PKC的酶学特征及在结肠癌中的研究进展
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齐齐哈尔医学院学报２０１０年第３１卷第８期
・
１２６７・
・综述・讲座・ ＰＫＣ的酶学特征及在结肠癌中的研究进展
范桂莲 王玉国 何 苗
ＰＫＣ的酶学特征 ＰＫＣ的超家族成员 根据不同亚单位在结构和功能上
蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）是丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶的家族成
１ １．１
员，对细胞的生长、分化：凋亡等信号转导均起重要作用。因而
Ｊ０１ａｎｄａ Ｈ．ＬｉｏｎｅＩ Ｇ，Ｅｒｉｋ
ｔｉｏｎ Ｂ，ｅｔ ａＩ．Ｐｒｏｔｅｉｎ
ＰＫＣ与结肠癌细胞的分化
Ｒｉｃｋａｒｄｌ等Ｈ１在人类结肠
上皮细胞的体外研究还发现ＰＫＣ的激活可以增加丁酸盐诱
导的细胞分化和更新。丁酸盐是一个潜在的分化因素，在结 肠癌细胞中，它能促进许多细胞分化标记物的表达，包括碱性
ｃ ａｃｔｉｖａ—
ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｔｅｒｃｅＩｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｏｆ Ｃａｔｅｎｉｎ—ｎｅｇｅｔｉｖｅ
ｃｏｌｏｎ
ｃａｎｃｅｒ
ｈｕｍａｎ
Байду номын сангаасｃｅｌｌ
ｖａ
ｒｉａｎｔｓ
ｖｉａ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
１１６
ｏｆ
ｄｅｓｍｏｓｏｍｅｓ
［Ｊ］．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，１９９７，１３７（５）１１ １０３—１
ＰＫＣ的结构及调节
对ＰＫｃ各亚单位分子的结构分
析表明，ＰＫＣ分子中有４个相对保守的区域，从氨基端到羧
基端分别命名为Ｃ１一Ｃ４结构域。Ｃ１是ＤＡＧ的结合位点，
Ｃ２是ｃａ”的结合位点，Ｃ１和Ｃ２合称ＰＫｃ的调节区。Ｃ３有 一个ＡＴＰ结合基序，为ＰＫＣ提供能量和磷酸基团，ｃ４是底 物结合区，Ｃ３和Ｃ４合称为ＰＫＣ的催化区。
收稿日期２０１０一０２～２２
万方数据
！！！竺！！！９１９ｉ！！！坚型！！！鱼！虹！：！！！！！！！！：！！！丝！：！
临床应用方面受到很大局限。
２
能。因此，整合素间的相互作用和它们特定的配体对ＰＫＣ介
导的转移是必不可少的。同时，也检测到ＰＫＣ能激活ＭＡＰ
（ｍｉｔｏｇｅｎ—ａｃｔｉｖａｔｅｄ
ＰＫＣ在结肠中的研究进展
２．１
ＰＫＣ与结肠癌细胞的粘附作用
细胞粘附对于各种调
含有大量ＰＫＣ／口１整合素的小囊结构的聚集，这种现象是正 常暂时的再循环间隔。若去除ＰＫＣ的抑制，含有ＰＫＣ／８１整 合素的小囊结构则分离。
２．４
节和生长过程是非常重要的。在恶性肿瘤中，细胞间粘附的
抑制作为转移的第一步是必不可少的。Ｈｅｎｇｅｌ等：一２３分析了
型在不同类型的肿瘤中有不同的表达。近年来的研究发现， ＰＫｃ各亚型在正常结肠粘膜上皮细胞的生长调控和结肠癌
位；ａＰＫＣ包括≮、ｘ亚单位。这些亚单位在不同组织中的分布 不同，详见表１。最近又发现了与ＰＫＣ相关的一些激酶
（ＰＲＫ），如ＰＲＫｌ、ＰＲＫ２，也属于ＰＫＣ家族。
变中都起着较为重要的作用。
衷１
ＰＫＣ亚单位在哺乳动物体内的分布
Ｊａｒｎ∞ＭＭ．Ｋａｔｈｌｅｅｎ ＶＬ．Ｎｉｃｏｌｅ
Ｇ，ｅｔ
ａＬ
Ｉｎｃｒｃ”ｅｄ
