绵羊人工授精技术

绵羊的人工授精技术
一、人工授精的意义
人工授精是借助器械，用人为的方法把公羊的精液采出来，经过检查和处理，再用器械输入发情母羊的生殖器官内，使母羊受孕的一种先进配种技术。

多年来的实践证明，人工授精有很多优点，主要有以下几点：
（1）可以充分利用优良种公羊，扩大交配母羊数，加速绵羊改良工作。

（2）可以提高母羊的受胎率，降低不孕率。

（3）可以节省购买和饲养大量种公羊的费用。

（4）可以防止由公、母羊直接交配而传染的疾病。

（5）克服公母羊所处地域相距过远的困难。

（6）用超低温可以长期保存精液，经过几十年后仍然可以繁殖后代。

二、人工授精技术
1、准备工作
（１）器械、用具的清洗和消毒
凡是供采精、输精及与精液接触的一切器械、用具，都要做到清洁、干燥、消毒，存放在清洁的厨柜或搪瓷盘里用消毒过的纱布盖好。

新购入的用具、器械，应仔细擦去上面的油质和积垢。

器械、用具的清洗，用2～3％的碳酸钠溶液。

清洗工具用试管刷、毛刷或将纱布、脱脂棉用镊子夹住或缠在玻璃棒上。

清洗假阴道时，注意不要使凡士林和污垢存留在内胎橡皮皱折内。

所有器械、用具洗净后，用清洁的温开水冲洗数次，并用清洁的布擦干或晾干待用。

经过清洗的器械、用具,可根据其性质分别用煮沸，酒精擦洗、火焰烧烤等方法进行消毒。

假阴道先用65％的精棉球擦洗（连续使用时，可用96％的酒精），稍停再用１％氯化钠棉球擦洗数次，直至酒精气味完全消失为止。

集精杯、输精器、吸管、玻璃棒以及存放稀释液和氯化钠溶液等玻璃器皿，可根据情况用65%的酒精擦洗或煮沸消毒。

如用酒精擦洗，应再用1%氯化钠溶液冲洗数次，直至酒精气味完全消失为止。

如煮沸消毒，应先浸入温水中，然后煮沸15～20分种，取出后除去水滴使其自然干燥。

煮沸消毒要用“软水”或烧开后的“硬水”。

有条件的地方，最好以“蒸”代“煮”，用“土”办法进行蒸气消毒。

金属开膣器、镊子等金属器皿，可用65%的酒精擦洗或在无烟火焰（酒精灯等）上烧烤消毒。

凡士林应每天连瓶隔水煮沸消毒20分钟，瓶盖下垫滤纸，瓶底垫脱脂棉或纱布，防止煮沸时破裂。

用酒精消毒时，其顺序最好是先消毒输精器，然后依次集精杯，假阴道、开膣器。

凡是和精液直接接触的器械、用具，使用前要用1%的氯化钠溶液冲洗数次。

人工授精用的各种布巾、工作服等要经常洗涤，保持清洁。

纱布、毛巾可用蒸气或煮沸法进行消毒。

（2）各种药液及棉球的配制
65%酒精的配制：市售酒精浓度一般为96%，人工授精需要的为65%，通常配制65%酒精的方法，是将96%酒精68毫升加入蒸馏水或滤过的冷开水32毫升，即成65%的酒精100毫升。

各种不同浓度酒精的配制，可用下列公式计算：[需配酒精浓度（%）×需酒精量] / 原酒精浓度（%）= 应用原酒精量。

需配酒精量－应用原酒精量 = 应加入的水量。

例如用96%的酒精配制100毫升65%的酒精时即为：（65×100）/ 96 = 67.7(四舍五入后为68) 100－67.7 =32.3(四舍五入后为32)。

