血小板手工计数法

血小板手工计数
血小板计数，指单位体积血液中所含的血小板数目。

血小板是血液中最小的细胞，可保护毛细血管的完整性。

正常范围
(100~300)×10^9/L
临床意义
血小板计数有助于临床上止血和血栓性疾病的诊断和鉴别诊断。

增多:见于原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、急性大出血、急性溶血、恶性肿瘤、感染、缺氧、创伤、骨折等。

减少:见于以下情况:
血小板生成减少(见于急性白血病和再生障碍性贫血等)
血小板破坏过多(见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进等疾病)
血小板消耗增加(见于弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等)。

血小板手工计数法操作步骤：
1、于清洁试管中加入稀释液0.38ml(草酸铵)。

2、准确吸取毛细血管血20μl,擦去管尖外附着血液,置于血小板稀释液内,立即充分混匀。

待完全溶血后再次混匀1min。

3、取上述均匀的血小板悬液1滴,注入计数池内,静置10~15min,使血小板下沉。

4、用高倍镜计数中央1个大方格(即400个小格)内血板,乘以0.2×10^9/L即为每升血液内血小板数。

下图可见最多的是双凹圆盘状的红细胞，两个红色箭头所指的是白细胞，而那些比红细胞小很多，具有折光性的“小点”则是血小板。

公式解读
①×5：将5个中方格的血小板数换算为1个大方格的血小板数；
②×10：将1个大方格（0.1ul）的血小板数换算为1.0ul中的血小板数；
③×20：血液的稀释倍数；
④×10e6：由1.0ul换算为1L；
所以，5个中方格内数到多少个血小板，该标本的血小板计数就是多少（×10e9/L）。

注意：
1、全部用具和稀释液要特别清洁，显微镜仔细的擦净，无任何斑点玻璃器械清洁光滑，因为显微镜目镜，物镜，计数池和盖片上的尘埃可被误认为血小板。

2、刺血一定要深（3mm）。

3、血小板容易聚焦，在滴入计数池前充分混匀，用力太大会破坏血小板，
太小则分布不均匀，因此要掌握适当。

4、一定要等血小板完全下沉后再计数，计数要快和仔细，不要把污染微粒看成血小板。

血小板结构与白细胞胞浆相似，在光线及焦距调节恰当时半透明有轻微折光性，边缘与中心结构一致，具有一定的形态。

大小相差一般不很悬殊，而污染颗粒的大小不一相差悬殊，无一定形态，当旋转调节器时，有时很黑，有时很亮。

5、EDTA依赖的血小板聚集，对于这种标本，需要采集末梢血或者不抗凝静脉血，再进行手工计数。

6、大血小板/小红细胞干扰，此时直接进行手工计数即可，可无需另外采血。