观察将成熟后的卵母细胞与精子共同培养,进行体外受精,然后观察并记录胚胎的发育情况。

三、实验结果1. 生长因子对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响(1)卵母细胞的成熟率在添加了生长因子的实验组中,卵母细胞的成熟率显著高于对照组(P<0.05)。

其中,适中的生长因子浓度对卵母细胞的成熟最为有利。

(2)胚胎的发育情况实验组中早期胚胎的发育率也显著高于对照组,且胚胎的质量较好。

2. C型钠肽对山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响(1)卵母细胞的成熟率C型钠肽的添加对卵母细胞的成熟率也有一定的促进作用,但效果不如生长因子明显。

(2)胚胎的发育情况C型钠肽处理组的早期胚胎发育情况与对照组相比,无明显差异。

四、讨论生长因子和C型钠肽在山羊卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中发挥了重要作用。

卵母细胞体外成熟培养液的改良及研究

卵母细胞体外成熟培养液的改良及研究

卵母细胞体外成熟培养液的改良及研究卵母细胞体外成熟培养液是指能够模拟卵巢微环境,促进卵母细胞发育成熟的培养液。

由于其能够为体外受精提供条件,因此在体外受精辅助生殖技术中起着重要作用。

然而,传统的卵母细胞体外成熟培养液中存在一些问题,如成熟率低、不稳定性差等,因此有必要对其进行改良和研究。

首先,对于卵母细胞体外成熟培养液的改良方向,可以从以下几个方面入手。

1.组成成分的改良:可以优化培养液的蛋白质、激素和营养物质的组成,以提高卵母细胞的成熟率和质量。

例如,可以调整培养液中雌激素和孕激素的浓度和比例,以提高卵母细胞的发育和成熟。

2.pH值和温度的优化:培养液的pH值和温度对卵母细胞的成熟和发育起着至关重要的作用。

因此,可以通过优化这两个参数,提高卵母细胞的成熟率。

例如,可以将培养液的pH值调整到适合卵母细胞发育的范围内,同时将温度控制在适宜的范围内。

3.添加生长因子:生长因子在卵母细胞的成熟过程中起着重要的调控作用。

因此,可以添加适量的生长因子到培养液中,以提高卵母细胞的成熟率和质量。

4.寻找新的培养基:除了改良和优化传统的培养液外,还可以通过寻找新的培养基,进一步提高卵母细胞的成熟率和质量。

近年来,一些研究者已经发现了一些新的培养基,如基于胶原或蛋白质水凝胶的培养基,能够显著提高卵母细胞的成熟率和质量。

另外,卵母细胞体外成熟培养液的研究也是十分重要的。

通过对卵母细胞培养过程中的细胞生物学、分子生物学和遗传学等方面的研究,可以深入了解卵母细胞的成熟过程和分子机制,从而为卵母细胞的体外培养提供理论基础和指导。

总之,通过改良和研究卵母细胞体外成熟培养液,可以提高卵母细胞的成熟率和质量,促进体外受精辅助生殖技术的发展。

体外培养时间和表皮生长因子对牦牛卵母细胞成熟及孤雌胚胎体外发育的影响

体外培养时间和表皮生长因子对牦牛卵母细胞成熟及孤雌胚胎体外发育的影响

民 族 大 学 学报
自然
学版
N。 2 ol 3
d o i : I O . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 3 - 4 2 7 1 . 2 0 1 3 . 0 6 . 0 4
体 外培养 时 间和 表皮生长 因子对牦牛 卵母细 胞成熟
及孤雌胚胎 体外发 育 的影响
牦牛主要生活在青藏高原 3 0 0 0  ̄5 0 0 0米海拔 的高寒地带, 是青藏高原及周边地区牧民的主要经济来源, 其 对低温、低氧、低压等的恶劣高原环境有较强的适应能力, 能充分利用其他家畜难以利用的高山草原¨ . 此外, 牦牛是我国珍贵的畜种资源和宝贵的基 因库.因此, 利用现代 的胚胎工程和细胞生物学技术保护牦牛遗传资源、 提 高牦 牛 生产性 能 、 加速 牦牛 的 繁育 体系 、研 究 牦牛 生长 发育 及其 调 控模 式等 对充 分 发挥 牦牛 资源 特性 、促 进 牧 区发展 具 有 重要意 义 . 卵母细胞的体外培养技术是开展牦牛胚胎工程工作 的主要屏障之一. 卵母细胞的体外成熟可以为体外生产 胚胎提供大量 的MⅡ期 卵母细胞. 如何优化牦牛卵母细胞 的的体外 成熟体系, 使得细胞核与细胞质 同步成熟, 以便获得较 强的发育能力,已成为当下急需解决的问题【 j 珥 J . 迄今为止, 牦牛的卵母细胞体外成熟培养 尚未建立 个比较完善 的体系.虽然其他 哺乳动物 的体外生产胚胎 已基本建立, 但不同物种之 间的卵母细胞培养体系存
p g / m L C a C 1 2 . 2 H 2 0+0 . 1 g g / m L Mg C 1 2 . 6 H 2 0+0 . 1 5 g g / m L谷氨酰胺 +2 % 必需氨基酸 +l % 非必需氨基
在成都青 自江屠宰场, 牦牛被屠宰 后, 采集牦牛的卵巢, 立即放入含青霉素8 0 mg / L 和链霉素 1 0 0 m g m的

