大鼠脑立体定位技术
利用微透析技术在大鼠脑内取样的方法
利用微透析技术在大鼠脑内取样的方法本文通过查询文献并结合笔者的实际操作经验,介绍微透析技术原理,以及利用微透析技术进行清醒大鼠rACC脑区定位取样的方法。
标签:微透析;透析液;立体定位;rACC脑区;大鼠前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC),尤其是其吻侧部(rostral ACC,rACC)是参与情绪情感反应的重要中枢[1-3]。
已有研究证实,rACC也是伤害性刺激传入高位中枢时形成痛厌恶情绪的重要脑区[4-6],那么在痛情绪发生时rACC脑区神经元释放的神经递质有何变化是我们所关注的。
微透析技术正是一种可以探究这一問题的手段。
该技术是将灌流取样和透析技术结合起来并逐渐完善的一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术,具有活体连续取样、动态观察、定量分析、采样量小、组织损伤轻等特点[7]。
目前,微透析技术主要应用于大脑、血液、脊髓等部位[8-11],通过定位后取样再检测,观察目标神经递质的相对变化,可在麻醉或清醒的生物体上使用。
在清醒生物体上进行微透析实验比起麻醉生物体,取得的样本会更接近于正常生理状态[12]。
但由于动物处于可自由活动的状态,存在很多不确定因素,因此实验中所需的条件和对动物的各种操作均要在不断地摸索和尝试中确定。
笔者通过查询文献并结合作者的实验操作经验,介绍利用微透析技术进行清醒大鼠rACC脑区定位取样的方法,现报道如下。
1 定位1.1 微透析探针的选取微透析探针的供应商有瑞典的CMA公司,美国的BAS公司和日本的EICOM公司,另外也有实验室采用自制的微透析探针。
本实验室采用的是EICOM公司的探针,根据定位脑区的深度和所需检测的目标神经递质的分子量大小(一般检测的神经递质为氨基酸类神经递质和单胺类神经递质),选择所需的探针规格。
EICOM公司的脑组织探针主要有三个系列,本实验室选用的探针样式为A-Z系列带有导管、内芯和导管配套的螺帽,探针规格为管长4 mm,膜长2 mm,膜材料:人造纤维素,50 kDa截留分子量,见图1。
神经生物学实验指导
生物工程专业神经生物学实验指导实验内容一:大鼠脑立体定位及帕金森病(PD)模型制作目的要求:掌握大鼠脑立体定位仪的设计原理、基本结构、用途和正确使用;PD 模型制作要点和注意事项。
实验分组:4人/组实验课时:5学时实验用动物、器械和药品:健康成年SD大鼠,体重200-250g,雌雄不拘;脑立体定位仪、水平仪、电吹风;麻醉药(0.4%戊巴比妥钠:戊巴比妥钠0.4 g,生理盐水100 ml);碘酒、酒精、生理盐水、蒸馏水;5或10ul微量注射器;手术器械,如手术刀、镊、止血钳等;大鼠脑立体定位图谱;6-羟基多巴胺(6-OHDA)溶液(按3ug/ul 配制,加Vc,即6-OHDA溶液1ml:将6-OHDA3mg,VitC0.2mg,溶于灭菌生理盐水,在1.5ml离心管中定容至1ml,分装后-20℃保存)。
实验操作及注意点:1.根据老师的讲解和指导,认识脑立体定位仪主要部件,即主框、电极移动架及动物头部固定装置(即固定上颌的结构和耳杆与耳杆固定柱)及用途。
2.脑立体定位仪的调试:摆稳定位仪,用水平仪测水平。
检验电极移动架上各个轴向滑尺是否保持互相垂直,微量注射器针尖是否光滑垂直。
检查定位仪各衔接部位的螺丝有无松动。
检查头部固定装置两侧是否对称。
检查耳杆使两耳杆尖端相对,以此判定耳杆固定的准确程度。
然后,使两耳杆尖端相对间隔1~2 mm ,前后移动固定有注射器的注射装置纵轴,使注射器的针体向后移时,恰好通过两耳杆尖端之间的1~2 mm 间隙; 向前移时,恰好与切牙固定架的正中刻线在一条直线上。
3.大鼠称重并麻醉(腹腔注射戊巴比妥钠,40mg/kg),动物麻醉不可过深或过浅,注意呼吸情况。
抓取大鼠时要轻柔,防止抓咬伤。
4.鼠颅的固定:将麻醉大鼠置于脑立体定位仪上,鼠颅依靠两耳杆及切牙钩三点固定。
在向外耳道内插入耳杆时,鼠眼球向外凸出。
一旦进入鼓膜环沟内,穿破鼓膜,则会发出轻微的“嘭”声,同时出现眨眼反射,眼球不再凸出,说明耳杆进位正确。
大小鼠脑立体定位仪安全操作及保养规程
大小鼠脑立体定位仪安全操作及保养规程前言大小鼠脑立体定位仪是一种用于实验室小动物脑部定位的设备,可用于行为学、神经科学等领域的研究。
作为一种高精度的设备,其操作涉及到众多细节和安全注意事项。
本文旨在为操作者提供安全操作及保养规程,从而确保使用过程中的安全可靠性和设备的长期使用寿命。
安全操作规程1. 个人防护操作者在使用大小鼠脑立体定位仪前必须确保个人防护措施得当。
以下是一些常见的个人防护措施:•戴手套:手套可以减少皮肤和设备之间的接触,防止一些有害物质的吸入,同时也可以避免产生一些体液飞溅。
•戴口罩:如遇到需要进行操作而有体液飞溅的情况,则要求操作者戴口罩。
•穿工作服:应穿着长袖工作服,尤其是要注意避免长袖衣袖被卡在设备中。
•戴安全眼镜:应戴特殊的安全眼镜来防护眼睛,避免有害物质溅入眼睛造成损害。
2. 操作规程使用大小鼠脑立体定位仪前,必须了解使用要求。
以下是一些常见的操作规程:•在使用前检查仪器:在使用前要检查设备是否正常工作,该设备是否已配备所需要的配件或替换品。
需要注意的是,不要错装尖锐物品、是否超级放大镜等危险配件。
•使用正确的方法和工具:在使用该设备时,应当按照说明及相关文件所指定的方法和工具使用,避免使用不正确的工具损坏仪器或误操作。
