鸿彤玉米芯载体项目介绍

鸿彤玉米芯载体项目介绍
鸿彤玉米芯载体项目介绍

十万吨玉米芯载体项目介绍

内蒙古通辽市鸿彤玉米芯载体有限公司

二零一二年十月

目录

鸿彤公司简介

项目背景及环境介绍

项目建设规模以及内容

投资方案及产品方案

市场分析

整体效益分析及资金保障问题项目进程及初步规划

SWOT分析

营业执照

税务登记证

组织机构代码证书

鸟瞰图

土地位置图

鸿彤公司简介

通辽市鸿彤玉米芯有限公司坐落于内蒙古通辽市高林屯种畜场内,位于内蒙古通辽市中东部科尔沁区境内,地处东经121°40′~121°50′,北纬43°40′~43°56′之间。东、北部与科左中旗接壤;西、南部与科尔沁区相连。

我公司是玉米芯为原料集生产加工兽药载体、饲料添加剂年产10万吨玉米芯载体的产业链综合性建设项目,是以玉米芯深加工为核心的农业产业化的企业,建设成一个现代化、产业化的产业园。项目使用土地14.19万平方米,总建筑面积20000平方米;项目总投资1.128亿元,员工300人,每年可实现利税1.2亿元人民币。

公司从2008年开始,经过长达四年多的实地和市场考察对玉米芯载体技术,并结合国、内外市场信息的分析研究,特别是对项目的立项进行审批、专家论证、可研报告、环评报告等全面评估与综合分析,得出结论:本项目是可充分利用当地资源,推动农村经济再增长,促进农民再增收,是利国利民具有科技含量高的可行性开发项目,本项目是国家及地方政府提倡、扶持的朝阳产业项目,符合《产业结构调整指导目录》(2011年本)鼓励类“农林业”20条农作物秸秆还田与综合利用(非粮饲料资源开发利用)。同时享受国家的各项优惠政策,是利国利民、推动农业高效发展的高科技项目。目前我国玉米芯载体产量远远满足不了国内市场的需求,特别是从国内优质的供需玉米芯载体的情况看,优质玉米芯载体价格始终是居高不下,供不应求。为满足国内、国际市场对优质玉米芯载体的需求,所以公司决定对玉米芯载体产业化项目进行一系列的投资建设。

目前我们已经成立了以市农业研究骨干为技术专家与各科研机关、大专院校专业的研究生、教授为一体的研发团队;确保技术团队的精良,为产品的专业化、

技术化、科技化、高端化保驾护航。实行“产、学、研”为一体化的经营创新理念。确保项目在技术上的先进性,设计上的科学性、生产建设的可行性,经济效益的合理性。并遵循科学发展观,在高科技产品的深加工上进行深入的研发。

公司项目建成后将加快当地农业结构战略性调整和产业化进程,对促进通辽地区玉米种植的发展,起到了带动和辐射周边百里地区内农业的发展,对废弃的玉米芯合理化开发应用,对拉动当地消费,促进地方经济发展能起到十分显著的作用。对农村经济发展有着重要意义。每年向周边农民收购玉米芯10万吨,将大大的增加农民收入水平,有利于带动上下游相关产业的协调发展。

本项目三年全部建成投产后,将是世界最大的生产玉米芯深加工及副产品加工的大型现代化龙头企业。我们豪情满怀,任重道远,让我们用心血和汗水浇灌新生的“通辽市鸿彤玉米芯有限公司”,共同创造和享用美好的明天,愿我们握住彼此真诚的手——“携手万里,共创辉煌”!

项目背景及环境介绍

公司产业化建设项目选址于内蒙古通辽市高林屯种畜场位于内蒙古自治区通辽市中东部,地处东经121°40′~121°50′,北纬43°40′~43°12′之间。东北部与科左中旗接壤;南部与科尔沁区相连。

公司选址原因如下:

这里有得天独厚的适应玉米生长的地理环境优势。这里居住着传统的农牧民,这里种植了大面积玉米并积累了丰富的种植经验。

这里是内蒙古主要产粮区,完全具备生产大量优质玉米的条件,享受国家粮食种植补贴。

这里不仅享有国家对西部大开发的优惠政策及振兴老东北工业基地政策还特别享受国家对少数民族地区更优惠的特殊政策等。

当地政府的大力支持并给予诸多优惠政策,科尔沁区人民政府及高林屯种畜场以文件形式明确自项目开工之日起5年内,免征该项目土地税及水资源费,另免征营业税、所得税。

内蒙古通辽市高林屯种畜场交通条件较好,交通运输十分便利。以国、省道主干线临近,以乡、场道为补充的交通网络体系已形成,为经济的繁荣,社会的进步发挥着巨大的作用。通辽市高林屯种畜场座落在通辽市科尔沁区境内,距市区50公里,通让铁路横穿境内。全场总人口5399人,总户数1815户,总面积24.5万亩。全场板油路31公里,砂石路9公里,农田砂石路16公里,共计56公里。

项目建设规模以及内容

公司计划本项目使用土地五百亩,其中先期用100百亩土地作为厂区建设,其余100亩作为原料场用地,准备建设一个现代化、产业化的链条深加工产业园,其余三百亩作为预留土地,主要用于建设玉米芯深加工产业园。

项目总投资人民币为1.128亿元,其中固定资产投入为:5280万元,流动资金为:60000万元。全部工程分为三期,员工300人,其中管理人员60人;全部工程分为三期,全部建成投产后,每年税金为1000万元人民币,可实现年利润为1.2亿元人民币。为了资金的有效利用,我们计划先以一期工程为重点开始投入,本项目三年全部投产后将是世界最大的生产玉米芯载体及副产品加工的龙头企业。

投资方案及产品方案

投资方案

融资额度:5000万元。资金主要用于一期工程具体投资:建玉米芯深加工生产车间两栋、生产线设备、成品库两栋和原料库四栋、办公楼(化验室、检验室、职工宿舍、食堂)配电室、管网工程、厂区主干道路硬化等;一期建设投资2700万元人民币,流动资金2300万元,共计5000万元,期限三年。 二期工程具体投资项目:投资1080万元,兽药生产车间一栋、生产线配套设备;

