近交系小鼠过氧化氢酶-2遗传生化标记位点的研究
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标 记 ， 动物脏 器 组织 匀 浆 上 清液 、 液 中的 酶 、 将 血 蛋
白质等 进行 电泳后 ， 以特 异 的 生物 化 学方 法 进 行 染 色来识 别 待 测 的性 状 。 国家 标 准 Ｇ ／ ４ ２ ． － Ｂ Ｔ１９７ １ ２０ ０ ８中显 示小 鼠遗 传 生化标 记 检测 的 １ ４个 位点 里 有 ５个 生化位 点存 在 杂 和 形式 ， 且 其 相 应 的杂 合 并
没有 过氧 化 氢 酶一 ２的杂 合 型 图谱 的描 述 。过 氧 化
氢 酶一 ２是取 小 鼠 的 肾匀 浆 ， 行 醋纤 膜 电 泳 ， 据 进 根
电泳 条带 的快 慢 来 判 断该 位 点 的 基 因 型 。该 位 点
的染 色方 法 简 便 迅 速 ， 是 条 带 很 宽 ， 于 杂 合 型 但 对
ｄ ｉ ０． ９ ９ ｊ ｉ ｎ １ ７ ． ８ ６ ２ １ ． ６ ０ ３ ｏ ：１ ３ ６ ／．ｓ ． ６ １ ７ ５ ． ０ ０ ． ０ ｓ １
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［ 金 项 目 ］ 国 药 品生 物 制 品 检 定 院 中青 年 发 展 研 究 基 金 （ ０９ ８号 课 题 ） 基 中 ２０ Ｃ 。 ｆ 者 简介 ］ 洪 （９ ７一） 女 ， 理 研究 员 。研 究 方 向 ： 验 动 物遗 传 质 量 检 测 。 — ｉ ａｇｏｇ０ ６ ｈ ｔ ｉ ｃｒ。 作 王 １７ ， 助 实 Ｅｍａ ：ｗ ｎｈｎ２ ４ ＠ ｏ ｌ ｏ ｌ ｍａ ． ｎ
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中 国 比较 医学 杂 志 ２ １ 年 ６月 第 ２ ０１ １卷 第 ６期
Ｃ ｉ ＪＣ ｍ ｄ Ｊｎ ０ １ Ｖ １２ ． ｏ ６ ｈｎ ｏ ｐＭｅ ， ｕ ｅ２ １ ， ｏ． 未 见 相 关 报 道 。基 于 此 ， 文 对 小 也 本 鼠遗 传 生 化标 记 位 点 过 氧 化 氢 酶 一 杂 合 型 图谱 ２的
王 洪 ， 双环 ， 淑 菁 ， 刘 王 岳秉 飞
（ 中国 药 品 生 物 制 品 检定 院 ，北 京 １０ ５ ） ０ ０ ０
【 摘要 】 目的
点 进 行 研 究 。方 法
为 了进一步完善近交系小 鼠遗传生化标 记检测方法 ， 对近交系小 鼠过 氧化氢酶一 ２生化标 记位
将 Ｃ ＡＣ Ｂ ／ ａ与 Ｂ Ｌ ／ 交 配得 到杂 交 Ｆ 代 动物 ， 时 将 Ｃ Ａ Ｃ 与 Ｃ ７ Ｌ６交配 得 到 杂 交 Ｆ ＡＢｃ ｌ 同 Ｂ ／ａ ５Ｂ ／ １
６同居 ，２ｄ之后 ， ４ ６只 Ｆ ２代 动物 出生 。
来 自国 家 啮 齿 类 实 验 动 物 种 子 中心 ［ Ｃ Ｋ（ ） ＳＸ 京 ２ ０ —０ ４ 。 ０ ５０ ０ ］
１ ２ 实 验 材 料 、 器 及 试 剂 ． 仪
Ｄ组 ， １只雄 性 Ｃ Ｂ １与 ２只雌性 Ｃ Ｂ １同 将 ＣＦ ＣＦ
