对临床常用酶联免疫吸附试验技术类型的评价与分析
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［ 者 简 介】 文 阁 （９ ７ ） 作 刘 １６ 一 ，男 ，铁 岭 卫 生 职业 学 院 教 授 级 高 级 讲 师 。
１８ ９ ９年 毕 业 于 辽 宁 师 范 大 学 生 物 学 系 ，９ ５ １ ９ １ ９ — ９ ８年 就 读 于锦 州 医 学 院
竞争 法 的原 理 是将 已知特 异性 抗 体 包 被在 同相 载体 上 ， 形 成 固 相抗 体 ，加 入待 检标 本 和 相应 的一 定量 的酶标 抗 原 ． 待检 标 本 中的 Ａ ｇ和 酶 标 Ａ ｇ竞 争 与 固相 抗 体 结 合 ，洗 涤 后 加 入底 物 进 行 显色 测定同 。颜 色 反应 程 度 与待 测 抗原 量 成反
比。
临 床 医 学 专业 ， 双本 科 学 历 。曾任 铁 岭 市 ｆ生 学校 微 生 物 教 研 室 主任 ． 获 Ｊ
评 价 分析 ： 法是 针对 不 能用 双 抗 体夹 心 法 检测 的 单价 此
２０ ０ ０年 开 始 兼 职 医 学 教 育 研 究 室 副 主 任 ，从 事 教 学 研 究 与 管 理 Ｔ 作 。 ２０ ０ ４年 １ ～ ０ ７年 ７月 在 漯 河 医学 高 等 々科 学 校 研 修 月 ２０
Ａ — ｇ Ａ１ 酶 标 ） 合 物 ， 加 入 酶 的 相 应 底 物 ， 酶 的 作 用 ｂＡ— ］ （ 复 再 在 下 生 成 有 色 产 物 ，根 据 颜 色 的 有 无 和 深 浅 进 行 待 测 Ｈ Ｓ ｇ ＨＢ Ａｇ Ａ Ｐ等 Ｂ Ａ 、 ｅ 、Ｆ 的 定 性 和 定 量 分 析 。用 于 检 测 带 ２个 以 上 表 位 的 大 分 子 抗 原 ， 如
和 影 响 素 进 行 评 价 和 分 析 。
【 关键 词】 联 免疫 吸 附试 验 ； 术 类型 ； 价 分析 酶 技 评 【 中图分 类号］Ｒ ４ ． ４ ６１ ［ 文献 标 识码 】Ａ
［ 章编 号】 １ ７ — ２ ０ ２ １ ） ２ ａ － １ － ２ 文 ６ ３ ７ １ （ ０ ０ （ ） ０ ０ １ １
ｅ ｅｔ ， Ａ ｉ ｆ ｃ） 即 ｇ浓 度越 高 ， 产物 颜色 越 浅 ， 至 阴性 。改用 两 步 甚 法 ． 即待 检 标本 和酶 标 抗 体 分两 步 加 入 反 应 体 系 中 ， 适 当 或 稀 释标 本 ， 以克 服钩 状 效应［ 可 ３ １ 。此法 可受 内源性 物 质 ＲＦ的 影 响 ． 待 检标 本 中含 有 Ｒ Ｃｌ 、 嗜 性 抗 体 等 ， 可 与 固 如 Ｆ、 ｑ 异 其 相 抗 体 和酶标 抗 体 结合 ， 出现 假 阳性 结果 。
色 测定 ， 用 于 检测 带 不 同表位 的大分 子抗 原 。 可
Βιβλιοθήκη Baidu
１ 用 于 检 测 抗 原 的 技 术 类 型
１１双 抗 体 夹 心 法 ．
双抗 体 夹 心 法 的 原理 是 将 已知 特 异 性 抗 体 包被 在 同相 载体 上 ， 成 固相抗 体 ， 入待 检标 本 ， Ａ 形 加 如 ｇ存在 ， 与 固相 将 抗 体结 合 形成 复合 物 ，冉 加 入特 异 性 的酶 标 抗 体 ，便 形 成
下 ：
双 位点 一 步法 的原理 是 在 双抗 体 夹 心法 基础 上 设计 的 ， 应 用 针 对 抗 原 分 子 上 两个 不 同表 位 的 两 种 Ｍｃ Ａｂ分 别 作 为 固相抗 体 和酶 标抗 体 。 测定 时将 待 检标 本 和 酶标 抗体 同时加 入 进行 结 合 反 应 ， 过一 次 温 育 和 洗 涤 ， 加入 底 物 进 行 显 经 再
１２双 位 点 一 步 法 ＿
酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ＬＳ Ｅ ＩＡ）白 ２ ０世 纪 ７ ０年 代 初 由 瑞 典 学 者 Ｅ ｇａ１ Ｐ ｆ ａ ｎ等 发 明 使 用 以 来 ， 不 断 改 进 和 ｎ ｖ１ 和 ｅ ｍ ｎ ｌ 经
