HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量_曾荣华
HPLC法测定复方丹参片中三七含量的探讨
ＨＰＬＣ法测定复方丹参片中三七含量的探讨目的：建立复方丹参片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rbl含量测定的HPLC 法。
方法：采用Venusil-XBP-C18色谱柱(250×4.6mm，5μm)，以乙腈(A)和水(B)为流动相梯度洗脱，流动相梯度：0min(20％A)→12min(20％A)→60min(36％A)。
流速：1.0ml.min-1，柱温：30℃，检测波长：203nm。
结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rbl线性范围分别为0.99～4.95ug、3.14～15.7μg、2.27～11.35μg。
该方法加样回收率：三七皂苷R199.8％、人参皂苷Rgl为99.5％、人参皂苷Rb1,为99.8％，RSD分别为0.87％、0.62％、0.90％。
结论：本法操作简便、结果准确、灵敏度高，重复性好，能有效的控制复方丹参片的质量。
标签：复方丹参片；HPLC;三七皂苷Rl；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；含量测定复方丹参片由丹参、三七、冰片组成，具有活血化瘀、理气止痛的功效。
用于气滞血瘀所致的胸痹。
《中国药典》规定测定丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量，未对三七进行质量控制。
笔者认为，三七在复方丹参片中是主要成分，为了有效控制其产品质量，应对其进行质量控制。
本文采用高效液相色谱法测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1,的含量，结果表明，本法简便、迅速、结果准确，现报道如下。
1仪器试剂与材料1．1仪器高效液相色谱仪(日本岛津)，LC－10ATVP泵，SPD－10PVP紫外一可见检测器，CTO－10ASVP柱温箱，SCL－10A VP系统控制器，CLASS－VPLC工作站。
1．2试剂对照品：三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Rb1,分别由中国药品生物制品检定所提供(批号分别为：110745-200312 110703-0200322 110704-200318)。
乙腈、甲醇为色谱纯；水为超纯水。
复方丹参片含量测定与化学模式识别研究
复方丹参片含量测定与化学模式识别研究作者：崔新刚王颖莹王新胜来源：《中国民族民间医药·上半月》2021年第11期【摘要】目的：通过化学模式识别研究，评价复方丹参片的质量。
方法：采用HPLC法对复方丹参片中丹参酮IIA、丹酚酸B、三七皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1及人参皂苷Re进行含量测定，结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘判别分析对复方丹参片质量进行评价。
结果：主成分分析和聚类分析结果基本一致，正交偏最小二乘判别分析法结果表明不同厂家复方丹参片的指标成分含量存在差异。
结论：化学模式识别为不同厂家复方丹参片的质量控制提供参考。
【关键词】 HPLC;指标成分;化学模式识别【中圖分类号】R284.3 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2021）21-0062-05Chemical Component Analysis and Chemical Pattern Recognition from Compound Danshen TabletCUI Xingang1 WANG Yingying2 WANG Xinsheng31.Luoyang Maternal and Child Health Hospital，Luoyang 471023，China;2.School of Chemical Engineering and Pharmaceuticals， Henan University of Science and Technology， Luoyang 471023，China;3.Luoyang Food and Drug Inspection Institute，Luoyang 471023，ChinaAbstract：Objective The quality of compound Danshen tablets from different manufacturers was evaluated using chemical pattern recognition.Methods The contents of tanshinone IIA， salvianolic acid B， and panax notoginseng saponins were determined using HPLC method. Principal components analysis， cluster analysis and orthogonal partial least square-discriminate analysis were performed using IBM SPSS 18.0 