影响猪卵母细胞体外成熟的若干因素

影响猪卵母细胞体外成熟的若干因素
中 图分 类 号 : 8 3 ¥ 1 文献标志码 : A 文 章 编 号 :0 2—10 (0 8 0 0 8 0 10 32 2 0 )3— 14— 3
利用 屠宰 场废 弃 的猪 卵 巢 资 源 , 过 卵 巢 卵母 通 细胞 系统 的体 外 成 熟 (V 、 外 受 精 (V ) IM) 体 IF 和体 外发 育 获得猪 胚 胎 的过 程 是 开 展 猪 种 质 资 源保 存 、 育种 、 基 因药物 、 转 细胞 克 隆 、 复合 体 ( O s发 育 机 C C)
中 1% N S 0 C 。选取胞 质 均匀 、 被 3层或 4层 以上 包 致 密卵 丘细胞 、 直径为 2~ m 的 C C , 照 文献 8m O s参
发 育 阶段 卵 泡 的卵母 细 胞 对 其体 外 成 熟 ( 体 排 出 极 和 细胞 活力 等 ) 体 外 受 精 的影 响 , 开展 猪胚 胎 及 为 发 育生 物学 和种 质资 源保存 研究 提 供参 考 。

2 0℃冷冻保存 , 备用。
卵母 细胞 体 外 成 熟 培 养 系统
近年 来 , 猪卵 巢 卵母 细 胞体 外 成熟 培 养 和 体 外 受精
技术 研究 取 得 一 定 进 展 , 仍 停 留在 研 究 阶段 。 但
12 不 同卵母 细胞 复合体 的体 外成 熟培 养 系统 . 12 1 不 同培 养 液 .. 分别 为 2种 , 一种 为添 加 1%p F 卵 泡直径 2~ 第 0 F( 8
熟培 养作 为一 项 非常 有发 展前 途 的生物 技术 和畜 牧
1 U m C 1 g m 7 —E 0I / l G、 / l1 H 以及 双 抗 ( 、 青 链 霉 素 ) 10 I 的改 良 T M1 9培 养 液 ; 二 种 为 各 0 U C 9 第 改 良 N S 2 养液 , C U 3培 成分 与 T M19基 本 相 同 , C 9 不

卵巢生理状态、精子获能时间及精卵共孵育时间对猪体外受精及胚胎发育的影响

卵巢生理状态、精子获能时间及精卵共孵育时间对猪体外受精及胚胎发育的影响
50 4 ) 16 2
570 ; . 2 4 0 2 华南农业大学 动物科学学院 , 广东 广州

