何首乌二苯乙烯苷对神经突触的影响及作用机制研究

Ｐ Ｄ－９ Ｓ － ５的表达 。结 论 ：二苯 乙烯 苷 能 够 明显 改 善 老 年小 鼠的学 习记 忆 功 能 和 运 动 能力 ，抑 制 海 马 、纹 状体 多个 部位 ａ ｙ 表达 和 聚集 ，减轻 ＭＰ ＋损伤 导致 的线 粒体 功 能失 调 、氧 化 应 —ｓｎ过 Ｐ
激以及 ａ ｓｎ的聚集 ，保护突触结构和功能，进一步扩充 了二苯 乙烯苷对抗神经退行性疾病的 －ｙ 药效学研究 ，为其开发成为治疗 Ｐ Ｄ Ｌ Ｄ 、Ｄ Ｂ等神经退行性疾病的药物提供实验依据 。
狂犬病 毒糖蛋 白衍生肽作 为耙 脑载体研究
王逸 麟 西 南大 学药 学 院 付 爱玲 重庆 ４０ １ ０７６
狂犬病毒糖蛋白 （ａｉ ｉ ｓ ｌｃｐｏｅ ，Ｒ Ｇ ｒｂ ｓ ｒ ｙｏ ｒｔｉ ｅｖ ｕ ｇ ｎ ｖ ）为一种嗜神经性 的蛋白质 ，能够促使病
毒 向 中枢 神经 系统 移 动 。将狂 犬病 毒糖 蛋 白 （ａｉｓｖｒｓｇｙｏ ｒｔｉ，Ｒ ｒｂｅ ｉ ｌｃｐｏｅｎ ＶＧ）的衍 生 肽段 与 荧 ｕ 光 素酶 （ ｃ ｅａｅ 的基 因在 ｐ Ｔ ８ （ １ ｉ ｒｓ） ｕｆ Ｅ ２ ａ ＋）上 构 建新 的载 体 ，并 通 过 在 Ｂ ２ Ｌ １中表 达 ，将 融 合 蛋 白尾静 脉 注射 人 昆明种 小 鼠体 内 ，于 １ｍｉ、３ｍｉ、ｌ 、３ 、５ 死小 鼠，取全 脑 、脊 髓 匀 ５ ｎ ０ ｎ ｈ ｈ ｈ处
二 苯 乙烯苷 能够 改善 老年 小 鼠的学 习记忆 功 能和 运 动 功 能 。 （ ）二 苯 乙 烯苷 能够 明显 保 护 老年 ２
小 鼠海马 Ｃ １ Ａ 区突触超微结构 ，增大纹状体突触后致密物质带 ，使海马 、纹状体的突触连接区
域个 数增 加 。（）二 苯 乙烯苷 能够 明显 抑制 老 年小 鼠海 马 、皮层 及 纹状 体 组 织 的 ａ ｓｎ表 达 和 ３ — ｙ 聚集 ，有 效 地 改 善 衰 老 造 成 的 ａ ｓｎ异 常 状 态 ；能 够 明 显 增 强 老 年 小 鼠 海 马 、纹 状 体 的 — ｙ Ｃ ＭＫＩ磷 酸化 活性 ，减 低 ｓｎｐｏａｍｉ 含 量 ，增 强 ｓｎｐｏ ｈ ｓ ａ Ｉ ｙ ａ ｔｔｇ ｎＩ ｙ ａ ｔｐ ｙｉ ｎ和 Ｐ Ｄ一 ９ 达 ，提 高 Ｓ ５表 ｓｎｐｉ 磷 酸化 活 性 ，从 而 有效 提 高突触 可 塑性 。 （） 过表 达 突变 型 Ａ５Ｔ －ｓｎ基 因使 Ｓ ｙａｓ Ｉ ｎ ４ ３ ａ ｙ Ｈ
