第13章(香豆素类)

结构特点：香豆素母核上异戊烯基常与邻位酚羟基环合 成呋喃，可分为6，7-呋喃骈香豆素（线型呋喃香豆 素），（花椒毒素、佛手柑内酯、异虎耳草素）7，8呋喃骈香豆素（角型呋喃香豆素）如补骨脂素、哥伦比 亚内酯、O-乙酰异蛇床子素、O-乙酰哥伦比亚内酯等。
R2
O
OO
R2
线型呋喃香豆素
OO
oR
角型呋喃香豆素 6
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二．色谱定性分析
（一）薄层色谱定性分析 吸附剂:硅胶;常用的展开系统有：氯仿；含1.5%乙
醇氯仿；乙醚- 苯（1：1）；乙醚- 苯- 10%乙酸（1： 1：1）等。
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2．应用实例
（1）白芷的薄层定性分析
取白芷粉末0.5g，加乙醚10ml，浸泡1h，时时振摇， 滤过，滤液挥干乙醚，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供 试品溶液。另取欧前胡素、异欧前胡素对照品，加醋酸乙 酯制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。
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第二节 香豆素定性分析
一．化学定性分析
1．荧光反应 （1）秦皮的鉴别
取秦皮，加热水浸泡，浸出液在日光下可见碧蓝色荧光。 （2）前胡的鉴别 取前胡粉末1g，加乙醚10ml，浸渍2h后，取乙醚液2 滴， 分别点于两张小滤纸片上，置紫外光灯（365nm）下观察， 显淡天蓝色荧光。然后滴加15％氢氧化钠溶液数滴，2 min 后荧光消失。将一张滤纸片避光保存，另一张滤纸片曝光， 约3h后，置紫外光灯（365nm）下观察，曝光者天蓝色荧 光加强，避光者不显荧光。 ?
2．与碱的作用
香豆素具有α、β不饱和δ内酯的结构，在稀碱溶液中可 渐渐水解开环生成顺式邻羟基桂皮酸的盐，但它不稳定， 一经酸化．又可复原。
利用这种性质来处理复杂的植物提取物，可使香豆素类 和中性、酸性、酚性的其它成分分离开。
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3．显色反应
（1）异羟基肟酸铁反应：
因香豆素具有内酯环，所以能与异羟基肟酸铁 反应，产生紫红色，可被用来鉴别和比色测定，其 反应如下：
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第三节 香豆素定量分析
含香豆素成分的中药定量测定方法有比色 法、荧光法、极谱法、紫外分光光度法、薄 层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法用概况
香豆素类化合物在紫外光的照射下显蓝色荧光，可 用荧光分光光度法测定。如 7- 羟基香豆素和香豆素 混合物的测定，前者用370nm激发，在450nm测定， 浓度为1-10µg／ml时荧光与浓度成线性关系。后者 用361nm激发，在491nm测荧光。
第十三章
香豆素分析
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第一节 香豆素分布及理化性质
香豆素及其衍生物是中药中的主要成分之一，具有多 种生理活性，临床上用于止咳、利尿、抗菌、抗放射、抗 凝血等。 香豆素类成分广泛分布于植物界，如伞形科、夹竹桃科、 萝藦科、菊科、十字花科、杜鹃花科、豆科、唇形科、兰 科、禾本科、芸香科、蔷薇科、茄科、无患子科、瑞香科 等植物中均有较多分布。
吸取上述两种溶液各4µl，分别点于同一以羧甲基纤维素 钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（30-60℃）- 乙 醚（3：2）为展开剂，在25℃以下展开，取出，晾干，置 紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品 色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。
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（二）气相色谱定性分析 （三）高效液相色谱定性分析
（1） 简单香豆素类
结构特点：取代基位于苯环上，C7位带有含氧 基团。多存在于伞形科、瑞香科、大戟科、芸 香科中，如蛇床子素、秦皮乙素、双七叶树内 酯，橙皮油素等。
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蛇床子素 蛇床子素的药理作用：① 抗组织胺；②抗发癬 菌作用；③抗变态反应；④Ca2+阻断作用。
M eO
OO
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（2） 呋喃香豆素类
Emerson反应是将香豆素类化合物溶于碱性溶液中， 加入2% 4- 氨基安替比林溶液数滴及8%铁氰化钾溶液 2-3滴即可显色，其反应如下：
OHOO
CH3 N CH3
COO- + C6H5 N
NH2
OH
O
CH3 N CH3
C6H5 N
N
O
COOOH
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4．荧光与紫外吸收
（1）香豆素类化合物在紫外光的照射下显 蓝色荧光，不但作为定性鉴别，而且作为定 量测定依据。
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（2）羟基香豆素在紫外光下有强的荧光，
不难辨认；呋喃香豆素较弱，但也能在紫外 光下显示蓝、紫、棕、绿、黄等色。必要时 可喷10% KOH醇液，或20% SbCl3氯仿液 以显色。
（3）香豆素类化合物羟基和芳环形成的共
轭体系具较强的紫外特征吸收，不同的香豆 素化合物在不同pH条件下表现不同的光谱特 性，对该类成分的分析具重要意义。
NH2OH O O NaOH
NH ONa O OH
Fe 3+, H +
NH
ONa O O
Fe
1 3
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（2）酚类试剂反应：
因该类化合物多具酚羟基，能和常规酚类试剂反应， 如三氯化铁、硝酸银的氨溶液、三氯化铁-铁氰化钾。
如果香豆素化合物的C6位上（即酚羟基的对位）没有 取 代 基 ， 则 能 和 Emerson 试 剂 反 应 显 橙 - 红 色 ； 与 Gibbs试剂反应显蓝色。
含有香豆素类化合物的常用中药有白芷、秦皮、独活、 前胡、阿魏、当归、补骨脂、茵陈蒿、川芎、防风、蛇床 子等。
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一. 结构类型与分布 香豆素是一类顺式邻羟基桂皮酸内酯的羟 基衍生物，基本母核为：
oo
香豆素的基本母核
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分子中的苯环或а-吡喃酮环上常有取代基存在， 根据所连接的基团不同，可分为以下几类：
（3）吡喃香豆素类
香豆素母核上异戊烯基常与邻位酚羟基形成2， 2-二甲基-а-吡喃环。如白花前胡甲、乙、丙、 丁素，花椒内酯等。
O
OO
（4）其它香豆素类
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二．理化性质
1．通性
多具芳香气，能随水蒸气挥发或升华。 不溶于水或难溶于水，可溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿 或乙醇等溶剂中,在定量测定时，多用氯仿和乙醇来提取。
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2．颜色反应
（1）蛇床子的鉴别 取蛇床子粉末2g，加乙醇20ml，加热回流30min，滤过。 取滤液数滴，点于白瓷板上，置紫外光灯（365nm）下观察， 显蓝紫色荧光；另取滤液 2ml，加等量的3％碳酸钠溶液，加 热5min，放冷，再加新制的重氮对硝基苯胺试液1-2滴，即 显樱红色。 （2）白芷的鉴别 取少量样品粉末，加乙醚，振摇5min后静置20min，取上 清液 1ml，加入7%盐酸羟胺甲醇溶液2-3滴，20%KOH甲醇 溶液2-3滴，摇匀，在水溶上微热，冷却后加稀盐酸调到pH 3 -4，然后加入1%三氯化铁乙醇溶液1-2滴，溶液显紫红色。