Statistics software and SIMCA-P 14.5 software.Results The results of principal components analysis and cluster analysis showed that the samples from the same manufacturer could be clustered into one category. The results of orthogonal partial least square-discriminate analysis showed the contents of index compounds were different from different manufacturers.Conclusions The results of chemical pattern recognition can offer reference for quality control of compound Danshen tablet.Key words：HPLC;Index Component;Chemical Pattern Recognition复方丹参片系由丹参、三七、冰片组成的中药复方制剂，具有活血化瘀、理气止痛作用，为《中国药典》2015版收载的成方制剂[1]。
采用HPLC法测定三七中3种皂苷的含量
采用HPLC法测定三七中3种皂苷的含量目的研究探讨采用高效液相色谱仪测定复三七中三种皂苷含量的临床应用价值。
方法以三七总皂苷分散片为研究对象，对其中的人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1含量进行检测。
结果不同批次三七总皂苷分散片中，人参皂苷Rb1含量在17.91 mg/片～18.23 mg/片，人参皂苷Rg1含量在17.12 mg/片～17.65 mg/片，三七皂苷R1含量在4.73 mg/片～4.82 mg/片。
结论通过高效液相色谱仪（HPLC）可以同时对三七中不同皂苷的含量进行准确定量，且具有操作简单、快捷的优点，重复性好，稳定性强，可以用于三七相关药物质量控制的过程中，值得推广应用。
标签：高效液相色谱；三七；皂苷；含量三七是我国传统医学中最珍贵的药材之一，具有止血、补血、活血、抗血栓等多种功效[1]。
本文以三七总皂苷分散片为研究对象，通过高效液相色谱法对三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1等三种皂苷含量进行测定，并对其具体操作方法及检测结果进行分析。
具体报告如下。
1资料与方法1.1一般资料仪器：选择日本岛津仪器生产的LC-10A高效液相色谱仪（组成部分有微体积串联双柱塞、柱温箱、紫外可见双波长检测器、超声波提取器HS 3120、中文化LC工作站）。
试剂：对照品人参皂苷Rb1（批号：110703-201420）、对照品人参皂苷Rg1 （批号：110703-201421）、对照品三七皂苷R1 （批号：110703-201423）；三七总皂苷分散片（三七总皂苷含量为50 mg/片）；洗脱剂乙腈（色谱纯）、甲醇（分析纯）、水（超纯水）。
其中，对照品皂苷购自中国食品药品检定研究院，三七总皂苷分散片为自制，洗脱剂购自津市科密欧化学试剂开发中心。
1.2方法分别取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品进行精密称定，并使用浓度为20%的乙腈水溶液对其进行溶解，并制成1 ml的混合溶液（其中人参皂苷Rb1含量为0.5 mg、人参皂苷Rg1含量为0.4 mg、三七皂苷R1含量为0.12 m）。
复方丹参片测定HPLC液相谱图（2010药典三七皂苷测定）_复方丹参片2015药典
复方丹参片测定HPLC液相谱图(2010药典三七皂苷测定)_复方丹参片 2015药典复方丹参片测定HPLC液相谱图(2010药典三七皂苷测定) 样品名称: 复方丹参片参考标准:2010 版增补版一部复方丹参片测定HPLC液相谱图(2010药典三七皂苷测定)_复方丹参片2015 药典1 概述复方丹参片，中成药，研制方，片剂。
组成：丹参浸膏、三七、冰片。
功能：活血化瘀理气止痛。
主治：胸痹心痛。
症见胸闷、心悸、心痛气短、面色苍白、四肢厥冷、唇舌青紫黯红等。
用法：1次3片，1日3次。
该药由华山医院与上海中药制药二厂研制，经临床观察377例冠心病患者，结果其心绞痛显效率为34.7%，改善率为50.9%，总有效率为85.6%。
治疗颅外伤后神衰综合征122例，有效率达90.2%。
实验研究表明，该药对垂体后叶素引起的急性心肌缺血和缺氧有显著的保护作用，能增加离体豚鼠心脏的冠脉流量，延长小鼠耐常压缺氧时间。
能延长小鼠的正常凝血时间，明显抑制氯仿引起的小鼠心室纤颤和缩短氯化钡引起的大鼠心律失常时间，显示一定的抗心律失常作用。
豚鼠心脏灌流结果表明，该药可提高缺氧灌流所致心衰的冠脉流量。
2 复方丹参片药典标准2.1 品名复方丹参片Fufang Danshen Pian2.2 处方丹参450g、三七141g、冰片8g2.3 制法以上三味，丹参加乙醇加热回流1.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适量，备用；药渣加50%乙醇加热回流1.5小时，提取液滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适量，备用；药渣加水煎煮2小时，煎液滤过，滤液浓缩至适量。
