Bouin液和4中性甲醛固定液对睾丸活检组织固定和HE染色差异的比较

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Ｂｏｕｉｎ液和４％中性甲醛固定液对睾丸活检组织固定和ＨＥ染色差异的比较

王海萍王淑妍

在男性学发展过程中，睾丸活检曾经是惟一对无精子症

或少精子症有诊断价值的检查。随着精液内一些附性腺的

功能性指标检测技术的建立，生殖激素测定及与精子发生有

关基因诊断技术的开展，睾丸活检已成为一种既可协助临床

诊断又可指导临床治疗的方法。通常情况下睾丸活检组织

与普通组织标本放在一起用４％中性甲醛液固定，但甲醛在

睾丸组织的固定中渗透速度相对较慢，且后续ＨＥ染色中组

织色彩暗、对比差、生精细胞及精子结构模糊，影响其观察。

自１９９７年１月开始，我们改用Ｂｏｕｉｎ液固定了１３６６例睾丸

活检组织，并对其中的１６例患者的睾丸活检组织分别用

Ｂｏｕｉｎ液和４％中性甲醛液作了对比，效果满意。

一、材料与方法

１．材料：睾丸活检标本来源于２００６—２００９年宁波大学

医学院附属医院泌尿外科不育症患者。主要试剂及仪器：

４％中性甲醛（饱和甲醛溶液１９ＩＹｌｌ＋ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸

缓冲液９０ｍ１），Ｂｏｕｉｎ固定液（苦味酸７５ｒｎｌ＋４０％甲醛溶液

２５ｌｌｌｌ＋冰乙酸５ｍ１），乙醇，二甲苯，盐酸及石蜡等，ＨＭ３１５Ｒ

型Ｍｉｃｒｏｍ切片机，ＹＴ－６Ｂ型摊烤片仪，电热恒温电烤箱（上

海跃进医疗器械厂）。

２．方法：将配对好的Ｂｏｕｉｎ液和４％中性甲醛固定液交

给临床医师保存。同一患者同部位取两块睾丸活检组织，立

即分别放入两种固定液中，固定４ｈ以上。用Ｂｏｕｉｎ液固定

·６２９·．技术交流．

的组织在７０％乙醇中脱水１ｈ以上。这样可以洗去因固定

液中苦味酸染上的黄颜色，然后和用４％中性甲醛固定的组

织按常规方法脱水、包埋、石蜡切片机连续切片，片厚４斗ｍ，

４２℃水浴裱片，ＨＥ常规染色，光镜下观察比较睾丸组织结

构，同时对精子数量进行计数。每例标本各观察计数５张切

片１０个高倍视野，取其均数。计数结果用ＳＰＳＳ１７．０统计

学配对ｔ检验分析。

二、结果

肉眼观察见睾丸组织入Ｂｏｕｉｎ液立即由红色变白色，而

入４％中性甲醛中则是逐渐由红变白。显微镜（物镜×４０）

下观察：用Ｂｏｕｉｎ液固定过的组织其ＨＥ染色色彩亮丽，对比

清晰，生精细胞结构清晰，组织结构分明（图１），高倍视野下

精子数量较多（图２）；４％中性甲醛固定过的组织色彩较暗，

对比不够清晰，生精细胞结构较模糊，组织结构比较分明

（图３），高倍视野精子数量较少（图４）。Ｂｏｕｉｎ液固定组织

与４％中性甲醛固定组织之间精子检出个数差异有统计学

意义（ｔ＝４．２８７，Ｐ＜０．０５）。

三、讨论

组织的固定是形态学研究中不可缺少的重要步骤，其目

的是（１）抑制细胞内溶酶体酶的释放和活性，防止自溶；抑

制组织中细菌的繁殖，防止组织腐败；（２）使细胞的蛋白质、

脂肪、糖等各种成分凝固成不溶性物质，以防止物质扩散并

图１Ｂｏｕｉｎ液固定，颜色对比亮丽ＨＥ中倍放大图２Ｂｏｕｉｎ液固定，精子数量多ＨＥ高倍放大图３４％中性甲醛固定，颜色对比模糊ＨＥ中倍放大图４４％中性甲醛固定，精子数量少ＨＥ高倍放大

ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０５２９－５８０７．２０１０．０９．０１２

作者单位：３１５０２０宁波大学医学院附属医院病理科

Bouin液和4%中性甲醛固定液对睾丸活检组织固定和HE染色差

异的比较

作者：王海萍， 王淑妍

作者单位：宁波大学医学院附属医院病理科,315020

刊名：

中华病理学杂志

英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PATHOLOGY

年，卷(期)：2010，39(9)

被引用次数：0次

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本文链接：/Periodical_zhblx201009012.aspx

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下载时间：2010年11月12日