•确保清洁和卫生环境:在使用仪器时,应保持干燥清洁以及合适的温度和湿度,确保卫生状况符合工业标准,防止污染浸润设备损坏。
•调整放大倍数:调整正确的放大倍数能够获得清晰的图像。
需要注意的是,在操作过程中要避免把摄像头抬得太高,因为高倍放大会产生锯齿状图像,而低倍放大无法提供清晰的图片,需要根据待观察的生物现象选择正确的倍数。
•严格操作:在使用设备时,需要严守以下操作规则:–避免法令和技术规程规定禁止的操作,防止产生事故;–使用该设备时,要保持注意力集中,以确保正确认识操作全过程;–坚持防范事故,防止事故的发生;–尽可能击退由于工艺变动、创新技术及改进设计产生的一些不宜控制的事故。
脓毒症相关性脑病大鼠动物模型的建立
脓毒症相关性脑病大鼠动物模型的建立脓毒症相关性脑病在脓毒症患者是一种常见并发症,合并脓毒症相关性脑病者病死率明显增加。
目前临床对于脓毒症相关性脑病仍是排除性诊断,缺乏客观的诊断指标,如生化指标、影像学指标、电生理学指标等,导致流行病学及发生机制均不明确,因此确立相对客观统一的诊断标准势在必行。
动物模型的选择建立对其机制及治疗方法研究具有重要意义。
研究人员应用脑电图和诱发电位监测早期诊断脓毒症相关性脑病,取得一定效果,但尚未形成统一结论。
本研究根据已有脓毒症相关性脑病模型研究的进展,选用盲肠结扎法(CLP)建立脓毒症模型,通过监测大鼠神经行为学改变、脑电图信号及体感诱发电位改变来早期诊断脓毒症相关性脑病,并对所建立的大鼠脓毒症脑病模型进行分析,为以后的研究提供参考。
1 材料与方法1.1 实验动物清洁级成年雄性SD大鼠30只,体质量200~250 g,由中南大学动物学部提供。
1.2 主要药品、试剂、仪器PBS购自鼎国生物工程公司,水合氯醛为中南大学湘雅医院药剂科化学分析室配制;多聚甲醛购置岳麓区鼎盛实验器材公司;戊二醛、无水乙醇、二甲苯、苏木素、伊红、锇酸等由中南大学病理教研室提供。
套管针购置BD公司。
脑立体定位仪,RM6240生物信号记录器,Olympus BX41型光学显微镜(日本),LKB-Ⅲ型超薄切片机(瑞典),H-7500型透射电镜(日本),石腊切片机(美国),生化培养箱(广东),格兰士微波炉WP700,隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂),荣事达家用冷藏冰箱BCD-202,MIAS医用图像分析管理系统电子摄像。
1.3 实验方法1.3.1 大鼠脑电及诱发电位监测电极放置30只大鼠称质量、编号分别在造模前10 d放置脑电监测电极。
水合氯醛腹腔注射麻醉后,大鼠头部用立体定位仪固定,常规外科消毒,在头颅中间矢状位作3 cm的皮肤切口,将前囟点和其他颅骨缝暴露。
在颅骨面行局麻(10%利多卡因喷雾),移去骨膜。
鼠脑定位
大鼠脑立体定位技术1.麻醉: 水合氯醛0.36ml/100g, i.p.准备:水合氯醛10g/ 100ml Deionize water, 1ml 注射器2.将大鼠头部固定于脑立体定位仪上, 门齿3.3mm, 耳间距大约22mm. 3个标准检测是否固定成功(鼻对正中,头部不动,提尾不掉)3.剪毛, 碘酒酒精消毒, 切皮准备:剪毛剪,碘酒酒精,棉球(大,小),直剪刀4.剥开皮下组织, 双氧水烧至骨缝清晰准备:30%双氧水5.用铅笔在前囟和后囟(转角中线连线中点)各做一标志, 测量其距离是否为9mm. 如不是,按比例换算bregma后距离准备:铅笔6.定位原点, 记下AP, R准备:针7.定位MFB (AP: +0.2 R: 2.0 DV: 8.0)mmSN ( AP: -4.8 R:1.6 DV: 8.2)mmICV(AP: -1.0 R 1.5 DV: 3.8)mm做标志, 钻孔, (ICV用大钻头,6—OHDA注射用小钻头)8.给6-OHDA : 将注药管连至定位针上, vicle清洗, 排净液体,取下1ml注射器。
连上微量进样器,待针头有一滴液体滴出时, 将针头移至孔上,液体滴下,添满孔, 针尖斜面中点进入孔内时, 记高度。
缓慢进针至DV,推药, 1ul/min, 留针10min. 缓慢拔针.立即清洗针和管以防堵塞准备:管,微量进样器,vehicle,注射器,6-OHDA,9.碘酒消毒颅骨表面10.缝皮准备:针,线,持针器,11.皮肤表面消毒12.苦味酸标号13.放回笼中,打penicillin ,16wan/ml qd , for 3 days14.1,7,14 day 检测行为,筛选成功模型入组准备:opo。
《大鼠脑立体定位图谱》出版消息
《大鼠脑立体定位图谱》出版消息《大鼠脑立体定位图谱》是一部由诸葛启钏主编,人民卫生出版社于2005年7月1日出版的书籍。
该书以大鼠脑为研究对象,提供了大鼠脑各个区域的立体定位信息,对于研究大鼠脑的结构和功能具有重要的参考价值。
该书共分为字,由人民卫生出版社正式出版,胶版纸印刷,平装包装。
对于医学、生物学、神经科学等领域的研究者来说,《大鼠脑立体定位图谱》无疑是一本非常有价值的参考书籍。
书中详细介绍了大鼠脑的各个区域和核团,并使用定位坐标来描述其在脑中的位置。
还提供了许多有关大鼠脑的形态学、生理学和行为学等方面的信息。
通过该书,读者可以全面了解大鼠脑的结构和功能,对于开展相关研究具有重要指导意义。
《大鼠脑立体定位图谱》的出版为相关领域的研究者提供了一本非常有价值的参考书籍,对于推动大鼠脑科学研究的发展具有重要意义。
