白芷质量标准研究

[ 摘要] 目的: 对白芷药材进行质量标准研究。方法: TLC 法检定白芷药材中 4 个香豆素类成分, HPLC 法测 定 白芷 中 2 个主要成分的含量。结果与结论: 白芷药材中同时检定出欧前胡素 、异欧 前胡素、比克白芷 素及水化氧 合 前胡素, 欧前胡素和异欧前胡素的含量分别不得 低于 0. 1% 和 0. 04% 。
第 29 卷第 7 期 2004 年 7 月
中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica
Vol. 29, Issue 7 July, 2004
[ 5] Takashi Yoshida, Kaoru Seno, Y okiko Takama, et al . Bergenin derivatives from M allotus japonicus. Phyt ochemistry , 1982, 21 ( 5 ) : 1180.
Study on constituents in rhizome of Astilbe chinensis
CHEN Hao1 , CHEN Ting2, LI Jian-xin3 , XU Qiang2 ( 1. Dep artment of Chinese Medicinal Prescription, China Pharmaceutical University , N anjing 210038, China; 2. State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology , School of Life Sciences , N anjing University , Nanjing 210093, China;
3. I nstitute of Medicinal Chemistry , Nanj ing University , N anjing 210093, China)
[ Abstract] Objective: To study the chemical constituents in rhizome of Astilbe chinensis. Method: The constituents were isolated with column chromatographies and the structures were identified by physicochemical properties and spectral analysis ( UV , IR, MS, 1H- NMR, 13C-
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第 29 卷第 7 期 2004 年 7 月
中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica
Vol. 29, Issue 7 July, 2004
前胡素、异欧前 胡素进行了 HPLC 含量测 定。在此 基础上制定出白芷药材的质量标准, 为中药白芷等 质量评价提供了科学依据。 1 仪器与试药
显高于另外 2 种溶剂, 因此选择甲醇为提取溶剂。 3. 2. 1. 2 不同提取方法比较 取川白芷( 大) 样品 约 0. 5 g 若干份, 精密称定, 准确加入甲醇 50 mL , 分 别以冷浸 24 h, 超声提取及热回流进行处理, 补充失 去的重量, 滤过, 取续滤液过微孔滤膜, 进行液相色 谱分析比较。根据表 1 的结果, 选用回流 9 h 为提取 方法。
从图 1 中可清晰地鉴定出欧前胡素、异欧前胡
图 3 白芷样品 HPLC 色谱图 1. 欧前胡素; 2. 异欧前胡素
3. 1. 2 线性 关系考 察 精密 称取欧 前胡素 5. 04 mg, 异欧前胡素 5. 05 mg, 加甲醇定容至 50 mL, 分别 取此溶液 0. 5, 1. 0, 1. 5, 2. 0, 2. 5 mL , 加甲醇定容至 25 mL, 制得 5 个不同 浓度的 标准品 溶液, 进 样 20 LL, 按上述条件进行色谱分析。以峰面积为纵坐标,
[ Key words] A stilbe chinensis; 11- O- galloylbergenin; 4- O- galloylbergenin; catechin
[ 责任编辑 李 禾]
白芷质量标准研究
肖永庆1* , 李 丽1, 游小琳1, 张 村1, 谷口雅彦2, 马场 - _ 江2
( 1. 中国中医研究院 中药研究所, 北京 100700; 2. 大阪药科大学, 日本 大阪 569- 1094)
[ 6] Chen X in-M in, Takashi Yoshida, Tsutomu Hatano, et al . Galloylarbutin and polyphenols from Beergenia purpurascens. Phytochemistry , 1987, 26( 2) : 515.
NMR and 2D-NMR) . Result: The structures were identified as bergenin ( 1) , 11- O- galloylbergenin ( 2) , 4- O- galloylbergenin ( 3) , catechin
( 4) , respectively. Conclusion: Compound 3 was isolated from Astilbe for the first time.