要 : 的体 外 受精 受温度 、 猪 多精 受精 等 因素影 响一 直效 率较 低 。 文研 究 了卵巢 生理状 态、 子 本 精
获 能时 间及 精 卵共 孵育 时 间对 猪体 外 受精及 胚胎 发 育 的影响 。 实验 结 果表 明 :1从 存 在黄 体 的 卵 ()
共 同孵 育 的时 间是体 外 受精 的关 键 。关 于精 子 体外 过改进 。
获 能 时间普 遍 采用 的方 式是 获 能 1h但 也有 人认 为 1 . 猪 卵巢和 精 液 , .2 1
猪 卵 巢来 自本 地 的屠 宰 场 ,
不需 要额 外 获能 ,因为精 卵 共 同孵 育时 就在 受精 液 精 液来 自广 东温 氏集 团水 台原种 猪 场 的优 秀 纯种 公
好, 卵裂率 和 囊胚 率显 著 高 于其他 获 能 时 间( < .1 。( ) 卵共 孵育 6h和 1 受精 和胚 胎 发 P O0 ) 3 精 2h对 育无显 著影 响 , 孵 育 1 但 2h的囊胚 率稍 高 于 6h的 。 关键词 : ; 外 受精 ;胚胎 发 育)男 , 1 8 一 , 硕士。
1 — 5
黑 龙江动 物繁殖
第1 9卷
第 1期
2 1 0 年 3
S YAN HI YANJ U I
卵 巢 生 理 状 态 、 子 获 能 时 间及 精 卵 共 孵 育 时 间 精
对猪体 外受精及 胚胎发 育的影 响
石俊 松 , 赵云 翔 ’罗绿 花 , , 周
(. 1广东温氏食品集团有 限公 司研究院 , 广东 新兴
荣 , 郑少 芳 , 周
秀 , 麦然 标 , 吴珍 芳

哺乳动物卵母细胞体外成熟培养中影响因素分析

哺乳动物卵母细胞体外成熟培养中影响因素分析

外 培养 成 熟 、 和胚 胎 发育 的研 究 . . 受精 上海 实 验动 物 [ 3 李 子 义 , 景 和 , 兴 参 , . 同激 素 剂量 对 幼 鼠超 排 及 6 J 谭 孙 等 不
科学 ,0 34 2 0 ,.
超排卵质量的影响. J I. J 黑龙江畜牧兽医,9 9 ( )24 19 , :2 . 3
小 试管小 [ 1 尹海林 ,陈秀兰. 鼠卵母细胞体外培养成熟及 “ 6] 鼠” 的研究. J [. J 遗传 ,9 93 18 ,. 郑凤娇. 小鼠超数排卵的试验方法. l 【 生物学通报 , J [2 杨慧 , 6 J
20 02, 2: . 1 49
高敏芝 , 汪玉宝 , 吴晓云 , 小 鼠生殖泡期卵母 细胞体 等.
层 卵丘 细 胞合 成 物 逐 级 传 送 给 卵母 细 胞 起 重 要 作 认 为 ,卯母 细 胞 的 成熟 率 与采 集 C C 时 的 卵泡直 Os 用 。弓超 通过试 验对 牛卵母 细胞 不 同形式 的处 理 , 讨 径关 系密切 , 卵母 细胞 体外 培养 过程 中 , 在 宜选 择 卵 论 细胞 问隙连 接对 于其 体外 成熟 的影 响作用 。在最 巢 发育 正 常 的卵泡采 集 ,不 宜选 择发 育过 大或 过 小 适 于 卵母 细胞 体 外 成 熟 的 浓度 (. I/L 条 件下 , 的边 际 卵泡l。在 挑选 卵 母 细胞 时 要尽 可能 挑 选 卵 1 m ) 2U 1 2 1
分挖 掘优 良母 畜 的繁 殖潜 力 ,加 速 良种 家畜 的繁殖 纤维 中心最多 ,但 尚未发生致密化 ;到直径 3 ~ l . 5Im 5 T 和育 种进 程 ,而且 为胚 胎 工程 的其它 研究 以及拯 救 卵泡 , 颗粒 细 胞突 起 开始 退化 , 卵母 细胞 微 绒 毛 自透

