银杏酚酸的提取
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水平 # % < 6
故选择 289 乙醇为提取溶剂为宜。 %$ < 最佳浸提条件的确定 影响银杏酚酸浸提效果的因素很多， 如溶剂用量、 提取次数、 提取温度和提取时间。 在单因子试验的基础 上， 采用正交法设计试验确定最佳浸提条件， 因素水平 见表 #。 试验方法如下： 准确称取干燥粉粹的银杏外种 皮 <$ 88F， 以 289 乙醇为浸提溶剂， 浸提溶液过滤后用 甲醇定溶到 #884@， 取 % 4@ 用甲醇稀释至 #84@， 用高效 液相检测其酚酸含量， 结果见表 %。
， 国外主要采用正己烷、 氯仿、 乙醚等极性
较低的有机溶剂浸提， 虽然溶出的杂质少， 但溶剂的渗 透性不强， 耗量大， 毒性也大， 成本较高。 本研究对其提 取条件做了较深入的探索， 选择+-8 工业乙醇为浸提溶 剂， 利用大孔吸附树脂进行富集分离银杏酚酸， 该方法 具有选择性高， 分离效果好， 溶剂损耗少， 成本相对低等 优点， 是银杏酚酸类化合物提取分离的有效方法。
表# C 溶剂： 皮量 K M A L N 6J # "J # !J # ?J # 正交试验因素水平表 I 时间 K O N % < 6 " , 次数 # % < 6 H 温度 K E N !8 ?8 28 78
将试验结果进行方差分析可知， 6 个因子对浸提 效果的影响与单因子试验结果基本相同。各因子对浸 提效果影响的大小顺序为：溶剂用量（因子 C） G 提取 （因子 ,） （因子 H） （因子 次数 G 提取温度 G 提取时间 。溶剂用量对银杏酚酸的提取达极显著水平，增加 I） 溶剂用量有利于银杏酚酸的溶出，提取次数对银杏酚
精厂； 大孔吸附树脂 均为分析纯， 双蒸水。
银杏酚酸含量的严格控制， 也促进了对银杏酚酸类物质 的研究。 从银杏外种皮中浸提银杏酚酸类化合物的方法 报道不多
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电子恒温水浴锅； 真空旋转蒸发器； 岛津 R] . !^ 高效液相色谱仪，配有 X_‘ . !^4 紫外可见检测器， ]>a . !^ 柱温箱； ^6N=F% . 0 真空冷冻干燥器。 %’ * 实验方法 %’ *’ % 银杏酚酸提取物的制备
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% %来自百度文库 %
材料和方法 主要材料和仪器 银杏外种皮 采自湖北安陆；工业乙醇 武汉酒 南开大学化工厂； 其它所用试剂
高的酚酸性化合物， 具有抗肿瘤、 抗炎、 抗过敏、 抑菌、 防 ， 可用作日化产品添加剂， 是一个值 （OP[） 得开发的活性成分， 随着国际上对银杏提取物 中 治病虫害等功效
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溶剂浓度的选择 取一定量的干燥粉碎的银杏外种皮，分别加入
"84@ 的不同浓度乙醇，在相同的温度下浸提相同时 间， 比较其提取液中银杏酚酸含量， 结果见图 %。 由图 %
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乙醇浓度对提取效果的影响
测定， 结果见图 <。
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图! 提取溶剂对提取效果的影响