三期工程具体投资项目:投资1500万元,饲料添加剂生产车间一栋、生产线配套设备、厂区支干道路硬化、厂区绿化等;

项目固定资产总投资额:5280万元人民币。

产品方案

公司项目建成后,生产能力将达到:

一期:年生产加工五万吨玉米芯,兽医载体、饲料添加剂(20—120目五种产品)实现利润3000万元;

二期:年生产两万吨兽药载体用于生产马杜霉素、胆碱类、维生素等,实现利润4000万元;

三期:年产三万吨预混剂和饲料添加剂、各种霉制剂、防霉剂、香味剂、安普酶素氯化胆碱、蛋氨酸、赖氨酸、赖氨酸蛋白粉、甜菜碱、磷脂、植酸酶等,实现利润5000万元。

市场分析

玉米芯颗粒粉是选用优质玉米芯加工而成,为米色或黄褐色,是以往各种粕类颗粒粉的换代产品,含水份5.0、粗蛋白5.7、粗纤维3.7、比重为0.3-0.35、吸附力50-70,是制作兽药的载体,是豆饼粉、淀粉及其它载体的替代品。主要用于生产马杜霉素、胆碱类、维生素、预混剂和饲料添加剂等十几个兽药及饲料添加剂品种。它具有比其它载体成本低、保质期长、流动性好、吸水性强、适口性好等特点。以玉米芯颗粒粉为载体生产的兽药保质期达三年以上且稳定,各项指标及微生物指标均符合国内和国际标准。

玉米芯原料无任何农药残留,是生产各种兽药、预混剂和饲料添加剂最理想的载体原料,玉米芯载体完全符合国际兽药和饲料添加剂标准,它不但是以往各种粕类粉载体的换代产品,同时以物美价廉的优势畅销国内外。

可作为饲料预混料,蛋氨酸、赖氨酸、赖氨酸蛋白粉、甜菜碱、各种霉制剂、防霉剂、维生素、磷脂、植酸酶、香味剂及马杜酶素、安普酶素氯化胆碱等,兽药添加剂产品,营养性载体,可代替次粉,也是生物制品水洗霉发酵的主要原料之一。

可用它从废水中提取重金属,可用它防止热的薄钢片粘在一起。

可用于纸板、水泥板、水泥砖制作,可用它做胶水或浆糊的填充剂。

可用做包装材料、火药的制造。

可用做橡胶助剂,制造轮胎时加入它,可增加轮胎与地面间的磨擦力,达到增大牵引力的效果,延长轮胎使用寿命。

可用于干洗业,用它处理过的皮毛既干净又美观。

目前,全国有10多万家饲料生产企业和1万家以上兽药生产企业,如此庞大的用户群,为项目产品提供了巨大的市场空间。

整体效益分析及资金保障问题

三期项目建成后,我公司可建成资产总额两亿元人民币的世界最大的玉米芯载体深加工的大型现代化企业。

项目地开发建设形成规模,土地可实现价值3000万元人民币;

地上建筑物评估为:4000万元人民币;

设备评估为:1000万元人民币;

其他设施等评估为:500万元人民币;总计评估价为8500万元人民币。

公司据此可向银行申请分期贷款4200万元人民币,公司近期项目评估报告显示其利润高达60%,因此,第一年底即可实现利润3000万元人民币。

公司经过一年的生产和发展,在市、区政府和种畜场的各项政策全力扶持下,即可申报国家和地方支持的产业项目的企业,可得到政府扶持资金500万元人民币,政府补贴500万元人民币。这样我公司在两年内可以通过企业的自身发展、利润和政府、银行的协调可取得8200万元资金,为到期还款的资金提供了有力保障。通过以上的各项措施,能够充分完成资本运作,为企业的更进一步发展打下坚实的基础。

一期达产后我公司将在第二年开展二、三期工程,即以玉米芯载体为原料,开发精饲料和兽药制品等产品;利用生产的玉米芯载体进行深加工生产系列产品,这是该项目产业链的下游产品,而这些产品的深度开发将给企业带来丰厚的利益回报,三年达产后企业可实现年利润收益1.2亿元人民币。

项目进程及初步规划

公司现已完成可研报告、环评报告的重新制作及土地平整工作,正在紧锣密鼓地进行一期工程的筹建工作,同时进行各项目施工图设计、选择施工队伍,力争在2012年6月开工,拟投入资金2000万元。预计该项目一期建设期在年内完成,采取边生产边建设的方式,2012年12月实现正式投产。公司现已投入本项目前期运作铺垫费用100万元。主要用于国内市场考察调研、专家论证,项目立项审批、可研与环评报告制作、审核批复、办理营业执照等各项费用。

公司通过与各级政府领导及相关部门协调、铺垫,目前已取得项目用地200亩。每亩按15万元计算,共为3000万元人民币,土地使用证正在办理中。

我公司全体股东计划在3—5年内在国际或国内上市。完成资本运作,为企业的更进一步发展打下坚实的基础。经董事会研究决定出让一部分股份,吸收有识之士加入到我们的行列。考虑项目刚起步尚未形成规模,对前期加入项目的投资者予以优厚条件加盟。将本公司已行形成的土地资本,每亩按15万元计算,计3000万元,技术已经是成熟的占1000万元、成熟的销售渠道占2000万元。公司现已形成资产6100万元,每1元为1股,共6100万股,根据早投入早优惠的原则,接纳吸收资金入股,总体不超过公司资产的35%-40%,拟分三期吸收投资者入股:一期:(开工建设前到投产前)按原始股计算,每2元为1股,准备接纳2256万股,最多不超过总体资本的30%.;

二期:(投产后到盈利前)每5元为1股,准备接纳1120万股,最多不超过总体资本的10%.;

三期:(项目全部建成投产盈利)每8元为1股,准备接纳560万股,最多不超过总体资本的5%.;

后期资金保障问题。

为解决投资者投入资金的风险保障,后续资金一律由公司负责筹集,确保投资者零风险。具体有三个渠道做资金保障。

①、由某集团公司提供资金保障,以项目股权做抵押向公司提供项目所需全

部资金的投入。

②、北京某集团是上市公司每年在全国房地产投入上千个亿资金,经协商意

向帮助投入1个亿用于本项目,并帮助上市。

③、以我们的土地和形成的地上建筑物及设备抵押贷款4200万元;申办国家

龙头企业后,政府给予资金扶持500万元,政府补贴500万元。

公司为了在最短时间内建成投产并做大做强,使项目一起步即盈利,为上市打下坚实的基础,从设备到基本建设都按上市标准执行,以达到国际水平。

本项目不仅是国家及政府提倡扶持的朝阳产业项目,享受国家的各项优惠政策。而且是一个利国利民、推动农业高效发展的高科技项目,项目三年建成后将是世界最大的玉米芯深加工大型现代化企业。望有识之士前来投资合作,我们将竭诚欢迎加盟并期盼合作成功!您的一个正确选择,将成就您一生辉煌灿烂的梦想!

SWOT分析

S优势:

社会发展产生的快速增长的市场需求

地理环境优势

政策环境及企业自身的积累所带来的优势

关系积累所带来的优势

产业链优势

核心竞争力优势

管理及技术团队的优势

W劣势:

企业的成熟程度有待提高

还需充足的资本以获得更好的效益

因建立完整产业链所需的时间成本

客户群有待扩大

O机遇:

获得了稀缺的行业资源所带来的机遇

需求增长远远大于供给增长所带来的机遇

企业的充分准备于市场环境的契合所带来的机遇 综合国力增强所带来的行业机遇

T风险:

不可抗拒因素所带来的风险(政策及保险的保障)

经营过程中的常规风险

分析结果:

S优势(远大于)W劣势

O机遇优势(远大于)T风险

本项目符合《产业结构调整指导目录》(2011年本)鼓励类“农林业”20条农作物秸秆还田与综合利用(非粮饲料资源开发利用)。产品市场前景广阔,经济效益和社会效益显著,符合国家(本企业制定)质量标准,所以建设本项目是切实可行的。

内蒙古通辽市鸿彤玉米芯有限公司

二零一二年十月十日

如何阅读分析质粒图谱

如何阅读分析质粒图谱 日期:2012-04-18来源:未知作者:xilu点击:次 如何阅读分析质粒图谱 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素 1. 复制起始位点Ori即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 2. 抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 3. 多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段 4. P/E 启动子/增强子 5. Terms 终止信号 6. 加poly(A)信号可以起到稳定mRNA作用 如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 所谓穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间,也可以推广到真核生物表达载体的构建,如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒。这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增,也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中扩增和表达。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 1. Ampr水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 2. tetr可以阻止四环素进入细胞。 3. camr生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。

4. neor(kanr) 氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活 5. hygr使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号

质粒载体的发展

质粒载体的发展 质粒载体即,在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。 目录

的易感或抗性、产生限制酶、产生稀有的氨基酸和毒素、决定毒力、降解复杂有机分子,以及形成共生关系的能力和在生物界内转移DNA的能力。 编辑本段质粒的基本特征 质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下: 是染色质外的双链共价闭合环形DNA (covalently closed circuar DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,<15kb的小质粒比较容易分离纯化,>15kb 的大质粒则不易提取。 能自主复制,是能独立复制的复制子 (autonomous replicon)。一般质粒DNA复制的质粒可随宿主细胞分裂而传给后代。按质粒复制的调控及其拷贝数可分两类:严紧控制(stringent control)型质粒的复制常与宿主的繁殖偶联,拷贝数较少,每个细胞中只有1个到十几个拷贝;另一类是松弛控制(relaxed control)型质粒,其复制宿主不偶联,每个细胞中有几十到几百个拷贝。每个质粒DNA上都有复制的起点,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制,不同质粒复制控制状况主要与复制起点的序列结构相关。有的质粒的可以整合到宿主细胞染色质DNA中,随宿主DNA复制,称为附加体,例如细菌的性质粒就是一种附加体,它可以质粒形式存在,也能整合入细菌的DNA,又能从细菌染色质DNA上切下来。F因子携带基因编码的蛋白质能使两个细菌间形成纤毛状细管连接的接合(conjugation),通过这细管遗传物质可在两个细菌间传递。 质粒对宿主生存并不是必需的 这点不同于线粒体,线粒体DNA也是环状双链分子,也有独立复制的调控,但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分,质粒也往往有其表型,其表现不是宿主生存所必需的,但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存,例如,细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因,如编码合成能分解破坏四环素、氯霉素、氨芐表霉素等的酶基因,这种质粒称为抗药性质粒,又称R质粒,带有R质粒的细菌就能在相应的抗生素存在生存繁殖。所以质粒对宿主不是寄生的,而是共生的。医学上遇到许多细菌的抗药性,常与R质粒在细菌间的传播有关,F质粒就能促使这种传递。 现在分子生物学使用的质粒载体都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒,而是经过了许多的人工的改造。从不同的实验目的出发,人们设计了各种不同的类型的质粒载体,近年来发展很快,新的有特定用途的质

如何阅读质粒图谱(更新版本)

如何阅读质粒图谱 最近由于实验需要,需要查阅载体图谱,到园子里搜罗一番,发现虽然有人问载体图谱阅读的问题,也有前辈回答,但都不详细,借自己也在琢磨这个问题的机会,将我学到的东西整理一下,于 大家分享。 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素 #复制起始位点Oril 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 #抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+l ,Kan+ #多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段l #P/E 启动子/增强子l #Termsl 终止信号 #加poly(A)信号l 可以起到稳定mRNA作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 (1)Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr 可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使G418(卡那霉素衍生物)失活 (5)hygr 使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 #启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 #增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子-负增强子,负调控序列。 #核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。l #转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。

