纤维素提取方法

Dry befroe analysis with mass spectrometry
源自文库
Samples for mass spectrometry:
O18 silver capsule; C13 Titanium capsule
废液处理 The waste
• NaClO2 7%
注意溶液有气体产生, 废液应敞口至 于通风橱一段时间,然后再拧紧 Gas will emit from the wasted solution of NaClO2 7%, , keep the lipid open for 3~5 days
样品大小： 厚度 thickness 0.5-0.8 mm; sample size > 500μm 样品量 sample amount： ＞2 mg Samples needed for mass spectrometry: one measurement of: C13 0.5mg；O18 0.3 mg； (production~ 30%)
主要步骤 Main procedures
• • • • • Cross dating and Sample cutting; Extraction Homogenization Freeze drying Weighing and measured with mass spectrometry.
样品的切取和称量 Cutting and weighing
纤维素转移 镊子 去离子水等
冰箱4 ℃冷藏
纤维素的同质化 homogenization
样品冷藏 store in refrigerator (+4℃） 方法：超声波；ultrasonic 设置：cycle 0.5， amplitude 6-7； 继续时间 duration 30s （13C 2*15s 18O 30s 因不同物种而有所差异）； • 判断 呈牛奶状(milky)，或者纤维素均一(or homogenized 盖上带孔的盖子，至于冰箱中冷冻 (为低温真 空干燥作准备) stored in refrigerator -10℃ • • • •
• 判断是否提取完全( completely extracted?)
草酸溶液:每100ml NaClO2 加草 酸溶液 0.5~1ml草酸
acetic acid solutions: 0.5ml~1ml/ 100ml NaClO2 7%
纤维素转移 cellulose transfer
Eppi管清洗(高压气体、去离子水）、加入 1ml去离子水；
纤维素称量 weigh of cellulose
• 使用半微量天平（与称量木材使用同一天平）
精度 0.01mg
同位素测定 premeasurement
• 需要量 the amount of cellulose needed: 18O 300μg，13C 500μg 银（18O, Silver capsule ）或者钛（13C, Titanium capsule ）胶囊裹住； • 再次干燥：高温、真空将所有的水除去 remove all the water in samples; • 测定： 质谱仪 spectrometry
纤维素提取方法简介
How could we extract cellulose from tree ring- step by step
Peili FU (付培立)
March 14th 2014
references
• Wieloch T, Helle G, Heinrich I, et al. A novel device for batch-wise isolation of α-cellulose from small-amount wholewood samples[J]. Dendrochronologia, 2011, 29(2): 115-117.
• NaOH 17%
容器的清洗 clean of filters
500 ℃ Oven Clean machine
Chrismas party
（近沸腾热的去离子水，洗3次, washed 3 times with de-ioned boiled water ）
• NaOH 17% solution 溶液, 室温(room temperature), 2h, 2 times次
（1% HCl 溶液洗1次，近沸腾热的去离子水，洗3次 测pH, washed with 1% HCl, then washed 3 times with de-ioned boiled water ）
• Laumer W, Andreu L, Helle G, et al. A novel approach for the homogenization of cellulose to use micro‐amounts for stable isotope analyses[J]. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2009, 23(13): 1934-1940.
提取 extraction
• NaOH 5% solution 溶液, 60℃, 2h, 2 times次;
（近沸腾热的去离子水，洗3次, washed 3 times with boiled de-ioned water）
• NaClO2 7% solution 溶液, 60 ℃, 8h, 6 times（醋酸溶液 acetic acid, 调节pH至 4-5）;
真空低温干燥 (freeze dry)
• 关闭排气阀、排水阀， 检查油泵中油量多少。打开机器 和油泵预热30分钟（warm up）； • 将样品放入，一般一次可放入3个eppi板（288个样品左 右），主干燥程序，48h； 真空度 atm 降至 1.030mbar (main drying process) • 调节程序至干燥后程序，24h；(after dry process) 真空 1.030mbar 降至 0.003~0.005mbar • 调节至待机程序 小心打开排气阀，使压力升至1atm 然后 取出样品，打开排水阀，关闭机器和泵