FSH+LH添加方式、半胱氨酸、EGF对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响

FSH+LH添加方式、半胱氨酸、EGF对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响

FSH+LH添加方式、半胱氨酸、EGF对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响许惠艳;苏克同;何若钢;梁世忠;卢晟盛;卢克焕【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2010(023)003【摘要】为探讨IVM液中FSH+LH添加方式、半胱氨酸和表皮生长因子(EGF)不同浓度对猪IVM卵母细胞早期孤雌发育的影响,将在不同成熟体系中IVM 44 h后的卵母细胞经化学激活后放入NCSU-23中培养,分别于第2、7天统计分裂率和囊胚发育率.结果表明:①IVM液添加有FSH+LH且在培养22 h后更换添加有FSH+LH的IVM液继续培养22 h,其分裂率(83.76±9.95) %和囊胚发育率(23.49±7.74) %显著高于添加FSH+LH连续培养44 h、中间不换液的处理(P<0.05);②IVM液中添加1.2 mmol/L半胱氨酸的囊胚发育率(28.13±10.9) %显著高于添加0、0.3、0.6 mmol/L半胱氨酸的处理,差异显著(P<0.05);③IVM液中添加10 ng/mL EGF的囊胚发育率(23.49±7.74) %显著高于其他浓度处理(P<0.05).可见:在该研究条件下,IVM液添加有FSH+LH且在培养22 h后更换添加有FSH+LH的IVM液继续培养22 h,并添加1.2 mmol/L半胱氨酸、10 ng/mL EGF,有利于促进猪IVM卵母细胞早期孤雌发育.【总页数】5页(P885-889)【作者】许惠艳;苏克同;何若钢;梁世忠;卢晟盛;卢克焕【作者单位】广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005;广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005【正文语种】中文【中图分类】S828【相关文献】1.猪IVM卵母细胞孤雌激活及in vitro发育试验 [J], 董雅娟;柏学进;李建栋;程明;张涌2.EGF对牛卵母细胞成熟及孤雌发育能力的影响 [J], 马红3.HMG、EGF和TGF-α对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响 [J], 关伟军;梁素丽;李向臣;跃华;刘鹏;马月辉4.成熟液中不同来源促性腺激素对猪卵母细胞早期孤雌发育的影响 [J], 兰宗宝;韩晓慧;梁世忠;何若钢;卢晟盛;卢克焕5.Leptin对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后早期胚胎发育的影响 [J], 侯文文;王维;陆文昊;曹祖兵;张运海因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

表皮生长因子对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

表皮生长因子对小鼠卵母细胞体外成熟的影响
E F对小 鼠卵母细胞体 外成熟及 受精有促进作 用 , G 可提 高体 外成熟 率及囊 胚孵化 率 , 可促进受 精卵通 过二细 还 胞阻滞。 [ 关键词 ] 小 鼠; 卵母 细胞 ; 体外成熟 ; 体外受精 ; 表皮生长因子
[ 中图分类号 ]/2. / 12 3
[ 文献标识码 ] A
o 0 1, , 1 g mL d d t a s in f a ti ce s n t e r t f lso y t o ain, o v r f 0, . 1 5, 0 r / in’ u e a sg i c n r a e i h ae o a tc s r t i c i n b fm o h we e , t e rt so ac e lso y ta d 2 c l b o k alv ain i h o p ih t e c l r d me i m t h ae fh th d b a tc s n 一 el lc l it n t e g u swh c h u t e d u wi e o r u h
A s atObet e T td ee et feiem l rw hfc r( G )o ei ioma rt n b t c : jc v os yt f c o pd r a go t t E F nt nv r t ao r i u h f ao h t u i
第4 2卷 第 5 期
20 0 8年 l 0月
哈尔滨医科大学学报
J OURNAL OF HARB N DI I ME CAL UNI VERSTY I
Vo. 2. . 14 N0 5
0 t. 0 8 c 2 0 .
47 4
表皮生长 因子对小 鼠卵母 细胞体 外成熟的影响

不同培养时间对猪卵母细胞体外成熟效果的影响

不同培养时间对猪卵母细胞体外成熟效果的影响
验 的 目的 为 了 找 出 A、 B级 卵 母 细 胞 适 宜 的 培 养
镜 下观 察 卵母 细胞核成 熟情 况 ; 再经 电激活
处理 ,观 察 卵裂率。 结果表 明 :5 4 4 h和 8h 的 A级 卵母 细胞 成熟培 养后 的成 熟率 差异
不显 著 ( .5 ;7h和 5 尸 O )4 0 0h的 B级 卵母
( ylrnd s) H 2 2 M19 粉 ) Sg a M1 8 ; H a o iae : 4 7 ; 9 ( :im , 2 5 u 丙 酮 酸 钠 :o im p rvt, 4 5 ; 牛 血 清 蛋 白 : S du yu a P 6 2 e B A。 9 4 ;碳酸 氢 钠 : a O ,5 6 ;氯化 钠 : S A 67 N HC ¥ 7 1
G 1 2 谷氨 酰胺 : lt n , 3 2 。 65 ; Gua e G 1 6 mi
体视 显 微镜 : L MP S J pnO y u pi O Y U ,a a l mp s t O — cl O ,T C 2 养 箱 : oma 1 1 U A T e— a C . D; O 培 L F r 3 , S h r 3
绿 叶空 调净 化 有 限公 司 ; R 一 C Y 3细胞 融合 仪 : 波 宁 新 芝生 物科 技公 司 。
体外 成熟 培养 的 目的之一 ,就是 提 供 大量 可 供体 外受 精 用 的卵母 细胞 。在卵母 细胞 的成熟 培
养 中 ,有 许 多 因素均 不 同程度 地 影 响到 猪 卵母 细
摘 要 : 验 回 收 中 等 卵 泡 ( - i) 试 2 6m l 中的 1
A、 B级 卵母 细 胞 , 然后 把 卵母 细胞 分 为 l 2