1%氯化钠溶液的配制：在100毫升蒸馏水中加入纯净氯化钠1克，溶解后用滤纸过滤。

每天现用现配。

2～3%碳酸钠溶液的配制：在1000毫升温水中加入碳酸钠20～30克。

棉球的制作：用脱脂棉做成直径2～3厘米大的圆球。

放在有盖的玻璃器皿、广口瓶或搪瓷杯中，分别用65%酒精、96%酒精和1%氯化钠溶液浸泡备用。

酒精棉球和氯化钠棉球取用时要用专用镊子，不能混用。

配制好的药液，要贴上标签，以免用错。

2、采精
采精的具体步骤如下：1）准备假阴道：①检查假阴道外壳有无裂缝，两头边缘是否光滑，内胎有无气孔，长短是否合适，活塞是否灵活，有无漏水漏气情况等。

将假阴道内胎均匀地套在外壳里，粗糙面向外，装好的内胎要求舒展平衡，表面平滑，没有歪扭不正、皱褶过多的现象。

②清洗、消毒假阴道：将消毒好的集精杯插入假阴道一端的内层，深入2～3厘米。

气温低于18℃时，可使用双层集精杯，③在夹层里注入温水，使集精杯内保持25～30℃。

向假阴道的夹层中灌注50～55℃的温水156～180毫升。

灌水时宜用漏斗，防止水溢出进入假阴道内。

④用消毒过的玻璃棒取消毒凡士林，涂在假阴道内胎上，使之润滑。

由外向里均匀地涂上一层，不宜太多，深度不要超过假阴道长度的二分之一，以免凡士林流入集精杯内。

用嘴自活塞处吹入空气，以增加内胎的压力，使之松紧适度。

一般内胎呈三角形时即说明压力适。

⑤采精前用消毒过的温度计检查假阴道内温度是否适宜。

要求采精时的温度不低于38℃，不高于42℃。

调教种公羊时，最好使其习惯于较低的采精温度。

假阴道的温度、压力和润滑，对采精能否成功，影响很大，采精前应仔细检查。

假阴道准备妥当后，把事先准备好的母羊牵到采精架上。

将公羊的阴茎包皮周围用湿毛巾或纱布擦拭干净。

2）准备好台羊：采精前应该准备好健康无病的母羊或假母羊，做为引诱公羊射精的对象。

对没有射精习惯的种公羊，要使用发情母羊。

3）采精方法：采精人蹲在母羊右侧后方，右手横握假阴道，活塞向下，中指和食指压住集精杯，用其他手指和手掌握紧假阴道，有集精杯的一端向上，使假阴道和地面呈35～40度的角度。

当公羊爬跨母羊伸出阴茎时，采精人以敏捷的动作，右手稳当地将假阴道推向母羊臀部与公羊阴茎相平行，左手轻轻托住阴茎包皮，细心迅速地将阴茎导入假阴道内。

当公羊用力耸身向前时，已完成射精。

随着公羊自母羊身上跳下时，采精人顺着公羊的动作，将假阴道慢慢向后移动，轻轻取下，立即倒转竖立，有集精杯的一端向下，打开活塞，放出空气，谨慎地取下集精杯，盖好杯盖，送到精液处理间检查。

集精杯取出后，立即放出假阴道夹层里的水，依次清洗、消毒备用。

假阴道内胎，最好用一次拆卸一次。

在连续使用的情况下，也可以用几次拆卸一次，但时间不宜过长，以免影响内胎弹力的恢复和清洁卫生。

采情时要精神集中，动作迅速，沉着而敏捷。

采精时注意不要使手指、手臂或假阴道的边缘碰到公羊阴茎露出的部分，更不能用手去捉握阴茎外露部分，也不能用假阴道向阴茎上硬套。

当公羊阴茎插入假阴道后，不要将假阴道向公羊腹部推送。

假阴道要固定好，防止摇摆不定，影响采精。

当公羊接近母羊准备爬跨时，用手轻拨头部，不让它马上爬跨，挡几次之后，公羊性欲更加旺盛，射精充分，采精量多。

如果公羊经过一、两次爬跨，阴茎也插入假阴道里，但不射精，这时要检查假阴道的温度、压力、润滑程度是否适当，根据具体情况进行调节。

3、精液品质的检查
采出的精液，应该立即进行品质检查，分肉眼检查和显微镜检查。

肉眼检查：用肉眼观察射精量、精液的色泽、气味和精子的活动状况。

1) 射精量：射精量因采精方法、品种、年龄、个体营养状况、采精频率及采精技术水平而有差异。

绵羊每次射精量为0.5～2.5毫升，山羊每次射精量为0.5～1.5毫升。

2）颜色：正常的精液为乳白色。

如精液呈浅灰色或浅青色，是精子少的特征；深黄色表示精液内混有尿液；粉红色或淡红色表示有新的损伤而混有血液；红褐色表示在生殖道中有深的旧损伤；有脓液混入时，精液里淡绿色；精液囊发炎时，精液中可发现絮状物。

