2-药动学实验讲义(氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究)

氨茶碱的血药浓度测定及药动学研究【实验目的】

掌握血清中氨茶碱血药浓度的紫外测定法，掌握血清中茶碱提取法，验证氨茶碱的动力学模型，掌握二房室动力学模型的参数计算方法。用有机溶剂将血清中的氨茶碱提出，用紫外测定法根据标准曲线测出氨茶碱浓度，用残差法运用计算机进行数据处理、曲线描绘及参数计算，从而验证氨茶碱动力学模型，使大家对药动学研究有一初步的了解。

【实验原理】

1.氨茶碱为临床常用平喘药，由茶碱与乙二胺缩合而成。在酸性条件下,可用

有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。测量λ274和λ298处的吸光度（A274为茶碱和本底，即溶剂、血清的吸光度，A298为本底的吸光度），ΔA= A274-A298。

2. 氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进行组织分布，达到平衡后转入消除相。时量曲线呈二房室动力学模型。

3. 房室模型是抽象的数学模型，它的划分与解剖学部位或生理学功能无关。药物转运速率相同或相近的部位可划分为同一房室。房室模型可以分为一室模型、

二室模型、多室模型。大多数药物在体内的转运和分布符合二室模型。即药物静脉注射入血后，首先快速进入血流量大的组织，如心、肝、肾、肺、脑等，然后缓慢地向血流量小的组织，如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。

【实验材料】

1、动物

家兔1只，雌雄不限，体重（2.5+0.5）kg

2、药品

氨茶碱标准液

3、试剂

0.1mol/L HCl

0.1mol/L NaOH

异丙醇：氯仿抽提液（5:95）。

4、仪器

754型紫外分光光度计

液体涡旋混和器

数学坐标纸一张

半对数坐标纸一张。

【实验方法】

1 动物实验部分

1.1取健康家兔1只，称重，将家兔置于兔台。

1.2 在家兔一耳缘注射部位去毛、热敷和消毒，待血管扩张后，以左手拇指与食

指压住静脉耳根端，使静脉充盈，给药前用12号针头自耳静脉取血1-1.5ml，7号针头平行刺入静脉，抽动针管，见有回血即可推注。对其静脉注射氨茶碱15mg/kg。

1.3另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、

180、300、420min取血。

1.4分离血清，各管均取血清0.5ml于15ml试管中，加0.1mol/L盐酸0.2ml、

抽提液5ml，振摇混合，2500r/min离心10min。

2 血药浓度测定（紫外分光光度法）

2.1 吸取下层氯仿液4ml置另一试管中，加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，振摇

混匀，2500r/min离心10min。

2.2吸取上层碱液，以0.1mol/L NaOH溶液4ml作参比，振摇混匀，2500r/min

离心10min。

测定其在λ274和λ298处的吸收度（A274和A298），计算△A。

3 制作茶碱标准曲线：取5支试管，依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100µl，

各加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，终浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5µg/ml，测定各管的A274和A298，计算△A。以茶碱浓度为横坐标，△A为纵坐标描点绘图，用Excel软件求直线回归方程，即为茶碱标准曲线的直线方程（图示）。

4. 将测得血清样品的△A代入标准曲线的方程，求得相应的C，C×10即为茶碱

的血药浓度。以时间为横坐标，浓度对数为纵坐标，用CAPP软件描点做图，判断氨茶碱在体内代谢的房室模型。

【注意事项】

1.紫外分光光度计使用前需预热30min并激发氢灯。

2.振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。

3.样品离心前需配平。

4.测量时若更换波长，必须重新调节0和100％。

【讨论】

1.氨茶碱的时量曲线呈几房室模型？为什么？

2.为何要测两个波长下茶碱的吸光度并取其差值？

3.试述药动学参数V1、Vd、t1/2α、t1/2β、K10、K12、K21、Cl、AUC的含义