三七粉碎成细粉，与上述浓缩液和适量的辅料制成颗粒，干燥。
冰片研细，与上述颗粒混匀，压制成333片，包薄膜衣；或压制成1000片，包糖衣或薄膜衣，即得。
2.4 性状本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显棕色至棕褐色；气芳香，味微苦。
2.5 鉴别（1）取本品，置显微镜下观察：树脂道碎片含黄色分泌物（三七）。
快速高分离度液相色谱(RRLC)法测定复方丹参片中三七的含量
快速高分离度液相色谱(RRLC)法测定复方丹参片中三七的含量摘要：目的：采用高效液相色谱法（HPLC）和高分离度快速液相色谱法（RRLC）测定复方丹参片中三七含量。
方法：采用HPLC法（药典方法）和高分离度快速液相色谱法（RRLC），Eclipse plus C18 3.5μm，4.6*100mm柱，流动相为乙腈和水梯度洗脱；流速：1.0mL/min ；检测波长：203nm；柱温：25℃。
结果：《中国药典》2010年版第一增补本中，复方丹参片中三七含量测定用HPLC（高效液相色谱）法，此法分析需要高性能的系统和很长的分析时间。
利用RRLC（高分离度快速液相色谱）法分析简便、快速，高效、节省溶剂和时间，线性关系良好。
结论： RRLC法简便可行，分析时间短，重复性好，可用于复方丹参片中三七的4种有效成分的含量测定。
关键词：复方丹参片；三七；含量测定； RRLC复方丹参片中用RRLC进行三七含量测定研究的文献并不多,其他研究主要集中在对三七药材的HPLC法研究和UPLC（超高效液相色谱）法研究。
本文采用高效液相色谱法（HPLC）和高分离度快速液相色谱法（RRLC）测定复方丹参片中三七含量。
建立测定复方丹参片中三七含量的RRLC（高分离度快速液相色谱）法。
1.仪器和试药1.1 仪器Agilent1260高效液相色谱仪(YX001)，附紫外检测器；MS205DU天平（METTLER TOLEDO）；AL-204天平（METTLER TOLEDO）； KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超生仪器有限公司）；微量无机除热原型超纯水机（型号：SC082664）；1.2 试药乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯，水。
2.方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Eclipse plus C18 3.5μm，4.6*100mm柱流速：1.0ml/min柱温：30℃；紫外检测波长：203nm流动相：乙腈为流动相A ,以水为流动相B ,按下表进行梯度洗脱。
HPLC测定三七伤药片中人参皂苷Rgl的含量
HPLC测定三七伤药片中人参皂苷Rgl的含量摘要：目的建立三七伤药片中人参皂苷Rgl高效液相色谱含量测定方法。
方法采用Agilent1260高效液相色谱法，使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂Agilent SB - C18 4.6×250mm色谱柱，流动相为乙腈一水梯度洗脱，检测波长203cm，柱温：30℃结果该方法人参皂苷Rgl含量在（0-0.015）mg/mL范围内线性良好，人参皂苷Rgl平均回收率为97. 8%。
结论该方法比《中国药典》科学、准确，并能够检测出三七伤药片中有效成分人参皂苷Rgl含量。
关键词：HPLC；三七伤药片；人参皂苷Rgl；含量中图分类号：R284文献标志码：A文章编号：1007 - 2349（2015）02 - 0068 - 03三七是三七伤药片中最主要的药材之一，现标准中主要控制三七伤药片中柚皮苷含量，没有测定其三七中皂苷类成分，本方法采用液相色谱法测定三七伤药片中人参皂苷Rg1的含量，完善了三七伤药片的质量控制，保证了药品的质量。
1 仪器与试药高效液相色谱仪（德国Agilent公司1260，HPLC，紫外检测器）、超声波仪（上海科导有限公司功率：350 W、工作频率：53 KHz）、电子天平（梅特勒一托利多XP204）、色谱柱（十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂Agilent SB - C18 4.6×250 mm）。
人参皂苷Rgl对照品（中国食品药品检定院提供，批号为（110703 - 201027）、色谱纯的乙腈（德国merk公司提供）、纯化水（过0. 22 um的密理博制纯水机）。
2方法与结果2.1 溶液的制备2.1.1 对照品溶液精密称取人参皂苷Rgl对照品约5mg，置10 mL量瓶中，加甲醇适量溶解，并用甲醇稀释至刻度。
2.1.2供试品溶液取三七伤药片40片，除去糖衣，精密称定，研细，取约1.0g，精密称定，置50mL 容量瓶中，加甲醇40 mL，超声处理30 min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得。
高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1含量
高效液相色谱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1、Re、Rb1与三七皂苷R1含量一、本文概述Overview of this article本文旨在探讨高效液相色谱法（HPLC）在测定三七总皂苷中主要活性成分——人参皂苷RgRe、Rb1以及三七皂苷R1含量的应用。