凡是颜色异常的精液均不得用于输精。

3）气味：正常精液微有腥味，若精液中可嗅到尿味或脓腥味时，则不得用于输精。

4）云雾状：用肉眼观察采集的公羊精液，可以看到由于精子活动所引起的翻腾滚动、极似云雾的状态。

精子的密度越大、活力越强者，则其云雾状越明显。

因此，根据云雾状表现的明显与否，可以判断精子活力的强弱和精子密度的大小。

显微镜检查：显微镜检查是在外观检查（肉眼检查）的基础上，对精子的密度和活力作进一步检查。

精液的检查，通常使用200～600倍显微镜，用吸管或玻璃棒取一小滴精液，滴在载玻片中央，轻轻盖上盖玻片，使精液均匀地在载玻片上形成一薄层，放在显微镜下检查。

盖盖玻片时注意不要发生气泡。

为了防止显微镜头压碎盖玻片，可先将镜头慢慢降低到几乎接触盖玻片的地方，然后扭转显微镜小螺旋，慢慢升高到看清楚为止。

检查精子活力时，在精液中加入一滴1％的氯化钠溶液，稀释后用显微镜检查。

精液的处理，应在18～25℃室温下进行。

检查精液用的载玻片、盖玻片、玻璃棒、吸管等，事先要洗净擦干（不要使用肥皂）。

密度的评定：精子浓度（密度）精子浓度指单位容积（1毫升）所含有的精子数目。

浓度检查的目的，是为确定稀释倍数和输精量提供依据。

精子浓度检查主要采用显微镜计数法。

一般分为稠密、中等、稀薄三个等级，以“密”，“中”、“稀”表示。

“密”：在显微镜视野中布满密集的精子，彼此间没有空隙，难于看出单个精子的活动情况。

“中”：精子之间有相当于1～2个精子长度的空隙，能清楚地看到单个精子的活动情况。

“稀”：仅能看到少数精子分散于各处，精子间空隙很大。

如视野内无精子存在，用“无”表示。

以上是生产实践中通常采用的评定精子密度的方法，如要计算一个单位容量精液中精子的数量，可采用“精子计数法”，用“血球计数器”测定。

活力的评定：精子活力是评定精液品质优劣的重要指标，一般对采精后、稀释后、冷冻精液解冻后的精液应分别进行活力检查。

用已消毒的干净玻璃棒取出原精液一滴，或用生理盐水稀释过的精液一滴，滴在擦洗干净的干燥载玻片上，并盖上干净的盖玻片，然后在400～600倍的显微镜下观察。

观察时室温不得低于18℃。

根据直线前进运动的精子所占比例来评定精子活率。

在显微镜下观察，可以看到精子有三种运动方式：前进运动：精子的运动呈直线前进运动；
回旋运动：精子虽也运动，但绕小圈子回旋转动，圈子的直径很小，不到一个精子的长度；摆动式运动：精子不变其位置，而在原地不断摆动，并不前进。

除以上三种运动方式之外，往往还可以看到没有任何运动的精子，呈静止状态。

前进运动的精子才是具有受精能力的精子。

因此，根据在显微镜下所能观察到的前进运动精子占视野内总精子数的百分率来评定精子活率。

过去多采用五级评分：如果全部精子做直线前进运动，评为五级；大约有80%的精子做直线前进运动，评为四级；60%左右的精子做直线前进运动，评为三级；40%左右的精子做直线前进运动，评为二级；20%左右的精子做直线前进运动，评为一级。

