微生物检验质控

（七）标本检验过程的质量控制
微生物学实验室除了上述仪器、试剂、人员 等进行质量控制外，还应对标本检验过程中涉及 的每个环节进行全程质量控制。包括从标本采集 ， 直接涂片检查 ，分离培养到鉴定的全过程。使用 自动化鉴定仪或编码方式鉴定，必须进行核对以 防错误。
（八）室内全面质量控制
实验室人员要对以上各项的质量控制内容进 行全面实施。由个人负责全面的质量控制，自我 核对，定期与参考实验室核对并接受考评。
室间质量控制评价
（一）机构
我国负责临床微生物学实验室质量控制的部 门是各级临床检验中心和参考实验室，负责定期 或不定期地通过各项熟练程度考核和盲点试验检 查各实验室的工作质量和水平，进行总结和评估。 各级实验室可同时接受国内、国际多个质量控制 机构或参考实验室的质量评价。
（二）一般性检查项目
包括有否制定各种制度及其执行情况。 ①培养基和试剂的配制记录、培养基的保存方法、灭菌 质量、有效期。 ②室内全面质量控制的建立，室内工作人员的熟练程度 的考核和盲点试验的进行情况，细菌检验的操作手册及操 作的规范性。 ③设备的操作卡，操作人员的操作水平，设备的使用保 养、维修记录。
（九）标准菌株的来源和保存
①标准菌株的来源 标准菌株是指具有典型的、稳定的生理生化特征，并被国 际社会所认可的菌株。来源于专门的机构，如卫生部药物 生物制品鉴定所菌种保藏中心。 ②标准菌株的保存 （1）一般保存法：将菌种于半固体培养基中，35℃培养 18h时后封盖无菌石蜡油，置4℃保存。 （2）冷冻干燥法：是最可靠的菌种保藏方法，它具有不改 变菌种性状和保存时间长等优点，但需有专门的冷冻干燥 设备。
（六）仪器
①高压灭菌器和干热灭菌器最好在灭菌器装上温度记录装置， 以保证整个灭菌过程中保持合适的温度。为了保证灭菌的彻底， 可用生物指示剂嗜热脂肪芽胞杆菌ATCC7953监视灭菌效果。 ②培养箱、冰箱、水浴箱 应在每日工作开始和结束时记录温度。 ③二氧化碳培养箱 每天检查CO2含量。 ④厌氧罐或厌氧箱 美篮为指示剂，无氧时应无色。 ⑤生物安全柜 更换滤网由专门技术人员进行。 ⑥细菌培养仪 对每批培养瓶进行生长试验。保证在有效期内使 用。 ⑦微生物鉴定仪 应及时更新系统操作软件，使之能识别最新认 识的微生物。
（二）操作手册
①各级人员的职责和权限； ②实验室安全措施； ③标本采集和处理指南； ④本室开展的检验项目及最低鉴定要求； ⑤培养基和试剂的配制方法； ⑥质量控制方案； ⑦常用参考数据； ⑧其他制度。
（三）培养基的质量控制
培养基是分离培养微生物的必需品。 培养基质量的好坏，直接关系到分离培养 的成败。目前大多数实验室都使用干粉培 养基配制或使用成品培养基。对来自著名 的微生物培养基生产公司的培养基，质量 比较稳定。只要按照说明书的要求贮存， 在有效期内使用可获得满意效果。
（三）熟练程度的考核
由质控管理机构（检验中心或参考实验室）发放模拟 标本或菌种，接收的实验室知道菌株的来源、检验的内容 和时间。实验室完成鉴定后在规定时间内将结果反馈至检 验中心或参考实验室，进行评价。 分析结果错误的原因，提供有关的教育资料或举办学 习班，不断培养和训练技术人员，提高了解决类似问题的 技术水平。但受试实验室通常对这些菌株特别重视，采用 超过常规操作标准的方法进行鉴定，使上报结果不能准确 反映实验室的真实水平。
（四）盲点试验