脑缺血再灌注和电针治疗是当前医学研究的重要领域,其中电针治疗是一种具有中国特色且广泛应用于临床的疗法。
本文旨在探讨电针对脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量和血管新生的影响,为临床应用提供理论依据。
在过去的研究中,脑缺血再灌注损伤的机制一直是一个难题。
近年来,随着科学技术的发展,越来越多的研究表明,脑缺血再灌注后血管新生对于脑损伤的修复和神经功能的恢复具有重要意义。
然而,目前尚无理想的治疗方法能够有效地促进血管新生,改善脑部供血。
本研究采用随机对照实验方法,选取健康成年大鼠为研究对象,分为假手术组、模型组和电针组。
建立大鼠脑缺血再灌注模型,然后对电针组大鼠进行电针治疗。
通过免疫组织化学法和图像分析技术,观察各组大鼠脑皮质局部血流量和血管新生情况。
实验结果显示,电针组大鼠脑皮质局部血流量明显高于模型组和假手术组,且电针组大鼠脑皮质血管新生数量也明显增加。
这表明电针治疗可以有效地促进脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量增加和血管新生,对脑损伤修复和神经功能恢复具有积极作用。
电针对脑缺血再灌注大鼠脑皮质局部血流量和血管新生的影响研究表明,电针治疗可以有效地改善脑部供血,促进血管新生,对脑损伤修复和神经功能恢复具有积极作用。
神经生物学实验
体激活后第二信使、G 蛋白、膜离子流、调控蛋白及
产生磷酸化和脱磷酸化等各种反应的酶变化;
图 2 LTP 电位示意图
⑶突触前或突触后结构的可塑性,包ห้องสมุดไป่ตู้突触前树突棘体积增大,数目增多 ,
突触界面扩大及突触后致密物质增大增厚等;
⑷非神经元修饰:如胶质细胞及胶质-神经元相互作用的变化;
⑸上述某些变化或所有变化的综合表现。
(蔡 葵)
6
实习二 大鼠海马 LTP 的实验观察
1. LTP 的基本概念
LTP(long-term potentiation, 长时程增强), 对突触前神经元进行高频强直
电刺激后导致突触后神经元产生突触传递效应增强的现象,该效应可持续一
个小时以上,其具体表现为:
①峰电位幅值增大;
②潜伏期缩短;
③兴奋性突触后电位(EPSP)幅值增大;
兔脑:兔的头部固定在脑定位仪上时,其前囟(Bregma,即冠状缝与矢 状缝的交点)比λ(人字缝与矢状缝的交点)高 1.5mm,在这种情况下,以通过 前囟的水平面作参考平面,而以在该平面下 12mm 处的水平面作为水平标准 平面(HO, 零平面),在此平面上方为 V+,在此平面下方为 V-。经过前囟并 与矢状缝垂直又与水平面垂直的面,作为额面标准平面(APO),在此平面之 前为 AP+,在此平面之后为 AP-。
单管玻璃微电极是一根尖端开口很细的硬质玻璃管,内充电解质溶液作 为电极。由于电解质溶液可以导电,利用单管玻璃微电极可以记录到中枢神 经系统神经元的电活动。用于细胞内记录的微电极,其尖端直径应小于 0.5mm,尖端的倾斜度应相当缓和,以免穿入细胞膜时造成大的伤害。这种 微电极适合于从细胞内引导电活动和测量膜电位。用于细胞外记录的微电 极,其尖端直径约在 1~5mm。一般认为尖端内径 1~4mm 的玻璃微电极适宜 于记录神经元胞体的电活动。微电极的长度应视需要而定,但插入脑组织内 的部分不宜太粗,以免插入时造成显著的损伤。制作玻璃微电极应选用熔点 高,化学稳定性高,电阻率高和膨胀系数低的硬质玻璃管。国外常用 Pyrex 玻璃管,国内一般采用 GG17 和 95 玻璃管。 3.3.2 多管玻璃微电极
大鼠脑三维标准图谱的构建及磁共振图像分析系统的研究及实现
AbstractNeuroscience is an important topic in nowadays, and rat is one of the broadest experimental animals. However, the huge amount of data collected by neuroscientists will become meaningless if we cannot give them a precise description of th eir locations. The Rat Brain Atlas is a powerful tool for such questions.This work is supported by the project of “3D reconstruction of rat brain atlas and MR image analyzing system”, which comes from Wuhan Institute of Physics & Mathematics the Chinese Academy of Sciences. The purpose of this project is to further implement the image analysis and visualization functions based on the former work “3D MR image processing system”.This thesis focuses on the following aspects of MR image visualization: preprocessing of MR and atlas images; 3D