三七，作为传统中药材，具有广泛的应用价值和药理作用，其中人参皂苷和三七皂苷是其主要的药效成分。
通过准确测定这些成分的含量，对于三七的质量控制、药效评价以及临床用药指导具有重要意义。
This article aims to explore the application ofhigh-performance liquid chromatography (HPLC) in the determination of the main active ingredients in total saponins of Panax notoginseng - ginsenoside RgRe, Rb1, and Panax notoginseng saponin R1 content. Sanqi, as a traditional Chinese medicinal herb, has extensive application value and pharmacological effects, among which ginsenosides and Sanqi saponins are its main medicinal components. Accurately determining the content of these components is of greatsignificance for the quality control, efficacy evaluation, and clinical medication guidance of Panax notoginseng.高效液相色谱法作为一种高效、灵敏的分离分析技术，在中药材及其制剂的成分分析中具有广泛的应用。
药物分析辅导：复方丹参片含量测定方法
复方丹参片处方为：丹参450g，三七141g，冰片8g。
2005《中国药典》复方丹参片含量测定项下：丹参酮ⅡA：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270nm。
理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。
供试品溶液的制备：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。
丹酚酸B：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-甲酸-水（10：30：1：59）为流动相；检测波长为285nm。
理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于4000。
供试品溶液的制备：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取0.15g，精密称定，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。
卢绵等用GC法测定复方丹参片中冰片的含量，色谱柱以5%苯基取代聚硅氧烷（HP-5）为填充剂，30m×0.323mm ×0.25μm，采用FID检测器，程序升温为 110～140℃，升温速率为8.0℃/min，进样口温度为200℃，检测器温度为250℃，N2（载气）100kPa，H2 50 kPa，干燥空气50 kPa，样品用无水乙醇超声处理，以水杨酸甲酯为内标。
以丹参酮ⅡA为指标的，除药典方法外，其它如：薄层扫描法：张宏伟等用薄层扫描法测定复方丹参片中丹参酮ⅡA的含量，薄层板为硅胶G预制板，以苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，扫描波长为270nm。
样品用乙醚超声提取。
马红斌等用双波长扫描法测定复方丹参片中丹参酮ⅡA的含量，以苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，双波长反射式锯齿扫描，λS=275nm，λR=215nm，样品用乙酸乙酯超声提取。
高效液相色谱法(HPLC)测定三七药材中成分含量研究
高效液相色谱法（HPLC）测定三七药材中成分含量研究发表时间：2018-11-30T10:34:06.100Z 来源：《健康世界》2018年21期作者：曹本男[导读] 高效液相色谱法（HPLC），已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
山西省运城市食品药品检验所 044000摘要：高效液相色谱法（HPLC），已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
近年来，在药品成分含量的测定中也得到广泛应用。
本文针对采用高效液相色谱法对三七中各成分含量进行测定的方法做一阐述和分析，以期为三七药材的检验及质量控制提供参考。
关键词：高效液相色谱法；HPLC；三七；含量测定高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析[1]。
1三七来源及性状三七为五加科植物三七的干燥根及根茎。
支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”。
主根呈类圆锥形或圆柱形。
表面灰褐色或灰黄色。
顶端周围有瘤状突起。
体重，质坚实，击碎后皮部与木部常分离，断面灰绿色、黄绿色或灰白色。
气微，味苦回甜。
筋条呈圆柱形，上端直径约0.8cm，下端直径约0.3cm。