真核细胞常见表达载体

真核细胞常见表达载体 真核细胞, 表达载体 1、pCMVp-NEO-BAN载体 特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是,由于该真核细胞表达载体中抗neo 基因存在,转染细胞后,用G418筛选,可建立稳定的、高表达目的基因的细胞株。 插入外源基因的克隆位点包括Sal1、BamH1和EcoR1位点。注意在此载体中有二个EcoR1位点存在。 2、pEGFP, 增强型绦色荧光蛋白表达载体(Enhanced Fluorecent Protein Vector) 特点: pEGFP表达载体中含有绿色荧光蛋白,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40 T抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期启动子、Tn5的neomycin/kanamycin抗性基因以及HSV-TK基因的聚腺嘌呤信号组成,能应用G418筛选稳定转染的真核细胞株。此外,载体中的pUC origin 能保证该载体在大肠杆菌中的复制,而位于此表达盒上游的细菌启动子能驱动kanamycin抗性基因在大肠杆菌中的表达。 用途: 该表达载体EGFP上游有Nde1、Eco47111和Age1克隆位点,将外源基因扦入这些位点,将合成外源基因和EGFP的融合基因。借此可确定外源基因在细胞内的表达和/或组织中的定位。 亦可用于检测克隆的启动子活性(取代CMV启动子,Acet1-Nhe1)。 3、pEGFT-Actin, 增强型绿色荧光蛋白/人肌动蛋白表达载体 特点:pEGFP-Actin表达载体中含有绿色荧光蛋白和人胞浆β-肌动蛋白基因,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40 T 抗原的真核细胞内进行复制。Neo抗性盒由SV40早期启动子、Tn5的neomycin/kanamycin 抗性基因以及HSV-TK基因的聚腺嘌呤信号组成,能应用G418筛选稳定转染的真核细胞株。此外,载体中的pUC origin 能保证该载体在大肠杆菌中的复制,而位于此表达盒上游的细菌启动子能驱动kanamycin抗性基因在大肠杆菌中的表达。 用途: pEGFP-Actin载体在真核细胞表达EGFP-Actin融合蛋白,该蛋白能整合到胞内正在生的肌动蛋白,因而在活细胞和固定细胞中观察到细胞内含肌动蛋白的亚细胞结构。 4、pSV2表达载体 特点:该表达质粒是以病责SV40启动子驱动在真核细胞目的基因进行表达的,克隆位点为Hind111。SV40启动子具有组织/细胞的选择特异性。此载体不含neo基因,故不能用来筛选、建立稳定的表达细胞株。 5、CMV4 表达载体 特点:该真核细胞表达载体由CMV启动子驱动,多克隆区域酶切位点选择性较多。含有氨苄青霉素抗性基因和生长基因片段以及SV40复制原点和fl单链复制原点。但值得注意的是,该表达载体不含有neo基因,转染細胞后不能用G418筛选稳定的表达细胞株。 其他常用克隆Vector: pBluscript II KS DNA 15 ug pUC18 DNA 25 ug pUC19 DNA 25 ug 说明: pBluescript II kS、pUC18 &Puc19载体适合于DNA片段的克隆、DNA测序和对外源基因进行表达等。这些载体由于在lacZ基因中含有多克隆位点,当外源DNA片段扦入,转化lacZ基因缺乏细胞,并在含有IPTG和X-gal的培养基上培养时,含有外源DNA载体的细胞将

各种表达载体介绍

pET 载体中,目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下,并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen 的 pET 系统不断扩大,提供了用于表达的新技术和选择,目前共包括 36 种载体类型、 15 种不同宿主菌和设计用于有效检测和纯化目标蛋白的许多其它相关产品。 优点 · 是原核蛋白表达引用最多的系统 · 在任何大肠杆菌表达系统中,基础表达水平最低 · 真正的调节表达水平的“变阻器”控制 · 提供各种不同融合标签和表达系统配置 · 可溶性蛋白生产、二硫键形成、蛋白外运和多肽生产等专用载体和宿主菌 · 许多载体以 LIC 载体试剂盒提供,用于迅速定向克隆 PCR 产物 · 许多宿主菌株以感受态细胞形式提供,可立即用于转化 阳性 pFORCE TM 克隆系统具有高效克隆 PCR 产物、阳性选择重组体和高水平表达目标蛋白等特点。 pET 系统概述 pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统, Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。 控制基础表达水平 pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合,能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。没有单一策略或条件适用于所有目标蛋白,所以进行优化选择是必要的。 宿主菌株 质粒在非表达宿主菌中构建完成后,通常转化到一个带有 T7 RNA 聚合酶基因的宿主菌(λDE3 溶原菌)中表达目标蛋白。在λ DE3 溶原菌中, T7 RNA 聚合酶基因由 lacUV5 启动子控制。未诱导时便有一定程度转录,因此适合于表达其产物对宿主细胞生长无毒害作用的一些基因。而宿主菌带有 pLysS 和 pLyE 时调控会更严紧。 pLys 质粒编码 T7 溶菌酶,它是 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物,因此可降低其在未诱导细胞中转录目标基因的能力。 pLysS 宿主菌产生低量 T7 溶菌酶,而 pLysE 宿主菌产生更多酶,因此是最严紧控制的λ DE3 溶原菌。 有 11 种不同DE3 溶原化宿主菌。使用最广泛的为 BL21 及其衍生菌株,它的优点在于缺失 lon 和 ompT