ＷＡ ｎ ，Ｌ Ｕ Ｓ ｕ ｎ —ｕ ｎ，ＷＡＮ Ｓ ｕｊ ｇ ＮＧ Ｈｏ ｇ Ｉ ｈ ａ ｇｈ ａ Ｇ ｈ —ｎ ，ＹＵＥ Ｂ ｎ —ｅ ｉ ｉｇｆｉ
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代动物 ， 然后 通 过 Ｆ 代 动 物 之 间 的交 配 ， ｌ 以及 Ｆ １代 动 物 与 母 代 的 回交 ， 到 Ｆ 得 ２代 动 物 ， Ｆ 对 ２代 动 物 进 行 过 氧 化
氢 酶 一 化标 记 检 测 。结 果 ２生
在杂交 Ｆ ｌ代 不 表 现 的过 氧化 氢 酶 一 ２的 ｂ型 基 因 ， Ｆ 在 ２代 出 现 。结 论 近 交 系 小 鼠
同居 ，０ｄ之 后 ， ３ ６只 Ｆ ２代 动物 出生 。
Ｆ组 ， １只雄性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 ６ Ｂ １与 １只雌 性 Ｂ Ｃ Ｆ ６ Ｂ１
同居 ，０ｄ之 后 ， ３ ７只 Ｆ ２代 动物 出生 。 取 六组 实验 的父 母 本 和 所有 Ｆ ２代 ， ５ 共 ２只动 物 ， 照 Ｇ ／ ４ ２ ． — ２ ０ 按 Ｂ Ｔ１９ ７ １ ０ ８对 ５ ２只小 鼠进行 ｃ 一 ｅ
进行 探 讨 。
１ ３ 实验 方 法 ．
Ｆ 代 的培育 ： １
将 １只雄 性 Ｃ Ａ Ｃ Ｂ ／ ａ与 ２只 雌 性 Ｂ Ｌ ／ Ａ Ｂ ｃ同 居 ，１ｄ之后 ， ２ ７只杂 交 Ｆ 代 动 物 Ｃ Ｂ １出生 。 １ ＣＦ 将 １只 雄 性 Ｃ Ａ Ｃ Ｂ ／ ａ与 ２只 雌 性 Ｃ ７ Ｌ ６同 ５Ｂ／
【 ｓｒｃ】 ０ｂｅｔ ｅ Ｔ ｏ ｓｍｍ ｔ ｇｎｔ ｉ ｈｍｃｌｍ ｒｅ ｆｉ ｒ ｉ ，ｗ ｔｄ ａ ｌ ｅ ｆ Ａｂｔ ｔ ａ ｊｅｉ ｏｃｎｕ ａ ｅｅ ｃｂｏ ｅ ｉ ａ ｒｏ ｎ ｅ ｍｃ ｖ ｅ ｉ ｃ ａ ｋ ｂｄ ｅ ｅ ｓ ｙ Ｃ ｔ ａ 一 ｏ ｕ ａｓ２
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和 ６。
表ｌ Ｆ ２代 小 鼠 过 氧 化 氢 酶 一 化 标 记 位 点 的基 因型 ２生
Ｔａｂ． Ｔｈｅ ｇ ｎ ｔｐｅ ｆＦ ｃ ｏ 一 ｏ ｈ ｍｉ ａ ｒ ｒ １ ｅ ｏｙ ｓｏ ２ ｍｉ ｅ ｆｒＣｅ２ ｂｉｃ ｅ ｃ ｌｍａ ｋｅ
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居 ，６ｄ之 后 ， ２ ７只 Ｆ ２代 动物 出生 。
来 自国 家 啮 齿 类 实 验 动 物 种 子 中心 ［ Ｃ Ｓ ＸＫ（ ） 京 ２ ０ －０ ４ ； ０ ５０ ０ ］
８ 龄 近 交 系小 鼠 ， ５ Ｂ ／ ， ， 周 Ｃ ７ Ｌ ６ 雌 ４只 ，Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
ｃ组 ， １只雄 性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 ６ Ｂ １与 ２只雌性 Ｃ ７ Ｌ ５Ｂ／