ｔ曲ｔ
ｊｕｎｃｔｉ０Ｉｌ
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ｔｕｆｌｍ ｐｒｏｎｌｏｔｉｏｎａｌ
［７］Ｂａｒｏｎ ＰＬ，Ｋｏｒｅｔｚ ＭＪ，ｃａｒｃｈｍａｎ ＲＡ・ｅｔ ａ１．１ｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ—ｒｅｌａｔｅｄ
ａｎｔｉｇｅｎｓ
ｏｎ
ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ
ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｓｕｒｇ，１９９０，１２５：３４４—３５０
ｈＩｂｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ Ｄｉｆｆｅｒ，１９９３，４：４９５—５０１
ｉｎ
ｉｎｄｕｃｅｓ
ｇｒｏｗｔｈ
ｉｎ—
ＨＴ一２９
ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ
Ｇｒｏｗｔｈ
胞株ＨＴ２９一Ｄ４中在粘附、播散和转移等方面所起的作用。
实验发现，给予ＰＭＡ后能增加细胞播散的速率，并且能诱导 这些细胞朝着纯化的基质蛋白移动。ＰＭＡ诱导的效应是
ｅｓｔｅｒｓ、ＴＰＡ、ｂｒｏｓｔａｔｉｎｓ、ＡＡ、ｃａｌ—
ｐｈｏｓｔｉｎｃ等；抑制剂包括非特异性抑制剂ｓｔａｕｒｓｐｏｒｉｎｅ、Ｈ７、
ＧＦｌ０９２０３等和特异性抑制剂（抑制ｃＰＫＣｓ）Ｇ０６９７６、
ｌｙ３３３５３１。而针对于某一种同工酶的抑制剂，尚未见报道。 由于缺乏特异的ＰＫＣ同工酶抑制剂，同工酶功能的研究及在
ＤＧ，二酰甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒ０１）；ＰＳ，磷脂酰丝氨酸（ｐｈｏｓ— ｐｈａｔｉｄｉｌｓｅｒｉｎｅ）；ＦＦＡ。顺式不饱和脂肪酸（ｃｉｓ ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ）；ＬｙｓｏＰＣ。溶血磷脂胆碱（１ｙｓｏｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）。
１．２
用。ＰＫＣ是促癌剂ＰＭＡ（ｐｈｏｒｂｏｌ，１２一ｍｙｒｉｓｔａｔｅ—１３一ａｃｅ— ｔａｔｅ，即佛波醇一１２一豆蔻酰一１３一乙酸）细胞内受体，ＰＫＣ
整合素依赖细胞的活动力。ＰＫＣ的表达可以上调细胞表面 的Ｂ１整合素，而ＰＫＣ的激活可以诱导其通过胞饮作用实现
内吞。胞饮作用的阻断能使ＰＫＣ增加的转移应答受到抑制。 Ｉｖａｓｋａ等［１２］也发现ＰＫＣ的抑制能降低细胞的活力，并导致
现，ＰＫＣ广泛存在于结肠上皮细胞和结肠肿瘤细胞中．对其
生长调控起着必不可少的作用。
的过度表达导致细胞生长紊乱，并且触发肿瘤的形成。ＰＫＣ
的激活被认为是ｃａ”和磷脂依赖性的，尤其是磷脂酰丝氨酸 （ＰＳ）及其应激状态的各种产物（如ＤＡＧ）在ＰＫＣ的激活及其 发挥生理机能中有着至关重要的作用。异常持续的ＰＫＣ激 活，可导致细胞功能失调。为保持细胞间功能的协调，机体常 通过内源性机制使ＰＫｃ的活性下调，ＰＫＣ被激活后活性下 调的现象称为“ＰＫＣ的限制性调节”。ＰＫＣ的活性下调还有 激酶专一性和亚型专一性。夏保云等［１ ３发现ＰＭＡ对人７７２１ 肝癌细胞只引起ＰＫＣ而不引起ＰＫＡ和ＴＰＫ（酪氨酸蛋白激 酶）的下词，ＰＫＣ的非特异性抑制剂槲皮素和特异性抑制剂 Ｄ一鞘氨醇能大部分取消ＰＭＡ对ＰＫＣ的下调，用ＨＬ一６０ 细胞能证明ＰＭＡ只对含量丰富的ＰＫＣａ和ＰＫＣＢⅡ亚型而 不对含量很少的ＰＫＣＢ Ｉ亚型发生下调，说明ＰＭＡ对蛋白激 酶的下调有激酶和亚型专一性。