各种表达载体

表达载体 一、原核细胞表达载体 1. pBAD载体: 特点; 该表达质粒含有araBAD(arabinose)操纵子的P BAD启动子和编码该启动子的正负调控子基因araC,具有紧密调控功能和高水平表达外源蛋白质的原核细胞表达载体。 请注意: 1. 当要扦入其他信号肽片段,改建此载体时,请不要利用该载体上的Nde1 EcoR1 BamH1 Kpn1和 Pst1位点,以免造成重组困难,因为前述内切酶在此载体上均有二个位点,最好使用只有一个酶切位点的Sac1和Hind111位点。同时记住,如在不含任何信号肽的P BAD表达质粒扦入信号肽,其非编码N- 末端要包含核糖体结合位点(RBS)核苷酸序列。 2在使用含Omp A分泌信号肽的P BAD表达质粒时,请应用Omp A分泌信号肽上的Sac1以及载体Hind111酶切位点,这些在载体序列上都是单个酶切位点。 本公司目前有含Omp A分泌信号肽和不含任何信号肽的二种P BAD表达质粒,其多克隆位点区域图谱如下: (a)、含Omp A分泌信号肽的P BAD表达质粒多克隆区域 SD P BAD….TACCCGTTTTTTT CC….GCTAGCAGGAGGAAACG ATG AAA AAG ACA GCT ATC GCG ATT GCA GTG GCA CTG GCT GGT A M A E L TTC GCT ACC GTA GCC ATG GCC GAG CTC GGTACCCGGGGATCCTCTAGAGTCGCCTGCAGGCATCCAAGCTT Nco1 Sac1 Kpn1 Smal1 BamH1 (b)、不含分泌信号肽的P BAD表达质粒多克隆区域 Pst1 P BAD GCTAGCGAATTCGAGCTCGGTACCCGGGGATCCTCTAGAGTCGCCTGCAGGCATCCAAGCTT Nde1 Sac1 Smal 1 Hind111 下图显示本公司应用pBAD表达载体完成的实验结果: pBAD载体驱动大分子蛋白质在原核细胞 Origami(DE3)内高效表达 2. pCAl-n & pCAl-pelB载体 特点: 该原核细胞表达载体是来源于以T7 RNA聚合酶为基础的pET载体, 含有T7/LacO启动子、编码钙调素结合多肽标鉴和凝血酶切点的核苷酸序列。 因此,该表达载体在E.coli BL21(DE3)或BL21(DE3)pLysS宿主菌中能高水 平表达外源蛋白质、且这种表达的外源蛋白质因带有钙调素结合多肽和凝血 酶切点,故该蛋白产物易于纯化和产业化。 此外,本公司利用分泌信号肽PelB,构建成新型的的原核细胞表达载体Pcal-PelB。此载体表达的蛋白产物能在分泌肽PelB的指引下进入细胞周质。

所有质粒载体汇总

酿酒酵母表达载体 pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP, 酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF pY15TEF, pY16TEF, 酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47, 酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7 ;对照质粒pGBKT7-53 , pGBKT7-lam , pGADT7-T , PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,丫187,丫190, 毕赤酵母表达载体 pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ a A,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc , 配套毕赤酵母Pichiapink, 毕赤酵母宿主X33, KM71 , KM71H , GS115, 原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体,包括pET系列,pET-GST, pGEX 系列(含GST标签),pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,- p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列,pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列, pBV220,221,222,pTXB 系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA (分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPi nPoi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233- 3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK (+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒:pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒:pACYCduet-1,pETduet- 1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣:pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞:DH5a JM101 JM103

湖南2020年大数据和区块链产业发展重点项目申报书

附件1 2020年大数据和区块链产业发展重点项目 申 报 书 申报单位(盖章) 负责人 推荐单位(盖章) 申报日期2020年月日 湖南省工业和信息化厅编制 2020年2月

填报说明 一、提交材料包括申报书纸质材料和电子文档,申报单位必须确保纸质材料和电子文档的一致性。 二、请用A4幅面编辑,正文字号为4号宋体,行距26磅。一级标题3号黑体,二级标题3号楷体。 三、纸质材料请使用A4纸双面印刷,装订平整。电子文档以光盘或U 盘形式存储。

一、项目及申报单位基本信息

二、项目摘要(4000字以内) 项目名称、项目背景和必要性、技术基础,建设内容、规模、方案和地点,项目运营模式,各项建设条件落实情况,项目总投资及资金来源、经济和社会效益分析等。 三、项目单位基本情况 四、项目建设内容 项目建设的主要内容、建设规模、采用的技术路线与特点、项目运营模式、产品或服务市场预测、建设地点、建设工期和进度安排、建设期管理、成果推广计划及后续完善方案等。 五、项目市场前景 1、与国内外同类项目关键指标的比较、潜在用户、市场前景及风险预测; 2、可实现的预期成果,包括用户数、业务量的增长,须有二年期内的可考核技术指标和社会经济效益指标。 六、现有基础和条件 1、申报单位在相关领域的已有基础、主要成果。 2、项目实施具备的支撑条件,包括项目资金、设备以及重点实验室、工程中心等研究平台在项目中所起的作用等。列出现有与本项目有关的主要平台或设备(说明用途)。 3、项目团队的规模和结构,包括年龄、专业、职称等情况,团队规模要适度。 4、单位项目核心人员情况,包括工作简历、主要学术业绩,

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体 标签:真核细胞酵母表达系统细胞表达载体真核表达系统昆虫表达系统动物表达系统 摘要: 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。 自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。 在各种表达系统中,最早被采用进行研究的是原核表达系统,这也是目前掌握最为成熟的表达系统。该项技术的主要方法是将已克隆入目的基因DNA段的载体(一般为质粒)转化细菌(通常选用的是大肠杆菌),通过iptg诱导并最终纯化获得所需的目的蛋白。其优点在于能够在较短时间内获得基因表达产物,而且所需的成本相对比较低廉。但与此同时原核表达系统还存在许多难以克服的缺点:如通常使用的表达系统无法对表达时间及表达水平进行调控,有些基因的持续表达可能会对宿主细胞产生毒害作用,过量表达可能导致非生理反应,目的蛋白常以包涵体形式表达,导致产物纯化困难;而且原核表达系统翻译后加工修饰体系不完善,表达产物的生物活性较低。 为克服上述不足,许多学者将原核基因调控系统引入真核基因调控领域,其优点是: ①根据原核生物蛋白与靶DNA间作用的高度特异性设计,而靶DNA与真核基因调控序列基本无同源性,故不存在基因的非特异性激活或抑制; ②能诱导基因高效表达,可达105倍,为其他系统所不及; ③能严格调控基因表达,即不仅可控制基因表达的“开关”,还可人为地调控基因表达量。 因此,利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。目前,基因工程研究中常用的真核表达系统有酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。 1.酵母表达系统 最早应用于基因工程的酵母是酿酒酵母,后来人们又相继开发了裂殖酵母、克鲁维酸酵母、甲醇酵母等,其中,甲醇酵母表达系统是目前应用最广泛的酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha,Candida Bodini,Pichia Pastris3种。以Pichia Pastoris应用最多。