reconstruction and visualization; anatomical structures registration, localization and labeling.In the preprocessing part, the vectorial atlas slices are transformed into scalars. The brain of the rat is extracted from MR images with SNAKE model. Then, the two type slices are re-sampled with the same resolution.In the part of 3D reconstruction and visualization, we implemented volume rendering of rat brain based on ray-casting and texture mapping separately, surface rendering based on MC algorithm, and 3D arbitrary cutting view utilizing VTK.A manual registration method is introduced, f u rthermore, an automatic registration strategy based on PCA is implemented in the part of registration between atlas and MR image. In addition, the localization and labeling of ROI in 2D and 3D MR image are completed at last.Considering customers’ require, taking the engineering's principle of Object Oriented (OO) and stability and compatibility into account, this system is designed and implemented with Visual C++6.0 and VTK on windows platform. Practice proved that this system has a higher capability than our former MRI processing system in rat brain anatomic structure analysis.Key Words:MR Image, Rat Brain Atlas, ROI (Region of Interesting), 3D visualization, VTK, Image Registration, Localization and Labeling独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
大鼠脑的立体定位技术
材料
01
大鼠,立体定位仪,哺乳类手术器械,牙科钻,20%氨基甲酸乙酯,生理盐水,2%滂胺天蓝溶液
02
方法和步骤
20%氨基甲酸乙酯 0.6 ml/100g, i.p.
ห้องสมุดไป่ตู้
固定
将大鼠头部固定于脑立体定位仪上,门齿杆 -3.3 mm
3个标准检测是否固定成功(鼻对正中,头部不动,提尾不掉)
麻醉
切头皮,剥开皮下组织, 将骨缝暴露清晰,用铅笔在前囟和后囟各做一标志
以咬骨钳咬开颅骨,小心取出大脑,顺着注射点将大脑切开,观察染料是否在侧脑室内
注意事项
立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操作,以免损坏
微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞
01
02
大鼠脑的立体定位技术
单击此处添加副标题
了解脑立体定位技术的原理,初步掌握确定某一中枢核团的方法
某些颅外标记与颅内结构具有相对固定的位置关系 前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处 人字缝尖(lambda):位于后囟人字缝与矢状缝交会点
脑图谱
核团微量注射
核团的刺激或损毁
应用
电位引导
核团定位,做标志, 钻孔
LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安放微量注射器,针尖斜面中点进入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注入10 l 2%滂胺天蓝溶液(2 l/min),留针10 min后缓慢拔针
确定注射位置
取下动物,腹腔注射过量的20%氨基甲酸乙酯使动物死亡
大鼠脑立体定向手术校正的三种方法[1]
・论 著・大鼠脑立体定向手术校正的三种方法王少锦 孙彦辉 赵志国 杨天祝Ξ河北医科大学中医学院针灸系(石家庄050091) 摘 要 目的介绍三种方法相结合的大鼠脑立体定位术程序书。
方法在一般以切片观察确定靶位之前,先后分别将经过固定的死鼠、活鼠,固定在大鼠脑立体定位仪上,暴露靶点并校正靶坐标。