为了准确反映受控实验室日常处理临床标本的实际水 平及能力，较好的方法是进行未知标本的盲点质量控制。 由质控管理机构将模拟标本混入临床普通标本，送人实验 室进行常规测定。 实验室主管及实验操作者不知道哪一个标本是来自质 控机构的。实验结果由质控管理机构负责收回，进行评价。
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（五）质控结果的分析与评价
（四）试剂、抗血清和染色液质量控制
①试剂及染色液注明配制日期，有效日期 及贮存条件。测试同时进行阳性和阴性对 照试验。 ②抗血清的质量控制来源可靠，根据使用 说明使用与保存。冻干制品还应注明配成 水溶液的日期。抗血清应澄清。第一次使 用时，应用已知菌效价和特异性进行测定。 合格者方可使用。
（五）抗生素与抗生素纸片
抗菌药物敏感试验是临床进行抗菌治 疗的指导性实验，其结果的正确性直接关 系到抗菌治疗的成败。常用有纸片法和稀 释法，保证结果的准确性极为重要。
举例：纸片法质量控制
①培养基：应使用合格的MH琼脂，应使用标准菌株、已知药 敏纸片和标准方法进行测试，符合要求才可使用。 ②菌悬液浓度标准：为1.5×108CFU／ml 。 ③含药纸片应冷冻保存，－20℃可保存一年。新购纸片用标 准菌株和培养基，用标准方法测定，符合要求方可使用。 ④实验过程及结果测量：菌悬液应在15min内接种至平板，平 放3min，然后将药物纸片贴到平板上， 100mm的平皿不超 过5张，置35℃孵育18h，测量精确度1／10mm。 ⑤质控菌株有：金黄色葡萄球菌ATCC25923；大肠埃希菌 ATCC25922等。 ⑥抑菌环的质控范围：在20个试验结果中只能有1个结果超出 所列的范围。 ⑦质控测定次数：每批新的MH琼脂和含药纸片必须用质控菌 株进行检测30日，30个抑菌环直径只有少于3个结果超出范 围。达到要求后，每周检测一次。
测定羊血琼脂平板的性能
培养基 生长试验 溶血反应 质控菌株 金黄色葡萄球菌 ATCC25923 肺炎链球菌 ATCC19615 化脓性链球菌 ATCC6305 化脓性链球菌 ATCC6305 B群链球菌 判定标准 生长 生长，α溶血 生长，β溶血 ＞10mm，敏感 ＜10mm，耐药
杆菌肽敏感 （纸片法）
微生物检验的质量控制
微生物检验的质量控制，包括室内 质量控制和室间质量控制评价。
• 室内质量控制是由实 验室内部制定并实施 的，是质量保证的核 心和基础。 • 室间质量控制评价是 由实验室外部的组织 或机构对实验室进行 的质量评价。
室内质量控制
（一）人员与组织管理
①经过广泛的基础训练教育，包括微生物 学、基础医学临床医学知识的学习，专业 化的实验技能培训。 ②参加医务人员的继续教育。 ③配有一名经严格训练并长期从事于微生 物检验的技术人员，全面负责实验室的工 作。
谢谢！
质控管理机构对每次质控结果进行统计分析，将每一 实验室的结果与标准进行比较。根据参加的规模和鉴定的 正确数，计算鉴定正确率及所有参加实验室的平均分，以 及每个实验室的得分。 世界卫生组织对每一个正确的鉴定得3分；部分正确但可 以接受的鉴定结果得2分；鉴定结果部分错误得1分；完全 错误的0分。 英国国家微生物学质量控制实验室的计算公式为： 标本鉴定正确数－平均实验室正确数 /实验室平均正确数 的标准差，高于平均值得正分，低于平均值得负分。如果 得分低于－1．96，则表示水平差，需进行学习和帮助。