遗传 生 化 标 记 检 测 法 是 一 种 简便 、 速 、 确 迅 准 地保 证 近 交 系小 鼠遗 传 质 量 的 方 法 。选 择 一 些 在 品系间 具有 多 态 性 的 同工 酶 和 异 构 蛋 白作 为 生 化
图谱在 最 新 版 本 的 国家 标 准 中可 以找 到 。 杂 合 图 谱 为 近交系 小 鼠的遗 传 质量 控 制 提供 了判 断 依 据 。 过氧 化氢 酶一 近 交 系 小 鼠生 物 化 学标 记 基 因检 ２是 测法 的 １ 生化位 点之 一 ， 现行 的 国家标 准 里并 ４个 在
２ １ 年 ６月 ０１
中 国 比较 医 学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＯＭＰＡＲＡＴ ＶＥ ＭＥＤＩ Ｉ ＥＪ Ｉ Ｃ ＮＥ
Ｊｎ ２ ｕ ｅ ＯＩＩ
Ｖｏ ． ＮＯ ６ １２１ ．
第２ １卷
第 ６期
近 交 系小 鼠过 氧 化氢 酶 ． ２遗传 生 化 标记 位 点 的研究
过 氧 化 氢 酶 一 遗 传 生化 标 记 位 点 的等 位 基 因 ａ 完 全 显 性 的 。 ２ 是
【 关键 词】 小鼠 ； 近交系 ； 过氧化氢酶． ２ 【 中图分类号】Ｑ ８ ３ ２ ３ ；Ｒ ３ 【 文献标识码 】Ａ 【 文章编号 】１７ —８ ６ ２ １ ）６０ １ － ６ １７ ５ （０ １ ０ 。０ ２０ ４
１ 材 料 和 方 法
１ １ 实 验 动 物 ．
居 ，１ｄ之后 ， ２ ５只杂 交 Ｆ 代 动 物 Ｂ Ｃ Ｆ １ ６ Ｂ １出生 。
Ｆ ２代 的培育 ： Ａ组 ， １只雄性 Ｃ Ａ 与 ２只雌 性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 Ｂ ６ Ｂ １同
８周 龄 近 交 系 小 鼠 ， Ｂ ／ ａ 雄 ， Ｃ Ａ Ｃ ， ４只 ，Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
２遗传 生 化标 记检 测
２ 结 果
品生物 制 品检定 所提 供 。 醋酸纤 维素 膜 （ 纶 基 ） 浙 江 台州路 桥 四 甲生 涤 ， 化 塑料 厂提 供 。 电泳槽 ， 京市六 一仪 器 厂产 品 。 北
电泳仪 ， Ｉ — Ａ ｄ ｌ ０ ０ ｉ美 国 。 Ｂ Ｏ Ｒ Ｄ Ｍｏ ｅ ３ ０ Ｘ ，
。
毛 细管 离心 机 ，Ｅ Ｅ Ｔ ＩＵ Ｅ， 国。 Ｉ Ｃ ＭＢ Ｃ Ｎ Ｒ Ｆ Ｇ 美 低 温高 速离 心机 ， ＩＡ ＨＩ ０ Ｒ ５ Ｄ， Ｈ Ｔ Ｃ Ｐ 一２ 日本 。 ２
酸度 计 ，ａｔ ｉｕ Ｂ １ ， 国 。 ｓｒ ｒ ｓＰ 一０ 德 ｏｏ
六组 ５ ２只 Ｆ ２代 小 鼠过 氧 化 氢 酶 ２生 化 标 记 位 点 的基 因 型 和 表 现 型 ， 表 １和 图 １ ２ 、 、 、 见 、 ３４ ５
居 ，２ｄ之 后 ， ２ ９只 Ｆ ２代 动物 出生 。 Ｅ组 ， １只 雄 性 Ｃ Ｂ １与 ２只 雌 性 Ｂ Ｌ ／ 将 ＣＦ ＡＢｃ
Ｔｉ 和柠 檬 酸 ， 为分 析纯 ， 京 化 学试 剂 公 司 ｒ ｓ 均 北
提供。 Ｃ一 ｅ ２标准 样 品试剂 盒 及 染 色用 试 剂 盒 ， 国药 中