ｉｎ
ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ∞ｎｏｅｒｓ［Ｊ］．
活性的影响，它说明丁酸盐不是被ＰＫＣ信号通路直接调节
的。这与其他细胞株中得到的结果是一致的，包括恶性Ｔ淋 巴母细胞株ＭＯＬＴ一３［６］和结直肠癌细胞株Ｓｗ一４８口３和Ｃａ—
ｃｏ一２［“。 ２．３
Ａｃａｄ啪ｙ ｏｆ
ＳｃｉｅＩ艄，２０００。９１５：２３１—２３６
ＰＹ，ｅｔ
［４］
Ｋｕｒｔ ＬＲ，Ｐｅｔｅｒ ＲＧ．Ｇｒａｅｍｅ
ａ１．Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎ
ｋｉｎａｓｅ Ｃ ａｕｇｕｍｅｎｔ ｂｕｔｙｒａｔｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｕｍ—
ｏｖｅｒ
ｉｎ
ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎｉｃ ｅｐｊｔｈｅｌｉａｌ ｃｅＩｌｓ
ｉｎ
磷酸酶和癌胚抗原，５］。近来的研究还发现丁酸盐在生理浓度 可以促进各种细胞的凋亡。Ｒｉｃｋａｒｄｌ等的实验结果表明， ＰＫＣ在调节丁酸盐的各种生理功能中起着重要的作用，包括 分化和细胞更新。ＰＫｃ的激活，能明显提高细胞对丁酸盐的 敏感性。但是，激酶的抑制，并不能改变丁酸盐对碱性磷酸酶 ［３］
ｋｉｎａｓｅ
在外界刺激作用下，ＰＫＣ移位（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）到细胞膜而被
激活。短暂的ＰＫｃ激活，在信号传导通路中所致的短期事件 （如离子内流，分泌等）方面似乎起着重要作用；持续的ＰＫＣ 激活，可能在细胞增殖，分化及肿瘤发生等方面起着重要的作
作者单位：黑龙江省大庆油田总医院病理科 邮
编１６３００１
ＰＫＣ的调节剂可分为作用于催化区和调节区两类。其 中激活剂包括ｐｈｏｒｂｏｌ
有丝分裂的信号通路。近两年也有人报道，ＰＫＣ定位在细胞 基侧，可以抑制上皮细胞的分泌功能；若定位在顶侧，则可以 降低细胞的屏障功能，同时也表明这两种功能被不同的ＰＫＣ
异构酶所调节ｉ－“］。 此外，临床组织标本研究中也发现，在正常粘膜、癌周及 癌组织这一连续过程中，ＰＫＣ的活性是逐渐降低的，且以细 胞膜下降为主［１“。还有报道称，ＰＫＣ的表达仅与肿瘤组织分
的存在是必需的。但Ｍｕｌｌｉｎａ等＿１研究却发现，在ＬＬＣ—ＰＫＩ
上皮细胞中，ＰＫＣ的激活或移位可以增加紧密连接的通透
性，这种通透性的增加可以使盐、糖和大分子通过，它并作为
上皮肿瘤的一个独一无二的促进因素。
２．２
特异的抗癌药物将具有重大的理论及实践意义。
参 ［１］ 考 文 献 夏保云，李忠，张帆，等．佛波酯引起蛋白激酶ｃ下降调节的专一 性［Ｊ］．中国生物化学与分子生物学报，１９９８，１４（２）：２１８—２２１ ［２］
阻断能引起细胞转移的丧失。所以，ＰＫＣ引起的整合素的联
合以及ＭＡＰ激酶途径的激活对于促进ＨＴ２９一Ｄ４细胞的转 移是必需的。这与Ｋｌｅｍｋｅ等［１０］的报道一致。Ｔｏｎｙ等［“］研
究也发现，ＰＫｃ能通过整合素交通的关联和控制来调节８ｌ
殖、分化和转移中也起着关键的调节作用。近年的研究表明，
在多种人类肿瘤中均可见到ＰＫＣ活性表达异常。我们也发
蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）作为机体细胞信号传导通路的中心产 物，存在于多种组织中，通过催化多种生理活性蛋白，ＰＫＣ广
泛参与一系列与细胞生命活动相关的过程。它不仅在正常细 胞的增殖、分化、凋亡、基因表达、膜转运和信号传导等过程中 起着重要的调节作用，而且，在细胞癌变以及肿瘤细胞的增
ｐｒｏｔｅｉｎ）激酶途径，并且，此激酶途径的
在肿瘤的发生、发展及转移的过程中具有重要的意义。迄今
的特点，可将ＰＫＣ分为经典ＰＫｃ（ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＰＫｃ，ｃＰＫＣ）， 新型ＰＫＣ（ｎｏｖｅｌ ＰＫＣ，ｎＰＫＣ）和非典型（ａｔｙｐｉｃａｌ ＰＫＣ，ａＰＫＣ） 三组。ｃＰＫＣ包括ｎ、ｐ Ｉ、ｐⅡ、７亚单位；ｎＰＫＣ８、ｅ、１】、８亚单
为止，在哺乳动物体内已经发现１２种以上ＰＫＣ亚型，而各亚
另外，除ＰＲＫｓ外，所有ＰＫＣ亚单位的氨摹端ｃ１区均存
在一个假底物位点，其与真底物位点的差别在于磷酸化位点 的丙氨酸取代了丝氨酸／苏氨酸残基，因而不能被磷酸化，从
而封闭酶的活化中心，这种假底物位点的自我抑制作用是多 种蛋白激酶所共有的自身活性调节机制之一。由于假性底物
的存在，静息状态下ＰＫＣ均以无活性的形式存在于胞浆中，
导并无相关性，但应用抗Ｅ一钙粘蛋白抗体却可抑制ＴＰＡ的
效应。这表明正常链蛋白的表达对建立上皮细胞问的紧密连 接并非必需的，同时也表明通过激活ＰＫｃ信号通路可以上调 桥粒连接和紧密连接，而对于基本的细胞连接Ｅ一钙粘蛋白
化程度有统计学相关性，而与其他临床因素无相关性［１“。
总之，ＰＫＣ在正常细胞及肿瘤发生发展过程中所起到的 作用，还有许多问题尚待深入研究，揭示它们之间的内在联系 对于研究细胞的生长调控和肿瘤的发生发展机制，开发新的
ＰＫＣ激活剂ＴＰＡ在侵袭性的缺乏链蛋白的人类结肠癌细胞 株中的作用。这些细胞表现一种孤立圆形的形态，这种形态
ＰＫＣ的其他作用
除了具有上述功能外，Ａｎｇｅｌａ等［１３］
报道，ＰＫＣ还参与人类结肠癌细胞株Ｓｗ一４８０的一个新的
是和增加的侵袭性相关的。它们在被转染了一个表达链蛋白
的质粒，同时给予ＴＰＡ治疗后获得了更加正常的表型。视频 记录显示给予ＴＰＡ治疗后３０ ｍｉｎ内，这些细胞就开始建立 复杂的细胞间联系，有趣的是，这种ＴＰＡ效应与链蛋白的诱
［６］
Ｎａｇａｓａｗａ ｉｎ
Ｋ，Ｍａｋ
ｍａｌｉｇｎａｎｔ
Ｔｗ．Ｐｈｏｒｂｏｌ
Ｔ
ｅｓｔｅｒｓ
ｉｎｄｕｃｅ
ｄｉｆｆｅｆｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｓｃｉ
ｈｕｍａｎ
ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ ＮａｔＩ Ａｃａｄ
９６８
ＵＳＡ，１９８０．７７：２ ９６４—２
ＰＫＣ激活的结果，这是通过使用无活性的异构体４口一ＰＭＡ 和ＰＫＣｓ抑制剂得到的结果。在ＰＭＡ诱导的细胞转移中， 整合素的参与可以通过两种方法检测到，一是膜上衬有多 聚一Ｌ一赖氨酸的细胞的转移的丧失，另一是阻断抗体的功
ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅ—
ＰＫＣ与结肠癌细胞的转移
Ｒｉｇｏｔ等¨１研究发现整合
ｓｉｓ，１９９９，２０（６）：９７７—９８４
素（ｉｎｔｅｇ“ｎ）的联合与ＰＫＣ的激活对于结肠癌细胞的转移是 必不可少的。他们检测了ＰＫＣ的激活荆ＰＭＡ在结肠癌细
［５］Ｂａｒｎａｒｄ ＪＡ，ｗａｒｗｉｃｋ Ｇ．Ｂｕｔｙｒａｔｅ ｒａｐ｜ｄｌｙ
・
１２６７・