酸的提取达显著水平，温度和时间对银杏酚酸的提取 影响小些。随着溶剂用量的增加， 提取次数增加， 银杏 酚酸的浸出量明显增加， 但溶剂用量过大， 不仅增加了 溶剂费用消耗， 也增加浓缩时的能耗。综合以上分析， 银杏酚酸提取的最佳条件为 C6 I< ,< H# ，即以 289 乙醇 为提取溶剂， 采用 #J ? K L A M N 的料液比， 在 !8E 条件 下回流提取 < 次，每次 6O，此条件下银杏酚酸浸出率 最高。 %$ 6 不同树脂精制银杏酚酸的效果比较 称取 #88$ 88F 银杏外种皮，加 289 ?884@ 乙醇在 每次 6O。经过滤， 真空浓缩后， 分 !8E 回流提取 < 次， （ ） （ 成 < 等份，分别上 #8# 大孔吸附树脂 、#8% 聚酰胺） （硅胶） 型树脂柱， 洗脱液经浓缩干燥后用 ;(*, 和 #8<
中图分类号： X,)*1 )0 文献标识码： P 文章编号： %--* . !!/- 2 *--/ 3 -/ . --!* . -"
（OE@LD5QE65QFR’ ） 银杏 外种皮是银杏果仁的皮层， 即种子硬壳外面部分， 我国每年有大量的银杏外种皮被 废弃， 未被开发利用， 既浪费资源又污染环境， 而且皮肤 接触它常引起漆毒样皮炎 。 银杏外种皮内含有含量较
!工艺技术
银杏酚酸总含 量9) = %> #&# $> ($! (> $"/ $> 0"% $> /"1 %> &#$ &> !0" (> &10 0> 0%! (> 0%$ (> #$/ &> (%" !> $#" 0> 1!/ &> 1/0 &> "/$
且大孔树脂成本低， 效率高， 稳定性好， 容易再 $’ #&) ， 生， 因而是较好的供选树脂。 %’ & 洗脱剂浓度对树脂精制银杏酚酸的影响 提取液经浓缩后上大孔吸附树脂进行洗脱，所 用的洗脱剂为乙醇 * 水溶液。用不同浓度乙醇和不 同方式洗脱，收集与 ") 三氯化铁溶液反应呈阳性 的洗 脱液 （紫外扫描 监控） ，浓 缩干燥 后用 +,-.
/#) 1#) 水， 0#) ， 1#) 梯度洗脱
对银杏酚酸吸附作用弱， 洗脱速度快， 大量样品损失， 测定其银杏酚酸总含量，比较其洗脱效果，结果如 其酚酸含量和得率都很低。 "#% 型聚酰胺柱层析在用 乙醇作洗脱剂时，是聚酰胺键与银杏酚酸的酚羟基与 “氢键吸附 羧基形成氢键而产生一定的选择性吸附， 即 学说” ， 洗脱液中银杏酚酸含量有所增加， 但得率仍较 低。用 "#" 型大孔吸附树脂精制银杏酚酸得到较好的 效果，洗脱液中银杏酚酸总含量达 &%’ "() ，得率为 表 $ 所示。 由表 $ 可知， 用 /#) 乙醇洗脱， 解吸率低， 洗脱不 完全， 得率低， 且洗脱时间长。用水、 0#) 乙醇和 1#) 乙醇进行梯度洗脱效果比用 1#) 乙醇洗脱好， 银杏酚 酸含量和得率都较高。 综上所述，从银杏外种皮中提取银杏酚酸的最佳
456’ *"， 75’ / !" *--/，
发酵食品， 可以以此为主要原料， 开发调制出具有特殊 风味的腊八豆系列产品。
$/& 参考文献 # $%& 杜秉海 ’ 微生物学实验 $ ( & ’ 北京： 大学出版社， %))"’ $"& $*&
!工艺技术
刘海岭 ’ 食品物理与化学分析方法 $ ( & ’ 北京： 轻工业出 版社， %)+,’ *- . *" ， /, . "- ， ,0 . %--’ 石彦国’ 大豆制品工艺学 $ ( & ’ 北京： 轻工业出版社， %))"1 天津轻工业学院，无锡轻工业学院，大连轻工业学院等 ’ 微生物学 $ ( & ’ 北京： 轻工业出版社， %))+’
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可知， 乙醇浓度对银杏酚酸浸提效果影响很大， 289 乙 醇的提取效果最好， 随着浓度增大， 提取率略有下降。 当乙醇浓度低于 !89 时，提取效果急剧下降，提取液