来 自上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 责 任 公 司 ［ Ｃ Ｋ ＳＸ （ ） ０ ７０ ０ ］ 沪 ２ ０ —０ ５ ；
８周 龄 近交 系小 鼠 ， Ａ Ｂ ｃ 雌 ， Ｂ Ｌ ／ ， ４只 ， Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
居 ，０ｄ之 后 ， ２ ５只 Ｆ ２代 动物 出生 。 Ｂ组 ， １只 雄 性 Ｃ Ａ 与 ２只 雌 性 Ｃ Ｂ １同 将 Ｂ ＣＦ
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标 记 ， 动物脏 器 组织 匀 浆 上 清液 、 液 中的 酶 、 将 血 蛋
白质等 进行 电泳后 ， 以特 异 的 生物 化 学方 法 进 行 染 色来识 别 待 测 的性 状 。 国家 标 准 Ｇ ／ ４ ２ ． － Ｂ Ｔ１９７ １ ２０ ０ ８中显 示小 鼠遗 传 生化标 记 检测 的 １ ４个 位点 里 有 ５个 生化位 点存 在 杂 和 形式 ， 且 其 相 应 的杂 合 并
没有 过氧 化 氢 酶一 ２的杂 合 型 图谱 的描 述 。过 氧 化
氢 酶一 ２是取 小 鼠 的 肾匀 浆 ， 行 醋纤 膜 电 泳 ， 据 进 根
电泳 条带 的快 慢 来 判 断该 位 点 的 基 因 型 。该 位 点
的染 色方 法 简 便 迅 速 ， 是 条 带 很 宽 ， 于 杂 合 型 但 对
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［ 金 项 目 ］ 国 药 品生 物 制 品 检 定 院 中青 年 发 展 研 究 基 金 （ ０９ ８号 课 题 ） 基 中 ２０ Ｃ 。 ｆ 者 简介 ］ 洪 （９ ７一） 女 ， 理 研究 员 。研 究 方 向 ： 验 动 物遗 传 质 量 检 测 。 — ｉ ａｇｏｇ０ ６ ｈ ｔ ｉ ｃｒ。 作 王 １７ ， 助 实 Ｅｍａ ：ｗ ｎｈｎ２ ４ ＠ ｏ ｌ ｏ ｌ ｍａ ． ｎ
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中 国 比较 医学 杂 志 ２ １ 年 ６月 第 ２ ０１ １卷 第 ６期
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王 洪 ， 双环 ， 淑 菁 ， 刘 王 岳秉 飞
（ 中国 药 品 生 物 制 品 检定 院 ，北 京 １０ ５ ） ０ ０ ０
【 摘要 】 目的
点 进 行 研 究 。方 法
为 了进一步完善近交系小 鼠遗传生化标 记检测方法 ， 对近交系小 鼠过 氧化氢酶一 ２生化标 记位
将 Ｃ ＡＣ Ｂ ／ ａ与 Ｂ Ｌ ／ 交 配得 到杂 交 Ｆ 代 动物 ， 时 将 Ｃ Ａ Ｃ 与 Ｃ ７ Ｌ６交配 得 到 杂 交 Ｆ ＡＢｃ ｌ 同 Ｂ ／ａ ５Ｂ ／ １
６同居 ，２ｄ之后 ， ４ ６只 Ｆ ２代 动物 出生 。
来 自国 家 啮 齿 类 实 验 动 物 种 子 中心 ［ Ｃ Ｋ（ ） ＳＸ 京 ２ ０ —０ ４ 。 ０ ５０ ０ ］
１ ２ 实 验 材 料 、 器 及 试 剂 ． 仪
Ｄ组 ， １只雄 性 Ｃ Ｂ １与 ２只雌性 Ｃ Ｂ １同 将 ＣＦ ＣＦ