・综述・讲座・ ＰＫＣ的酶学特征及在结肠癌中的研究进展
范桂莲 王玉国 何 苗
ＰＫＣ的酶学特征 ＰＫＣ的超家族成员 根据不同亚单位在结构和功能上
蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）是丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶的家族成
１ １．１
员，对细胞的生长、分化：凋亡等信号转导均起重要作用。因而
Ｊ０１ａｎｄａ Ｈ．ＬｉｏｎｅＩ Ｇ，Ｅｒｉｋ
ｔｉｏｎ Ｂ，ｅｔ ａＩ．Ｐｒｏｔｅｉｎ
ＰＫＣ与结肠癌细胞的分化
Ｒｉｃｋａｒｄｌ等Ｈ１在人类结肠
上皮细胞的体外研究还发现ＰＫＣ的激活可以增加丁酸盐诱
导的细胞分化和更新。丁酸盐是一个潜在的分化因素，在结 肠癌细胞中，它能促进许多细胞分化标记物的表达，包括碱性
ｃ ａｃｔｉｖａ—
ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｔｅｒｃｅＩｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｏｆ Ｃａｔｅｎｉｎ—ｎｅｇｅｔｉｖｅ
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ｈｕｍａｎ
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１１６
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ＰＫＣ的结构及调节
对ＰＫｃ各亚单位分子的结构分
析表明，ＰＫＣ分子中有４个相对保守的区域，从氨基端到羧
基端分别命名为Ｃ１一Ｃ４结构域。Ｃ１是ＤＡＧ的结合位点，
Ｃ２是ｃａ”的结合位点，Ｃ１和Ｃ２合称ＰＫｃ的调节区。Ｃ３有 一个ＡＴＰ结合基序，为ＰＫＣ提供能量和磷酸基团，ｃ４是底 物结合区，Ｃ３和Ｃ４合称为ＰＫＣ的催化区。
收稿日期２０１０一０２～２２
万方数据
！！！竺！！！９１９ｉ！！！坚型！！！鱼！虹！：！！！！！！！！：！！！丝！：！
临床应用方面受到很大局限。
２
能。因此，整合素间的相互作用和它们特定的配体对ＰＫＣ介
导的转移是必不可少的。同时，也检测到ＰＫＣ能激活ＭＡＰ
（ｍｉｔｏｇｅｎ—ａｃｔｉｖａｔｅｄ
ＰＫＣ在结肠中的研究进展
２．１
ＰＫＣ与结肠癌细胞的粘附作用
细胞粘附对于各种调
含有大量ＰＫＣ／口１整合素的小囊结构的聚集，这种现象是正 常暂时的再循环间隔。若去除ＰＫＣ的抑制，含有ＰＫＣ／８１整 合素的小囊结构则分离。
２．４
节和生长过程是非常重要的。在恶性肿瘤中，细胞间粘附的
抑制作为转移的第一步是必不可少的。Ｈｅｎｇｅｌ等：一２３分析了
型在不同类型的肿瘤中有不同的表达。近年来的研究发现， ＰＫｃ各亚型在正常结肠粘膜上皮细胞的生长调控和结肠癌
位；ａＰＫＣ包括≮、ｘ亚单位。这些亚单位在不同组织中的分布 不同，详见表１。最近又发现了与ＰＫＣ相关的一些激酶
（ＰＲＫ），如ＰＲＫｌ、ＰＲＫ２，也属于ＰＫＣ家族。
变中都起着较为重要的作用。
衷１
ＰＫＣ亚单位在哺乳动物体内的分布
Ｊａｒｎ∞ＭＭ．Ｋａｔｈｌｅｅｎ ＶＬ．Ｎｉｃｏｌｅ
Ｇ，ｅｔ
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Ｉｎｃｒｃ”ｅｄ
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ｔｕｆｌｍ ｐｒｏｎｌｏｔｉｏｎａｌ