剪口呈不规则的皱缩块状及条状，表面有数个明显的茎痕及环纹，断面中心灰白色，边缘灰色[2]。
2质量标准2.1《中国药典》2000年版一部三七项下规定含量测定：照薄层色谱法进行扫描，本品含人参皂苷Rb1（C54H92O23）和人参皂苷Rg1（C4d-172014）的总量不得少于3.8％[3]。
2.2《中国药典》2005年版一部三七项下新增根茎入药（1）增订：水分：用水分测定法测定，不得过14.0％；总灰分：不得过6.0％；酸不溶性灰分：不得过3.0％；浸出物：用熟浸法测定，本品含甲醇浸出物不得少于16.0％。
HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量
HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量
曾荣华;邓雪媚;卢慧娴;莫肇江;刘燕
【期刊名称】《中国医药指南》
【年(卷),期】2010(008)006
【摘要】目的建立复方丹参片中三七有效成分的含量测定方法.方法采用HPLC 法测定本品中三七中人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量.结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为0.850～8.524、0.922～9.013、0.377～3.317μg;平均回收率分别为
101.1%,101.2%,103.2%,RSD分别为1.5%、1.6%、1.8%.结论本方法简便可靠,结果稳定,可用于丹心舒胶囊中三七的有效成分的舍量测定.
【总页数】3页(P21-23)
【作者】曾荣华;邓雪媚;卢慧娴;莫肇江;刘燕
【作者单位】广东省肇庆市第一人民医院药剂科,526021;广东省肇庆市第一人民医院药剂科,526021;广东省肇庆市第一人民医院药剂科,526021;广东省肇庆市第一人民医院药剂科,526021;广东省肇庆医学专科学校,526021
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.HPLC法测定复方丹参片中丹参脂溶性成分的含量 [J], 张海江;胡静雅;袁日琴
2.HPLC-ELSD法同时测定复方丹参片中4种皂苷的含量 [J], 吴笛;叶秋雄;王德勤;
覃仁安
3.HPLC-ELSD法同时测定复方丹参缓释片中丹参酮ⅡA和人参皂苷Rb1含量 [J], 王金香;叶斌
4.HPLC法测定三七总皂苷分散片中三种皂苷的含量 [J], 侯安国;康绍建;刘苏宝;陈凌云;蒋小华
5.复方丹参片中三七总皂苷的含量测定 [J], 塔娜;李常胜;松林
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定三七及复方丹参片中三七皂苷R_1和人参皂苷R_g1_的含量
取样量 人参皂苷 +/# 对照品加 ,/ #. *&"! #. *’#% #. *!&! #. *$!’ #. *$%" 含量 , 2/ #$. &#&$ #$. &’)* #$. #*’! #$. !**( #$. !!"" 入量 , 2/ ". !&! ". !&! ". !&! ". !&! ". !&!
图! 表"
成分 三七皂苷 60
三七及复方丹参片 2345 图谱
线性关系考察结果
线性范围 #9 !( ; 0#9 #( !7 #9 .# ; !)9 -, !7 相关系数 # 09 #### #9 ,,,#
（ $ 8 (）；人参皂苷 670 峰面积的平均值为 01))#， 6@A 为 #9 "! + （ $ 8 (）。 !" & 重 现 性 试 验 精密称取同一复方丹参片 （ 批 号： #!#0)1 B !） ( 份，依法平行测定 ( 次，三七皂 苷 60 的 平 均 含 量 为 09 #) %7 $ 片 ， 6@A 为 !9 0- + （$ 8 (） ； 人 参 皂 苷 670 的 平 均 含 量 为 )9 -) %7 $ 片，6@A 为 09 "! + （ $ 8 (）。 !" ’ 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，每间 隔 ! > 进样 0 次，共进样 ( 次，三七皂苷 60 峰面积 的平均值为 0#.1，6@A 为 #9 "( + （ $ 8 (）；人参皂 苷 670 峰 面 积 的 平 均 值 为 (!!!， 6@A 为 #9 (, + （ $ 8 (）。供试品溶液在 - > 内基本稳定。 !" ( 加 样 回 收 率 试 验 取同一复方丹参片供试品 （ 批 号 ： #!#0)1 B !， 含 量 为 三 七 皂 苷 60 09 #))0 %7 $ 片、人参皂苷 670 )9 -!(# %7 $ 片） ( 份，精密称 定，分别精密加入对照品溶液 ( %4，混匀，干燥。 精密加入甲醇 !( %4，分别按含量测定方法处理，进 样测定，并计算回收率。结果见表 )，1。
HPLC测定不同厂家复方丹参片中三七皂苷R1和人参皂苷Re、Rg1、Rb1含量
９８．３６％，９７．５４％，９６．０７％，ＲＳＤ分别为４．４１％，１．６４％，２．７７％，１．１２％。结论：本测定方法简便可行、重复性好，可用于
本制剂中三七多种有效成分的含量测定。
中图分类号：Ｒ９２７．２
文献标识码：Ａ
文章编号：１００１—１５２８（２００９）０１－．００７１－０３