结果三种方法结合运用后,克服了每种方法的缺点,缩短了预实验时间,提高了大鼠脑立体定向手术的效率。
结论以少量的动物,经过较少次预实验,即能打准大鼠脑靶。
主题词 脑;立体定位技术;方法;大鼠中图号 R322.85;R338.2THREE METHODS OF CORRECTI NG THE T ARGET SITE I N THERAT BRAI N ON STEREOT AXIC COORDI NATESWang Shaojin Sun Yanhui Zhao Zhiguo Yang TianzhuA cupuct ure and Moxibustion f aculty of T raditional Chi nese Medici ne College,Hebei Medical U niversity(S hijiaz huang050091)ABSTRACT Objective The present paper introduces an integrated method for stereotaxic operation on the rat brain,using three different procedures for correcting the brain targeting site. Methods Before the ordinary method for correcting the target site,on the stereotaxic instrument the target site was exposured and the stereotaxic coordinates were corrected in fixed brain,and then unfixed brain,respectively.Results As the application of three methods is set up,the defect of every method can be removed and the course of experiment can be shorten,so the efficiency of the tanget sitein the rat brainon stereotaxic coordinates is improved.Conclusion With fewer animals and fewer preliminary tests the brain target site can be corrected accurately.Me SH brain;stereotaxic techniques;methods;rats 脑立体定位术技术要点多,目前国内尚无一种较详细的实验程序书提供给初学者使用。
大鼠标准脑立体定位仪安全操作及保养规程
大鼠标准脑立体定位仪安全操作及保养规程1. 引言大鼠标准脑立体定位仪是一种用于大鼠脑部定位的设备。
为确保操作人员的安全以及设备的正常运行,本文档详细介绍了大鼠标准脑立体定位仪的安全操作规程以及保养要点。
2. 安全操作规程为了确保操作人员的安全,以下是使用大鼠标准脑立体定位仪时需要遵守的操作规程:2.1 穿戴个人防护装备在操作大鼠标准脑立体定位仪之前,操作人员必须穿戴以下个人防护装备: - 实验手套:防止操作人员与设备直接接触,减少污染风险。
- 护目镜:防止液体溅入眼睛,保护视力安全。
- 实验大衣:防止污染物直接接触到皮肤,减少有害物质的吸入。
2.2 严格遵守操作流程操作人员必须严格按照设备的操作流程进行操作,并根据实际情况进行调整。
在操作过程中,应注意以下事项: - 将设备放置在平稳的工作台上,确保设备的稳定性。
- 在操作之前,检查设备的电源线和连接线是否完好无损。
- 操作人员应熟悉设备的各个部件及其功能,避免误操作。
- 在操作过程中,及时观察设备的运行状态。
如发现异常,应立即停止操作并联系维修人员。
2.3 定期检修和维护为了保证设备的正常运行,操作人员需要定期进行设备的检修和维护。
具体操作如下: - 每月检查设备的电源线和连接线是否存在磨损或损坏,如有问题及时更换。
- 每季度清洁设备表面的灰尘和污垢,避免堆积导致设备散热不良。
- 每年定期对设备进行全面的维护,包括清洗内部部件、更换耗损部件等。
2.4 废弃物处理操作过程中产生的废弃物应根据实验室的规定进行处理,包括但不限于以下方法: - 将废液倒入指定的废液桶中,不可随意倒入水槽或下水道中。
- 将废弃的实验手套、护目镜等随身设备放入指定的装袋中,交由实验室专业人员进行处理。
- 严禁将废物随意丢弃在实验室或其他非指定地点。
3. 保养规程为了延长设备的使用寿命并保持其性能稳定,以下是对大鼠标准脑立体定位仪的保养规程:3.1 日常清洁•定期使用干净的软布清洁设备的表面,避免灰尘、污垢堆积。
脑卒中后肢体痉挛大鼠模型制备方法
脑卒中后肢体痉挛大鼠模型制备方法谢志强; 谢莉娜; 郭斌; 刘未艾; 王彭汉; 黄麟荇; 岳增辉【期刊名称】《《中国中医药现代远程教育》》【年(卷),期】2019(017)005【总页数】3页(P103-105)【关键词】脑卒中; 肢体痉挛; 模型; 实验研究; 中风; 动物实验【作者】谢志强; 谢莉娜; 郭斌; 刘未艾; 王彭汉; 黄麟荇; 岳增辉【作者单位】湖南中医药大学针灸推拿学院湖南长沙410208【正文语种】中文脑卒中,是一种突发起病的脑血液循环障碍性疾病。
是当今三大主要死亡原因之一,同时也是目前第一致残疾病。
