绵羊人工授精技术
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绵羊的人工授精技术
一、人工授精的意义
人工授精是借助器械,用人为的方法把公羊的精液采出来,经过检查和处理,再用器械输入发情母羊的生殖器官内,使母羊受孕的一种先进配种技术。多年来的实践证明,人工授精有很多优点,主要有以下几点:
(1)可以充分利用优良种公羊,扩大交配母羊数,加速绵羊改良工作。(2)可以提高母羊的受胎率,降低不孕率。(3)可以节省购买和饲养大量种公羊的费用。(4)可以防止由公、母羊直接交配而传染的疾病。(5)克服公母羊所处地域相距过远的困难。(6)用超低温可以长期保存精液,经过几十年后仍然可以繁殖后代。
二、人工授精技术
1、准备工作
(1)器械、用具的清洗和消毒
凡是供采精、输精及与精液接触的一切器械、用具,都要做到清洁、干燥、消毒,存放在清洁的厨柜或搪瓷盘里用消毒过的纱布盖好。新购入的用具、器械,应仔细擦去上面的油质和积垢。器械、用具的清洗,用2~3%的碳酸钠溶液。清洗工具用试管刷、毛刷或将纱布、脱脂棉用镊子夹住或缠在玻璃棒上。清洗假阴道时,注意不要使凡士林和污垢存留在内胎橡皮皱折内。所有器械、用具洗净后,用清洁的温开水冲洗数次,并用清洁的布擦干或晾干待用。
经过清洗的器械、用具,可根据其性质分别用煮沸,酒精擦洗、火焰烧烤等方法进行消毒。假阴道先用65%的精棉球擦洗(连续使用时,可用96%的酒精),稍停再用1%氯化钠棉球擦洗数次,直至酒精气味完全消失为止。
集精杯、输精器、吸管、玻璃棒以及存放稀释液和氯化钠溶液等玻璃器皿,可根据情况用65%的酒精擦洗或煮沸消毒。如用酒精擦洗,应再用1%氯化钠溶液冲洗数次,直至酒精气味完全消失为止。如煮沸消毒,应先浸入温水中,然后煮沸15~20分种,取出后除去水滴使其自然干燥。煮沸消毒要用“软水”或烧开后的“硬水”。有条件的地方,最好以“蒸”代“煮”,用“土”办法进行蒸气消毒。金属开膣器、镊子等金属器皿,可用65%的酒精擦洗或在无烟火焰(酒精灯等)上烧烤消毒。
凡士林应每天连瓶隔水煮沸消毒20分钟,瓶盖下垫滤纸,瓶底垫脱脂棉或纱布,防止煮沸时破裂。用酒精消毒时,其顺序最好是先消毒输精器,然后依次集精杯,假阴道、开膣器。凡是和精液直接接触的器械、用具,使用前要用1%的氯化钠溶液冲洗数次。人工授精用的各种布巾、工作服等要经常洗涤,保持清洁。纱布、毛巾可用蒸气或煮沸法进行消毒。
(2)各种药液及棉球的配制
65%酒精的配制:市售酒精浓度一般为96%,人工授精需要的为65%,通常配制65%酒精的方法,是将96%酒精68毫升加入蒸馏水或滤过的冷开水32毫升,即成65%的酒精100毫升。各种不同浓度酒精的配制,可用下列公式计算:[需配酒精浓度(%)×需酒精量] / 原酒精浓度(%)= 应用原酒精量。需配酒精量-应用原酒精量 = 应加入的水量。例如用96%的酒精配制100毫升65%的酒精时即为:(65×100)/ 96 = 67.7(四舍五入后为68) 100-67.7 =32.3(四舍五入后为32)。1%氯化钠溶液的配制:在100毫升蒸馏水中加入纯净氯化钠1克,溶解后用滤纸过滤。每天现用现配。2~3%碳酸钠溶液的配制:在1000毫升温水中加入碳酸钠20~30克。棉球的制作:用脱脂棉做成直径2~3厘米大的圆球。放在有盖的玻璃器皿、广口瓶或搪瓷杯中,分别用65%酒精、96%酒精和1%氯化钠溶液浸泡备用。酒精棉球和氯化钠棉球取用时要用专用镊子,不能混用。配制好的药液,要贴上标签,以免用错。
2、采精
采精的具体步骤如下:1)准备假阴道:①检查假阴道外壳有无裂缝,两头边缘是否光滑,内胎有无气孔,长短是否合适,活塞是否灵活,有无漏水漏气情况等。将假阴道内胎均匀地套在外壳里,粗糙面向外,装好的内胎要求舒展平衡,表面平滑,没有歪扭不正、皱褶过多的现象。②清洗、消毒假阴道:将消毒好的集精杯插入假阴道一端的内层,深入2~3厘米。气温低于18℃时,可使用双层集精杯,③在夹层里注入温水,使集精杯内保持25~30℃。向假阴道的夹层中灌注50~55℃的温水156~180毫升。灌水时宜用漏斗,防止水溢出进入假阴道内。④用消毒过的玻璃棒取消毒凡士林,涂在假阴道内胎上,使之润滑。由外向里均匀地涂上一层,不宜太多,深度不要超过假阴道长度的二分之一,以免凡士林流入集精杯内。用嘴自活塞处吹入空气,以增加内胎的压力,使之松紧适度。一般内胎呈三角形时即说明压力适。⑤采精前用消毒过的温度计检查假阴道内温度是否适宜。要求采精时的温度不低于38℃,不高于42℃。调教种公羊时,最好使其习惯于较低的采精温度。假阴道的温度、压力和润滑,对采精能否成功,影响很大,采精前应仔细检查。假阴道准备妥当后,把事先准备好的母羊牵到采精架上。将公羊的阴茎包皮周围用湿毛巾或纱布擦拭干净。
