HPLC法测定人参决明子压片糖果中葛根素的含量

HPLC法测定人参决明子压片糖果中葛

根素的含量

目的： HPLC法对人参决明子压片糖果中葛根素的含量。方法：

KromasilC18(4.6mm×250mm，5μm)为色谱柱,乙腈∶0.033%磷酸溶液(40∶60)为

流动相;流速:1.0ml/min;检测波长:265nm，柱温30℃。结果：葛根素浓度在

5.50～27.48 ug/ ml之间线性关系良好,平均回收率94.65%,RSD=2.9%，结论：

该方法简单、可靠、专属性强，可用于活血壮筋丸的质量控制。

[关键词]:人参决明子压片糖果, 葛根素 , HPLC

人参决明子压片糖果是保健食品，由人参、蛹虫草、枸杞、黄精、决明子、

沙棘、栀子、葛根等中药食材精制而成，具有降压，增强免疫力功效。葛根[1]为

该制剂的主要成分之一，含有葛根素等有效成分。原标准中未收载含量测定项 ,

本文采用高效液相色谱法对该制剂中的葛根素[2，3]含量进行研究 ,实验结果表明，该法简便易行，灵敏度高，能准确地反映葛根素的含量，为更好的控制本品的内

在质量提供了科学依据。

1方法和结果 1.1 仪器与试药

BP211D型电子天平（赛多利士）；Agilent1100高效液相色谱仪，G1314A VWD检测器（美国安捷伦公司），葛根素对照品 (中国食品药品检定研究院

0713-9404),乙腈为色谱纯；水为二次重蒸水；其他试剂为分析纯；人参决明子

压片糖果（成都胜奥生物医药科技有限公司批号：210308，200212，211106）。

1.2 实验方法和结果

1.2.1 色谱条件

色谱柱：KromasilC18(4.6mm×250mm),流动相：0.033mol/L磷酸二氢钾-乙

腈(60:40)，流速：1.0mL/min，检测波长265nm，进样量：10ul，理论塔板数：9865，柱温：30℃，色谱图见图1。

1.2.2 对照品溶液制备：

精密称取葛根素对照品12.70mg，加流动相稀释至100ml量瓶，摇匀，精密

量取1ml至10ml量瓶加流动相稀释至刻度.色谱图见图1。

1.2.3 样品溶液的制备

取装量差异项下的内容物，研细，取5.0525g，置100ml量瓶中，加流动相100ml至锥形瓶中，水浴回流30分钟，冷却后超声30分钟，滤过，精取续滤液

1ml至10ml量瓶加流动相稀释至刻度.即得样品溶液。色谱图见图2。

1.2.4标准曲线的制备

分别精密取对照品溶液1、2、3、4、5 mL于10ml量瓶中，用流动相稀释至

刻度 ,摇匀，在上述色谱条件下进样10μl，依法测定。以峰面积（y）为纵坐标，相应浓度（x）为横坐标进行线性回归，得回归方程：

y=19.955x+0.2224(R=0.9999) ，线性范围为 5.50~27.48 ug /ml。结果表明峰

面积与浓度呈良好的线性关系。

1.2.5 精密度测定

精密取12.70ug/ml葛根素对照品溶液10μl重复进样5次，峰面积基本不变，RSD为0.3%。

1.2.6 重复性测定

取同批号(批号210308)样品5份，分别制备供试液，在上述色谱条件下测定

5次，得葛根素含量为1.455mg/g，RSD为0.4%。

1.2.7 稳定性试验

取同一批供试品溶液（批号210308），于室温放置,每隔2h测一次,共测5次,记录峰面积，RSD为0.3%。

1.

1.

1.

回收率试验

分别取已知含量的样品(批号210308)6份,各0.15 g,精密称定,分别置于50ml的容量瓶中,精密加入葛根素对照品溶液(0.127mg/ml)各0.5、1、2ml, 照样品测定法测定，计算回收率。

1.2.9 空白试验

按处方比例称取除黄连以外的其它十一味药，按制备工艺制成供试液，依样品测定法测定，在主成分出峰处无干扰(见图3)。

图1对照品色谱图图2样品色谱图

图3 空白试验图

1.2.10 样品测定

取样品溶液和对照品溶液，各进样10μL，读取峰面积值，按外标法计算含量(见表1)。

表1样品含量测定结果（n=3）

样品批号210308************

葛根素含量

1.455 1.521 1.468

(mg/g)

2讨论：

2.1 用药典法、回流法、超声法、回流超声法4种方法提取黄连[4]，《中国药典》提供的方法与其它提取方法所得小檗碱含量结果有显著性差异（P＜

0.01）.回流超声法与其它方法比较,时间短、含量高,较适宜提取黄连中的小檗碱.

2.2 实验过程中曾尝试乙腈∶0.01mol/l磷酸二氢钠溶液(50∶50)[5]为流动相，血竭素色谱峰与杂质峰未能完全分离，调整流动相为0.033mol/l磷酸二氢钠溶液∶乙腈(60∶40)时能完全分离，且峰形好，柱效高。

2.3 通过试验，确定了人参决明子压片糖果中葛根素含量测定方法，测定结果准确可靠，方法简便，可以作为人参决明子压片糖果质量控制的依据之一。

参考文献

[1] 仲英, 王菊, 杨尚军,等. 高效液相色谱法测定不同地区葛根中葛根素含量[J]. 时珍国医国药, 2000, 11(12):3.

[2] 金文姗, 谈钰元, 陈有根,等. 高效液相色谱法测定不同产地葛根中葛根素、大豆苷及大豆苷元的含量[J]. 中国中药杂志, 2003, 28(1):49.

[3] 国家药典委员会中华人民共和国药典(一部) [M].北京:中国医药科技出版社,2020,16.

[4] 张小茜, 燕云. 应用高效液相色谱法测定愈风宁心片及葛根中葛根素的含量[J]. 中国中药杂志, 1995, 20(008):477-479.