—
Ｓ Ｙ 细胞对 ＭＰ ＋造成 的损伤更 敏 感 。ＭＰ ＋促 进 ａ ｙ Ｙ５ Ｐ Ｐ —ｓｎ及 其相 关 作 用 蛋 白 ｓｎ ｈｌ － １ ｙ ｐ ｉｎ ｉ
表达增多 ，ａ ｙ 形成大量寡聚体 ，对神经细胞进一步造成损伤 。二苯乙烯基因转染 Ｓ ３ａ ｙ Ｈ—Ｓ ５ Ｙ Ｙ细胞模型 中细胞 的存 活率 ，保 护线粒体 功能，
与 Ｂ ＮＦ治疗 的脑 缺血 模型 鼠 ，而 Ｂ ＮＦ治 疗 的脑 缺血 面 积 与 脑 缺血 模 型 鼠的脑 缺 血 面 积相 差 Ｄ Ｄ 不显 著 ，这 说 明 Ｒ ＶＧ—Ｂ ＮＦ融 合 蛋 白能够 穿过 血脑 屏 障 ，达到治 疗 脑缺 血 的 目的 。 Ｄ
２ （ 一羟基戊基 ）苯 甲酸钾盐 （ ｌ ＨＰ ） 一 ａ ｄ—Ｐ Ｂ
具 体机 制 尚不 清楚 。本 研究 主要 针 对 ｄ～Ｐ Ｂ抗 血小 板 聚 集 的作 用 及其 相 关机 制 进 行 了探 讨 。 ｌ ＨＰ
２ ４
ａ ｄ ＬＡＭ Ｐ－ ２ ｇ ｎ ｓｗａ ｖ ｌｅ ｕ ｈ ａ ｒ ａ ｄｉ ｒ ｆ ｒｎ ｅ Ｓ ＣＮＴ ｅ ｕｔ ｄｉ ｏ ｌｐ ｅ ｎ － Ａ ｅ ｅ ｓｉ ｏ ｖ ｄ ｉ ｓ ｃ ｎ ｏ ｇ ｎ ｅｐ ｅｅ ｅ ｃ ． Ｗ ｎ ｎ ｒ ｓ ｌｅ ｃ ｌ ｓ ｎ ａ ｏ ｔ ｃ ｏ ｄ ｉｌ ｅ ｂ ａ ｅｐ ｔ ｎ ｉｌ ， ｇｖｎ ｉｅｔ ｖ ｒ ｒ ｄ ｃ ｉｎ ｏ ｆｍｉｏ ｈ ｎ ｒａ ｍ ｒ ｎ ｏ ｅ ｔａｓ ｍ ｉｉ ｇ ｒｓ ｏ ｏ ｅ ｐ ｏ ｕ ｔ ｆＲＯＳ， ｌａ ｉ ｇ ｔ ａ ａ ｅ ｏ ｅ ｄｎ ｏ ｄ ｍ ｇ
ｏ ｔｃ ｏ ｄｉ，ｗｈｃ ｓ ｆｌ ｗｅ ｙ ｌｓ ｓ ｍａ ａ ｄ ｃ ｌ ｌｒ ｉｊｒ ． ａｅ ｎ ｔｅ ｄ ｓｇ ｆｍｉ ｈ ｎ ｒ ｏ ａ ｉ ｗａ ｏｌ ｄ ｂ ｙｏ ｏ ｌ ｎ ｅｌ ａ ｎｕｙ Ｂ ｓｄ ｏ ｈ ｏ ａ ｅ ｈ ｏ ｕ
ｄｆｅ ｅ ｃ ｓｉ ａ ｇ ｔ ｏ ｇ ｎ ｌ ｓ Ｓ Ｃ ｉｆｒ ｎ ｅ ｎ ｔｒ ｅ ｒ ａ ｅｌ ， Ｗ ＮＴ ｒ ｕ ｃ ｓ ｆ ｌｙ ｕ ｅ ｏ ｄ ｌ ｅ ｃ ｔ ｌｈ ｌ ｅ ｉｔ ｅ ｗｅ ｅ ｓ ｃ ｅ ｓｕ ｌ ｓ ｄ ｔ ｅｉ ｒ ａ ｅ ｙｃ ｏｉ ｎ ｏ ｖ ｎ ｂ ａｎ ｆ ｒｔｅ ｔ ｎ ｆＡ ｌｈ ｉ ｒ Ｓ ｄｓ ａ ｅ ｗｉ ａ ｈ ｒｈ ｇ ａ ｅｙ ｒ ｎ ｅｂ ｌ ｃ ｎ ｒ ｌｉｇ ｔ ｅ ｒ ｉ ｏ ｒａ ｍｅ ｔｏ ｚ ｅｍｅ ’ ｉｅ ｓ ｔ ｒ ｔ ｅ ｉｈ ｓ ｆ ｔ ａ ｇ ｙ ｗｅ１ ｏ ｔｏｌ ｈ ｈ ｎ ｄ ｓ ｓ ｗｈ ｃ ｎ ｕ ｅ Ｗ ＣＮＴ ｎ ｙ ｅ ｔｒ１ｓ ｓ ｍｅ ， ｔ ｅｐ ａ ｍ ａ ｏ ｏ ｉａ ｒ ａ ｅｌｓ ａ ｄ ｎ ｒ ｏｅ， ｉｈ ｅ ｓ ｒ ｓＳ ｏ ｌ ｎ ｅ ｙ ｏ ｏ ｓ ｈ ｈ ｒ ｃ ｌｇｃ １ ｇ ｎ ｌ ， ｎ ｏ ｏ ｏ ｅ ｌｓ ｎ ｅ ｉ ｃ ｏ ｄ ｉ ， ｔ ｅｔ ｘ ｃ ｌｇｃ ｌｏ ｇ ｎ ｌ ｓ ｅ ｓｅ ｔｒｍ ｔ ｈ ｎ ｒａ ｈ ｏ ｉｏｏ ｉａ ｒ ａ ｅｌ ． ｏ ｅ
中国药理通讯 ２ １ 年第二 十八卷 第二期 ０１
ｎ ｌ ｂ ｏｂ ｄＳ Ｃ ｒ ｓ ｓ ｍｏｒ ｐｃｂ ｔ ｌｏｅ ｔｒｄｍｉ ｃｏ ｄ ｉ ａ ｒ ｅ ｏｅ．］ ＩＫ ａ ｙａ ｓｒ ｅ Ｗ ＮＴ ｗｅｅｌ ｏ ｏ ｔｏ ｉ ｕ ｓ ｎｅｅ ｔ ｈ ｎ ｒ ｔ ａｇ ｓｓ ］Ｐ ３ ｌ ｙ ａ ｏ ａ ｌ ｄ ］
表达 ，收集融合蛋白。构建脑缺血模型 的小 鼠，将其分为对照组、Ｂ Ｎ Ｄ Ｆ治疗组与注射融合蛋
白组 （ 每组 ５ ，存 活 ２ 小 时后处死取脑 ，Ｔ Ｃ染 色后计算 脑缺血面积并计算 显著性 差异 只） ４ Ｔ （） Ｐ 。通过 Ｒ －Ｂ Ｎ ＶＧ Ｄ Ｆ融合蛋 白治疗 的脑缺血模 型老 鼠，其缺血面积明显小于脑缺血模型 鼠
降低 活性氧 自由基水平 ，降低 Ｂ ｘ Ｂ ｌ ２ ａ／ ｃ － 表达 比值 ，抑制 ｃｓａｅ ３ ａｐｓ－ 激活 ，抵抗细胞凋亡。同
２ ３
中国药理通讯 ２ １ 年第二 十八 卷第二期 ０１
时 ，二 苯 乙烯 苷 能 明 显抑 制 模 型 细 胞 ａ ｓｎ的 过 表 达 和 聚 集 ，减 低 ｓｎ ｈｌ － １表 达 ，提 高 ～ ｙ ｙ ｐ ｉｎ ｉ
何 首乌二苯 乙烯苷对神经 突触 的影响及作用机制研究
孙 芳玲 李 林
首都医科大学宣武医院药物研究室教育部神经变性病学重点实验室
北京 １０ ５ ００ ３
目的 ：突触 功 能障碍 在 阿 尔 茨海 默 病 （ ＡＤ） 、帕 金森 病 （ Ｄ） 和路 易小 体痴 呆 （ Ｌ ）等 Ｐ Ｄ Ｂ 神经 退行 性疾 病 的病 程进 展 中起 到重要 作用 。ａ ｙ ｕｌｉ 脑 内一 种 突触 前 蛋 白，与家 族性 早 —ｓｎ ｃｅ ｎ是