我国为脑卒中高发国家,脑卒中平均年发病率在城市为 219/10万,在农村为 185/10万,其致残率相当高[1]。
这种高致残率与卒中后的并发症——肢体痉挛密切相关。
其严重影响患者的生活质量,同时给患者带来躯体上和精神上的痛苦,对患者融入社会造成障碍而且增加了家庭和社会的负担。
脑卒中后的肢体痉挛成为当今研究的热点。
目前制备脑卒中后肢体痉挛模型,多以大脑中动脉线栓塞为主。
本实验在线栓法的基础上往内囊注射 NMDA受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,N-甲基-D-天冬氨酸受体),拟建立一种痉挛症状稳定的脑卒中肢体痉挛大鼠动物模型。
1 材料与方法1.1 实验动物 20只 SD雄性大鼠,体质量 280~320 g,购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司。
饲养于湖南中医药大学动物实验中心。
分为线栓法和线栓+内囊注射 NMDA受体法 2组,每组各 10只大鼠。
1.2 线栓法采用改良 Zea Longa线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞肢体痉挛大鼠模型。
10%水合氯醛 3 mL/kg腹腔注射麻醉。
将麻醉后的大鼠固定在手术台上,备皮消毒后,沿颈部正中偏右切口,分离右侧颈动脉和迷走神经后,分别在颈总动脉远心端、颈内动脉近心端、颈外动脉近心端备线,然后分别结扎颈外动脉近心端、颈总动脉远心端,动脉夹夹闭颈内动脉。
大脑立体定位实验报告
一、实验目的1. 理解大脑立体定位技术的原理和操作步骤。
2. 掌握使用脑立体定位仪进行大脑皮层下结构定位的方法。
3. 学习如何通过立体定位技术进行神经解剖和神经生理研究。
二、实验原理大脑立体定位技术是一种精确的神经解剖和神经生理研究方法,它通过三维坐标系统来确定大脑皮层下结构的位置。
这种方法结合了脑部解剖学、影像学技术和立体定位仪,能够在非侵入性的条件下对大脑进行精确的定位。
三、实验材料1. 脑立体定位仪2. 大鼠脑部解剖模型3. 影像学数据(如MRI或CT)4. 计算机软件(用于数据处理和分析)四、实验方法1. 准备工作:- 将大鼠脑部解剖模型放置在脑立体定位仪的载物台上。
- 调整立体定位仪,使其X、Y、Z轴与大脑的解剖坐标轴对齐。
2. 图像导入:- 将大鼠脑部影像学数据导入计算机软件。
- 在软件中调整图像,使其与脑立体定位仪上的解剖模型对齐。
3. 定位:- 根据影像学数据和解剖模型,确定目标结构的坐标。
- 使用脑立体定位仪的微调功能,将手术针或电极精确地定位到目标结构。
4. 验证:- 通过显微镜观察手术针或电极的位置,确认其是否准确到达目标结构。
- 进行必要的生理或生化实验,验证定位的准确性。
五、实验结果本实验成功地将大鼠大脑皮层下结构(如纹状体、海马体等)进行了精确的立体定位。
通过脑立体定位仪和影像学数据,我们能够清晰地看到目标结构的形态和位置,并通过手术针或电极进行精确的操作。
六、讨论1. 大脑立体定位技术的优势:- 精确性:立体定位技术能够将大脑结构的位置精确到微米级别。
- 非侵入性:通过影像学数据和立体定位仪,可以在非侵入性的条件下进行操作。
- 应用广泛:立体定位技术可以应用于神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域。
2. 实验结果分析:- 本实验中,我们成功地将大鼠大脑皮层下结构进行了精确的定位,为后续的神经科学研究提供了重要的基础。
- 通过实验结果的验证,我们证明了大脑立体定位技术的可靠性和有效性。
大鼠脑部解剖图谱
Bibliographic Elements
– Authors (use et al. after 6 authors, if there areplete names should not be written. “et al” must be in italics)
• Websites or web pages /Homepage/Web site
– [Internet]. New York: Association of Cancer Online Resources, Inc.; c2000-01 [updated 2002 May 16; cited 2002 Jul 9]. Available from: /.
1. et al written after 4 authors it should have been written after 6 or more authors 2. Full stop after the end of the article title 3. 2006, 118 :882-887 this should have been written as 2006;118:882-7. 4. Correct ref would be Haggstrom AN, Drolet BA, Baselga E, Chamlin SL, Garzon MC, Horii KA, et al. Study of infantile hemangiomas: Clinical characteristics predicting complications and treatment. Pediatrics 2006;118:882-7.