［７］Ｂａｒｏｎ ＰＬ，Ｋｏｒｅｔｚ ＭＪ，ｃａｒｃｈｍａｎ ＲＡ・ｅｔ ａ１．１ｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ
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ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｓｕｒｇ，１９９０，１２５：３４４—３５０
ｈＩｂｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ Ｄｉｆｆｅｒ，１９９３，４：４９５—５０１
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ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ
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胞株ＨＴ２９一Ｄ４中在粘附、播散和转移等方面所起的作用。
实验发现，给予ＰＭＡ后能增加细胞播散的速率，并且能诱导 这些细胞朝着纯化的基质蛋白移动。ＰＭＡ诱导的效应是
ｅｓｔｅｒｓ、ＴＰＡ、ｂｒｏｓｔａｔｉｎｓ、ＡＡ、ｃａｌ—
ｐｈｏｓｔｉｎｃ等；抑制剂包括非特异性抑制剂ｓｔａｕｒｓｐｏｒｉｎｅ、Ｈ７、
ＧＦｌ０９２０３等和特异性抑制剂（抑制ｃＰＫＣｓ）Ｇ０６９７６、
ｌｙ３３３５３１。而针对于某一种同工酶的抑制剂，尚未见报道。 由于缺乏特异的ＰＫＣ同工酶抑制剂，同工酶功能的研究及在
ＤＧ，二酰甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒ０１）；ＰＳ，磷脂酰丝氨酸（ｐｈｏｓ— ｐｈａｔｉｄｉｌｓｅｒｉｎｅ）；ＦＦＡ。顺式不饱和脂肪酸（ｃｉｓ ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ）；ＬｙｓｏＰＣ。溶血磷脂胆碱（１ｙｓｏｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）。
１．２
用。ＰＫＣ是促癌剂ＰＭＡ（ｐｈｏｒｂｏｌ，１２一ｍｙｒｉｓｔａｔｅ—１３一ａｃｅ— ｔａｔｅ，即佛波醇一１２一豆蔻酰一１３一乙酸）细胞内受体，ＰＫＣ
整合素依赖细胞的活动力。ＰＫＣ的表达可以上调细胞表面 的Ｂ１整合素，而ＰＫＣ的激活可以诱导其通过胞饮作用实现
内吞。胞饮作用的阻断能使ＰＫＣ增加的转移应答受到抑制。 Ｉｖａｓｋａ等［１２］也发现ＰＫＣ的抑制能降低细胞的活力，并导致
现，ＰＫＣ广泛存在于结肠上皮细胞和结肠肿瘤细胞中．对其
生长调控起着必不可少的作用。
的过度表达导致细胞生长紊乱，并且触发肿瘤的形成。ＰＫＣ
的激活被认为是ｃａ”和磷脂依赖性的，尤其是磷脂酰丝氨酸 （ＰＳ）及其应激状态的各种产物（如ＤＡＧ）在ＰＫＣ的激活及其 发挥生理机能中有着至关重要的作用。异常持续的ＰＫＣ激 活，可导致细胞功能失调。为保持细胞间功能的协调，机体常 通过内源性机制使ＰＫｃ的活性下调，ＰＫＣ被激活后活性下 调的现象称为“ＰＫＣ的限制性调节”。ＰＫＣ的活性下调还有 激酶专一性和亚型专一性。夏保云等［１ ３发现ＰＭＡ对人７７２１ 肝癌细胞只引起ＰＫＣ而不引起ＰＫＡ和ＴＰＫ（酪氨酸蛋白激 酶）的下词，ＰＫＣ的非特异性抑制剂槲皮素和特异性抑制剂 Ｄ一鞘氨醇能大部分取消ＰＭＡ对ＰＫＣ的下调，用ＨＬ一６０ 细胞能证明ＰＭＡ只对含量丰富的ＰＫＣａ和ＰＫＣＢⅡ亚型而 不对含量很少的ＰＫＣＢ Ｉ亚型发生下调，说明ＰＭＡ对蛋白激 酶的下调有激酶和亚型专一性。
