细胞的形态与记数

2 . 熟悉血细胞计数板
• 血细胞计数板呈长方形，有2个计数室。每个
计数室分为9个大正方格，每个大格边长1 mm,
计数室的底与盖玻片间的距离为0.1mm，即每
大格的容积为1mm×1mm ×0.1mm =0.1mm3 • 四角的每个大格被分为16个中格；中央的大格 被分为25个中格，每个中格被分为16个小格。
（二）洋葱表皮细胞的制片与观察
1. 取一擦净的载玻片，滴1滴1%碘液；
2. 将洋葱嫩茎用小刀切成小块，取1块肉 质鳞叶，用镊子在其内表面轻轻撕下一 小块表皮，再用剪刀剪成小块，置于载 玻片的染液中铺平； 3. 染色2-3分钟，盖上盖玻片； 4. 先低倍，再高倍。细胞核被染成深黄色。
细胞计数
细胞计数的原理
物镜测微尺
目镜测微尺
测微尺的使用操作
• 1. 卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺有刻度一面向下装在目 镜镜面上，再旋上目镜的上透镜。 2. 将镜台测微尺有刻度一面朝上放在载物台上夹好，使测微 尺刻度位于视野中央。调焦至看清镜台测微尺的刻度。 3. 小心移动镜台测微尺和目镜测微尺(如目镜测微尺刻度模 糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的“0”点一 直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重复的直线(图)。 4.记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下 式计算目镜测微尺每格的长度等于多少μm 目镜测微尺每格的长度/ μm=镜台测微尺的格数/目镜测微尺 的格数
5. 细胞浓度计算
• 将四大格的细胞总数除以4，得出平均每大格的细
胞数，每大格的容积为0.1mm3 ，乘以10000即为 1000mm3（1ml）。 • 不同稀释倍数细胞悬液的细胞浓度可用下式计算： 细胞浓度（细胞数/ml)=( 四大格的细胞数/4） ×10000 ×稀释倍数
显微测量的原理
• 应用显微镜的成像原理，同时借助显微 镜的镜台测微尺和目镜测微尺，两尺配 合使用，进行测量和运算，得出细胞的 大小
细胞的形态与记数
湖州师院 杨建民
目的与要求
1.初步掌握临时制片技术和显微绘图的方法； 2.熟悉光镜下动、植物细胞的基本形态、结 构； 3. 掌握活细胞计数的使用方法。
4.掌握显微测微尺的使用方法。
临时制片方法及细胞形态的观察
（一）人口腔黏膜上皮细胞制片与观察
1. 取一载玻片，夹持载玻片两端，用清洁纱 布擦净； 2. 在载玻片中央滴1滴0 .5%次甲基蓝染液； 3. 用消毒牙签的钝端轻轻刮取颊部内侧的口 腔黏膜上皮细胞； 4. 将牙签在载玻片的染液中来回滚动数次； 5. 染色2-3分钟，盖上盖玻片，注意不要有 气泡产生； 6. 观察。先低倍，再高倍。细胞核被染成深 蓝色。
细胞计数时，先将培养细胞或血细胞 稀释成细胞悬液，然后将细胞悬液滴入细 胞计数板内，计数计数板上计数室四大格 内的细胞数。根据计数室的容积及稀释倍 数，即可计算出细胞浓度。
1.制备血细胞悬液
• 取1只乙醚麻醉过的蟾蜍，心脏取血
1ml，用Ringer液稀释一定倍数制成 细胞悬液；同时用蟾蜍血制备血涂 片，室温晾干备用；
目镜测微尺量测倍率比照表
细胞生物学实验绘图方法与要求
• 1．在仔细观察的基础上，选择典型结构进行描绘， 要求真实、准确（注意各部结构的比例关系）。 2．用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗一 律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得用涂暗 影或进行其他美术加工。 3．各部结构名称要在一侧引直线注明。各引线要平 行不得交叉。 4．每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当并注 意纸面的清洁。
3. 滴片
• 将盖玻片擦净，盖在血球计数板槽上， 取制备好的蟾蜍血细胞悬液1滴滴于血球 计数板的盖玻片一侧边缘，让细胞悬液 自然流入计数室内。注血细胞悬液不可 滴得过多，如溢出或盖玻片内有气泡必 须重做，否则将影响计数结果。
4. 计 数
• 在低倍镜下数出计数板上计数室四角大 格中的细胞数，如细胞压在格线上时， 数上不数下源自文库数左不数右。
高倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= XlO(μm)= μm 二、分别绘制所观察的高倍镜下人口腔黏膜上皮细胞并注明基本结构。 三、用测微尺测量不同材料各种细胞的大小后，制表格表示测量结果
• 四、计算蟾蜍红细胞的核质比例。
计算细胞、细胞核体积的公式： 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径) 椭圆形 V=4/3πab2(a、b为长、短半径) 核质比 N／D=Vn／(Vc—Vn)(Vn为核的体积，Vc是细胞质的体积)
实验报告
• 在低倍镜下数出计数板四角四大格中血细胞数，然后取下盖玻片，将血细胞记数 板冲洗干净，重新滴片、记数，共三次。取3次记数的平均数代入公式计算出结 果。 • 一、分别求出使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表的长度： 低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= XlO(μm)= μm