细胞周期和凋亡实验
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细胞周期实验
（1）收集对数生长期细胞：弃除旧培养基，用PBS洗涤细胞加入适量胰酶进行消化。加入新鲜的培养基吹打细胞，并将细胞收集于标记好的对应离心管中，室温1000 rpm离心5 min，弃除上清液。
（2）洗涤细胞：用预冷的PBS重悬上述细胞沉淀，室温1000 rpm 离心5 min，将上清液弃除。
（3）固定细胞：将细胞用0.5 ml 预冷的PBS 溶液重悬，加入预冷的70%乙醇溶液在4°C固定过夜。
（4）PI 染色细胞：加入10μl RNase（10mg/ml），置37 ℃、5% CO2、饱和湿度恒温培养箱孵育30min，运用冰浴终止RNase A 酶作用；再加入10μl溴化乙锭（PI，1mg/ml）染色，置37 ℃、5% CO2、饱和湿度恒温培养箱孵育30min。
（5）流式细胞仪检测，分析PI 荧光的直方图。
细胞凋亡检测
用0.25%胰酶消化收集细胞，PBS洗涤2次，加入100μl Binding Buffer和10μl FITC标记的Annexin-V(20ug/ml)，室温避光30min，再加入PI（50μg/ml）5μl，避光反应5min后，加入400μl Binding Buffer。在1h内完成上机定量检测。