蛋白质、 鞣质、 糖类和多酚类等水溶 甲醇， 乙酸调 :; 值为<$ #" ； 紫外检测波长 " = <#8>4； 中杂质含量较高， 提取液粘度较大， 过滤、 浓缩较困难， 流速 8$ ?4@ A 4B>； 柱温 <8E 。 对照样品银 性物质大量溶出， C’D& = 8$ 86 ； 杏酚酸为本实验室制备， 纯度为789 以上， 计算银杏酚 酸总含量。 % %$ # 结果与讨论 浸提溶剂的选择 取一定量的干燥粉碎的银杏外种皮，分别加入 甲醇、 乙醇、 丙酮、 氯仿和正己烷， 在相同的 "84@ 的水、 温度下浸提相同时间，比较其提取液中银杏酚酸的含 量， 结果见图 #。 由图 # 可知， 甲醇、 乙醇和丙酮的浸提 效果相差不大， 氯仿和正己烷由于其极性弱， 渗透性不 强， 浸提效果差一些， 但从液相色谱分析可看出用氯仿 和正己烷提取的银杏酚酸相对含量高， 提取的杂质少， 丙酮提取的银杏酚酸相对含量最低。考虑毒性和成 本， 选择乙醇作为提取溶剂。
图! 不同类型的树脂精制银杏酚酸的效果比较 表$ 洗脱剂浓度对提取物中银杏酚酸总含量的影响 提取物中银杏酚酸含量 9 ) = 得率 9 ) = (%> "0 (&> $% &%> "( "> 1# %> !" $> #& 乙醇浓度
不同类型的树脂对银杏酚酸的精制效果有较大的 差异。 这是因为树脂的理化性质和吸附性能的不同， 吸 附作用的本质是吸附剂与吸附质分子之间的范德华 力。用 "#$ 硅胶型树脂精制银杏酚酸， 选择性吸附差，
从银杏外种皮中提取银杏酚酸的工艺条件研究
倪学文， 吴谋成 2 华中农业大学食品科技系， 武汉
摘
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要： 研究从银杏外种皮中提取分离银杏酚酸的工艺条件， 探讨了影响银杏酚酸浸出率的主要因素以及合适的精制
（: ; 4 ） 方法。结果表明， 以 +-8 乙醇为提取溶剂， 采用 %9 , 的料液比， 在 !-< 条件下回流提取 / 次， 每次 "=， 经过滤， 真 空浓缩后， 采用大孔吸附树脂精制， 冷冻干燥后得到的提取物中银杏酚酸总含量为 0*’ %"8 ， 得率为 /’ -08 。 关键词： 银杏外种皮； 银杏酚酸； 提取分离
收稿日期： *--* . -! . -%
作者简介： 倪学文 2 %),, . 3 ， 女， 博士研究生， 研究方向： 天然产物化学。
!工艺技术
#$ %$ % 银杏酚酸含量的测定 高效液相色谱分析条件为： 色 谱 柱 &’()*+ /0 流 动 相 789 ,-&.* *, 1 #2 ， #"34 5 6$ !44， " ! 4；
银杏外种皮 & 清洗去杂 & 烘干粉粹 & 溶剂浸提 & 过滤 & 滤 （不同浓度乙醇梯度洗脱 ） 液浓缩 & 树脂精 & 制 & 冷冻干燥 & 银杏酚酸提取物 银杏酚酸提取 银杏酚酸提取物重量 2 D 3 Y Z %-（8 ） 银杏外种皮重 2 D 3 Z 2 % . 银杏外种皮含水量 3 物的得率
故选择 289 乙醇为提取溶剂为宜。 %$ < 最佳浸提条件的确定 影响银杏酚酸浸提效果的因素很多， 如溶剂用量、 提取次数、 提取温度和提取时间。 在单因子试验的基础 上， 采用正交法设计试验确定最佳浸提条件， 因素水平 见表 #。 试验方法如下： 准确称取干燥粉粹的银杏外种 皮 <$ 88F， 以 289 乙醇为浸提溶剂， 浸提溶液过滤后用 甲醇定溶到 #884@， 取 % 4@ 用甲醇稀释至 #84@， 用高效 液相检测其酚酸含量， 结果见表 %。
， 国外主要采用正己烷、 氯仿、 乙醚等极性
较低的有机溶剂浸提， 虽然溶出的杂质少， 但溶剂的渗 透性不强， 耗量大， 毒性也大， 成本较高。 本研究对其提 取条件做了较深入的探索， 选择+-8 工业乙醇为浸提溶 剂， 利用大孔吸附树脂进行富集分离银杏酚酸， 该方法 具有选择性高， 分离效果好， 溶剂损耗少， 成本相对低等 优点， 是银杏酚酸类化合物提取分离的有效方法。