现在大多直接采用百分率来评定精子活率，如活率为80%，即表示精液中直线前进运动的精子数占总精子数的80%。

如果精子仅作摆动运动而不前进，以“摆”表示，精子全不活动，以“死”表示。

公羊的精液，经过密度和活力检查，必须评为“密—五”、“密一四”或“中—五”、“中—四”的方能做输精用。

4、精液的稀释
在输精、保存和运输之前，对精液要进行稀释，主要是为了增加精液量，扩大母羊授精数；延长体外精子存活时间和增强精子活力。

稀释液应具备的条件是：对精子的生存有利无害；能供给精子营养；具有与精液相等的渗透压，有缓冲酸碱度的作用；容易配制，成本低。

常用的稀释液有以下几种：
（1）0.9％氯化钠（生理盐水）稀释液：氯化钠（化学纯）0.9克，蒸馏水100毫升。

以上稀释液稀释倍数一般以1：1～2比较适宜，这种稀释液通常不做保存和运输精液使用。

（2）葡萄糖、卵黄稀释液：无水葡萄糖3克，柠檬酸钠1.4克，新鲜卵黄20毫升，蒸馏水 100毫升。

配制这种稀释液，先将葡萄糖、柠檬酸钠溶解于蒸溜水，经过过滤、消毒（煮沸）后，再加入卵黄。

使用时一般按1：3倍稀释。

（3）牛奶和羊奶稀释液：
新鲜牛奶或羊奶用数层纱布过滤，煮沸消毒10～15分钟，冷却至室温，除去奶皮或用长针头注射器从奶皮下面吸取所需要的奶量，一般按1：2～4倍稀释。

这种稀释液容易配制，使用方便、效果良好。

精液采取后应尽快稀释，稀释液必须是新鲜的，其温度和精液温度保持一致，在20～25℃室温和无菌条件下进行操作。

稀释液应沿着集精杯壁缓缓注入，用细玻璃棒轻轻搅匀。

稀释精液时，要注意防止精子受到冲击、温度骤变和其他有害因素的影响。

精液稀释的倍数，根据精子密度决定。

通常只有经过显微镜检查评为“密—五”或“密—四”的精液才能稀释，原则上稀释后每次输精量（0.1毫升）保证有效精子数7500万以上即可。

密度不高的精液不进行稀释。

稀释后的精液，输精前应再次进行品质检查。

5、输精
输精是人工授精操作最后一个环节，掌握好母羊发情排卵的时机，采用正确的方法把精液输送到母羊生殖道的适当位置。

1）适宜的输精时间：输精要适时，也就是要选择最容易受胎的时刻进行输精。

要做到这一点，必须掌握好排卵的时间，卵子排出后具有受胎能力的时间，精子运动速度和存活时间等规律。

母羊发情持续期一般为30小时左右，最理想的输精时间在排卵前不久，过早过迟都不适宜。

但在实际工作中，由于发情开始时间常常不好掌握，发现发情不等于开始发情，确切掌握排卵时间比较困难，因此就要结合上述原理，根据实践经验来决定输精时间。

通常，绵、山羊在发情开始后10～36小时内输精为宜。

一般根据试情制度，早晚各输一次。

次日仍然发情的母羊，应该进行第三次输精。

2）输精量：每一只母羊的输精量，根据精液品质、稀释倍数等决定。

在一般情况下，如用原精液输精，其输精量每只母羊为0.05～0.1毫升。

如使用１：1的稀释精液，用量为0.1～0.2毫升。

如使稀释2～3倍的稀释精液，用量为0.1～0.3毫升。

不论原精液或稀释后的精液，要求每次输入精液中的有效精子（呈前进运动的）数，以不少于5000～１0000个（平均7500个）为适宜。

3）输精部位：母羊的输精部位应该在子宫颈口，子宫颈口一般位于阴道的后上方，但个体间很不一致，偏向左右两侧的羊往往较多，但由于子宫颈细长，管腔内有５～６个横向皱褶，因此需要仔细操作，才能达到较深部位（０.５～1厘米）输精的目的。

４）输精方法：将待配母羊牵到输精室内的输精架上固定好，将其外阴部和周围擦洗干净并消毒，保定人员用手掀起羊尾巴，输精人蹲（或坐）在配种架后面的坑里，左手握开膣器，右手持输精器，将开膣器保持合拢状态，慢慢插入母羊阴道，轻轻扭转，适度张开。

先检查阴道内有无疾病和发情情况，再慢慢转动开膣器，寻找子宫颈口，找到后将开膣器固定适当位置，将输精器从开膣器中间慢慢插入子宫口０.５～１厘米处，用拇指轻轻压输精器活塞，注入定量精液。

然后慢慢取出输精器，把开窒器稍加合拢（半开半闭）取出，将母羊打好记号，放回羊圈。

也可采取倒立、阴道底部输精法，即由保定人员用双手握紧母羊两后腿飞节处，将羊倒提起来，用双腿夹住羊的躯体进行固定，然后由输精员进行输精。

子宫颈口一般位于阴道的后上方，但个体间很不一致，偏向左右两侧的羊往往较多，要耐心寻找，一般子宫颈口附近粘液较多，阴道粘膜颜色也较深，仔细观察，不难找到。

每输完一只母羊，将开膣器清洗擦干后，用酒精火焰消毒，然后在1％氯化钠溶液中蘸一下，即可供下一只羊使用。

输精器在连续使用的情况下，每用完一次，可用较干的65％的酒精棉球，将输精器尖端表面沿着向尖端的方向擦拭消毒（注意不要向相反的方向擦拭，防止酒精从尖端管口流入输精器内），然后用1％的氯化钠棉球擦拭数次，再输另一只母羊。