[ 收稿日期] 2003-02-15 [ 基金项目] 国家/ 中药现代化研究与产业化开 发0 项目攻关 课 题( 99-929-01-24-4) [ 通讯作者] * 肖永庆, Tel: ( 010) 84040221, Fax: 861084040221, E-mail: X. heqi @ yeah. net
鉴定, 纯度均为 98% 以上。白芷药材由产地采集或 购自各地药材公司, 经本所黄璐琦博士鉴定为伞形 科植物 A . dahurica 的干燥根。 2 化学成分的 TLC 鉴定 2. 1 供试品及对照品溶液的制备 2. 1. 1 供试品溶液制备 称取不同产地白芷药材 粉末( 过 40 目筛) 各 2. 0 g, 分别置具塞三角瓶中, 加 甲醇 20 mL, 超声提取 20 min, 放置, 滤过, 弃去初滤 液, 续滤液置蒸发皿中, 水浴蒸干溶剂, 残物以甲醇 洗出, 定容至 1 mL, 配成 2. 0 g#mL- 1的供试品溶液。 2. 1. 2 对照品溶液制备 准确称取白芷中主要化 合物对照品各 1 mg, 置具塞刻度度管中, 加甲醇配制 成 1 g#L- 1的对照品溶液。 2. 2 白芷中化学成分的鉴定 2. 2. 1 将白芷供试液 2 LL, 对照品溶液 5 LL, 点于 同一 MERCK SG60 F254预制板上, 以氯仿- 甲醇( 10B1) 展开 2 次, 在 365 nm 紫外灯下观察其荧光斑点( 见 图1) 。
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中国中药杂志
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Vol. 29, Issue 7 July, 2004
各成分进样量为横坐标作图得 2 条直线, 其回归方 程 为: 欧前胡素 Y = 3 354 251. 42, X - 508. 27, r = 1. 000 0; 异欧前胡素 Y= 3 755 994. 09X - 9 042. 38, r = 0. 999 9。 3. 1. 3 精密度试验 精密吸取上述 2 种对照品溶 液, 重复进样 5 次, 欧前胡素和异欧前胡素 5 次测定 值的相对标准偏差分别为 1. 3% , 1. 5% 。 3. 2 样品测定 3. 2. 1 提取方法考察 3. 2. 1. 1 不同溶剂提取比较 取川白芷( 大) 样品 约 0. 5 g 共 6 份, 精密称定, 分别用甲醇、醋酸乙酯, 乙醚回流提取 3 h, 回收溶剂, 残渣以甲醇洗至量瓶, 定容至 25mL, 再各取 2 mL 稀释至 5 mL , 过微孔滤 膜, 各进样 20 LL, 进行液相色谱分析。结果表明, 甲 醇提取的样品中欧前胡素和异欧前胡素的峰面积明
[ 关键词] 白芷; 欧前胡素; 异欧前胡素; 水化氧化前胡素; 比克白芷素 [ 中图分类号] R 282. 5 [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1001- 5302( 2004) 07- 0654- 04
中药白芷为伞形 科植物白芷 Angelica dahurica ( Fisch. ex. Hoffm. ) Benth. et Hook. ex Franchபைடு நூலகம்et Sva
图 2 白芷药材中化学成分鉴定 18. 异紫花前胡苷; 19. 水化氧化前胡素; 20. 比克白芷素
从图 2 上可以清晰地鉴定出比克白芷素和水化 氧化前胡素。 2. 2. 3 结果 欧前胡素、异欧前胡素和水化氧化前 胡素是白芷中的主要成分, 含量较高, 比克白芷素为 白芷的特异性成分, 以这 4 种成分作为对照品可以 鉴定白芷。 3 有效成分的 HPLC 含量测定 3. 1 含量测定方法学考察 3. 1. 1 色谱条件 十八烷基键合相 Kromasil C18色 谱柱( 4. 6 mm @ 250 mm, 5 Lm) ; 流动相甲醇- 水( 70B 30) ; 检测波长 254 nm; 流速 0. 9 mL#min- 1。结果表 明, 在此条件下白芷中欧前胡素, 异欧前胡素与其他 组分均能达到基线分离( 见图 3) 。
图 1 白芷药材中化学成分鉴定 1. 祁白芷( s) ; 2. 祁白芷( m) ; 3. 祁白芷( l) ; 4. 川白芷( s) ; 5. 川白芷( m) ; 6. 川白芷( l ) ; 7. 禹白芷( s) ; 8. 禹白芷( m) ; 9. 禹白芷( l) ; 10. 川白芷( b) ; 11. 川白芷( g) ; 12. 杭白芷( b) ; 13. 杭白芷( g) ; 14. 余杭白芷( b) ; 15. 余杭白芷( g) ; 16. 内江白芷; 17. 绵阳白芷; 18. 比克白芷醛; 19. 欧前胡素; 20. 异欧前胡素( 1~ 17. 图 2 同)
[ 7] Reiko Sauo, Gen- ichiro Nonaka, Itsuo N ishioka. Gallic acid est ers of
bergenin and norbergenin from M allotus j aponicus. Phytochemi stry , 1990, 29( 1) : 267. [ 8] 陈召南, 孙石生, 徐 琪, 等. 野梅根利胆活 性成分的研究. 中 草 药, 1986, 17( 1) : 2. [ 9] 陈海生, 徐一新, 廖时萱, 等. 川赤芍化学成 分的研究. 第二军 医 大学学报, 1994, 15( 1) : 72.
高效液相色谱仪: Waters 600 泵, Waters 600 控制 器, Waters 486 紫外检测器。甲醇为色谱纯, 水为纯 净水, 其他 试剂均为 AR 级。薄层板为 Merck SG60 F254预制板。
对照品欧前胡素, 异欧前胡素, 水化氧化前胡素 及比克白芷素由本所肖永庆博士从白芷药材中分离
素, 而比克白芷醛只在个别样品中能检测到, 可能由 于其不稳定且含量低, 在采收加工过程中已变化成 其他成分。 2. 2. 2 将白芷供试品溶液各 2 LL, 对照品溶液各 5 LL, 点于同一 MERCK SG60 F254预制板上, 以石油醚乙醚( 5B4) 展开 2 次, 在 365 nm 紫外灯下检视( 见图 2) 。
f orma baizhi Hort 的干燥根。主要有川白芷、杭白芷、 禹白芷、祁白芷等药材品种, 化学成分主要为香豆素 类成分, 国内学者对其进行了较为详细的研究并进 行了含量测定[ 1, 2] 。其中以欧前胡素、异欧前胡素含 量较高, 且各地白芷药材中均含有这 2 种成分。因 此, 作者对 8 个产( 销) 地的 17 个白芷样品中 4 个主 要香豆素类化合物进行了 TLC 定性分析; 同时对欧