ｉｎ
ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ∞ｎｏｅｒｓ［Ｊ］．
活性的影响，它说明丁酸盐不是被ＰＫＣ信号通路直接调节
的。这与其他细胞株中得到的结果是一致的，包括恶性Ｔ淋 巴母细胞株ＭＯＬＴ一３［６］和结直肠癌细胞株Ｓｗ一４８口３和Ｃａ—
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ＳｃｉｅＩ艄，２０００。９１５：２３１—２３６
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［４］
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ａ１．Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ
ｐｒｏｔｅｉｎ
ｋｉｎａｓｅ Ｃ ａｕｇｕｍｅｎｔ ｂｕｔｙｒａｔｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｕｍ—
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磷酸酶和癌胚抗原，５］。近来的研究还发现丁酸盐在生理浓度 可以促进各种细胞的凋亡。Ｒｉｃｋａｒｄｌ等的实验结果表明， ＰＫＣ在调节丁酸盐的各种生理功能中起着重要的作用，包括 分化和细胞更新。ＰＫｃ的激活，能明显提高细胞对丁酸盐的 敏感性。但是，激酶的抑制，并不能改变丁酸盐对碱性磷酸酶 ［３］
ｋｉｎａｓｅ
在外界刺激作用下，ＰＫＣ移位（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）到细胞膜而被
激活。短暂的ＰＫｃ激活，在信号传导通路中所致的短期事件 （如离子内流，分泌等）方面似乎起着重要作用；持续的ＰＫＣ 激活，可能在细胞增殖，分化及肿瘤发生等方面起着重要的作
作者单位：黑龙江省大庆油田总医院病理科 邮
编１６３００１
ＰＫＣ的调节剂可分为作用于催化区和调节区两类。其 中激活剂包括ｐｈｏｒｂｏｌ
有丝分裂的信号通路。近两年也有人报道，ＰＫＣ定位在细胞 基侧，可以抑制上皮细胞的分泌功能；若定位在顶侧，则可以 降低细胞的屏障功能，同时也表明这两种功能被不同的ＰＫＣ
异构酶所调节ｉ－“］。 此外，临床组织标本研究中也发现，在正常粘膜、癌周及 癌组织这一连续过程中，ＰＫＣ的活性是逐渐降低的，且以细 胞膜下降为主［１“。还有报道称，ＰＫＣ的表达仅与肿瘤组织分
的存在是必需的。但Ｍｕｌｌｉｎａ等＿１研究却发现，在ＬＬＣ—ＰＫＩ
上皮细胞中，ＰＫＣ的激活或移位可以增加紧密连接的通透
性，这种通透性的增加可以使盐、糖和大分子通过，它并作为
上皮肿瘤的一个独一无二的促进因素。
２．２
特异的抗癌药物将具有重大的理论及实践意义。
参 ［１］ 考 文 献 夏保云，李忠，张帆，等．佛波酯引起蛋白激酶ｃ下降调节的专一 性［Ｊ］．中国生物化学与分子生物学报，１９９８，１４（２）：２１８—２２１ ［２］
阻断能引起细胞转移的丧失。所以，ＰＫＣ引起的整合素的联
合以及ＭＡＰ激酶途径的激活对于促进ＨＴ２９一Ｄ４细胞的转 移是必需的。这与Ｋｌｅｍｋｅ等［１０］的报道一致。Ｔｏｎｙ等［“］研
究也发现，ＰＫｃ能通过整合素交通的关联和控制来调节８ｌ
殖、分化和转移中也起着关键的调节作用。近年的研究表明，
在多种人类肿瘤中均可见到ＰＫＣ活性表达异常。我们也发
蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）作为机体细胞信号传导通路的中心产 物，存在于多种组织中，通过催化多种生理活性蛋白，ＰＫＣ广
泛参与一系列与细胞生命活动相关的过程。它不仅在正常细 胞的增殖、分化、凋亡、基因表达、膜转运和信号传导等过程中 起着重要的调节作用，而且，在细胞癌变以及肿瘤细胞的增
ｐｒｏｔｅｉｎ）激酶途径，并且，此激酶途径的
在肿瘤的发生、发展及转移的过程中具有重要的意义。迄今
的特点，可将ＰＫＣ分为经典ＰＫｃ（ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ＰＫｃ，ｃＰＫＣ）， 新型ＰＫＣ（ｎｏｖｅｌ ＰＫＣ，ｎＰＫＣ）和非典型（ａｔｙｐｉｃａｌ ＰＫＣ，ａＰＫＣ） 三组。ｃＰＫＣ包括ｎ、ｐ Ｉ、ｐⅡ、７亚单位；ｎＰＫＣ８、ｅ、１】、８亚单
为止，在哺乳动物体内已经发现１２种以上ＰＫＣ亚型，而各亚
另外，除ＰＲＫｓ外，所有ＰＫＣ亚单位的氨摹端ｃ１区均存
在一个假底物位点，其与真底物位点的差别在于磷酸化位点 的丙氨酸取代了丝氨酸／苏氨酸残基，因而不能被磷酸化，从
而封闭酶的活化中心，这种假底物位点的自我抑制作用是多 种蛋白激酶所共有的自身活性调节机制之一。由于假性底物
的存在，静息状态下ＰＫＣ均以无活性的形式存在于胞浆中，
导并无相关性，但应用抗Ｅ一钙粘蛋白抗体却可抑制ＴＰＡ的
效应。这表明正常链蛋白的表达对建立上皮细胞问的紧密连 接并非必需的，同时也表明通过激活ＰＫｃ信号通路可以上调 桥粒连接和紧密连接，而对于基本的细胞连接Ｅ一钙粘蛋白
化程度有统计学相关性，而与其他临床因素无相关性［１“。
总之，ＰＫＣ在正常细胞及肿瘤发生发展过程中所起到的 作用，还有许多问题尚待深入研究，揭示它们之间的内在联系 对于研究细胞的生长调控和肿瘤的发生发展机制，开发新的
ＰＫＣ激活剂ＴＰＡ在侵袭性的缺乏链蛋白的人类结肠癌细胞 株中的作用。这些细胞表现一种孤立圆形的形态，这种形态
ＰＫＣ的其他作用
除了具有上述功能外，Ａｎｇｅｌａ等［１３］
报道，ＰＫＣ还参与人类结肠癌细胞株Ｓｗ一４８０的一个新的
是和增加的侵袭性相关的。它们在被转染了一个表达链蛋白
的质粒，同时给予ＴＰＡ治疗后获得了更加正常的表型。视频 记录显示给予ＴＰＡ治疗后３０ ｍｉｎ内，这些细胞就开始建立 复杂的细胞间联系，有趣的是，这种ＴＰＡ效应与链蛋白的诱
［６］
Ｎａｇａｓａｗａ ｉｎ
Ｋ，Ｍａｋ
ｍａｌｉｇｎａｎｔ
Ｔｗ．Ｐｈｏｒｂｏｌ
Ｔ
ｅｓｔｅｒｓ
ｉｎｄｕｃｅ
ｄｉｆｆｅｆｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｓｃｉ
ｈｕｍａｎ
ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ ＮａｔＩ Ａｃａｄ
９６８
ＵＳＡ，１９８０．７７：２ ９６４—２
ＰＫＣ激活的结果，这是通过使用无活性的异构体４口一ＰＭＡ 和ＰＫＣｓ抑制剂得到的结果。在ＰＭＡ诱导的细胞转移中， 整合素的参与可以通过两种方法检测到，一是膜上衬有多 聚一Ｌ一赖氨酸的细胞的转移的丧失，另一是阻断抗体的功
ｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅ—
ＰＫＣ与结肠癌细胞的转移
Ｒｉｇｏｔ等¨１研究发现整合
ｓｉｓ，１９９９，２０（６）：９７７—９８４
素（ｉｎｔｅｇ“ｎ）的联合与ＰＫＣ的激活对于结肠癌细胞的转移是 必不可少的。他们检测了ＰＫＣ的激活荆ＰＭＡ在结肠癌细
［５］Ｂａｒｎａｒｄ ＪＡ，ｗａｒｗｉｃｋ Ｇ．Ｂｕｔｙｒａｔｅ ｒａｐ｜ｄｌｙ