Authors of the chapter
大鼠立体定向图谱解_部分1
de Groot大鼠脑立体定向图谱参考文献: de Groot J. The rat hypothlamus in stereotaxic coordinates.J Comp Neurol 1959, 113:389-400使用说明(一)图谱使用范围本图谱使用范围主要是下丘脑及其周围结构,也涉及到视前区和中脑上部。
选用体重200-300g英格兰大白鼠的脑,制成冰冻连续切片,片厚50um。
在冠状平面,自前而后每隔0.4mm 取一切片,共14张。
在矢状平面,中线左侧0.2和1.1mm处各取一切片。
全部共16幅平面图。
(二)规定以下各种坐标平面对大鼠下丘脑各结构进行定位1.水平零平面(H0)令动物上门齿后缘根部高于两侧颅骨外耳孔中心连线(耳间线)5mm。
此时通过上门齿后缘根部所作的水平面(即与定向器框架水平面平行的面)为H0,低于H0者为负值,高于H0者为正值。
这样通过耳间线的水平面就比H0平面低5mm,为H-5。
按此规定,H0平面正好通过脑的前连合与后连合。
2.冠状零平面(A0)通过耳间线并与H0平面相垂直的冠状平面为A0。
在A0以前的各冠状平面均以正数表示如A2.8即表示A0以前2.8mm的冠状平面。
本图谱所选平面自A2.8到A8.0止。
3.矢状零平面(L0)通过前囟并与H0 A0两平面均垂直相交的平面称L0。
前囟是两侧颅骨、顶骨在正中线的汇合点。
前囟位置一般在A0前5.9mm(A5.7-A6.1),H0以上6.3mm(H+6.1-H+6.6)左右。
这样,L0就恰好通过矢状缝,而把脑分为左、右对称的两半。
本图谱所用L0.2、L1.1两平面分别表示L0外侧0.2mm及1.1mm处的矢状平面。
根据上述各坐标平面,可由图谱查出下丘脑某一结构的坐标读数,并定出其具体空间位置。
(三)图谱的表示方法图谱中核团和脑区的轮廓用虚线表示,纤维束的轮廓用实线表示。
各结构的名称用西文缩写。
Konig及Klippel 大鼠脑立体定向图谱参考文献: Konig JFR, et al. The rat brain: a stereotaxic atlas of the forebrain and lower parts of the brain stem. Williams & Wilkins, Baltimore,1963使用说明本图谱所用的鼠为体重150克雌性大白鼠(Wistar BR46)(一)图谱的制作1. 照片图的制作鼠脑先放在8%的福尔马林中固定一周,用白明胶包埋,并用冰冻法切成25um的连续切片,用苏丹黑B染色。
两种采集SD大鼠脑脊液方法的比较_cropped
疡的发生10 。
胃缺血- 再灌注引起急性胃黏膜损伤的机制, 主要与细胞内钙超载、氧自由基过量生成、白细胞浸润等因素有关。
已有研究报道SS 对胃黏膜损伤具有保护作用,可能与对抗自由基引起的损伤有关2 。
胃缺血- 再灌注后胃窦黏膜内D 细胞通过分泌SS ,一方面抑制胃酸的分泌, 减轻溃疡的程度;另一方面, SS 可通过增强细胞对抗自由基引起的损伤而对胃黏膜起保护作用。
SS 的增多,可能是机体自然抗病的一种局部反应。
综上所述, 本实验结果提示: 胃窦黏膜D 细胞通过分泌SS 参与了大鼠GI - RI 的过程。
duced by ischemia - re perf usion in the rat : r ole of leukocytes on ulcer2 ation in rat stomachJ . Lif e Sci ,1996 ,59 (19) :295 - 301 .周吕主编. 胃肠生理学基础与临床M. 北京:科学出版社, 1998 . 73 - 97 .詹静海,石爱荣. 大鼠实验性肠系膜上动脉闭塞性休克时胃窦粘膜D 和G 细胞免疫组织化学研究J . 解剖学报, 1990 , 21(2) :200 - 204 .Park SM , Park H S. G -and D -cell populations , serum and tissu ec oncentrations of gastrin and somatostatin in patients w ith pe ptic ulcerdiseasesJ . K orean J I ntern Med ,1993 ,8 (1) :1 - 7 .K armeli F , Eliakim R , Okon E , et al . S omatastatin e f fectivly prevents ethanol - and NSAI D - induced gastric muc osal damage in rats J .D ig D is Sci ,1994 ,39 (3) :617 - 625 .卢十一,石爱荣. 大鼠实验性胃溃疡自愈期间胃窦黏膜G、D 细胞变化的免疫组织化学研究J . 解剖学报,1990 ,21 ( 3) : 302 -306 .Low M J . Clinical endocrinology and metabolism. The somatostatin neu2r oendocrine system :physiology and clinical relevance in gastr oint esti2nal and pancreatic disorders J . Best Pract Res Clin EndocrinolMetab ,2004 ,18 (4) :607 - 622 .收稿日期:2005 - 06 - 26 修回日期:2005 - 07 - 10 56789参考文献:1 Mythen MG ,Webb AR. I ntra - operative gut muc osal hypoperfusion isassociated w ith increased post - operative c omplications and c ost J .I ntensive Care Med ,1994 ,20 (2) :99 - 104 .李铁,张席锦. 生长抑素对胃黏膜的保护作用可能与清除自由基有关J . 生理学报,1994 ,46 (4) :369 - 374 .M orris JB , G uerrer o NH , F urth EE ,et al . S omatostatin attenuates isch2 emic intestinal injuryJ . A m J Surg ,1993 ,165 (6) :676 - 680 . Wada K , K amisaki Y , K itano M , e t al . A ne w gastric ulcer m odel in2 1023本文编辑:吴进4两种采集SD 大鼠脑脊液方法的比较Ξ曹远东1 ,章龙珍1 ,王梅申2 ,唐天友1 ,苏卫红1(1. 徐州医学院肿瘤防治研究所放射治疗科,江苏徐州221006 ;2. 徐州医学院解剖学实验室,江苏徐州221002)摘要:目的比较实验S D 大鼠脑脊液采集的两种方法。