猪卵母细胞体外成熟的研究进展

猪卵母细胞体外成熟的研究进展
节 ,受 到 众 多 因素 的调 控 ,其 调 控机 制 非 常复 后 ,线粒体又移 向核周 围,形成幼稚 型线 粒体 。
杂。
随着卵母细胞 的成 熟 ,粗面 内质 网减少 ,滑面 内
尽 管猪 卵母细胞体外成 熟技术 至今 已经取得 质 网增多 ,到成 熟晚期 ,滑面 内质 网变得 很少 。
P E 的活性, 使卵母细胞 内的c M 处 AP c c 5 氨酸磷 酸酶 。此外 ,C c iB d 2酪 y l n 在激活M F 磷酸二酯 酶 (D ) P 从而抑制卵母细胞成熟u 。 的同时还激活 了p 9 o ,p 9 o 控制微 管组织 中 于高浓度状态, 3m s 3m s 心 的变化,影响纺锤体的形成u 。
. 母 细胞胞质均 匀、形态完好 、裸卵较少 ,果好 。初情 期前 的青年 母猪 的卵巢 卵母细胞
生长 因子对 卵母细胞成 熟的作用是正 向的。
体外成熟后 可得到后代 ,但 是效率不如 成年母猪 发 育卵泡 中存在 多种促生长 因子及 其受体 ,它们 卵巢体外成 熟 的卵母细胞 ,即使是性成 熟后还没 同时影响卵膜细胞 和颗粒细胞 的增殖和分化 ,并
丘细 胞 的有无 和层 数 ,猪 卵丘 一 卵母 细胞 复合体 外 成 熟 培养 中 ,研 究较 多 的就 是 表 皮 生长 因子 分5 级 。A :扩 展 且颜色 较 暗 ,卵丘细 胞有 5 (G ) G 是一 种 卵母 细 胞成 熟 的诱 导 剂 ,能 级 E F 。E F
层 以上包 裹 的胞 质均 匀 的卵母 细胞 ;B :卵丘 促 进C C 的体外 成熟 ,在C C 上 存在E F 级 Os Os G 受体 , 细胞 颜色 较浅 且稀疏 的,卵丘 细胞 有5 以上包 随着卵泡 的发育表达增 强 ,排 卵前达到 高峰 。 层

成熟培养基对猪卵母细胞的影响

成熟培养基对猪卵母细胞的影响

孤 雌 囊胚 细胞数 的影 响差异显 著( 分别 为 3 .和 3 . 84 7 6个细胞 )P 0 5 。N S 2 成 熟培养基 能够使 胞质成 熟完 (< . ) C U 3 0 全 。提 高囊胚细胞数 ,有利 于妊娠 的发 生。可见,以N S 2 为基 础培 养基 的体 外成熟液有利于猪 卵母 细胞体外 CU 3
郭云云 ,付 博 ,马 红 ,康雅雅 娣 ,刘
(. 1 东北农业大学动物科学技术学院 ,哈尔滨 1 0 3 ;2 黑龙江省农业科学院 ,哈 尔滨 500 . 10 8 50 6)

要 :评估 N S 2 和 T M19两种 培养基对猪 卵母 细胞 体外成熟 、孤雌激 活以及核移植重构胚发 育的影 CU3 C 9
s trtdh mit , ee t efs p lr o y Wema etemaueo ctswt ate o e ei auae u d y) s l e t it o d . d h tr o ye i p r n g n t i c d h r a b h h c
和 核 移植 重 构 胚 操 作 ,14h 观 察 囊胚 数 。 结 果表 明 ,N S 2 组 与 T M19 对 卵母 细 胞 体 外 成 熟 (81%和 4 后 CU 3 C 9组 6. 8
6 . %) 7 5 、孤 雌囊胚 率(84 %和 3 . %) 5 3. 0 76 0 与核移植 囊胚率 (37 %和2 . %) 2. 9 1 8 无显著影响 ( > . ) 3 P 0 5 ,但是 两者对 0
第4 卷第6 3 期
2 1年 6 02 月