2)准备好台羊:采精前应该准备好健康无病的母羊或假母羊,做为引诱公羊射精的对象。对没有射精习惯的种公羊,要使用发情母羊。
3)采精方法:采精人蹲在母羊右侧后方,右手横握假阴道,活塞向下,中指和食指压住集精杯,用其他手指和手掌握紧假阴道,有集精杯的一端向上,使假阴道和地面呈35~40度的角度。当公羊爬跨母羊伸出阴茎时,采精人以敏捷的动作,右手稳当地将假阴道推向母羊臀部与公羊阴茎相平行,左手轻轻托住阴茎包皮,细心迅速地将阴茎导入假阴道内。当公羊用力耸身向前时,已完成射精。随着公羊自母羊身上跳下时,采精人顺着公羊的动作,将假阴道慢慢向后移动,轻轻取下,立即倒转竖立,有集精杯的一端向下,打开活塞,放出空气,谨慎地取下集精杯,盖好杯盖,送到精液处理间检查。
集精杯取出后,立即放出假阴道夹层里的水,依次清洗、消毒备用。假阴道内胎,最好用一次拆卸一次。在连续使用的情况下,也可以用几次拆卸一次,但时间不宜过长,以免影响内胎弹力的恢复和清洁卫生。
采情时要精神集中,动作迅速,沉着而敏捷。采精时注意不要使手指、手臂或假阴道的边缘碰到公羊阴茎露出的部分,更不能用手去捉握阴茎外露部分,也不能用假阴道向阴茎上硬套。当公羊阴茎插入假阴道后,不要将假阴道向公羊腹部推送。假阴道要固定好,防止摇摆不定,影响采精。
当公羊接近母羊准备爬跨时,用手轻拨头部,不让它马上爬跨,挡几次之后,公羊性欲更加旺盛,射精充分,采精量多。如果公羊经过一、两次爬跨,阴茎也插入假阴道里,但不射精,这时要检查假阴道的温度、压力、润滑程度是否适当,根据具体情况进行调节。
3、精液品质的检查
采出的精液,应该立即进行品质检查,分肉眼检查和显微镜检查。肉眼检查:用肉眼观察射精量、精液的色泽、气味和精子的活动状况。
1) 射精量:射精量因采精方法、品种、年龄、个体营养状况、采精频率及采精技术水平而有差异。绵羊每次射精量为0.5~2.5毫升,山羊每次射精量为0.5~1.5毫升。2)颜色:正常的精液为乳白色。如精液呈浅灰色或浅青色,是精子少的特征;深黄色表示精液内混有尿液;粉红色或淡红色表示有新的损伤而混有血液;红褐色表示在生殖道中有深的旧损伤;有脓液混入时,精液里淡绿色;精液囊发炎时,精液中可发现絮状物。凡是颜色异常的精液均不得用于输精。3)气味:正常精液微有腥味,若精液中可嗅到尿味或脓腥味时,则不得用于输精。4)云雾状:用肉眼观察采集的公羊精液,可以看到由于精子活动所引起的翻腾滚动、极似云雾的状态。精子的密度越大、活力越强者,则其云雾状越明显。因此,根据云雾状表现的明显与否,可以判断精子活力的强弱和精子密度的大小。
显微镜检查:显微镜检查是在外观检查(肉眼检查)的基础上,对精子的密度和活力作进一步检查。精液的检查,通常使用200~600倍显微镜,用吸管或玻璃棒取一小滴精液,滴在载玻片中央,轻轻盖上盖玻片,使精液均匀地在载玻片上形成一薄层,放在显微镜下检查。盖盖玻片时注意不要发生气泡。为了防止显微镜头压碎盖玻片,可先将镜头慢慢降低到几乎接触盖玻片的地方,然后扭转显微镜小螺旋,慢慢升高到看清楚为止。检查精子活力时,在精液中加入一滴1%的氯化钠溶液,稀释后用显微镜检查。精液的处理,应在18~25℃室温下进行。检查精液用的载玻片、盖玻片、玻璃棒、吸管等,事先要洗净擦干(不要使用肥皂)。
密度的评定:精子浓度(密度)精子浓度指单位容积(1毫升)所含有的精子数目。浓度检查的目的,是为确定稀释倍数和输精量提供依据。精子浓度检查主要采用显微镜计数法。
一般分为稠密、中等、稀薄三个等级,以“密”,“中”、“稀”表示。
“密”:在显微镜视野中布满密集的精子,彼此间没有空隙,难于看出单个精子的活动情况。
“中”:精子之间有相当于1~2个精子长度的空隙,能清楚地看到单个精子的活动情况。
“稀”:仅能看到少数精子分散于各处,精子间空隙很大。如视野内无精子存在,用“无”表示。
以上是生产实践中通常采用的评定精子密度的方法,如要计算一个单位容量精液中精子的数量,可采用“精子计数法”,用“血球计数器”测定。
活力的评定:精子活力是评定精液品质优劣的重要指标,一般对采精后、稀释后、冷冻精液解冻后的精液应分别进行活力检查。
用已消毒的干净玻璃棒取出原精液一滴,或用生理盐水稀释过的精液一滴,滴在擦洗干净的干燥载玻片上,并盖上干净的盖玻片,然后在400~600倍的显微镜下观察。观察时室温不得低于18℃。
根据直线前进运动的精子所占比例来评定精子活率。在显微镜下观察,可以看到精子有三种运动方式:前进运动:精子的运动呈直线前进运动;