4大鼠脑立体定位
4大鼠脑立体定位局部药物毁损大鼠双侧下丘脑对其摄食量的影响1.1 任务和目的掌握和熟悉摄食中枢控制的原理学习脑立体定位的方法观察双侧毁损大鼠的下丘脑所引起的摄食行为和体重变化糖原小肠(充盈状态)甘油三酯合成代谢机体能量的平衡分解代谢糖原甘油三酯小肠(排空状态)肥胖消瘦1.2 原理—能量平衡的中枢控制下丘脑调节哺乳动物的摄食行为和体脂引自Central nervous system control of food intake. Nature. 2000;404(6778):661-71.损毁双侧下丘脑外侧区会导致动物的厌食,即严重的食欲降低。
相反,双侧损毁下丘脑腹内区会导致引起动物的食欲增加过度肥胖。
下丘脑外侧区曾一度被认为是“饥饿中枢”,它与“饱中枢”下丘脑腹内侧区相互拮抗的作用。
因此,损毁任何一个脑区都会使系统失去平衡。
饥饿中枢饱中枢1.3 实验技术—脑立体定位术20世纪初英国学者Horsley和Clarke设计了第一架立体定位仪;广泛应用于神经解剖、神经生理、神经药理、实验神经学以及实验神经病理学;利用脑立体定位技术,可以在非直视暴露并对中枢神经系统损伤小的情况下,对皮层下某些神经结构进行定向的刺激、破坏、药物注射、引导电位等研究。
1.3 实验技术—立体定位仪的设计原理利用颅骨表面的某些标志,如前囟(Bregma)、人字缝尖(lamda)、矢状缝、外耳道等部位,与脑表面以及脑深部某些结构的相对恒定的关系,借以从外部确定这些颅内结构的空间位置;利用三个假想的相互垂直的平面作为一组立体坐标,利用此立体空间直角坐标,以mm为单位来确定动物脑内某一结构的位置;1.3 实验技术—脑立体定位仪1.3 实验技术—脑立体定位图谱George Paxinos, Charles Watson. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. 6th edition, 2008, AcademicPress1. Paxinos, G. and Watson C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates, 6th ed.2008. Academic Press.2.王太一,韩子玉. 实验动物解剖图谱2000.用一坚固、准确而两侧对称的耳杆,将动物的头非常牢固地固定起来(不允许有0.1mm的移动);用一组准确性很高、三个互成直角的滑动尺构成电极移动架,滑尺的刻读要求读出0.1 mm,在电极移动架上装有电极夹,电极装上后可以沿三个平面做前后、左右、上下移动,并可按照一定的平面转动一定的角度;手术:对照组(3只):麻醉,暴露头骨后,颅骨钻洞,插针,缝合好,不进行毁损操作;实验组:每组两只大鼠,分别用于:下丘脑外侧区(LH)和下丘脑的腹内侧(VMH);实验参数:参照The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates, 6th ed. Figure 54.LH: 前囟后2.52 mm; 中缝侧移2 mm; 头骨下9 mm;VMH:前囟后2.52 mm; 中缝侧移0.5 mm; 头骨下9.5 mm;门牙杆incisor bar比耳间连线低3.3 mm;前囟点和矢状缝尖几乎在同一水平高度。
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? 脑图谱
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? 应用
? 核团微量注射 ? 电位引导 ? 核团的刺激或损毁
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材料
? 大鼠,立体定位仪,哺乳类手术器械, 牙科钻,20%氨基甲酸乙酯,生理盐水, 2%滂胺天蓝溶液
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方法和步骤
? 麻醉
? 20%氨基甲酸乙酯 0.6 ml/100g, i.p.
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注意事项
? 立体定位仪为精密仪器,实验时应小心操 作,以免损坏
? 微量注射器取出后应立即清洗,以防堵塞
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? 固定
? 将大鼠头部固定于脑立体定位仪上 ,门齿杆 -3.3 mm
? 3个标准检测是共10页
? 切头皮,剥开皮下组织, 将骨缝暴露清 晰,用铅笔在前囟和后囟各做一标志
? 核团定位,做标志, 钻孔
? LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
大鼠脑的立体定位技术
浙江大学医学院生理学系 梁华为
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目的
? 了解脑立体定位技术的原理,初步掌握 确定某一中枢核团的方法
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原理
? 某些颅外标记与颅内结构具有相对固定 的位置关系
? 前囟(bregma):位于冠状缝和矢状缝的交接处 ? 人字缝尖(lambda):位于后囟人字缝与矢状缝
? 小心安放微量注射器,针尖斜面中点进 入孔内时,记高度。缓慢进针至LV ,注 入10 ? l 2%滂胺天蓝溶液(2 ? l/min),留 针10 min后缓慢拔针
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? 确定注射位置
? 取下动物,腹腔注射过量的 20%氨基甲酸乙 酯使动物死亡
? 以咬骨钳咬开颅骨,小心取出大脑,顺着注 射点将大脑切开,观察染料是否在侧脑室内