完善 ， 以其 操 作 简 便 、 速 、 感 性 高 、 异 性 强 、 放 射 性 快 敏 特 无
２１ ２ 第 卷 ４ ０年 月 ８第 期 １
‘纫 】 。 ・综 述 ・
对 临床 常 用 酶联 免 疫 吸 附试 验 技 术 类 型 的 评 价 与分 析
刘 文 阁
（ 岭 卫生 职业 学 院 ， 宁铁 岭 铁 辽
１２ ０ ） １０ ０
【 摘要］酶联 免疫 吸 附试 验 （ ＩＳ 以其操 作 简 便 、 Ｅ Ａ） Ｉ 快速 、 敏感 性 高 、 异性 强 和无 放 射性 污染 等 优点 在 临 床检测 中被 特 广 泛使 用 ， 不 断发 展 ， 已设 计产生 多种 技 术类 型 。各 种技 术 类型 由于设 计原 理 不 同 ， 并 现 其操 作 步骤 、 途和 影 响因 用 素 不 同。现 主要 对 目前 临 床常 用 酶联 免疫 吸 附试 验技 术 类 型的 原理 和用 途 进行 阐释 ，对 每一 种技 术 类 型 的优 缺 点
１ 竞 争 法 ． ３
评 价分 析 ： 法 在操 作 方法 上 分 一步 法 和两 步 法 。一 步 此 法 是将 待检 标 本和 酶标 抗 体 同时 加 入反 应 体 系 中 ， 简化 了步
骤 ， 省 了时 间 ， 如 果 Ａ 节 但 ｇ浓 度 高 时 ， 出 现 钩 状 效 应 （ ｏｋ 会 ｈｏ
污 染 等 优 点 ， 成 为 目前 临 床 检 测 中 使 用 最 普 遍 、 展 最 快 已 发 的 免 疫 学 检 测 技 术 之 一 。然 而 该 法 仍 存 在 材 料 选 择 、 作 步 操 骤 设计 以及干 扰 物质 等 方 面 的影 响 因素 … 。现 归 纳 并 分 析 如
评 价分 析 ： 法 由于使 用高 亲 和力 的 Ｍｃ ， 高 了 敏感 此 Ａｂ 提 性 和 特异 性 ． 化 了 步骤 ， 同样 存 在 钩 状 效应 的影 响 。另 简 但 外． 固相 的 Ｍｃ ｂ比 Ｐ Ａ Ａ ｃ ｂ更 容 易 失 活 ． 以 在包 被 抗体 时要 所 考 虑 固相对 抗 体 的影 响嘲 。
１８ ９ ９年 毕 业 于 辽 宁 师 范 大 学 生 物 学 系 ，９ ５ １ ９ １ ９ — ９ ８年 就 读 于锦 州 医 学 院
竞争 法 的原 理 是将 已知特 异性 抗 体 包 被在 同相 载体 上 ， 形 成 固 相抗 体 ，加 入待 检标 本 和 相应 的一 定量 的酶标 抗 原 ． 待检 标 本 中的 Ａ ｇ和 酶 标 Ａ ｇ竞 争 与 固相 抗 体 结 合 ，洗 涤 后 加 入底 物 进 行 显色 测定同 。颜 色 反应 程 度 与待 测 抗原 量 成反
比。
临 床 医 学 专业 ， 双本 科 学 历 。曾任 铁 岭 市 ｆ生 学校 微 生 物 教 研 室 主任 ． 获 Ｊ
评 价 分析 ： 法是 针对 不 能用 双 抗 体夹 心 法 检测 的 单价 此
２０ ０ ０年 开 始 兼 职 医 学 教 育 研 究 室 副 主 任 ，从 事 教 学 研 究 与 管 理 Ｔ 作 。 ２０ ０ ４年 １ ～ ０ ７年 ７月 在 漯 河 医学 高 等 々科 学 校 研 修 月 ２０
Ａ — ｇ Ａ１ 酶 标 ） 合 物 ， 加 入 酶 的 相 应 底 物 ， 酶 的 作 用 ｂＡ— ］ （ 复 再 在 下 生 成 有 色 产 物 ，根 据 颜 色 的 有 无 和 深 浅 进 行 待 测 Ｈ Ｓ ｇ ＨＢ Ａｇ Ａ Ｐ等 Ｂ Ａ 、 ｅ 、Ｆ 的 定 性 和 定 量 分 析 。用 于 检 测 带 ２个 以 上 表 位 的 大 分 子 抗 原 ， 如
和 影 响 素 进 行 评 价 和 分 析 。
【 关键 词】 联 免疫 吸 附试 验 ； 术 类型 ； 价 分析 酶 技 评 【 中图分 类号］Ｒ ４ ． ４ ６１ ［ 文献 标 识码 】Ａ
［ 章编 号】 １ ７ — ２ ０ ２ １ ） ２ ａ － １ － ２ 文 ６ ３ ７ １ （ ０ ０ （ ） ０ ０ １ １
