苦参碱测定

HPLC法测定苦参中苦参碱的含量

张　毅

(安徽省药物研究所,合肥　230022)

摘要　目的　应用高效液相色谱(HPLC)法对苦参中苦参碱的含量进行测定。方法　采用Kromasil C18柱(416mm×250mm,5μm),以甲醇2乙腈2磷酸盐缓冲液(p H716)2三乙胺(15∶25∶65∶011,用磷酸调至p H718)为流动相,检测波长220nm。结果　苦参碱与其它成分分离良好,在512176～52.176mg・L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1),平均回收率10015%,RSD 为2118%(n=6)。结论　该方法简便、快速、准确。

关键词　高效液相色谱法;苦参碱;苦参

Determination of matrine in sophora f lavescens ait by HPLC

ZHAN G Y i

(A nhui Instit ute of Pharm acy,Hef ei　230022)

ABSTRACT　AIM　To determination of matrine in sophora f lavescens ait by HPLC.METH ODS　Using kromasil C18column(416 mm×250mm,5μm),methanol2acctonitrile2p H716phosphate buffer(15∶20∶65∶011,p H718by phosphate)as mobile phase,UV detector at wavelength220nm.RESU LT　The matrine curvers were linear between512176～521176mg・L-1(r=1),the average recovery was10015%,RSD=2118%(n=6).CONC L USION　This mathod is simple,quick and accurate.

KYE WORDS　HPLC;matrine;sophora f lavescens ait

苦参为豆科苦参(sophora f lavescens ait)的干燥根。苦,寒,归心,肝,胃,大肠,膀胱经。具有清热燥湿,杀虫,利尿作用。用于热痢,便血,黄疸尿闭,赤白带下,阴肿阴痒,湿疹,湿疮,皮肤瘙痒,疥癣麻风;外治滴虫性阴道炎。苦参中主要含生物碱成分1,2,同时还含黄酮类,醌类等成分3。其中生物碱中苦参碱和氧化苦参碱含量较高,多作为控制质量的有效成分1,2。本文采用高效液相色谱法对苦参中苦参碱的含量进行测定,结果表明:该法操作简便、快速、准确,适用于对苦参药材的质量控制。

1　仪器与试剂

LC210A vp高效液相色谱仪,SPD210A vp紫外2可见波长检测器,日本岛津公司。J S23030色谱工作站,大连江申公司。Rheodyne7725进样阀,美国Rheodyne公司。苦参药材,购自安徽中医学院附属医院药剂科。苦参碱对照品,购自中国药品生物制品检定所。

2　色谱条件及色谱图

2.1　色谱柱　Kromasil ODS柱,416mm×250mm,5μm(大连江申公司);流动相:甲醇2乙腈2磷酸盐缓冲液p H7162三乙胺(15∶25∶65∶011用磷酸调至p H718);流速:018ml・min-1;检测波长:220nm,0110AU FS。进样量:20μl。在此条件下对照品与供试品的色谱图见图1,2。

3　供试品的制备

取苦参粉末110g,精密称定,置100ml量瓶中,精密加氯仿50ml、浓氨试液1ml,密塞,称定重量,时时振摇,放置24h后,超声30min,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,加在中性氧化铝柱(1cm×9 cm,内装2cm中性氧化铝)上,收集过柱氯仿液(流速110ml・min-1),再用20ml氯仿2甲醇(7∶3)洗脱(流速110ml・min-1),合并洗脱液与过柱氯仿液,置60℃水浴蒸干。残渣用甲醇溶解并定容至5ml,即得。

4　方法学考察

4.1　线性范围　精密称取苦参碱对照品10187mg,置25ml 量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液(014348g・L-1)。分别精密吸取对照品储备液3ml,置25ml量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为1号对照品溶液;分别精密吸取1号对照品溶液5,3,2,1ml,置10ml量瓶中,用无水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别作为2,3,4,5号对照品溶液。取以上溶液各20μl注入液相色谱仪,苦参碱在512176～521176mg・L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程(n=5)为

S=271243C+233166,r=019999

。

图1　苦参碱对照品

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3

2

1

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安徽医药　A nhui Medical and Pharm aceutical Journal　2004Apr;8(2)

图2　苦参药材

4.2　精密度试验　精密吸取浓度为512176和261088mg・L-1的对照品溶液,各连续重复进样6次,每次进样20μl,测定苦参碱峰面积,RSD分别为1123%和0184%。