输精器内精液用完后，重新清洗、消毒，方可继续吸取精液。

当注入精液时，如感到精液排出不畅通，可检查输精器尖端是否在子宫颈口内，如确实插入子宫颈口，可稍许转动一下输精器或稍向外拉出一些，即可顺利注入。

当输精器插入子宫颈口内，如发现母羊有拱背情况，可用手轻压其腰部，以缓和紧张，防止精液倒流。

处女羊或其他因阴道狭窄，开膣器不能插进，看不见子宫颈口的羊，可采用阴道输精。

由于阴道输精精液损失较大，所以输精量要增加一倍至数倍。

输精器的温度，应保持与精液的温度相等。

使用保存、运输的精液时，应逐渐加温，输精室应保持18～25℃的温度。

一个工作日的工作结束后，器械、用具依次清洗消毒，注意不要使输精器活塞部分残留精液，要洗干净。

最后填写好各种记录表格和工作日记。

5）输精记录：种公羊采精记录：主要记载采精日期和时间、射精量、精子活率、颜色、密度、精液稀释倍数、输精母羊号。

母羊输精记录：主要记载输精母羊号、年龄、输精日期、精液类型、配公羊号、精液稀释倍数。

6）鲜精人工授精注意事项
①认真做好发情、输精及公羊配种的有关记录。

②禁止闲杂人员围观采精室、输精室，随便进入工作室。

③工作人员严肃认真，踏踏实实地完成
各环节任务，禁止大声喧闹，更不要随便开玩笑。

④工作室内决不允许吸烟及吃带刺激性食物（葱、蒜、酒等）后入内。

⑤爱护公母羊，不能粗暴对待。

⑥根据当日发情母羊多少，决定是否稀释精液。

⑦实现无菌操作，消毒过的器具，不可污染。

⑧严格按操作规程进行。

三、人工授精站的建立
建立和办好人工授精站是搞好绵羊改良和杂交生产工作的一项重要措施。

人工授精站的主要任务，除人工授精配种外，还要负责绵羊改良技术指导，人员的培训，种公羊的管理以及宣传和组织绵羊改良工作。

人工授精站的地址、布局、规模、设备、草场和水源等条件要和绵羊改良任务、羊群的分布、数量等相适应。

人工授精站的站址，应选择地高燥，排水良好，位置适中，水源充足，无传染病流行的地方。

人工授精站不能和兽医院建在一起。

人工授精站的规模大小，应因地制宜地根据羊只数量、草场面积等决定，一般以能够集中300～400只羊为适宜。

在规划建站时，要在附近为种公羊留出较好的放牧草场。

在草场面积小，牧草生长不好，不能大量集中母羊的情况下，为了便利人工授精工作的开展，更好地发挥种公羊的作用，可以建立人工授精配种点—输精点。

输精点不养种公羊，所需精液由人工授精站供应。

为了便利精液的运送，在交通不便的情况下，可以建立流动输精点。

人工授精站和输精点的建筑与设备，只要向阳、避风、干燥、保温、清洁卫生。

能够正常地进行操作即可。

每个站应有精液处理室、输精室（兼采精室）、种公羊圈（兼试情公羊圈）、待配母羊圈各一个，母羊圈（兼试情圈）若干个。

此外还要有饲料间、工作人员宿舍等。

精液处理室可以套建在输精室里面，和输精室合用两间房屋，外间是输精室，约占一间半（24平方米左右），里间是精液处理室，约占半间（8平方米左右）。

为了保持恒温和精液处理室的清洁，可以利用精液处理室和输精室中间的墙壁改装“火墙”，炉口设在输精室。

精液处理室最好用右灰刷墙，输精室为了光线充足，采光面积（窗的面积）应稍大一些，输精室内应有1～2个配种架。

人工授精站房屋和羊圈的布局，要合理、紧凑、便于试情、抓羊、输精等流水作业。