4 () 1  ̄ 9 36: 6 1

猪卵母细胞体外成熟培养的研究

猪卵母细胞体外成熟培养的研究

Ab s t r a c t T h e s t u d y c o mp a r e d t h e e f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n o f p o r c i n e f o l l i c u l a r l f u i d( P F F ) ,d i f f e r e n t k i n d s o f h o r m o n e 。 d i f -
( C o l l e g e o f An i ma l S c i e n c e/ K e y L a b o r a t o r y o f T a r i m An i ma l Hu s b a n d y r S c i e n c e& T e c h n o l o g y
Ke y W or ds Po r c i n e;Oo c y t e s;I VM
随着 胚 胎 工 程 技 术 的研 究 与 应 用 , 卵母 细 胞 作
猪 卵 母 细胞 体 外 成 熟培 养 的研 究
王艳 萍 曾维斌 杨顺邦 贺 昌萍
( 塔里木大学动物科学学院/ 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室 , 新疆 阿拉尔 8 4 3 3 0 0 )
摘要 本研究对 比了不 同浓 度的猪卵泡液 、 激素 、 卵 泡直径 对猪 卵母 细胞 体外 成熟 培养 的影 响。结果 表 明 : ①在 T C M1 9 9+
S t u d y o n Po r c i n e Oo c y t e s i n Vi t r o Ma t u r a t i o n
Wa n g Ya n p i n g Ze n g We i b i n Ya n g S h u n b a n g He Ch a ng p i n g

猪卵母细胞体外成熟及电激活后发育能力的研究

猪卵母细胞体外成熟及电激活后发育能力的研究

猪卵母细胞体外成熟及电激活后发育能力的研究徐小明;杨春荣;胡军和;窦忠英【期刊名称】《自然科学进展》【年(卷),期】2006(16)3【摘要】探讨了不同的成熟培养液及外源激素对猪卵母细胞体外成熟培养及电激活后孤雌胚胎发育能力的影响.结果表明:(1)改良M199(mM199)组猪卵母细胞成熟率显著高于M199组,且这两组又较NCSU-23组能极显著提高卵母细胞的成熟率.(2)孕马血清(PMSG)+人绒毛膜促性腺激素(hCG)+促卵泡素(FSH)组卵母细胞成熟率略高于FSH+促黄体素(LH)组,两者卵母细胞成熟率极显著高于尿促性腺激素(hMG)组.(3)含胎牛血清(FBS),猪卵泡液(PFF),表皮生长因子(EGF)的培养液较对照组在卵母细胞成熟率上无显著差异,但均能显著提高电激活后的卵裂率.添加EGF组桑囊率明显高于不添加组.但分别添加FBS和PFF组较对照组在桑囊率上均无显著差异.(4)卵丘细胞扩散与卵母细胞第一极体排出之间无直接相关性,但扩散程度好能提高电激活后的卵裂率.【总页数】4页(P361-364)【作者】徐小明;杨春荣;胡军和;窦忠英【作者单位】西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100;西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100;西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100;西北农林科技大学,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S828.3【相关文献】1.乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响2.不同化学激活方法和电激活参数对猪体外成熟卵母细胞早期孤雌发育的影响3.乙二胺四乙酸钠对猪卵母细胞的体外成熟和孤雌激活后早期发育的影响4.不同成熟液对猪卵母细胞体外成熟和体外受精后早期胚胎发育的影响5.Leptin对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后早期胚胎发育的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

不同因素对猪卵母细胞体外成熟影响的研究进展

不同因素对猪卵母细胞体外成熟影响的研究进展
维普资讯
LV IEST K A OC ND POUL RY| T NOU RY№ 9 ST 2 2
更 大 的耐 冻 性 。 验 中G 期 卵母 细 胞 试 V 经玻 璃 化 冷 冻 后 , 经 体 外 成 熟 、 雌 再 孤 激 活 , 得 比M Ⅱ期 较 高 的卵 裂 率 。 获 这
1 物 理 因 素 11 卵巢 回收 时 间及 温 度 .