(整理)质粒的分子生物学与质粒载体

第三章质粒的分子生物学与质粒载体 一、填空题 1.基因工程中有3种主要类型的载体:——-------、------------一、-----------. 2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度—----------—,OC DNA泳动速度—---------—,L DNA居中,通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。 3.质粒的复制像染色体的复制一样,是从特定的起始点区开始的。然而,质粒的复制可以是—---—向的、或是—----—向的。在杂种质粒中,每个复制子的起点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。并认为:当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后,在正常情况下—------—的复制起点可能被苯闭。 4.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:—-----—、—---------—、—----------------—。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 5.如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中,则属于—---------—群,这是因为它们的——————————所致。 6.质粒拷贝数是指细胞中—------------------------—。 7.复制子由三部分组成:(1)—-----------------—---(2)——-----------————(3)—--------------—。 8.酵母的2μm质粒有------------,可以配对形成哑铃结构。 9.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测不出质粒,这种现象叫----------------。 10.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于----——,它的四环素抗性基因来自于—-----------—,它的氨苄青霉素抗性基因来自于—---------—。 11.质粒的消失同染色体基因的突变是不同的,前者不能恢复,后者可以通过—------—恢复该基因的性状。 12.ColEl质粒复制的起始需要三种酶,即—-----------—、一------------和一------。 13.YAC的最大容载能力是—-----------—,BAC载体的最大容载能力是—---------—。 14.pSCl01是一种---------——复制的质粒。 15.把那些没有可检测表型的质粒称为—--------------—。 16.转座子主要由下列部分组成:(1)—-----————————(2)---------------—— (3)—----------------—。

招商引资范本内容

招商引资范本 一、招商引资项目的含义 项目是投资的具体载体和体现,是招商的基础和灵魂,是有一定的资金和生产要素的投入,同时能产生社会和经济效益的载体。招商引资项目就是引导和吸引潜在投资者进行投资的项目。在实际工作中,招商引资项目一般由政府、企业或其它经济组织通过一定的途径向潜在投资商提供,供其选择投资。 二、招商项目由哪些要素构成 一个项目的建立和推出,从项目的提报、审核、论证、包装到项目的最终推出,有一套非常严格规范的程序,要严格按照程序,具体包括立项、审批、预期投资额、短期、中期和长期规划以及效益的回收期等,才是一个成熟科学的项目。 三、对外推介项目应具备哪些条件 1、完成可行性研究报告 2、通过立项审批或备案 3、完成项目简介材料(包括项目名称、内容、规模、建设单位、法人代表、资源秉赋、投资估算、预期经济效益、合作方式等) 四、招商项目包装与推介 (一)项目的包装 包装项目就是把完成立项、可研批复和发展前景好的项目做好项目简介向外推介吸引投资。主要内容有项目的特点、发展前景、市场预测、投资回报、联系方式等,项目简介力求简练、突出重点,真实可靠,一定要写清可研报告中所反映的投资规模,效益分析等内容,不能随意夸大投资额及效益,更不能同一个项目在不同地点出现

投资规模及效益及数字不一致情况。联系方式一定要准确,电话号码更换和不真实会带来很大的负面影响,会给投资方造成项目虚假现象。 1、向国内投资者推介的项目要突出以下内容: ⑴项目名称(标题); ⑵项目业主(项目单位); ⑶企业简介(指技术改选项目及产权转让项目原企业固定资产、技术能力,竞争优势等); ⑷项目概况; ⑸建设条件; ⑹市场预测; ⑺投资规模; ⑻效益分析(年产量、年销售收入、年利润、年税金及投资回收期); ⑼项目进展; ⑽合作方式; ⑾企业法人或企业联系人; ⑿联系单位、联系人; ⒀联系电话、传真、电子信箱、邮政编码等。 2、向国外投资者推介项目,按国际商务惯例,提供的项目资料应包括如下内容: ⑴项目背景简介(注明项目地点、联系人、电子信箱、传真、电话); ⑵项目执行人介绍(含经历、阅历、学历);

区块链应用项目商业计划书两篇

区块链应用项目商业计划书两篇 篇一:区块链应用项目商业计划书 导读:根据英国市场研究公司Juniper Research发布的报告显示,到20XX年底,全球将有超过一半的大公司正在积极部署区块链技术。区块链技术应用十分广泛,除了金融服务行业(比特币),其他行业也能从中大大获益,尤其是商品防伪。中国山寨行业发达,假货横行,而目前的防伪系统已不能完全满足市场需求。 1、项目简介: 区块链应用项目商业计划书 2、团队介绍: CEO 资深的java架构师,曾供职于谷歌亚洲研究院、华为等公司。区块链网的联合创始人,中国最早报道区块链的网站之一,目前DAU达到100万。对计算机技术和区块链应用有深刻的理解 销售总监 前道左咨询高级顾问,曾在零售行业(沃尔玛中国、苏宁易购)担任过高管和策略顾问。担任美素佳儿奶粉中国区供应链和物流总监,对零售行业上下游服务商的把控力强 CTO 毕业于斯坦福大学计算机专业,精通Java、Php等开发语言。在项目管理,系

统构架,大数据处理,高并发控制等方面有丰富的经验。精通区块链原理及相关技术,主要负责放心购的所有技术架构 3、痛点分析: 主流防伪系统安全性较低: 旧防伪系统(如全息图)和新防伪系统(如二维码,简单的RFID/NFC)等,这些比较低端的方式即使加密了也很容易被破解,且复制的成本非常低,并不能做到完全意义上的防伪。 防伪真空区: 国内山寨行业发达,假货横行。目前市面上却只有针对如钻石等奢侈品的专属防伪验证方式,奶粉、酒品等原价不高但人们格外在意真伪性的商品亟待一种可靠而成本低廉的解决方案。 商家对商品管控力弱: 商家缺乏实用的供应链金融工具,难以形成对商品流转的溯源、定位追踪等有效的管理。

