食品清洗消毒效果试验方法三磷酸腺苷生物发光法编制说明

国家标准《食品清洗消毒效果试验方法三磷酸腺苷生物发光法》

编制说明

1、工作简况

根据国标委2013年国家标准制修订计划，制定《食品清洗消毒效果试验方法三磷酸腺苷生物发光法》，项目编号20131348-T-607。

通过对ATP检测仪器和试剂调研，了解分析测试产品性能以及市场需求，了解国际相关标准情况，系统研究ATP化学发光分析方法，实现检测过程的量值溯源，对关键技术环节进行进行优化，形成国家标准草案。

2、标准编制原则和内容

2.1 标准编制原则

标准编制遵循“统一性、协调性、适用性、一致性、规范性”的原则，尽可能与国际通行标准接轨，注重标准的可操作性，本标准严格按照GB/T 1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T 20001.4—2001《标准编写规则：化学分析方法》的规定进行编写和表述。

2.2 编制依据

本标准编制组收集了大量国内外相关资料，查询了国内外相关标准方法，参考了ASTM D 4012-2009《水中微生物ATP含量的标准检测方法》、DIN 10124-2009《三磷酸腺苷检测借助生物发光法了解卫生状况》、TB/T 3121-2005《铁路食（饮）具洁净度ATP生物发光检测法和分级判定》，并按照国家标准编制的要求进行起草。

2.3 解决的主要问题

本标准统一了ATP化学发光检测的实验条件，包括样品处理、试剂材料准备、ATP检测操作；注明了ATP化学发光检测的主要干扰因素；建立了溶液中微生物总数与ATP化学发光强度的关系。

3、主要试验（或验证）情况

本标准中方法一：台式化学发光分析仪检测法，参考ASTM D 4012-2009《水中微生物ATP含量的标准检测方法》制定。

本标准中方法二：手持式ATP生物发光检测仪涂抹法，使用了两台A TP检测仪。

1）仪器品牌型号

a. 品牌Hygiena ，型号SystemSURE Plus

b. 品牌3M，型号Clean-Trace NG

2）细菌污染

选取15 cm 2食品接触表面，用无菌棉棒沾取1个麦氏比浊浓度的大肠杆菌溶液，并来回分别涂抹8次，从而将菌液均匀沾染于表面。在清洗消毒之前检测表面ATP 残留，清洗消毒之后再次检测ATP 残留，从而评价清洗消毒效果。将无菌的tris 缓冲液代替菌液涂抹于样品表面，作为阴性对照。 3）样品的清洗消毒方法

a. 煮沸消毒：将食品接触材料置于沸水中持续煮沸10min ，在生物安全柜中放置至干燥后检测。

b. 75%乙醇溶液喷洒消毒：将75%乙醇溶液喷洒至食品接触材料表面，待乙醇溶液完全挥发后检测。以75%乙醇溶液作为阴性对照。 4) 计算结果

根据公式%1001

2

1⨯-=

n n n 去除率，计算清洗消毒对食品接触表面生物量的去除率，并作为食品接触表面清洗消毒效果的评价指标。

表1 hygiena 牌ATP 发光检测仪检测餐具煮沸前后

细菌污染的餐具（RLU ） 阴性对照（RLU ）

餐具煮沸10min 后（RLU ）

208 0 0 174 0 0 110 0 0 163 0 0 157 0 0 189

平均值（RLU ）166.8

平均值（RLU ）0

平均值（RLU ）0

生物去除率=100%

表2 3M 牌A TP 发光检测仪检测餐具煮沸前后

细菌污染的餐具（RLU ） 阴性对照（RLU ）

餐具煮沸10min 后（RLU ）

362 0 0 565 0 0 499 0 0 491 0 0 611 0 0 510

平均值（RLU ）506.3

平均值（RLU ）0

平均值（RLU ）0

生物去除率=100%

表3 hygiena牌ATP发光检测仪检测餐具用75%乙醇溶液消毒前后

细菌污染的餐具（RLU）阴性对照（RLU）75%乙醇消毒后（RLU）

134 0 51

150 0 69

151 0 81

180 0 70

125 0 42

147 0 60

平均值（RLU）147.8 平均值（RLU）0 平均值（RLU）62.1

生物去除率=58.0%

4、标准中涉及专利的情况

本标准并未涉及专利。

5、预期达到的社会效益、对产业发展的作用等情况

清洗消毒产业是一个保证人民健康甚至生命安全的重要行业，建立清洗消毒效果的科学合理的检测方法具有重要的经济和社会效益，ATP化学发光检测方法有利于大大降低时间和经济成本，检测结果灵敏、可靠，操作方便，但是目前行业内还没有统一的方法标准，导致实验室间结果的可比性差。因此，有必要制定行业标准，建立一个公正、统一的清洗消毒效果评价方法，促进企业提高产品质量，同时淘汰劣质产品出市场，有利于保护消费者利益，也提高了技术质量水平高的产品竞争力，促进市场良性竞争发展。

6、与国际、国外对比情况

本标准在制定过程中参考了ASTM D 4012-2009《水中微生物ATP含量的标准检测方法》。

7、与现行相关法律、法规、规章及相关标准，特别是强制性标准的协调性

与清洗消毒行业相关法律法规及规章未发生冲突。

8、重大分歧意见的处理经过和依据

无。

9、标准性质的建议说明

标准性质的建议是推荐性国家标准。

10、贯彻标准的要求和措施建议

建议国内生产和使用清洗消毒产品的企业以及实验室采用，组织实施由全国食品用洗涤消毒产品标准化技术委员会组织或中国轻工业联合会组织实施，对其企业进行标准方法的培训。

11、废止现行相关标准的建议