发帕金森病密切相关 ，是散发性帕金森病和其他神经退行性病变 中路易小体的主要成分 ，并且 是Ａ Ｄ老年斑的非 Ａ３ ｌ 成份 。何首乌二苯乙烯苷是从何首乌中提取 的有效成分 ，我们的前期研究 表明，其能够改善 Ａ Ｐ转基 因小 鼠的认知功能，抑制海马 ａ ｙ Ｐ —ｓｎ的过表达 和聚集 ；能够抵抗 ＭＰ ＋导致的氧化应激和线粒体损伤 ，抑制细胞凋亡 。但是 ，二苯 乙烯苷是否能够影 响海马 区 Ｐ
其 他 突触 蛋 白的表 达 ，是 否对 黑 质纹 状 体 部 位 的突 触 结 构 和 功 能也 有 影 响 ，尚不 清 楚 。本 研 究
应用 自然衰老动物模型，研究二苯 乙烯苷对 老年小 鼠脑 内海马 、大脑皮层和纹状体多个脑 区神
经 突触 的影响及 其 作用 机制 ；同 时采 用 ＭＰ ＋ 损 伤 Ａ５Ｔ 突 变 型 ａ ｓｎ基 因转 染 Ｓ Ｐ ３ — ｙ Ｈ— Ｓ Ｙ Ｙ５
细胞模型 ，探讨二苯乙烯苷的干预作用及可能机制 。结果 ：（ ）二苯乙烯苷灌 胃给药 ３ １ 个月可
明显缩短老年小 鼠在 Ｍｏｒ 水迷宫 中的逃避潜伏期 ，延长避暗试验的潜伏期 ，减少避 暗试验的 ｒｓ ｉ 错误次数 ；能够 明显延长老年小 鼠的在棒时间 ，缩短爬杆时掉转 时间和从杆上爬下时间，表明
浆后 ，用荧光素酶测定试剂盒检测融合蛋 白在脑内的含量 ，并通过罗丹明 Ｂ标记分析 Ｒ ＶＧ在 昆 明种小 鼠的体 内分布 （５ ｉ、５ ） １ｍ ｎ ｈ 。结果显示荧光素酶融合蛋 白在 １ｍｉ ５ ｎ时在脑和脊髓均有很
高分 布 ，５ ｈ时在 体 内 已基 本代 谢 完全 ；同时 ，１ ｍｉ ５ ５ ｎ和 ｈ均在 大脑 和脊 髓也 观察 到 罗 丹 明 Ｂ标 记的 Ｒ ＶＧ，而 外周 组织 的分布 却很 少 。这说 明了 Ｒ ＶＧ 具有很 高 的 嗜神经 性 。将 Ｒ ＶＧ 与脑 源 性 神经 营 养 因子 （ ｒｉ—ｄｒ ｅ ｅｒｔｏ ｈｃｆｃｏ ，Ｂ ＮＦ）构 建成 新 的载 体 ，在 Ｂ ２ ｂａ ｎ ｅｉ ｄｎ ｕｏｒｐ ｉ ａｔｒ Ｄ ｖ Ｌ １中诱 导
抗血小 板聚集作用及机制研究
杨 宏艳 王 晓 良
中国 医学科 学 院药 物研究 所 北京 协 和 医学院
北京
１０ ５ ０ ００
目的：２ （ 一羟基戊基）苯甲酸钾盐 （ｌ Ｈ Ｂ 一 Ｑ ｄ—Ｐ Ｐ ）是医科 院药物所 自行设计合成的全新 化合物 ，目前正开发为治疗脑缺血 的一类新药。我室前期实验研究结果表 明 ｄ—Ｐ Ｂ可改善 ｌ ＨＰ 大脑中动脉栓塞 （ ＡＯ ＭＣ ）大鼠缺血区脑血流 ，减少梗死体积 ，抑制血栓形成 。但其抗血栓的