关于天麻胶囊质量标准分析

关于天麻胶囊质量标准分析

发表时间：2014-10-14T08:58:32.950Z 来源：《医药前沿》2014年第21期供稿作者：赵燕

[导读] 本文通过研究，建立当归、杜仲、牛膝进行薄层色谱定性鉴别，测定出君药天麻中主要成分天麻素的含量，提升现有质量标准。

赵燕

（四川省绵阳市中医医院 621000）

【摘要】目的：建立专属性强的天麻胶囊质量标准。方法：对天麻胶囊进行薄层探索，寻求没有阴性样品没干扰的中药，建立专属性强的薄层色谱定性鉴别。结果：通过研究建立当归、杜仲、牛膝薄层色谱法，对各个成分特征斑点进行检测，所建立的质量标准方法较为简便、可靠，重现性好，专属性强，可以提升现有质量控制方法。

【关键词】天麻胶囊质量标准控制色谱法

【中图分类号】R927.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）21-0287-01

1 引言

本文通过研究，建立当归、杜仲、牛膝进行薄层色谱定性鉴别，测定出君药天麻中主要成分天麻素的含量，提升现有质量标准。

2 试验仪器药品准备

2.1 实验仪器准备

岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪，其中包括进样器、柱温箱与紫外检测器；数控超声波清洗器；YB-2真空恒温干燥箱；湘仪电子分析天平；瑞士梅特勒电子分析天平AB135-S。

2.2 试验药品准备

供鉴别用的药品主要有当归对照药材、牛膝对照药材、杜仲对照药材等，天麻素对照品供含量测定使用。以上药品需要由生物制品检定所供给。具有许可证编号的天麻胶囊与由医院提供的阴性样品。另外还需要硅胶G、磷酸、乙腈为色谱纯，水使用超纯水，其他的试剂为分析纯。[1]

3 薄层色谱鉴别方法

3.1 当归、川芎薄层色谱鉴别取三批样品内容物各22.5g，加入正已烷25ml，使用超声处理15min，过滤将滤液挥干，残渣加入1ml正已烷溶液使之溶解,作为样品溶液；利用同样的方法制备缺当归的缺阴性对照溶液，作为阴性对照溶液；取当归对照药材1g，按同样的方法制备，作为对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述三种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚-乙酸乙酯(10：0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下进行检视，供试品与对照品相应位置显相同颜色的荧光斑点，没有发现阴性对照样品对结果形成干扰影响。[2]

3.2 牛膝薄层色谱鉴别取三批样品内容物各10g,加乙醇30ml,加热回流1h，滤过，把滤液浓缩到10ml，加入盐酸1ml，加热回流一个小时后浓缩至5ml，加水10ml，使用石油醚进行萃取，蒸干，残渣加乙醇溶液1ml溶解，作为样品溶液；利用同样的方法制备缺牛膝样品的缺阴性对照溶液，作为阴性对照溶液；取牛膝对照药材1g，按同样的方法制备，作为对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述三种溶液各

5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(40：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%的磷钼酸乙醇溶液，于105℃下烘至相应位置显相同颜色的荧光斑点，没有发现阴性照样品对结果的干扰。

3.3 杜仲薄层色谱鉴别取三批样品内容物各20g，加水100 ml，微热30min，滤过，加入三氯甲烷萃取三次，合并溶液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使之溶解，作为样品溶液；利用同样的方法制备缺杜仲样品的缺阴性对照溶液，作为阴性对照溶液；取杜仲对照药材1g，按同样的方法制备，作为对照品溶液。按照薄层色谱法实验,吸取上述三种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丙酮(17：3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%的三氯化铁与1%的铁氰化钾混合溶液，检视相应位置显相同颜色的斑点，没有发现阴性照样品对结果的干扰。

4 天麻素含量测定

首先确定色谱条件。以Diamonsil C18为色谱柱，比例为3：97配比而制成的乙腈0.05%的磷酸溶液为流动相，检测波长为220mm，速度为1.0ml/min，色谱柱温为25度，进样量为10μL，根据理论板数，不低于7800。

分别制备对照品溶液、样品溶液、阴性样品溶液。在对照品溶液的制备时，取五氧化二磷减压干燥14天，取天麻素对照品5.09mg，放在100ml的容量杯中，加入乙腈-水（3：97）混合溶液溶解，得到对照品溶液；把样品研细[4]，取3.3g,放入到锥形瓶中，取25ml稀乙醇加入，混合物称重，加热3h后放置冷却，再次称重，精密量取续滤液10ml，浓缩接近干燥状态，加入乙腈-水（3：97）混合溶液溶解，转移到10ml的量瓶中，充分混合，摇匀，取得滤液；对于阴性样品的制备，需要取缺天麻的阴性样品约3.3g，按供试品溶液制备法得到阴性对照溶液。[3]

分别得到以上对照品、样品与阴性样品溶液，取10μL进行测定。如下图所示。

图一天麻素胶囊阴性样品色谱图

样品溶液色谱中有峰值，而阴性样品色谱图中却没有峰值，样品色谱天麻素与其他成分可以达到基线分离，表明阴性样品对结果没有明显干扰。通过绘制标准曲线，确定线性关系，考察精密度。并进行重复性试验与稳定性试验，最后得到样品含量，最后进行加样回收试验。

表一样品中天麻素测定表

编号含量（mg/粒） RSD(%)

1 0.211 0.87

2 0.204 0.80

3 0.218 0.72

5 结论

本文通过对提升天麻胶囊质量标准专属性的研究，建立无阴性样品干扰的薄层色谱定性鉴别，确保了天麻胶囊质量标准更加专属性、科学性。专属性强的天麻素进行含量测定，可以对药品质量进行很好地控制，在含量的测定试验中，流动相对多种不同比例配比进行比较，乙腈量过多与保留时间短等将会造成天麻素峰和杂质峰分离不明确。而乙腈过少，保留时间太长的话，则会造成峰拖尾问题。所以根据实验数据，选择乙腈-0.05%磷酸溶液系统，保持适度的保留时间，与其他组实现基线分离。

参考文献

[1] 李文莉,万胜利,赵勇,王艳,龙海燕.天麻胶囊质量标准中补充检验对乙酰氨基酚的方法[J].药物分析杂志,2013,06:1041-1044.

[2] 温立义,温博,董慧,姜泽.加味天麻胶囊质量标准研究[J].中国现代中药,2013,09:793-796.

[3] 徐茜.两种药物制剂的质量标准研究[D].南方医科大学,2013.