番茄红素

不同品系番茄中番茄红素的含量对比及其抗氧化性的检测和天然
面膜的制备
摘要
目的：通过实验分别从圣女果和西红柿中提取番茄红素,并研究其抗氧化性,为番茄红素的规模化生产和应用提供依据。

方法：利用超声波法提取番茄红素，通过邻苯三酚检测其抗氧化性。

结果：圣女果和西红柿中的番茄红素含量存在一定的差异，且圣女果中番茄红素的含量高于西红柿中番茄红素的含量，番茄红素对超氧阴离子自由基具有清除作用。

关键词：番茄红素超声波圣女果西红柿邻苯三酚面膜制备
1.前言
番茄红素（Lycopene)是一种开链式的不饱和类胡萝卜素，属于脂溶性天然色素，[1]，其主要存在于番茄、西瓜、南瓜、葡萄、柑橘等果实和茶的叶片以及萝卜、胡萝卜、芜菁、甘蓝的根部，其中在番茄中含量最高，且番茄成熟度越高，番茄红素的含量越多。

[2]番茄红素是人们膳食中的一种主要类胡萝卜素，它是由11个共轭双键及2个非共轭双键组成的直链型碳氢化合物，动物无法生物合成，只能由食物摄取。

近年来的研究表明番茄红素在体内具有抗氧化、清除自由基、预防和抑制癌症、抑制诱变、保护心血管、延缓衰老、防治白内障和调节机体免疫力等功能。

[3]番茄红素作为一种非常有前途的抗氧化剂受到普遍关注。

本文是在传统的溶剂萃取方法的基础上，采用超声波辅助萃取法对番茄红素进行提取，大大缩短了提取时间，提高了提取效率，且产品品质好，提取率较高，质地纯且无环境污染，具有广阔的应用前景。

2.实验目的
2.1比较不同品系番茄中番茄红素的含量
2.2 熟练掌握番茄红素的提取方法
2.3熟练掌握番茄红素的定量及检验番茄红素抗氧化能力的方法
2.4学会利用生物统计的方法对实验数据进行分析
2.5实用生活小应用-“巧制番茄祛皱美白面膜”
2.6锻炼实验设计能力，提高实验操作技能，增强团队合作精神
3.实验原理
3.1超声波提取原理番茄红素易溶于氯仿、苯、乙酸乙酯，可溶于乙醚、石油醚、己烷、丙酮，不溶于水，利用这一性质用有机溶剂将番茄红素提取出来，同时，萃取时利用超声波的空化和振动作用，使得植物细胞壁破裂，而且整个破裂过程在瞬间完成，不仅加速植物中有效成分的溶出，而且有利于活性成分的保留。

3.2番茄红素含量测定原理番茄红素在不同的有机溶剂里均有类似的吸收峰，最大吸收波长约为472-485nm，人们经常将样品溶解在石油醚或乙酸乙酯中，在最大吸收波长下用分光光度计测定溶液的吸光度，以此来计算番茄红素的浓度。

-，生成3.3番茄红素抗氧化性检测原理邻苯三酚在碱性条件下迅速自氧化，释放出O
2
有色的中间产物。

可用分光光度法进行测定，邻苯三酚自氧化过程的初始阶段，中间产物的累积在30-40s后与时间成线性关系，且中间产物在320nm有强烈的光吸收，当有
-，从而阻止中间产物的积累，溶液在X=320nm处吸收减弱，番茄红素存在时，可清除O
2
值在加入抑制剂前后的变化来判定番茄红素对自由基的清除效果。

故可以通过测定A
320
4.实验设备
紫外分光光度计、723型可见分光光度计、电热鼓风干燥箱、研钵、电子分析天平、称量纸、AG285 型分析天平、 SHZ-DⅢ型循环水式真空泵、搅拌器、JY92-2D 超声波细胞粉碎机、离心机（50ml离心管）1台、6个50ml和1个200ml的容量瓶、100ml和200ml 烧杯、25和100ml和200量筒、微量移液器一套、10ml移液管、吸耳球、药匙、PH试纸（6-10）、玻璃棒。

5.实验材料与试剂
成熟的西红柿、圣女果、番茄红素标准品 (纯度 >90%)、无水乙醇、甲醇、甘油、邻苯三酚、乙酸乙酯等分析纯、超纯水、0.2mol/L的HCl、0.2mol/L的Tris、10mmol/L的HCl
5.1溶液配制：（1）0.1mol/l的Tris-Hcl缓冲液（PH=8.2）：取0.2mol/l的Tris液100ml，加0.2mol/l的HCl44.76ml混合，用双蒸水稀释至200ml。

（2）3.6mol/l的邻苯三酚：称取4.5400g邻苯三酚，用10ml 10mmol/l的HCl溶解。

5.2材料的处理：从市面上购买较新鲜的圣女果和西红柿，去蒂切块以备研磨。

6．实验操作步骤
6.1 番茄红素的提取
挑选成熟度好，色泽鲜艳均匀的西红柿和圣女果清洗干净，去掉梗后用搅拌器制成浆状，高速离心机脱水得番茄糊， 将10 g 捣碎后的番茄糊，置于洗净干燥的100mL 烧杯中，再加入 40 mL 的乙酸乙酯。