4.3　重现性试验　取同一批苦参样品按供试品溶液的制备方法制备6份供试液,分别进样,测定苦参碱峰面积,计算含量,RSD为1135%。

4.4　回收率试验　取已测知浓度的苦参样品6份,每份110 g,精密称定,分别精密加入110ml苦参碱对照品溶液(014348mg・L-1),按供试品溶液的制备方法制备供试液并分别测定,计算平均回收率为100151%,RSD为2118%。

5　样品测定

按“供试品溶液的制备”项下方法制备供试液,测定5批样品,结果见表1。

表1　样品含量测定结果(n=3)

样品编号含量/mg・g-1RSD/%

10.912 1.28

20.879 1.03

30.952 1.35

40.868 1.67

5 1.023 1.59

6　讨论

在甲醇2乙腈2磷酸盐缓冲液系统中,流动相的p H对样品色谱分离的影响较大,实验表明,p H越高,样品分离越好,苦参碱的峰形越好,考虑到色谱柱对p H的耐受性,选择p H为718。

参考文献

1　金莉霞et al.苦参生物碱的高效液相色谱法测定.药学学报, 1993;28(2):136

2　李家实.苦参的生物碱测定.北京中医学院学报,1984;(2):25～6 3　崔建芳et al.苦参与苦豆子中生物碱的高效液相层析法与薄层光密度法测定.药学学报,1985,20(1):59～66

(收稿日期:2003212230)

◇药物不良反应◇

滥用皮康霜继发面部痤疮11例

孙慧娟

(武警合肥市消防支队卫生所,合肥　230061)

笔者近两年来共收治面部痤疮病人30例,其中由于滥用皮康霜继发或加重的11例,占该类病人总数的3617%,现将其临床表现及治疗情况报道如下。

1　临床表现

11例患者年龄18～27岁,使用皮康霜时间最短9d,最长1年半。主要表现为患处皮肤潮红、充血、毛细血管扩张、皮下血管清晰可见、胶原纤维消失、损伤时易出血、皮肤出现淤斑、脱屑、毛囊孔角化、皮肤粗糙、萎缩、弹性下降,色素沉着,皮损增大,痤疮形成脓性或囊肿性痤疮。患者自觉皮肤有烧灼感或瘙痒,皮肤绷紧感。

2　治疗方法

凡由于滥用皮康霜继发的面部痤疮,首先应嘱患者立即停药,然后给予相应的治疗。效果较为迅捷的可采取面膜疗法与配合相应的口服药物治疗,对于囊肿或脓疮型及感染较重的,可给予抗生素口服,皮脂分泌旺盛者,可用硫磺软皂,每日洗涤面部2～3次,洗后外用15%氧化锌软膏或硼酸氧化锌软膏,患者有烧灼感者,可给予维生素B1或维生素B6霜外用。患者应忌辛辣、油腻等食物,禁用各类化妆品。

3　讨论

皮康霜是一种皮质激素类外用药,能降低毛细血管的通透性,减少渗出和细胞浸润而具有较强的消炎、止痒和抗过敏作用。因其在皮肤科疾病中具有广泛的适应证和独特的疗效,深受临床医生和患者的偏爱。痤疮患者外用皮康霜虽可暂时减轻皮损炎症,但是长期、大量使用或使用不当,不仅会降低皮肤正常的免疫机能,引起菌群失调,促进痤疮棒状杆菌的生长,加重痤疮感染,而且在突然停药的情况下,由于机体激素的调节不能迅速恢复,会导致病情反复,甚至恶化等现象的发生。

就其滥用原因,笔者分析①患者不熟悉该药药性及副作用。造成了皮康霜的滥用。②医生诊断不明确的情况下滥用。没有掌握激素外用的适应证和禁忌证。③医生未能给予正确指导,该药的用法没有向患者交待清楚,致使部分病人长期使用或滥用而造成。④部分病人在面部发生皮疹而使用皮康霜治愈后,为了美容或防止病情复发,竟然将皮康霜作为护肤化妆品长期使用或滥用。

参考文献

1　吴志华,李景月.皮肤性病学.第2版,广东:科技出版社,1999:246 2　陆凤翔,杨　玉.临床实用药物手册.第1版,江苏:科学技术出版社,1997:635

3　张金花.外用皮质类固醇激素类所致不良反应及防治.中国社区医师,2002:23:27

(收稿日期:2003212210)

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・安徽医药　A nhui Medical and Pharm aceutical Journal　2004Apr;8(2)