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氢 酶 一 化标 记 检 测 。结 果 ２生
在杂交 Ｆ ｌ代 不 表 现 的过 氧化 氢 酶 一 ２的 ｂ型 基 因 ， Ｆ 在 ２代 出 现 。结 论 近 交 系 小 鼠
同居 ，０ｄ之 后 ， ３ ６只 Ｆ ２代 动物 出生 。
Ｆ组 ， １只雄性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 ６ Ｂ １与 １只雌 性 Ｂ Ｃ Ｆ ６ Ｂ１
同居 ，０ｄ之 后 ， ３ ７只 Ｆ ２代 动物 出生 。 取 六组 实验 的父 母 本 和 所有 Ｆ ２代 ， ５ 共 ２只动 物 ， 照 Ｇ ／ ４ ２ ． — ２ ０ 按 Ｂ Ｔ１９ ７ １ ０ ８对 ５ ２只小 鼠进行 ｃ 一 ｅ
进行 探 讨 。
１ ３ 实验 方 法 ．
Ｆ 代 的培育 ： １
将 １只雄 性 Ｃ Ａ Ｃ Ｂ ／ ａ与 ２只 雌 性 Ｂ Ｌ ／ Ａ Ｂ ｃ同 居 ，１ｄ之后 ， ２ ７只杂 交 Ｆ 代 动 物 Ｃ Ｂ １出生 。 １ ＣＦ 将 １只 雄 性 Ｃ Ａ Ｃ Ｂ ／ ａ与 ２只 雌 性 Ｃ ７ Ｌ ６同 ５Ｂ／
【 ｓｒｃ】 ０ｂｅｔ ｅ Ｔ ｏ ｓｍｍ ｔ ｇｎｔ ｉ ｈｍｃｌｍ ｒｅ ｆｉ ｒ ｉ ，ｗ ｔｄ ａ ｌ ｅ ｆ Ａｂｔ ｔ ａ ｊｅｉ ｏｃｎｕ ａ ｅｅ ｃｂｏ ｅ ｉ ａ ｒｏ ｎ ｅ ｍｃ ｖ ｅ ｉ ｃ ａ ｋ ｂｄ ｅ ｅ ｓ ｙ Ｃ ｔ ａ 一 ｏ ｕ ａｓ２
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和 ６。
表ｌ Ｆ ２代 小 鼠 过 氧 化 氢 酶 一 化 标 记 位 点 的基 因型 ２生
Ｔａｂ． Ｔｈｅ ｇ ｎ ｔｐｅ ｆＦ ｃ ｏ 一 ｏ ｈ ｍｉ ａ ｒ ｒ １ ｅ ｏｙ ｓｏ ２ ｍｉ ｅ ｆｒＣｅ２ ｂｉｃ ｅ ｃ ｌｍａ ｋｅ
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居 ，６ｄ之 后 ， ２ ７只 Ｆ ２代 动物 出生 。
来 自国 家 啮 齿 类 实 验 动 物 种 子 中心 ［ Ｃ Ｓ ＸＫ（ ） 京 ２ ０ －０ ４ ； ０ ５０ ０ ］
８ 龄 近 交 系小 鼠 ， ５ Ｂ ／ ， ， 周 Ｃ ７ Ｌ ６ 雌 ４只 ，Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
ｃ组 ， １只雄 性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 ６ Ｂ １与 ２只雌性 Ｃ ７ Ｌ ５Ｂ／
遗传 生 化 标 记 检 测 法 是 一 种 简便 、 速 、 确 迅 准 地保 证 近 交 系小 鼠遗 传 质 量 的 方 法 。选 择 一 些 在 品系间 具有 多 态 性 的 同工 酶 和 异 构 蛋 白作 为 生 化
图谱在 最 新 版 本 的 国家 标 准 中可 以找 到 。 杂 合 图 谱 为 近交系 小 鼠的遗 传 质量 控 制 提供 了判 断 依 据 。 过氧 化氢 酶一 近 交 系 小 鼠生 物 化 学标 记 基 因检 ２是 测法 的 １ 生化位 点之 一 ， 现行 的 国家标 准 里并 ４个 在