[ 4 鹏 秦 , 云 龙 , 景 和 . 乳 动 物 脑 】秦 李 谭 哺
胎学. 北京 : 学 出版 社 。0 1 科 2 0 【J张德 福 , 忠 明 , 平 . 物 胚 胎 生 物 技 5 张 徐 动 术 发展 概 况. 海 实验 动 物 科 学 ,0 3 2 : 上 2 o ( )

结 果 显 著 低 于 新 鲜 卵母 细胞 的 卵 裂
Hale Waihona Puke 不 同因素对猪卵母 细胞 体外戚 熟影 晌 的研究进展
刘 永 罗 光彬 邹 伟
率 ,这 表 明 冷 冻 过程 仍 对 卵母 细胞 的
发 育 能 力造 成 了 明显 的影 响 。所 用 的
冷 冻 保存 程 序 仍 然 存 在 很 大 的改 进 空
19 2 1  ̄1 2
其 他 哺 乳 动 物 卵 母 细 胞 体 外 成 熟 培 养 时 问通 常 是 2 ~ 4h 也 即 l , 2 2 , 但 d 猪 比较 特 殊 , 常 需 要4 ~ 8h 右 才 通 4 4 左
能 达 到 核 成 熟 。在 2 的 核 成 熟 率 几 4h 乎 为 零 , 且 从 3 左 右 到 7 , 成 而 0h 2h 核
术 为胚 胎 来 源 开 辟 了一 个 新 途 径 。获 得 具 低 , 均 卵裂 率 为 4 .%m 与 其 他 哺 乳 平 6 7 。
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装满玩具的屋子
甲组儿童 锁门
乙组儿童 开门
破坏
温和
2、认知相符理论和一致性理论
认知相符理论是以认知趋向一致的状态或倾向性来解 释个人心理活动和外部行为变化的社会心理学理论。
本世纪50年代,美国心理学家麦克盖尔提出了“认知相符”的 概念。其认为,人具有一种理智上的动力倾向性,其信念、概念或 态度如果与其他观点或许为发生矛盾,只要他意识到,他就会自发 地调整自己原来的观点,去与正常的逻辑关系相符。以此观点开展 的研究统称为认知相符理论。
三、 精神分析学派
➢ 认为驱动人们行为的动力是本能 ➢ 用潜意识、性欲、生的本能与死的本能 等概念来解释人们行为的内驱力 ➢ 人格由本我、自我与超我构成 ➢ 用冲突、焦虑和各种防卫作用等概念来 解释人格层次间的关系
四、社会交换理论
代表人物:霍曼斯
基本观点:趋利避害是人 类行为的基本原则,人们之间 的互动是物质与非物质的一种 交换,是最大限度地获取奖赏、 快乐,最大限度地减少代价。
4.剥夺与满足命题 个体或群体重复获得相同奖赏次数越多,则该奖 赏对个体的价值越小。
5.侵犯与赞同命题 当个体行为没有得到期待的奖赏或受到出其所料 的惩罚时,他可能产生愤怒情绪,从而出现侵犯行为;反之,如果个体行为 得到、甚至超过预期的奖赏,或没有受到预期的处罚,他可能会高兴,就会 赞同该行为。
6.理性命题 在选择采取何种行动时,人们会选择当时他所认识到的 行动结果与获得这一结果的概率之乘积较大的那一种行动。也就是说,人们 在行动前不仅要计算行动产生的报酬的价值,还要考虑获得这一报酬的可能 性。报酬价值大但得到的概率小,会降低人们行动的可能性;反之,报酬价 值大且得到的概率也大,则会提高行动的可能性。
人就是一个场,人的心理现象具有空间的属性, 人的心理活动也是在一种心理场或生活空间中发生 的。也就是说,人的行为是由场决定的。心理场主 要是由个体需要和他的心理环境相互作用的关系所 构成。它包括有可能影响着个人的过去、现在和将 来的一切事件,这三方面的每一方面都能决定任何 一个情境下的人的行为。心理场也称为心理动力场 或心理生活空间。
认知失调理论——费斯廷格 平衡理论——海德 归因理论——韦纳
“一致性理论”——也称为和谐理论,代表人物为奥 斯古德和坦南包姆。基本观点是:人在接受新信息后,一 般来说会为保持内部一致性而调整原有态度。