表达载体的构建方法及步骤

表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前,载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素: (1)复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 (2)抗生素抗性基因可以便于加以检测,如 Amp+ ,Kan+ (3)多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 (4) P/E 启动子/增强子 (5)Terms 终止信号 (6)加 poly(A)信号可以起到稳定 mRNA 作用 选择载体主要依据构建的目的,同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目 的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体。 载体选择主要考虑下述3点: 【1】构建 DNA 重组体的目的,克隆扩增/基因表达,选择合适的克隆载体/表达载体。 【2】.载体的类型: (1)克隆载体的克隆能力-据克隆片段大小(大选大,小选小)。如<10kb 选质粒。 (2)表达载体据受体细胞类型-原核/真核/穿梭,哺乳类细胞表达载体。

(3)对原核表达载体应该注意:选择合适的启动子及相应的受体菌,用于表达真核蛋白质时注意克服4个困难和阅读框错位;表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。 【3】载体 MCS 中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不能产生阅读框架错位。 综上所述,选用质粒(最常用)做载体的5点要求: (1)选分子量小的质粒,即小载体(1-)→不易损坏,在细菌里面拷贝数也多(也有大载 体); (2)一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束,一般 10个以上的拷贝,而严谨型质粒<10个。 (3)必需具备一个以上的酶切位点,有选择的余地; (4)必需有易检测的标记,多是抗生素的抗性基因,不特指多位 Ampr(试一试)。(5)满足自己的实验需求,是否需要包装病毒,是否需要加入荧光标记,是否需要加入标签蛋白,是否需要真核抗性(如Puro、G418)等等。 无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,然后采用适当的限制酶将载体 DNA 进行切割,获得线性载体分子,以便于与目的基因片段进行连接。 如何阅读质粒图谱 第一步:首先看 Ori 的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 (1)Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr 可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使 G418(长那霉素衍生物)失活 (5)hygr 使潮霉素β失活。

查询质粒方法汇总

如何查找质粒图谱之我见——plasmid map, Vector Sequence方法汇总 经常在坛子里看到一些人求助质粒图谱,很多时候我发现其实有些质粒图谱还是很容易找到了,刚开始帮忙查找了下,还公布了一些查找质粒图谱比较好的网站,后来看得多了,很多时候,这样的帖子直接跳过了。今天又看到几个求质粒图谱的帖子,因此决定就查找质粒图谱的方法,写个总结帖子,希望对虫子们有些帮助。这些方法,大部分是自己学习的过程中积累的,也许总结得还不够全面,望其他虫友指正。 方法一:安装软件Vector NT 做分子实验,经常和不同的质粒打交道,了解各种质粒的图谱信息是必需的,invitrogen公司的这款软件绝对是分子生物学虫子们的福音,功能强大、界面美观,使用起来很人性化。后面的很多方法都是基于在这款软件的使用之上,因此个人觉得要想对质粒图谱了解更直观,安装这款软件是非常必要的。而且,一旦安装了这款软件,你就发现这款软件的软件包里面会包括invitrogen公司的所有质粒图谱信息和其他比较常见和经典的质粒图谱。这里就不一一细说,各位虫子可以自己体验下。(这款软件的下载和使用说明书站内很多) 方法二:查找质粒图谱的网站: 这个之前有人求助质粒图谱时,我在回应求助帖里面公布过几个我经常用的网址,估计不是专题,很多人没看到,现在在此重新总结下 1.Vector Database 地址:https://https://www.360docs.net/doc/c312334439.html,/g?a=vdb 这个网站很页面很人性化,直入主题,也是我经常用到一个网站,比如同样这个帖子求pRS类质粒图谱(注意,是一类质粒图谱,没关系,照样能找到),直接在搜索框输入pRS,可以看到,之类质粒一共有三十多个。

质粒载体基础

第一节质粒载体 一、质粒的基本特性 1.质粒的复制 通常一个质粒含有一个与相应的顺式作用控制要素结合在一起的复制起始区(整个遗传单位定义为复制子)。在不同的质粒中,复制起始区的组成方式是不同的,有的可决定复制的方式,如滚环复制和θ复制。在大肠杆菌中使用的大多数载体都带有一个来源于pMB1 质粒或ColE1 质粒的复制起始位点。图3-1 是其复制其始示意图。 在复制时,首先合成前RNAⅡ,即前引物,并与DNA 形成杂交体;而后RNase H 切割前RNAⅡ,使之成为成熟的RNAⅡ,并形成三叶草二级结构,该引物引导质粒的复制。形成的RNAⅠ可控制RNAⅡ形成二级结构,同时Rop 增强RNAⅠ的作用,从而控制质粒的拷贝数。削弱RNAⅠ和RNAⅡ之间相互作用的突变,将增加带有pMB1 或(ColE1)复制子的拷贝数。 图3-1 带pMB1(或ColE1)复制起点的质粒在复 制起始阶段所产生的转录的方向及其粗略大小。 2.质粒的拷贝数 质粒拷贝数分为严谨型与松驰型。严谨型质粒每个细胞中拷贝数有限,大约1 ~几个;松驰型质粒拷贝数较多,可达几百。表5-1 就是不同类的质粒与复

制子及拷贝数的大致关系。 表3-1 :质粒载体及其拷贝数 pUC 系列质粒的复制单位来自质粒pMB1 ,但其拷贝数较高。pMB1 质粒的复制并不需要质粒编码的功能蛋白,而是完全依靠宿主提供的半衰期较长的酶(DNA 聚合酶Ⅰ,DNA 聚合酶Ⅲ),依赖于DNA 的RNA 聚合酶,以及宿主基因dnaB 、dnaC 、dnaD 和danZ 的产物。因此,存在抑制蛋白质合成并阻断细菌染色体复制的氯霉素或壮观霉素等抗生素时,带有pMB1(或ColE1)复制子的质粒将继续复制,最后每个细胞中可积聚2~3 千个质粒。3.质粒的不相容性 两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称质粒的不相容性,它是指在第二个质粒导入后,在不涉及DNA 限制系统时出现的现象。不相容的质粒一般都利用同一复制系统,从而导致不能共存于同一宿主中。两个不相容性质粒在同一个细胞中复制时,在分配到子细胞的过程中会竞争,随机挑选,微小的差异最终被放