收稿日期：２００８－０４－０２ 基金项目：国家自然基金（３０６７２６７０）；国家科技部。十一五”支撑项目（２００６ＢＡＩＯＰＢ０８－０２） 作者简介：冯中（１９８３一）。男，硕士研究生，从事中药新剂型新技术研究。Ｔｅｌ：（０２０）３９３３５２５４１ Ｅ·ｍａｉｌ：ｆｅｎｇｚｈｏｎ９２２＠１６３．ＰＡｔｔｉ ·通讯作者：吴燕红（１９６９一），高级工程师，从事中药新药研究和开发。Ｔｅｌ：（０２０）３９３５２５４１
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｄａｎｓｈｅｎ Ｔａｂｌｅｔｓ；ｎｏｔｏｇ］＂ｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｌ；ｇｉｎｓｅｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ
Ｒｂｌ；ＨＰＬＣ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＡＩＭ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｄａｎｓｈｅｎ Ｔａｂｌｅｔｓ（Ｒａｄｉｘ ｅｔ Ｒｈｉｚｏｍａ Ｓａｌｖｉａｅ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａｅ，Ｒａｄｉｘ ｅｔ Ｒｈｉｚｏｍａ Ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ，Ｂｏｒｎｅｏｌｕｍ Ｓｙｎｔｈｅｔｗｕｍ） ｂｙ ＲＰ—ＨＰＬＣ．ＭＥＴＨｏＤＳ：ｒ１１ｌｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｌ，ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ’ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ ａｎｄ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｂｌ ｗｅｒｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ａｌｌ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍ ｗｉｔｈ Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃｌｓ（５ ｐ．ｍ，２５０ ｍｍ ｘ ４．６０ ｎｌｎｌ），ｔｈｅ ｍｏ－ ｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ＣＨ３ＣＮ－０．０５％Ｈ３Ｐ０４（ＣＨ３ＣＮ ０—１２ ｍｉｎ：２２％；１２－２０ ｒａｉｎ：２２％－２８％；２０－６０ ｍｉｎ：２８％－４３％）．
RP-HPLC法测定复方丹参滴丸中三七皂苷R_1的含量
RP-HPLC法测定复方丹参滴丸中三七皂苷R_1的含量
李伟;张文生;魏峰
【期刊名称】《药物分析杂志》
【年(卷),期】2004(24)6
【摘要】复方丹参滴丸是由丹参、三七、冰片组成的复方制剂，具有活血化瘀、理气止痛之功能，主要用于冠心病的心绞痛、胸闷的治疗，具有起效快、用量小、副作用少等特点。
臣药三七的主要活性成分为三七皂苷和人参皂苷，而三七皂苷R1是三七区别于人参的特有活性成分。
【总页数】2页(P642-643)
【关键词】RP—HPLC法;测定;复方丹参滴丸;三七皂苷R1;含量;中药
【作者】李伟;张文生;魏峰
【作者单位】天津天士力集团现代中药研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.RP-HPLC梯度洗脱法测定血塞通片中三七皂苷R_1、人参皂苷Rb_1及人参皂苷Rg_1的含量 [J], 苏静;朱卫泉
2.HPLC-ELSD法测定复方丹参滴丸中人参皂苷R_(g1)、R_(b1)和三七皂苷R_1的含量 [J], 黄永焯;王宁生
3.RP-HPLC法测定舒胸胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1的含量 [J], 汪霞
4.RP-HPLC法测定血塞通中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1的含量 [J], 黄超;张幼成;吴伟东
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中国医药指南 2010 年 2 月第 8 卷第 6 期Guide of China Medicine, February 2010, V ol.8, No.621论 著和预后的辅助指标。
综上所述，采用免疫组织化学SP法检测p53、VEGF、PCNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达，对于判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后有较好的临床应用价值。