表# C 溶剂： 皮量 K M A L N 6J # "J # !J # ?J # 正交试验因素水平表 I 时间 K O N % < 6 " , 次数 # % < 6 H 温度 K E N !8 ?8 28 78
将试验结果进行方差分析可知， 6 个因子对浸提 效果的影响与单因子试验结果基本相同。各因子对浸 提效果影响的大小顺序为：溶剂用量（因子 C） G 提取 （因子 ,） （因子 H） （因子 次数 G 提取温度 G 提取时间 。溶剂用量对银杏酚酸的提取达极显著水平，增加 I） 溶剂用量有利于银杏酚酸的溶出，提取次数对银杏酚
精厂； 大孔吸附树脂 均为分析纯， 双蒸水。
银杏酚酸含量的严格控制， 也促进了对银杏酚酸类物质 的研究。 从银杏外种皮中浸提银杏酚酸类化合物的方法 报道不多
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材料和方法 主要材料和仪器 银杏外种皮 采自湖北安陆；工业乙醇 武汉酒 南开大学化工厂； 其它所用试剂
高的酚酸性化合物， 具有抗肿瘤、 抗炎、 抗过敏、 抑菌、 防 ， 可用作日化产品添加剂， 是一个值 （OP[） 得开发的活性成分， 随着国际上对银杏提取物 中 治病虫害等功效
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溶剂浓度的选择 取一定量的干燥粉碎的银杏外种皮，分别加入
"84@ 的不同浓度乙醇，在相同的温度下浸提相同时 间， 比较其提取液中银杏酚酸含量， 结果见图 %。 由图 %
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乙醇浓度对提取效果的影响
测定， 结果见图 <。
234’ %(， 53’ $ !! %##$，
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图! 提取溶剂对提取效果的影响
酸的提取达显著水平，温度和时间对银杏酚酸的提取 影响小些。随着溶剂用量的增加， 提取次数增加， 银杏 酚酸的浸出量明显增加， 但溶剂用量过大， 不仅增加了 溶剂费用消耗， 也增加浓缩时的能耗。综合以上分析， 银杏酚酸提取的最佳条件为 C6 I< ,< H# ，即以 289 乙醇 为提取溶剂， 采用 #J ? K L A M N 的料液比， 在 !8E 条件 下回流提取 < 次，每次 6O，此条件下银杏酚酸浸出率 最高。 %$ 6 不同树脂精制银杏酚酸的效果比较 称取 #88$ 88F 银杏外种皮，加 289 ?884@ 乙醇在 每次 6O。经过滤， 真空浓缩后， 分 !8E 回流提取 < 次， （ ） （ 成 < 等份，分别上 #8# 大孔吸附树脂 、#8% 聚酰胺） （硅胶） 型树脂柱， 洗脱液经浓缩干燥后用 ;(*, 和 #8<
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!工艺技术
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/#) 1#) 水， 0#) ， 1#) 梯度洗脱