质粒载体分类及阅读

质粒载体分类及阅读 一.九种表达载体 Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C, pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA 二.克隆载体 pTZ19R DNA pUC57 DNA PMD18T PQE30 pUC18 pUC19 pTrcHisA pTrxFus pRSET-A pRSET-B pVAX1 PBR322 pbv220 pBluescript II KS (+) L4440 pCAMBIA-1301 pMAL-p2X pGD926 三.PET系列表达载体 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Dsb Fusion Systems 39b and 40b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression System 33b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? p ET Expression Systems Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression Systems plus Competent Cells Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET GST Fusion Systems 41 and 42 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET NusA Fusion Systems 43.1 and 44 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Vector DNA Protein Purification ? Purification Systems ? Strep?Tactin Resins and Purification Kits 四.PGEX系列表达载体 T EcoR pGEX-1 I/BAP pGEX-2T pGEX-2TK pGEX-3X

招商简介

招商简介

中国酒镇酒庄 有机农业项目招商简介 一、我们在做什么? 1、打造占地67平方公里的“中国酒镇酒庄”项目; 2、“中国酒镇酒庄”项目是老窖集团“一园三基地”中的酿酒基地; 3、整体项目包含了白酒酿造的全产业链(种植、养殖、酿造、能源、生物饲料、有机肥料等循环农业),其中包括了旅游景区(观光农业和现代农业); 二、我们在农业方面想做什么? 发挥好“国家农业产业化重点龙头企业”的示范带动作用,以建立从农田到餐桌的完整产业链实现质量保障及产品溯源,围绕保障酒的高品质抓好有机高粱生产,围绕促进白酒旅游产业发展开发更多特色农产品。 三、我们的农业要做成什么样子? 1.设施农业方面 本项目投入了较大规模的现代农业设施,高、中、低档钢架大棚设施和滴灌喷灌等农业设施配备齐全。为保证安全、优质农产品的生产,项目区将大量应用循环农业、生态农业技术,使园区具备了很强的现代农业科技示范功能。

结合项目建设的科研培训管理中心,本项目可以开展“循环农业技术”、“绿色、有机、生态蔬菜生产技术”、“现代设施农业技术”、“新品种新技术示范”、“特色养殖技术”等典型的现代农业科技示范和培训。 结合企业带动农户的共羸模式,农场还将开展农户生产技术培训、企业员工技能培训等多种针对生产者的科技培训,扩大农场的科技带动能力;通过农场整体环境的打造,项目还将实现都市农业体验、农耕文化展示、青少年科普教育等社会教育功能,将有效拓展了农场现代农业示范带动面。 2.生态循环农业 园区的生产功能方面,全面采用生态和循环农业技术,种植业板

块以绿色标准为基础,不产生环境污染;养殖板块内容,立足于充分利用项目区土地资源,使用林下放养、生物发酵床技术、健康水产养殖技术,产生的养殖废污在园区内直接进行生物转化,不仅不会造成环境污染,还能够为园区种植业生产提供优质生物肥料;园区建设的固体废弃物无害化处理技术,使用生物技术(蚯蚓)对废弃物进行转化,转化过程中无污染产生,转化副产物为生物肥料,实现了农场农业生产的完整循环链。 通过对农场内溪水的综合开发、生态湿地建设、防护林地建设等方面的统筹建设,将有效提高项目区水土保持能力和抗洪涝灾害能力,改善项目区生态环境质量;结合园区的生态旅游功能开发和建设,进一步提升项目区人居环境质量。 3.产品质量方面 食品的健康、安全和营养是消费者关注的焦点,也是产品价值的体现。目前,主要的安全农产品标准从低到高主要分为无公害、绿色和有机及地理标识产品四个层次,无公害保证了农产品的安全性,绿

项目征集大数据领域大数据基础支撑领域大

附件1 项目征集指南 一、大数据领域 (一)大数据基础支撑领域 1.大数据加工领域。 ■大数据采集手段与采集范围的产品与技术; ■面向不同行业发展大数据挖掘、服务及数据可视化等产品与技术。 2.大数据安全领域。 在数据安全、信息安全、云平台安全等领域的大数据安全产品与技术。 (二)大数据应用。 1.政务服务大数据应用。 在政务数据开放共享、政府治理能力精准、行政管理手段智能、公共安全监管提升等领域的大数据应用。 2.普惠民生大数据应用。 健康医疗大数据应用、社会保障大数据应用、新型教育大数据应用。 3.公共服务大数据应用。

能源管理大数据应用、交通服务大数据应用、旅游服务大数据应用、生态环保大数据应用、危化及冶金大数据应用、公共资源交易及公共服务事项大数据应用。 4.产业创新大数据应用。 智能制造大数据应用、金融大数据应用、物流大数据应用、电商大数据应用、知识产权大数据应用。 二、云服务平台 云服务典型案例严格限制在云计算范畴,云计算业务是指利用云计算中心的软硬件资源,通过互联网或其他网络以随时获取、按需使用、弹性扩展、协作共享等方式,为用户提供的计算存储、开发支撑、应用部署、应用软件、运行管理等服务,主要包括基础设施及服务(IaaS)、平台及服务(PaaS)、应用即服务(SaaS)等类型。 三、工业互联网 (一)工业互联网平台 面向制造业数字化、网络化、智能化需求,构建基于海量数据采集、汇聚、分析的服务体系,支撑制造资源泛在连接、弹性供给、高效配置的各类工业互联网平台。 通过构建精准、实时、高效的数据采集互联体系,建立面向工业大数据存储、集成、访问、分析、管理的开发环境,

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