参考文献[1] Lane DP. P53 guanlian of the genoma [J].Nature,1992,358(6381):15-16.[2] 阎洪涛,龚百生,廖勇,等.膀胱移行细胞癌组织中P53和血管内皮生长因子表达的关系及临床意义[J].中华泌尿外科杂志,2006, 27(3):178-180.[3] Ferrara N,Henzel WJ. Pituitary follicular cells secrete a novelheparin-binding. Growth factor. Specifi c for vascular endothelial cells [J]. Biochem Biophys Res Commun,1989,161(2):851-858.[4] 郭雪涛,崔明玉.P53、P16、TGF-α、EGFR、VEGF在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义[J].现代泌尿外科杂志,2007,14(4): 225-228.[5] Miyachi K,Frilzler MJ,Tan EM,et al. Autoantibody to a nuclearantigen in proliferating cells [J].J Immunol,1978,121(6):2228-2234.[6] 卢童,杨为民,章群. 膀胱移行细胞癌组织中P16、P53和PCNA的表达及其意义[J].临床泌尿外科杂志,2008,23(1):58-60.复方丹参片是2005年版《中国药典》一部收载的品种，由丹参、三七和冰片三昧药组成，有活血化瘀、理气止痛之功效，用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉，增加血流量，减少心肌耗氧量，改变血液流变性。
同时也能改善糖尿病患者心、脑血管及神经系统并发症的症状及体征。
三七是复方丹参片的重要药物组成，国内文献报道[1-3]。
对不同厂家生产的本品的含量比较只是针对丹参中主要成分丹参酮ⅡA和丹酚酸B。
三七总皂苷含量变化幅度较大，致使药品质量和疗效存在很大的差异。
三七中的主要有效成分是人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，已有文献报道采用HPLC法测定以上成分的含量来控制制剂的质量[4,5]。
本文采用HPLC法，同时对复方丹参片中的三七总皂苷3种主要有效成分进行了含量测定，可用于控制复方丹参片的质量，保证其临床用药有效性提供参考。
1 资料与方法1.1 资料仪器与试剂：Agilentl100高效液相色谱仪（美国惠普公司）；Agilentl100系列可变波长检测器；Diamonsil C18柱（5μm，250mm×4.6mm，迪马公司）；BP211D电子分析天平（北京塞多利斯天平有限公1 广东省肇庆市第一人民医院药剂科（526021）2 广东省肇庆医学专科学校（526021）HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量曾荣华1邓雪媚1卢慧娴1莫肇江1刘燕2【摘要】目的建立复方丹参片中三七有效成分的含量测定方法。
方法采用HPLC法测定本品中三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。
结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为0.850~8.524、0.922~9.013、0.377~3.317μg；平均回收率分别为101.1%、101.2%、103.2%，RSD分别为1.5%、1.6%、1.8%。
结论本方法简便可靠，结果稳定，可用于丹心舒胶囊中三七的有效成分的含量测定。
【关键词】复方丹参片；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；三七皂苷R1；含量测定中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2010）06-0021-03Determiation the Contents of Panax Notoginseng Saponins in Compound Danshen Tablets by HPLCZENG Rong-hua1,DENG Xue-mei1,LU Hui-xian1,MO Zhao-jiang1, LIU Yan2(1 Department of Pharmacy, The First People' s Hospital of Zhaoqing, Zhaoqing 526021,China;2 Zhaoqing Medical College, Zhaoqing 526021, China)[Abstract]Objective To analyze the active compounds of Panax notoginseng and Salviae miltiorrhizae in Compound Danshen Tablets. Methods HPLC was used to analyze the contents of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1 and notoginsenoside R1 in Compound Danshen Tablets. Results The linear ranges of ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1, and notoginsenoside R1 were 0.850~8.524, 0.922~9.013, 0.377~3.317μg. With average recoveries of 101.1%(RSD=1.5%), 101.2% (RSD =1.6%), 103.2% (RSD=1.8%). Conclusion The method is simple, reliable and stable, which could be used for the quality control of Compound Danshen Tablets.[Key words]Compound Danshen Tablets; Ginsenoside Rg1; Ginsenoside Rb1; Notoginsenoside R1; Determination司）；KQ100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