ｅ ｅｔ ， Ａ ｉ ｆ ｃ） 即 ｇ浓 度越 高 ， 产物 颜色 越 浅 ， 至 阴性 。改用 两 步 甚 法 ． 即待 检 标本 和酶 标 抗 体 分两 步 加 入 反 应 体 系 中 ， 适 当 或 稀 释标 本 ， 以克 服钩 状 效应［ 可 ３ １ 。此法 可受 内源性 物 质 ＲＦ的 影 响 ． 待 检标 本 中含 有 Ｒ Ｃｌ 、 嗜 性 抗 体 等 ， 可 与 固 如 Ｆ、 ｑ 异 其 相 抗 体 和酶标 抗 体 结合 ， 出现 假 阳性 结果 。
色 测定 ， 用 于 检测 带 不 同表位 的大分 子抗 原 。 可
Βιβλιοθήκη Baidu
１ 用 于 检 测 抗 原 的 技 术 类 型
１１双 抗 体 夹 心 法 ．
双抗 体 夹 心 法 的 原理 是 将 已知 特 异 性 抗 体 包被 在 同相 载体 上 ， 成 固相抗 体 ， 入待 检标 本 ， Ａ 形 加 如 ｇ存在 ， 与 固相 将 抗 体结 合 形成 复合 物 ，冉 加 入特 异 性 的酶 标 抗 体 ，便 形 成
下 ：
双 位点 一 步法 的原理 是 在 双抗 体 夹 心法 基础 上 设计 的 ， 应 用 针 对 抗 原 分 子 上 两个 不 同表 位 的 两 种 Ｍｃ Ａｂ分 别 作 为 固相抗 体 和酶 标抗 体 。 测定 时将 待 检标 本 和 酶标 抗体 同时加 入 进行 结 合 反 应 ， 过一 次 温 育 和 洗 涤 ， 加入 底 物 进 行 显 经 再
１２双 位 点 一 步 法 ＿
酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ＬＳ Ｅ ＩＡ）白 ２ ０世 纪 ７ ０年 代 初 由 瑞 典 学 者 Ｅ ｇａ１ Ｐ ｆ ａ ｎ等 发 明 使 用 以 来 ， 不 断 改 进 和 ｎ ｖ１ 和 ｅ ｍ ｎ ｌ 经
完善 ， 以其 操 作 简 便 、 速 、 感 性 高 、 异 性 强 、 放 射 性 快 敏 特 无
２１ ２ 第 卷 ４ ０年 月 ８第 期 １
‘纫 】 。 ・综 述 ・
对 临床 常 用 酶联 免 疫 吸 附试 验 技 术 类 型 的 评 价 与分 析
刘 文 阁
（ 岭 卫生 职业 学 院 ， 宁铁 岭 铁 辽
１２ ０ ） １０ ０
【 摘要］酶联 免疫 吸 附试 验 （ ＩＳ 以其操 作 简 便 、 Ｅ Ａ） Ｉ 快速 、 敏感 性 高 、 异性 强 和无 放 射性 污染 等 优点 在 临 床检测 中被 特 广 泛使 用 ， 不 断发 展 ， 已设 计产生 多种 技 术类 型 。各 种技 术 类型 由于设 计原 理 不 同 ， 并 现 其操 作 步骤 、 途和 影 响因 用 素 不 同。现 主要 对 目前 临 床常 用 酶联 免疫 吸 附试 验技 术 类 型的 原理 和用 途 进行 阐释 ，对 每一 种技 术 类 型 的优 缺 点
１ 竞 争 法 ． ３
评 价分 析 ： 法 在操 作 方法 上 分 一步 法 和两 步 法 。一 步 此 法 是将 待检 标 本和 酶标 抗 体 同时 加 入反 应 体 系 中 ， 简化 了步
骤 ， 省 了时 间 ， 如 果 Ａ 节 但 ｇ浓 度 高 时 ， 出 现 钩 状 效 应 （ ｏｋ 会 ｈｏ
污 染 等 优 点 ， 成 为 目前 临 床 检 测 中 使 用 最 普 遍 、 展 最 快 已 发 的 免 疫 学 检 测 技 术 之 一 。然 而 该 法 仍 存 在 材 料 选 择 、 作 步 操 骤 设计 以及干 扰 物质 等 方 面 的影 响 因素 … 。现 归 纳 并 分 析 如
评 价分 析 ： 法 由于使 用高 亲 和力 的 Ｍｃ ， 高 了 敏感 此 Ａｂ 提 性 和 特异 性 ． 化 了 步骤 ， 同样 存 在 钩 状 效应 的影 响 。另 简 但 外． 固相 的 Ｍｃ ｂ比 Ｐ Ａ Ａ ｃ ｂ更 容 易 失 活 ． 以 在包 被 抗体 时要 所 考 虑 固相对 抗 体 的影 响嘲 。