２ １ 年 ６月 ０１
中 国 比较 医 学 杂 志
ＣＨＩ ＮＥＳ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＯＭＰＡＲＡＴ ＶＥ ＭＥＤＩ Ｉ ＥＪ Ｉ Ｃ ＮＥ
Ｊｎ ２ ｕ ｅ ＯＩＩ
Ｖｏ ． ＮＯ ６ １２１ ．
第２ １卷
第 ６期
近 交 系小 鼠过 氧 化氢 酶 ． ２遗传 生 化 标记 位 点 的研究
过 氧 化 氢 酶 一 遗 传 生化 标 记 位 点 的等 位 基 因 ａ 完 全 显 性 的 。 ２ 是
【 关键 词】 小鼠 ； 近交系 ； 过氧化氢酶． ２ 【 中图分类号】Ｑ ８ ３ ２ ３ ；Ｒ ３ 【 文献标识码 】Ａ 【 文章编号 】１７ —８ ６ ２ １ ）６０ １ － ６ １７ ５ （０ １ ０ 。０ ２０ ４
１ 材 料 和 方 法
１ １ 实 验 动 物 ．
居 ，１ｄ之后 ， ２ ５只杂 交 Ｆ 代 动 物 Ｂ Ｃ Ｆ １ ６ Ｂ １出生 。
Ｆ ２代 的培育 ： Ａ组 ， １只雄性 Ｃ Ａ 与 ２只雌 性 Ｂ Ｃ Ｆ 将 Ｂ ６ Ｂ １同
８周 龄 近 交 系 小 鼠 ， Ｂ ／ ａ 雄 ， Ｃ Ａ Ｃ ， ４只 ，Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
２遗传 生 化标 记检 测
２ 结 果
品生物 制 品检定 所提 供 。 醋酸纤 维素 膜 （ 纶 基 ） 浙 江 台州路 桥 四 甲生 涤 ， 化 塑料 厂提 供 。 电泳槽 ， 京市六 一仪 器 厂产 品 。 北
电泳仪 ， Ｉ — Ａ ｄ ｌ ０ ０ ｉ美 国 。 Ｂ Ｏ Ｒ Ｄ Ｍｏ ｅ ３ ０ Ｘ ，
。
毛 细管 离心 机 ，Ｅ Ｅ Ｔ ＩＵ Ｅ， 国。 Ｉ Ｃ ＭＢ Ｃ Ｎ Ｒ Ｆ Ｇ 美 低 温高 速离 心机 ， ＩＡ ＨＩ ０ Ｒ ５ Ｄ， Ｈ Ｔ Ｃ Ｐ 一２ 日本 。 ２
酸度 计 ，ａｔ ｉｕ Ｂ １ ， 国 。 ｓｒ ｒ ｓＰ 一０ 德 ｏｏ
六组 ５ ２只 Ｆ ２代 小 鼠过 氧 化 氢 酶 ２生 化 标 记 位 点 的基 因 型 和 表 现 型 ， 表 １和 图 １ ２ 、 、 、 见 、 ３４ ５
居 ，２ｄ之 后 ， ２ ９只 Ｆ ２代 动物 出生 。 Ｅ组 ， １只 雄 性 Ｃ Ｂ １与 ２只 雌 性 Ｂ Ｌ ／ 将 ＣＦ ＡＢｃ
Ｔｉ 和柠 檬 酸 ， 为分 析纯 ， 京 化 学试 剂 公 司 ｒ ｓ 均 北
提供。 Ｃ一 ｅ ２标准 样 品试剂 盒 及 染 色用 试 剂 盒 ， 国药 中
来 自上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 责 任 公 司 ［ Ｃ Ｋ ＳＸ （ ） ０ ７０ ０ ］ 沪 ２ ０ —０ ５ ；
８周 龄 近交 系小 鼠 ， Ａ Ｂ ｃ 雌 ， Ｂ Ｌ ／ ， ４只 ， Ｐ Ｓ Ｆ级 ，
居 ，０ｄ之 后 ， ２ ５只 Ｆ ２代 动物 出生 。 Ｂ组 ， １只 雄 性 Ｃ Ａ 与 ２只 雌 性 Ｃ Ｂ １同 将 Ｂ ＣＦ