“认知——情感相符理 论”,代表人物为罗森伯格。 基本观点是:人的认知与情 感一般相符,人对态度对象 在感情上发生变化也会引起 认知的变化。
勒温把决定行为的“全部影响的事实”分为三种:
(1)准物理事实即心目中的自然环境;
(2)准社会事实即心目中的社会环境;
(3)准概念事实即思想概念与现实的差异。
“准事实”或“准环境” 是指在人与环境相互作用中, 现实反映可能有影响的那些事实,也就是勒温所说的心理环境。 因此,准事实或准环境和客观现实有时是相应的,有时又是不 相对应的。
• 每一种人的行动都在重复某种东西, 是一种模仿。模仿是最基本的社会关系, 社会就是由互相模仿的个人组成的群体。
2、社会学习理论
代表人物:班杜拉
➢ 强调人的行为和环境的相互作用 ➢ 强调认知因素 ➢ 强调观察学习 ➢ 强调自我调节过程
学习的三种机制: 联想(巴甫洛夫的狗) 强化(斯金纳的猫) 观察(儿童的学习)
1、场论和群体动力学理论
B = f(PE)
B:行为 P:人 E:环境
行为B等于个人P和环境E的函数f,人的行为依赖于人 和环境的相互作用。也就是说,不同的人对同一环境可产 生不同的行为,同一个人对不同的环境亦可产生不同的行 为,甚至同一个人在不同的情境下,对同样环境也可能产 生不同的行为。
勒温认为,凡属科学的心理学都必须讨论整个 人的情境,即人和环境的状态,这就是需要有一个 趋同的名词将人和环境阐述为同一情境的部分,也 就是一个人的心理世界或心理场。
一朝被蛇咬,十年怕井绳 望梅止渴 熟能生巧 鹦鹉学舌
班多拉PEB交互决定模式
P(人)
E(环境)
B(行为)
观察学习四过程: ①注意过程 ②保持过程 ③动作再现 ④动机过程
二、认知理论
强调认知结构的意义,认知是个体以已有 的知识结构来接纳新知识,同时旧的知识结构 也从中得到改造与发展。
❖ 场论和群体动力学理论 ❖ 认知相符理论和一致性理论
五、符号互动理论
人的行动是有社会意义的,人们之间的 互动是以各种各样的符号为中介进行的,人 们通过解释代表行动者行动的符号所包含的 意义而做出反应,从而实现他们之间的互动。
符号:指所有能代表人的某种意义的事 物,比如语言、文字、动作、物品甚至场景 等。一个事物之所以成为符号是因为人们赋 予了它某种意义,而这种意义是大家(相关 的人们)所公认的。
基本假定
① 人对事物所采取的行动是以这些事物对人的意义为 基础的;
② 这些事物的意义来源于个体与其同伴的互动,而不 存于这些事物本身之中;
③ 当个体在应付他所遇到的事物时,他通过自己的解 释去运用和修改这些意义。
感 谢
感 谢
感 谢
R1 > R2
C1
C2
则左方会体验到内疚 → 补偿作为
霍曼斯提出社会交换论的六个普遍性问题。
1.成功命题 个体的某种行为能得到相应奖赏,他就会重复这种;某 一行为获得奖赏越多,重复行为的频率就越高;
2.刺激命题 相同的刺激可能引起相同的或相似的行为。
3.价值命题 某种行为的结果对个体越有价值,他重复这种行为的可 能性越高。
reward (报酬)-cost(代价)=outcome(后果)
“报酬”包括物质财富、心理财富(精神奖励、 鼓励等)、社会财富(身份地位、声望);
“成本”包括体力、时间、放弃享受、忍受惩 罚、精神压力等。
R1
R2
=
C1
C2
公平 → 心理平衡 → 继续交往
R1 < R2
C1
C2
则左方会抱怨、消极愤怒 → 中止交往
第二章
社会心理学的主要理论流派
• 行为主义理论 • 认知理论
心理学的
• 精神分析理论
• 社会交换论 • 符号互动论
社会学的
一、 行为主义理论(S——R)
❖ 模仿理论 ❖ 社会学习理论
1、模仿论
• 代表人物:塔尔德、米勒和多拉德等
• 模仿是个体在社会生活中主动仿效他 人言行的社会心理学现象。模仿主要通 过维护某种刺激反应关系和强化的形式 得以完成。
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