调节 pH 为7,在200 W 的功率下超声提取25 min ，等待冷却后抽滤，取上层清液稀释到一定倍数，测量稀释后的溶液在 485 nm 处的吸光度，并计算番茄红素的提取率。

(若提取量过少将滤渣按照上述条件再进行第 2 次提取，各次提取所得的上清液稀释至一定的倍数，于485 nm 处测吸光度，并计算番茄红素提取率。

)
[4]
6.2番茄红素的含量测定
6.2.1标准曲线绘制 称取番茄红素标准品1 mg ，用少量乙酸乙酯溶解，移50 mL 容量瓶中，用乙酸乙酯溶解定容至刻度，所得的番茄红素标准溶液浓度即为 0．02 mg/mL 。

分别取标准溶液 1.25，3，3.25，5，6.25 mL 移入 50 mL 容量瓶中，并用乙酸乙酯定容至刻度，所得溶液浓度分别为 0. 5，1.0，1.5，2.0，2.5 mg / L 。

在 485 nm 下，以无水乙醇为空白溶液校零，分别测定其吸光度，得到标准曲线。

6.2.2样品分析
稀释样品提取液一定的倍数后，测量 485 nm 处的吸光度值，代入回归方程，算出番茄红素的浓度，按下式得出番茄红素的提取率(mg/g) ［5］ 。

番茄红素提取率 =0.001
W
bV
C 式中 C ———番茄红素浓度，mg/L; W ———称取样品的固含量，g; V ———样品体积，mL; b ———稀释倍数。

6.3番茄红素对超氧阴离子自由基的清除作用的测定
用甲醇溶解番茄红素,配制浓度为0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0（mg/ml ）的溶液。

取10支干净的试管,本底管（2支）自氧化管(2支）样品管（6支），本底管为自氧化管的空白，除本底管外其余各管均加入50µl 邻苯三酚,然后每管均加入2850ul0.1 mo1/L 、pH8.2的Tris-HCl 缓冲溶液。

样品管加入100μl 样品，自氧化管加入100μl
双蒸水，调节各管的反应总体积为3 ml。

其中以自氧化管调0，完成后加入试管中,同时按下秒表,迅速振荡试管,加至比色皿中,在320 nm处记录其在前4 min每30 s的吸光度。

根据吸光度计算不同浓度的番茄红素对超氧阴离子自由基的清除率，清除率S=(A 空-A样)/A空*100％[6]。

6.4 番茄红素面膜的制备
先将番茄连皮揉成浆状，再加入3匙杏仁粉搅拌，将提取后番茄红素溶于甘油中，并加入浆状的番茄中，搅拌均匀即可。

7.结果及计算
7.1番茄红素含量测定结果
7.1.1标准曲线制作数据
取配制好的0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mg/L的系列标准液样品，按6.2.1的测定方法，结果如表1，以吸光度（A）对质量浓度(C),绘制标准曲线，见图一
表1 番茄红素各浓度的吸光度
番茄红素浓度吸光度值
(λ)
(mg/l) 第一次第二次第三次x̅
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
由上表可绘制番茄红素标准曲线图1如下所示
7.1.2不同品系番茄的提取率对比
表2 不同品系番茄的提取率
番茄品系
提取率
第一次
第二次 第三次 x̅
西红柿 圣女果
7.1.3清除超氧阴离子自由基的测定
表3 各提取液的吸光度
浓度（mg/mL ）
0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
1 2 3 x̅
表4 各提取液的清除率
浓度/(mg/L) 图1标准曲线
吸光度
浓度（mg/mL）0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
清除率（%）
8.注意事项
番茄红素和维生素E对光比较敏感，尤其是在日光和紫外线下，而在暗处比较稳定。

提取番茄红素尽量避光操作。

操作过程中注意时间和温度的把握。

9.费用预算
500元
参考文献
[1]郑建仙.功能性食品[M].北京：中国轻工业出版社，2000
[2]林汝法.中国荞麦[M].北京：中国农业出版社，1994
[3]陈锦瑶,张立实. 番茄红素的生物学作用及应用研究进展[J]. 卫生研究，2013，v.4202:336-342.
[4]王晓军，高宁，王斌．超声波法提取番茄红素的研究［J］．应用化工，2012，41(10):1747-1750．
[5] 赵春玲，万端极，张萍．超声波法提取番茄红素的工艺研究［J］.食品研究与开发，2008，29( 10) : 80-83．
[6] BauerV, Nakajima T, Pucovsy V,et al.Effects of superoxidegenerating systems on muscle tone, cholinergic and NANC re-sponses in cat airway[J].AutoNeroous System, 2000, 79:
34-44.。