人参皂苷Rg1（批号：110703-200637）、人参皂苷Rb1（批号：110704-200634）、三七皂苷R1（批号：110745-200619），对照品均供含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供。
实验中乙腈为色谱纯，水为纯净水，甲醇为分析纯；复方丹参片（广州白云山中药厂）。
1.2 方法1.2.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C18柱（5μm，250mm×4.6mm）；以乙腈为流动相A，0.05%磷酸水溶液为流动相B，进行二元梯度洗脱，洗脱程序[6]：0→12min流动相A 22%，12→20min流动相A 22%→28%，20→60min流动相A 28%→43%；流动相B 81%→64%；流速：1.0mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：203nm，进样量为10μL。
1.2.2 供试品溶液的制备取复方丹参片20片(除去包衣)，研碎，精密称取约0.8g，加乙醚DOI:10.15912/ki.gocm.2010.06.02410mL ，超声5min ，过滤，弃去滤液，残渣挥干溶剂，加20mL 甲醇于水浴上回流60min ，放冷，过滤，滤液蒸干，加水微热溶解，定容至5mL ，摇匀，精密吸取上清液1.00mL ，加于Strata TM C 18-E 固相萃取小柱上（小柱先用5mL 甲醇和5mL 纯水预先冲洗处理）[7]，分别用5mL 纯水和5mL 20%甲醇水溶液洗脱，弃去洗脱液，再用5mL 70%的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，用甲醇定容至1mL ，用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液。
1.2.3 对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1对照品适量，分别加甲醇制成：人参皂苷Rg1质量浓度为0.462mg/mL 、人参皂苷Rb1质量浓度为0.368mg/mL ，三七皂苷R1质量浓度为0.105mg/mL 的溶液，将三者混合作为对照品溶液。
2.1.4 缺三七阴性对照溶液的制备按2005年版中国药典中复方丹参片中的处方，取处方中除三七外的其余药材按制剂工艺制成缺三七的阴性对照品，按2.2项下的供试品制备方法处理得缺三七阴性对照液，精密吸取溶液10μL 进行测定结果显示：在该色谱条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1能够达到基线分离，阴性对照液在三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的相同保留时间位置上未见色谱峰，说明其他成分对测定无干扰。
2 结 果2.1 线性关系试验精密吸取混合对照品1、5、9、13、17μL 注入液相色谱仪测定，以进样量(μg)为横坐标（X ），峰面积为纵坐标（Y ），绘制标准曲线，计算回归方程，结果如表1所示。
表1 标准曲线结果表对照品回归方程相关系数(r)线性范围(μg)人参皂苷Rg1Y=414.7X+9.2200.99970.850~8.524人参皂苷Rb1Y=235.0X+26.7150.99980.922~9.013三七皂苷R1Y=198.0X+17.280.99970.377~3.3172.2 精密度试验分别精密吸取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品溶液，于测定条件下进样10μL ，分别重复进样5次。
以3种组分峰面积分别计算，结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD 分别为3.02%、3.18%、3.35%，结果表明仪器精密度良好。
2.3 重现性试验取同一批号的供试品，按供试品溶液制备项下操作，平行制备6份，按“2.1”项色谱条件测定，按外标法以峰面积计算样品含量。
结果样品中测得人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1平均含量分别为5.47、5.13、1.608mg/g ，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD 分别为3.17%，4.24%、2.31%。
测定结果表明，本方法重现性符合要求。
2.4 稳定性试验取同一批号供试品，室温下放置，分别在0、2、4、8、10、24h 进样，结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的RSD 分别为2.46%、3.57%、3.46%。