对银杏酚酸吸附作用弱， 洗脱速度快， 大量样品损失， 测定其银杏酚酸总含量，比较其洗脱效果，结果如 其酚酸含量和得率都很低。 "#% 型聚酰胺柱层析在用 乙醇作洗脱剂时，是聚酰胺键与银杏酚酸的酚羟基与 “氢键吸附 羧基形成氢键而产生一定的选择性吸附， 即 学说” ， 洗脱液中银杏酚酸含量有所增加， 但得率仍较 低。用 "#" 型大孔吸附树脂精制银杏酚酸得到较好的 效果，洗脱液中银杏酚酸总含量达 &%’ "() ，得率为 表 $ 所示。 由表 $ 可知， 用 /#) 乙醇洗脱， 解吸率低， 洗脱不 完全， 得率低， 且洗脱时间长。用水、 0#) 乙醇和 1#) 乙醇进行梯度洗脱效果比用 1#) 乙醇洗脱好， 银杏酚 酸含量和得率都较高。 综上所述，从银杏外种皮中提取银杏酚酸的最佳
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可知， 乙醇浓度对银杏酚酸浸提效果影响很大， 289 乙 醇的提取效果最好， 随着浓度增大， 提取率略有下降。 当乙醇浓度低于 !89 时，提取效果急剧下降，提取液
蛋白质、 鞣质、 糖类和多酚类等水溶 甲醇， 乙酸调 :; 值为<$ #" ； 紫外检测波长 " = <#8>4； 中杂质含量较高， 提取液粘度较大， 过滤、 浓缩较困难， 流速 8$ ?4@ A 4B>； 柱温 <8E 。 对照样品银 性物质大量溶出， C’D& = 8$ 86 ； 杏酚酸为本实验室制备， 纯度为789 以上， 计算银杏酚 酸总含量。 % %$ # 结果与讨论 浸提溶剂的选择 取一定量的干燥粉碎的银杏外种皮，分别加入 甲醇、 乙醇、 丙酮、 氯仿和正己烷， 在相同的 "84@ 的水、 温度下浸提相同时间，比较其提取液中银杏酚酸的含 量， 结果见图 #。 由图 # 可知， 甲醇、 乙醇和丙酮的浸提 效果相差不大， 氯仿和正己烷由于其极性弱， 渗透性不 强， 浸提效果差一些， 但从液相色谱分析可看出用氯仿 和正己烷提取的银杏酚酸相对含量高， 提取的杂质少， 丙酮提取的银杏酚酸相对含量最低。考虑毒性和成 本， 选择乙醇作为提取溶剂。
图! 不同类型的树脂精制银杏酚酸的效果比较 表$ 洗脱剂浓度对提取物中银杏酚酸总含量的影响 提取物中银杏酚酸含量 9 ) = 得率 9 ) = (%> "0 (&> $% &%> "( "> 1# %> !" $> #& 乙醇浓度
不同类型的树脂对银杏酚酸的精制效果有较大的 差异。 这是因为树脂的理化性质和吸附性能的不同， 吸 附作用的本质是吸附剂与吸附质分子之间的范德华 力。用 "#$ 硅胶型树脂精制银杏酚酸， 选择性吸附差，
从银杏外种皮中提取银杏酚酸的工艺条件研究
倪学文， 吴谋成 2 华中农业大学食品科技系， 武汉
摘
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要： 研究从银杏外种皮中提取分离银杏酚酸的工艺条件， 探讨了影响银杏酚酸浸出率的主要因素以及合适的精制
（: ; 4 ） 方法。结果表明， 以 +-8 乙醇为提取溶剂， 采用 %9 , 的料液比， 在 !-< 条件下回流提取 / 次， 每次 "=， 经过滤， 真 空浓缩后， 采用大孔吸附树脂精制， 冷冻干燥后得到的提取物中银杏酚酸总含量为 0*’ %"8 ， 得率为 /’ -08 。 关键词： 银杏外种皮； 银杏酚酸； 提取分离
收稿日期： *--* . -! . -%
作者简介： 倪学文 2 %),, . 3 ， 女， 博士研究生， 研究方向： 天然产物化学。
!工艺技术
#$ %$ % 银杏酚酸含量的测定 高效液相色谱分析条件为： 色 谱 柱 &’()*+ /0 流 动 相 789 ,-&.* *, 1 #2 ， #"34 5 6$ !44， " ! 4；
银杏外种皮 & 清洗去杂 & 烘干粉粹 & 溶剂浸提 & 过滤 & 滤 （不同浓度乙醇梯度洗脱 ） 液浓缩 & 树脂精 & 制 & 冷冻干燥 & 银杏酚酸提取物 银杏酚酸提取 银杏酚酸提取物重量 2 D 3 Y Z %-（8 ） 银杏外种皮重 2 D 3 Z 2 % . 银杏外种皮含水量 3 物的得率